本发明涉及组合物的应用，尤其是杜仲叶和苦丁茶的组合物在制备防治糖尿病及其并发症的药物中的应用。
背景技术：
：糖尿病(diabetesmellitus,dm)是一种常见的内分泌代谢障碍性疾病、多发病，久病可引起多系统损害,导致眼、肾、神经、心脏、血管等疾病。随着人口老化,各国经济的发展和人们生活方式的改变,糖尿病的患病率在世界范围内迅速增长，严重威胁着人类健康。目前,全球dm病人已达1.5亿,预测2025年可达3亿。近年来,我国dm的患病率迅速增长,2002年dm病人约4000万,其中90％以上属2型dm,发病年龄呈现年轻化趋势。糖尿病肾病(diabeticnephropathy，dn)是dm最主要的微血管并发症,也是导致慢性肾衰竭的主要原因之一。据欧、美、日本的统计资料表明,目前dn已跃升为终末期肾病(esrd)的首位原因,占35％左右。据1999年统计,东北三省透析病人中dn占17.6％,在原发病中排第二位。进一步探讨dn的发病机制、早期诊断、坚持医疗监护和病人自我管理,以防止急、慢性并发症的发生,已成为当前的研究热点。糖尿病微血管病的发病机理尚未完全阐明,目前认为糖尿病的发生主要与肾组织糖代谢紊乱、血液动力学异常、血管活性物质、生长因子与化学趋化因子、反应性氧中间产物(ros)以及遗传等因素有关。目前现代医学治疗多从饮食控制、强化血糖控制、降压、调整脂质代谢等方面着手,或是采用透析、肾移植等治疗手段,虽然有一定疗效,但不能阻止其发展和恶化,且给患者带来沉重的经济负担。现有产品杜仲双降袋泡剂是由杜仲叶和苦丁茶为主要成分制成的一种茶剂，具有降压、降脂的功能，其价格比较实惠，患有高血压症及高血脂症的人常饮用；但未见利用杜仲双降袋泡剂对糖尿病方面的防治作用的临床药理研究方面的报道。现有技术中，200910186104.5含天麻杜仲叶苦丁茶的保健制剂是由天麻、杜仲叶、苦丁茶为主要成分制成，公开的是降血压和降血脂的作用；201410289120.8一种调节血脂、血压、血糖的中药组合物及其制备方法，虽然具有调节三高作用，但是成分包括绞股蓝、决明子、山楂、苦丁茶等15种成分，在调节血糖方面不能很好的明确是由哪种药材起到主导作用；而我公司此前的研究主要集中在产品的工艺优化、质量检测或配伍方面，如201310270311.5一种降血压、降血脂的保健茶及其制备方法由杜仲叶10-15份、苦丁茶30-50份、普洱茶20-30份为原料制成，侧重于配伍研究，而201310268359.2一种降血压、降血脂袋泡茶的制作方法，则侧重于对杜仲双降袋泡剂工艺的优化。因此，对现有产品新适应症的开拓研究，也是我们药学工作者的又一工作重点。本发明技术人员在经过进一步的实验研究后，还意外地发现，上述杜仲叶和苦丁茶的组合物在防治糖尿病及并发症方面具有明显的作用效果。技术实现要素：为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供了一种杜仲叶和苦丁茶的组合物在制备防治糖尿病及其并发症的药物中的应用。所述的糖尿病为2型糖尿病。所述的糖尿病并发症包括妊娠型糖尿病、糖尿病并发心血管病、糖尿病下肢血管病变、糖尿病足、糖尿病性神经病变。优选的，杜仲叶和苦丁茶的组合物用于治疗和预防2型糖尿病以及合并的脂代谢异常，以及妊娠型糖尿病。本发明所述杜仲叶和苦丁茶的组合物是从杜仲叶和苦丁茶中提取出的具有药用价值的提取物制成的制剂。其中，杜仲叶和苦丁茶的组合物制剂，原料药的重量配比为：杜仲叶5～10份、苦丁茶1.5～4份。优选的原料药的重量配比为：杜仲叶7份、苦丁茶3份。本发明的杜仲叶和苦丁茶的组合物，其中杜仲叶具有散血、消积、止痛的功能，主要含黄酮类荭草素、荭草甙、叶绿醌等成分，可用于风湿性关节炎、心肌缺血、降血压、脚气疮肿的治疗，为君药；苦丁茶具有宣畅心阳，疏通心脉，蠲除瘀阻，散瘀止痛的功能，为臣药。本发明提供的杜仲叶和苦丁茶的组合物中，其杜仲叶和苦丁茶的有效成分提取物可以按照我公司此前专利号为201310268359.2中的方法进行提取，也可以采用现有杜仲双降袋泡剂质量标准中的方法进行提取，还可以用其他现有常规的方法进行提取。例如，杜仲叶和苦丁茶的组合物制剂，其中杜仲叶经过水煎煮提取得到提取物；苦丁茶总量60-70％的细粉经过水煎煮提取，得到提取物；上述苦丁茶、杜仲叶提取物和苦丁茶总量30-40％的细粉混合，加入药学上可接受的辅料制成。本发明杜仲叶和苦丁茶的组合物可以根据需要加入一种或多种药学上可以接受的载体，如稀释剂、赋形剂、填充剂、崩解剂、湿润剂、粘合剂、表面活性剂、吸收促进剂、润滑剂等等，按照药学领域的常规方法，制备需要的剂型。本发明所述杜仲叶和苦丁茶的组合物制成的制剂包括袋泡剂、口含片、口服液、颗粒剂、片剂、胶囊剂，优选为袋泡剂。通过动物试验证实本发明所述杜仲叶和苦丁茶的组合物可以预防和治疗糖尿病以及由糖尿病引起的并发症，确切地说，本发明所述杜仲叶和苦丁茶的组合物具有防治2型糖尿病合并脂代谢异常，及妊娠型糖尿病的作用。疗效优于单独使用杜仲叶提取物及苦丁茶提取物。为了使本领域普通技术人员更好的理解本发明，以下通过实验及实施例来进一步阐述本发明荭叶心通制剂的组成、其制备方法及用途：一、药物的制备：原料：杜仲叶700份、苦丁茶300份制备方法一：苦丁茶减压干燥后，粉碎成过40-60目筛的细粉，取总量60-70％，加8-10倍量水煎煮提取2-3次，每次1-2小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在70-80℃为1.15-1.20的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，得苦丁茶提取物；杜仲叶加8-10倍量水煎煮提取2-3次，每次1-2小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在50-60℃为1.10-1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65-75％，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度在70-80℃为1.15-1.20的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，得杜仲叶提取物；将杜仲叶提取物、苦丁茶提取物和剩下的30-40％的苦丁茶细粉混合，按常规方法制成所需制剂。制备方法二：袋泡剂的制备苦丁茶减压干燥后，粉碎成过40-60目筛的细粉，取总量60-70％，与杜仲叶加8-10倍量水煎煮提取2-3次，每次1-2小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在70-80℃为1.15-1.20的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，和剩下的30-40％的苦丁茶细粉混合，干燥，分装，制成袋泡剂100袋。每袋装3.5g。制备方法三：袋泡剂的制备1)取杜仲叶洗净或除杂，加8倍量、浓度为30％乙醇溶液回流提取2次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩得清膏a；2)取60％重量份的苦丁茶粉碎成粒度为0.2-0.3mm的粗粉b，其余苦丁茶加入5倍量纯化水浸泡1小时，然后加入步骤1)提取后的杜仲叶残渣，煎煮1小时，煎煮液过滤，滤液浓缩成清膏后，加入杜仲醇提物a、罗汉果甜甙，充分混合，得在80℃时相对密度为1.0-1.2的混合物c，其中罗汉果甜甙的用量为5g，粉碎成100目的细粉；3)开启炒制锅，设定温度为75℃，调节搅拌棒速度为100转/分，放入苦丁茶粗粉b翻炒15分钟后，将混合物c均匀喷入炒制的苦丁茶中，喷制结束后将目的产物放入灭菌烘干设备中，先高温灭菌，高温灭菌温度为135℃，灭菌时间为50秒；然后迅速降温至80℃以下，50℃条件下低温干燥5小时，过80目筛整粒，分装，即得袋泡茶100袋。每袋装3.5g。需要说明的是，以上仅仅是介绍一种制备提取物的方法及制备成注射制剂的方法，是为了阐释本发明，而不是限制本发明。二、实验研究：实验例1组合物降血糖作用及合并脂代谢改善作用研究实验药物：实验1-5组：给予本发明实施例1-5制得的提取混合物。对比1组：杜仲叶水提取物，制成相当于生药1g/ml的溶液；对比2组：海南苦丁茶，水提取物用100％乙醇回流得提取物，制成相当于生药2g/ml的溶液；对比3组：糖脉康颗粒，制成相当于生药10g/ml的溶液。实验方法：取健康雄性昆明种小鼠100只，体重18-22g，适应性喂养一周后，随机分为10组，每组8只，分别为空白组、模型组、实验1-5组、对比1-3组。空白组饲喂基础饲料，其余各组饲喂高脂饲料，4周后除空白组外，其余各组均禁食不禁水12h，连续3天分别按小鼠35mg/kg剂量腹腔注射stz，空白对照组注射等量生理盐水，1周后禁食禁水24h，测定空腹血糖，大于11.1mmol/l确定为2型糖尿病模型小鼠。继续喂养高脂饲料，并进行药物灌胃10天。其中，给药组分别给予实验1-5组合对比1-3组药物(均为正常人使用量10倍)，灌胃给药，模型对照组和空白对照组每天给予生理盐水1ml。指标测定：(1)血糖值：于末次给药前12h禁食(不禁水)，剪尾取血，用血糖仪测定空腹血糖(fgb)。(2)血清指标：于末次给药前12h禁食，乙醚麻醉后尾静脉取血制成血清，测定血清tc、tg、hdl、ldl含量，以及sod和mda水平。结果：(1)血糖仪测定血糖值结果，见下表1：表1血糖仪测定血糖值结果比较注：与空白组比较,△p＜0.01；与模型组比较，▲p＜0.01与空白组比较，治疗前各组小鼠fbg水平显著升高；与模型组比较，给药后各治疗组的fbg水平下降，差异有统计学意义。以上结果可以看出，本发明组合物能拮抗stz诱导的小鼠高血糖，明显降低糖尿病小鼠的空腹血糖，具有良好作用。效果与糖脉康颗粒相当，好于单独使用杜仲叶提取物和苦丁茶提取物。(2)血清测定结果，见下表2、3：表2血脂测定结果比较注：与空白组比较,△p＜0.01；与模型组比较，▲p＜0.01与空白组比较，模型对照组大鼠tg、tc、ldl-c升高，hdl-c水平明显下降(p<0.01)，差异有统计学意义。提示大鼠体内存在脂质代谢紊乱，符合糖尿病特征；与模型对照组比较，给药后各治疗组的tg、tc、ldl-c水平下降，同时hdl-c水平升高(p<0.01)，差异有统计学意义。表3sod、mda水平比较组别剂量-生药(g.kg-1)sod(u.ml-1)mda(nmol.ml-1)空白--195.67±10.146.10±1.43模型--121.79±12.41△12.07±1.56△实11.5162.37±8.75▲8.65±1.33▲实22.0166.37±10.06▲8.22±1.46▲实31.7165.77±12.02▲8.35±1.52▲实41.7161.38±10.55▲8.30±1.24▲实51.7168.61±6.46▲8.17±1.48▲对12.5150.28±13.12▲9.22±2.09▲对25.0143.17±15.60▲10.48±1.52▲对35.0146.54±12.24▲9.87±1.66▲注：与空白组比较,△p＜0.01；与模型组比较，▲p＜0.01与空白组比较，模型对照组大鼠血液中sod水平下降、mda水平升高(p<0.01)，差异有统计学意义。表明糖尿病大鼠体内的抗氧化能力下降；与模型对照组比较，给药后各治疗组的sod水平升高、mda水平下降(p<0.01)，差异有统计学意义。以上结果可以看出，本发明组合物能明显降低糖尿病模型小鼠体内的氧化应激水平，抑制脂质过氧化物的形成，提高小鼠体内的自由基清除能力，增强其抗氧化能力，且效果好于单独使用杜仲叶提取物、苦丁茶提取物、糖脉康颗粒。糖尿病是以慢性血糖增高为特征的代谢系统疾病，常合并脂质代谢紊乱。脂代谢紊乱既可加重糖代谢紊乱，又可促进糖尿病并发症的发生、发展，因此，积极降糖降脂治疗有利于糖尿病的病情控制及生活质量的提高，降低糖尿病相关并发症的发生和降低并发症对机体的影响。实验例2组合物对妊娠糖尿病的作用研究实验药物：同实验例1实验方法：建立模型：参考文献，选择与雄性大鼠交配成功的雌性大鼠建立模型，次日晨检出阴栓或阴道涂片，发现精子者记为妊娠第0天。选取确定妊娠大鼠80只。孕鼠阴道发现精子后空腹10h，选择血糖低于6.1mmol/l，尿糖阴性的孕鼠，腹腔一次性注射四氧嘧啶40mg/kg，给药24h后每日尾尖取血测定血糖，妊娠4d起孕鼠空腹血糖>11.1mmol/l，随机血糖>17.9mmol/l，尿糖>++，即妊娠糖尿病大鼠模型复制成功。正常对照组腹腔注射等量生理盐水。分组与给药：实验动物分为10组，分别为实验1-5组、对比1-3组、妊娠糖尿病模型组、正常妊娠组，每组10只。实验组及对比组给药剂量同实验例1，妊娠糖尿病模型组及正常妊娠组给予等容量的蒸馏水，每日灌胃1次，连续给药14d。观察指标：各组大鼠分别于给药第0、7及14天用药后1h，禁食8h，尾尖取血，血糖测定仪测空腹血糖；给药第0、14天给药后2h，内眦静脉取血，分离血清，测定血清胰岛素含量；给药第o、14天用电子称测量大鼠体质量。结果：(1)本发明组合物对妊娠糖尿病大鼠空腹血糖的影响连续灌服实验组和对比组药物，第7、14天大鼠空腹血糖明显下降，与妊娠糖尿病模型组比较，有非常显著性差异(p<0.01)，其中本发明组效果好于对比组。见表4：(2)本发明组合物对妊娠糖尿病大鼠血清胰岛素的影响连续灌服实验组和对比组药物，第14天大鼠血清胰岛素水平无明显影响，与妊娠糖尿病模型组比较，无显著性差异。见表5：(3)本发明组合物对妊娠糖尿病大鼠体质量的影响连续灌服实验组和对比组药物，第14天大鼠体重无明显影响，与妊娠糖尿病模型组比较，无显著性差异，具体表现为：各组大鼠体质量范围在230-290g之间，0d和14d比较差异不超过20g。妊娠期糖尿病是妊娠期最常见的合并症之一，如不及时预防和治疗，将严重危害母婴健康。结果表明口服麦冬多糖第7、14天可降低妊娠糖尿病大鼠的空腹血糖，与模型组比较，有非常显著性差异，但对血清胰岛素水平及体重无明显影响。表面本发明组合物可以很好的用于妊娠期糖尿病，且不会影响胎儿发育。具体实施方式下面结合具体的实施方式来对本发明的技术方案做进一步的限定，但要求保护的范围不仅局限于所作的描述。实施例1杜仲叶500g、苦丁茶400g苦丁茶减压干燥后，粉碎成过40目筛的细粉，取总量70％，加10倍量水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在80℃为1.15的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，得苦丁茶提取物；杜仲叶加10倍量水煎煮提取3次，每次1小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在60℃为1.10的清膏，加乙醇使含醇量达75％，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度在80℃为1.15的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，得杜仲叶提取物。将得到的杜仲叶提取物、苦丁茶提取物，加入余下的苦丁茶细粉，充分混合。实施例2杜仲叶1000g、苦丁茶150g苦丁茶减压干燥后，粉碎成过60目筛的细粉，取总量60％，加8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在70℃为1.20的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，得苦丁茶提取物；杜仲叶加8倍量水煎煮提取2次，每次2小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在50℃为1.20的清膏，加乙醇使含醇量达65％，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度在70℃为1.20的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，得杜仲叶提取物；将得到的杜仲叶提取物、苦丁茶提取物，加入余下的苦丁茶细粉，充分混合。实施例3杜仲叶700g、苦丁茶300g苦丁茶减压干燥后，粉碎成过60目筛的细粉，取总量70％，加8倍量水煎煮提取2次，每次1.5小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在80℃为1.20的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，得苦丁茶提取物；杜仲叶加8倍量水煎煮提取2次，每次1.5小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在60℃为1.20的清膏，加乙醇使含醇量达70％，搅拌均匀，静置12小时，抽滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至相对密度在80℃为1.20的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉，得杜仲叶提取物。将得到的杜仲叶提取物、苦丁茶提取物，加入余下的苦丁茶细粉，充分混合。实施例4杜仲叶700g、苦丁茶300g苦丁茶减压干燥后，粉碎成过40-60目筛的细粉，取总量60-70％，与杜仲叶加8-10倍量水煎煮提取2-3次，每次1-2小时，合并提取液，过滤后浓缩至相对密度在70-80℃为1.15-1.20的清膏，进行微波真空干燥，粉碎成细粉；将得到的杜仲叶、苦丁茶混合提取物，加入余下的苦丁茶细粉，充分混合。实施例5杜仲叶700g、苦丁茶300g1)取杜仲叶洗净或除杂，加8倍量、浓度为30％乙醇溶液回流提取2次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液浓缩得清膏a；2)取60％重量份的苦丁茶粉碎成粒度为0.2-0.3mm的粗粉b，其余苦丁茶加入5倍量纯化水浸泡1小时，然后加入步骤1)提取后的杜仲叶残渣，煎煮1小时，煎煮液过滤，滤液浓缩成清膏后，加入杜仲醇提物a、罗汉果甜甙，充分混合，得在80℃时相对密度为1.0-1.2的混合物c，其中罗汉果甜甙的用量为5g，粉碎成100目的细粉；3)开启炒制锅，设定温度为75℃，调节搅拌棒速度为100转/分，放入苦丁茶粗粉b翻炒15分钟后，将混合物c均匀喷入炒制的苦丁茶中，喷制结束后将目的产物放入灭菌烘干设备中，先高温灭菌，高温灭菌温度为135℃，灭菌时间为50秒；然后迅速降温至80℃以下，50℃条件下低温干燥5小时。实施例6将实施例1-5得到的混合物，按常规方法制成袋泡剂。如：整粒，分装，即得袋泡茶100袋。每袋装3.5g。实施例7将实施例1-5得到的混合物，按常规方法制成颗粒剂。实施例8将实施例1-5得到的混合物，按常规方法制成普通片剂。实施例9将实施例1-5得到的混合物，按常规方法制成口含片剂。实施例10将实施例1-5得到的混合物，按常规方法制成胶囊剂。实施例11将实施例1-5得到的混合物，按常规方法制成口服液。当前第1页12