本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一类内质网（er）受体蛋白（sting）激活剂（激动剂）在制备免疫增强剂药物中的应用。
背景技术：
免疫增强剂是一个新的药物类别，曾用名为免疫促进剂及免疫刺激剂。本类药物能使低下的免疫功能提高，加速诱导免疫应答反应，大多是以肿瘤的非特异性免疫疗法为目的而开发的。免疫增强剂主要用于增强机体的抗肿瘤作用、抗感染能力，此类药物能激活一种或多种免疫活性细胞，增强机体特异性和非特异性免疫功能，使低下的免疫功能恢复正常，或具有佐剂作用，增强与之合用的抗原的免疫原性，加速诱导免疫应答反应；或替代体内缺乏的免疫活性成分，产生免疫代替作用。临床上主要用于免疫缺陷疾病、恶性肿瘤的辅助治疗，以及难治性细菌或病毒感染。
在感染的哺乳动物细胞中微生物和病毒dna能通过刺激干扰素分泌诱导內源强有力的免疫应答。内质网（er）受体蛋白（sting）对胞质dna的免疫应答是必需的因素。最近的研究表明，环化cgmp-amp二核苷酸合成酶（cgas）在结合dna后的活化条件下，内源性地催化cgamp的合成。cgamp是一种胞质dna传感器，它作为第二信使通过sting刺激inf-β的感应，介导tbk1和irf-3的活化，进而启动inf-β基因的转录。最近报道，重组cgas在dna结合条件下催化环化cgmp-amp二核苷酸gamp。cgas结合dna的复合物的晶体结构也已被报道，cgamp结合sting使转录因子irf3激活并产生β干扰素。
环二核苷酸合成酶(cgas)是先天性免疫通路中重要的细胞质dna感受器。cgamp作为二级信使分子通过内质网膜上的sting蛋白通路诱导干扰素ifn-β和其他细胞因子的产生，调节下游蛋白质表达，诱导细胞生长停滞和凋亡，产生抗病毒效应。sting通路可以调节免疫原性肿瘤的先天免疫识别，促进干扰素的抗肿瘤作用。ifn-γ在体内通过trail(tumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand)发挥抗肿瘤作用，促进肿瘤细胞凋亡。sting的内源性激活剂是先天免疫反应的关键刺激物，具有增强免疫功能的作用。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一类内质网受体蛋白激活剂能够刺激干扰素的感应产生，继而增强树突状细胞、t细胞的增值和细胞活性，激活免疫细胞发挥作用，增强免疫功能，能增强机体的抗肿瘤、抗炎症、抗感染等能力。因此，该类激活剂可用于制备免疫增强剂药物。
具体实施方式
下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。
实施例1：环二核苷酸cgamp及其衍生物的制备
cgamp或其衍生物（环化-gmp-amp）按文献方法在结合dna后的活化条件下，由环化cgmp-amp二核苷酸合成酶（cgas）催化合成。纯度在98％以上。（lip.w，etal.,immunity,2013,39(6),1019-1031.）
实施例2：采用小鼠模型进行检测该内质网受体蛋白激活剂在增强免疫细胞活性中的作用。
（1）动物
种属、品系、性别、体重、来源、合格证
balb/c普通小鼠、雄性，体重20-25g，6-8周龄，spf级，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司[实验动物质量合格证号：scxk（沪）2007-0005]。
（2）小鼠饲养条件
所有小鼠均自由觅食和饮水，在室温（25±2）℃下饲养。饲料及水均经高压灭菌处理，全部实验饲养过程为spf级。
（3）药物剂量设置
静脉注射小鼠，cgamp,设置1个剂量组：10mg/kg（每天一次）
阴性对照：生理盐水溶液
（4）给药方法
给药途径：尾静脉注射给药
给药体积：100微升/只
给药次数：连续20天给药。
cgamp,每天1次;
每组动物数：10只
（5）试验主要步骤
5-1．酶联免疫吸附试验小鼠眼静脉采血，室温离心2小时，1000g离心20分钟，制备血清。用小鼠elisa试剂盒（r&d系统）分别测定ifn-β、ifn-γ的浓度。
5-2.脾细胞分离及流式flowcytometry。通过40μm滤器对小鼠脾脏进行破坏和过滤，以获得单细胞悬液。在含0.5%bsa的pbs缓冲液中复苏脾细胞，用ack缓冲液溶解红细胞。用cd11c-mab微珠标记脾cd11c+dc，并用macs分离柱（meltyi-biotoc，au烧伤，ca）分离。单克隆抗体包括抗小鼠cd40、抗小鼠cd80、抗小鼠cd86和抗小鼠mhcii类，用于dcs检测。纯化的dc分别与抗体孵育。
5-3.脾细胞分离及流式flowcytometry，cd8+t细胞检测cd3+cd8+t细胞cd3抗体和cd8α抗体染色。用于流式细胞术的单克隆抗体均购自ebisosistices（圣地亚哥，ca），流式细胞术分析在bdfacscablipbr流式细胞仪（bdbisccineson，san若泽，ca）上进行。
（6）结果
小鼠给药20天后检测结果表明，内质网受体蛋白（sting）的激活剂刺激了干扰素β、γ的感应和产生，干扰素蛋白上调表达显著。脾细胞分离检测结果表明，静脉注射内质网受体蛋白（sting）的激活剂20天后，树突状细胞活性标志物cd40、cd80、cd86、mhcii均有明显增强。检测cd3+cd8+t细胞表明，小鼠给药20天后t细胞明显增强活化。因此，内质网受体蛋白（sting）的激活剂在制备免疫增强剂药物方面有很好的应用前景。
具体结果见如下图1-3：
图1.内质网受体蛋白sting激活剂刺激干扰素的感应和产生
图2.内质网受体蛋白sting激活剂刺激树突状免疫细胞活化
图3.内质网受体蛋白sting激活剂激活cd8t细胞增值活化。