本发明涉及一种二氢吡喃酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。(二)
背景技术：
：恶性肿瘤是临床上常见病及多发病之一，严重威胁人类健康，因此开发新颖的抗肿瘤药物具有重要意义。二氢吡喃酮类化合物是天然产物基本骨架之一，因其具有广泛的生物活性,如抗菌、抗氧化、降血脂、抗老年痴呆等，逐渐引起人们的重视。(三)技术实现要素：本发明涉及一种如式(i)所示的二氢吡喃酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用：式(i)中，r1、r2、r3、r4各独自为氢、羟基、c1～c10烷氧基或卤素，或r3、r4和连接在r3、r4之间的c形成含氧的c3-c5杂环。进一步，优选的，所述的r1、r2、r3、r4各自独立为h、meo、meoch2o或br或r3、r4和连接在r3、r4之间的c形成含氧的c3的五元环。再进一步，所述的二氢吡喃酮类化合物优选为下列之一的化合物：进一步，所述的肿瘤为人肺癌细胞h446或人胃癌细胞sgc-7901。再进一步，所述的肿瘤为人肺癌细胞h446时，化合物(i-4)、(i-5)有较好的抗肿瘤活性；化合物(i-1)、(i-2)、(i-3)、(i-6)、(i-7)、(i-8)有一定的抗肿瘤活性。再进一步，所述的肿瘤为人胃癌细胞sgc-7901时，化合物(i-1)、(i-2)、(i-3)、(i-4)、(i-6)、(i-8)有一定的抗肿瘤活性。本发明涉及的黄烷酮类化合物制备方法主要根据文献通过式(ii)所示的芳酮与式(iii)所示的芳醛在室温条件下，在氢氧化钠作用下缩合制得式(iv)所示的查尔酮粗品，之后在80℃反应条件下，在吡啶作用下通过分子内环加成反应制得。式(i)所示的黄烷酮类化合物由式(ii)所示的芳酮类化合物、式(iii)所示的芳醛类化合物与氢氧化钠和吡啶的投料物质的量之比为1：1：9:52，式(ii)、式(iii)及式(iv)中r1、r2、r3、r4分别与所述的式(i)中r1、r2、r3、r4相同。本发明所提供的黄烷酮类化合物显示较好的抗肺癌细胞活性，显示一定抗胃癌活性，为新药筛选及开发奠定了基础，具有较好的实用价值。具体实施方式下面将通过实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围不限于此。实施例1：5,7-二甲氧基-2-(2-甲氧基苯基)苯并二氢吡喃-4-酮(i-3)化合物的制备将邻甲氧基苯甲醛(544.7mg，4.0mmol)和2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮(784.8mg，4.0mmol)溶于30ml乙醇中，在0℃下滴加naoh水溶液(1.44g，36.0mmol溶于20ml水)，滴加完毕后在室温下搅拌5小时，用盐酸调节ph为3，过滤，收集固体得2’-羟基-4’,6’-二甲氧基-2-甲氧基查尔酮。再将2’-羟基-4’,6’-二甲氧基-2-甲氧基查尔酮和吡啶(16ml,206mmol)加入30ml水中，在80℃反应10h，用乙酸乙酯萃取(20ml×3)，合并有机层，浓缩，柱层析(洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯＝1：1，v：v)，收集rf值0.3～0.35的洗脱液(tlc监测，展开剂同洗脱剂)，减压蒸馏除去溶剂，干燥得目标化合物(i-3)250.7mg，收率20％。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.60(dd,j＝7.6,1.5hz,1h),7.40–7.30(m,1h),7.05(t,j＝7.3hz,1h),6.92(d,j＝8.2hz,1h),6.19(d,j＝2.3hz,1h),6.11(d,j＝2.3hz,1h),5.81(dd,j＝9.2,6.8hz,1h),3.92(s,3h),3.84(s,6h),2.92–2.84(m,2h).实施例2：(i-1)的制备操作同实施例1，只是将邻甲氧基苯甲醛换成2,3-二羟基苯甲醛(552.5mg,4.0mmol)，制得目标化合物(i-1)303.9mg，收率24％。1hnmr(500mhz,dmso-d6)δ9.51(s,1h),8.69(s,1h),6.89(dd,j＝7.8,1.3hz,1h),6.79(dd,j＝7.8,1.3hz,1h),6.69(t,j＝7.8hz,1h),6.22(d,j＝2.3hz,1h),6.20(d,j＝2.3hz,1h),5.67(dd,j＝12.7,2.8hz,1h),3.81(s,3h),3.78(s,3h),2.95(dd,j＝16.3,12.7hz,1h),2.59(dd,j＝16.3,2.8hz,1h).实施例3：(i-2)的制备操作同实施例1，只是将邻甲氧基苯甲醛换成邻羟基苯甲醛(488.5mg,4.0mmol)，制得目标化合物(i-2)168.2mg，收率14％。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.53(s,1h),7.48–7.39(m,1h),7.25–7.16(m,1h),6.98–6.95(m,2h),6.20(d,j＝2.2hz,1h),6.11(d,j＝2.2hz,1h),5.77(dd,j＝12.4,3.6hz,1h),3.90(s,3h),3.85(s,3h),3.06–2.94(m,2h).实施例4：(i-4)的制备操作同实施例1，只是将邻甲氧基苯甲醛换成2,3-二甲氧甲氧基苯甲醛(904.8mg,4.0mmol)，制得目标化合物(i-4)630.9mg，收率39％。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.29–7.72(m,1h),7.21–7.11(m,2h),6.16(d,j＝2.2hz,1h),6.11(d,j＝2.2hz,1h),5.87(dd,j＝13.1,3.2hz,1h),5.22(s,2h),5.15(s,2h),3.91(s,3h),3.83(s,3h),3.514(s,3h),3.511(s,3h)2.98–2.86(m,2h).实施例5：(i-5)的制备操作同实施例1，只是将邻甲氧基苯甲醛换成2,3-二甲氧基苯甲醛(664.8mg,4.0mmol)，制得目标化合物(i-5)468.3mg，收率34％。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.17–7.13(m,2h),6.95(d,j＝7.0hz,1h),6.15(s,1h),6.11(s,1h),5.88–5.66(m,1h),3.91(s,3h),3.89(s,3h),3.87(s,3h),3.83(s,3h),2.99(dd,j＝16.3,13.7hz,1h),2.78(dd,j＝16.6,2.1hz,1h).实施例6：(i-6)的制备操作同实施例1，只是将邻甲氧基苯甲醛换成对溴苯甲醛(740mg,4.0mmol)，制得目标化合物(i-6)53.3mg，收率4％。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.55(d,j＝8.5hz,2h),7.34(d,j＝8.5hz,2h),6.16(d,j＝2.3hz,1h),6.11(d,j＝2.3hz,1h),5.38(dd,j＝12.9,3.0hz,1h),3.90(s,3h),3.84(d,j＝6.3hz,3h),2.97(dd,j＝16.5,12.9hz,1h),2.79(dd,j＝16.5,3.0hz,1h).实施例7：(i-7)的制备操作同实施例，只是将邻甲氧基苯甲醛换成邻甲氧甲氧基苯甲醛(664.7mg,4.0mmol)，制得目标化合物(i-7)192.8mg，收率14％。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.68–7.52(m,1h),7.33–7.27(m,1h),7.16–7.13(m,1h),7.12–7.08(m,1h),6.18(d,j＝2.2hz,1h),6.11(d,j＝2.2hz,1h),5.82(dd,j＝11.0,5.1hz,1h),5.21(s,2h),3.91(s,3h),3.83(s,3h),3.46(s,3h),2.95–2.83(m,2h).实施例8：(i-8)的制备操作同实施例1，只是将邻甲氧基苯甲醛换成3,4-亚甲二甲氧基苯甲醛(607.5mg,4.0mmol)，制得目标化合物(i-8)192.1mg，收率30％。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ6.98(d,j＝1.5hz,1h),6.91(dd,j＝8.0,1.5hz,1h),6.84(d,j＝8.0hz,1h),6.15(d,j＝2.2hz,1h),6.11(d,j＝2.2hz,1h),6.00(s,2h),5.33(dd,j＝13.1,2.8hz,1h),3.91(s,3h),3.83(s,3h),3.01(dd,j＝16.5,13.1hz,1h),2.77(dd,j＝16.5,2.8hz,1h)实施例9：抗肺癌细胞h446生物活性测试体外抗肺癌细胞h446活性测试方法：mtt法实验步骤：1)样品的准备：对于可溶样品，每1mg用20μldmso溶解，取2ul用1000μl培养液稀释，使浓度为100μg/ml，再用培养液连续稀释至使用浓度。2)细胞的培养2.1)培养基的配制:每1000ml培养基中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。2.2)细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％co2培养箱中培养，3～5d传代。3)测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用将细胞用edta-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成1×105/ml，加到96孔细胞培养板中，每孔100ul，置37℃，5％co2培养箱中培养。接种24h后，加入用培养基稀释的样品，每孔100μl，每个浓度加3孔，置37℃，5％co2培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/ml的mtt，每孔10μl，置37℃孵育4h，加入dmso，每孔150μl，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在570nm波长下比色。以同样条件用不含样品，含同样浓度dmso的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞ic50，结果如表1所示。以肺癌细胞h446为模型，测定了化合物(i-1)～(i-8)8个样品体外对肺癌细胞生长的抑制作用(结果详见表1)。表1各化合物对肺癌细胞h446的ic50(μg/ml)化合物ic50(％)(i-1)33.79(i-2)31.69(i-3)37.32(i-4)16.65(i-5)10.69(i-6)21.48(i-7)35.56(i-8)21.27实施例10：抗胃癌细胞sgc-7901生物活性测试将肺癌细胞h446换为胃癌细胞sgc-7901，其他操作同实施例1.以胃癌细胞sgc-7901为模型，测定了化合物(i-1)～(i-8)8个样品体外对胃癌细胞生长的抑制作用(结果详见表2)。表2各化合物对胃癌细胞sgc-7901的ic50(μg/ml)当前第1页12