一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物及其制备方法与应用与流程

文档序号:18006611发布日期:2019-06-25 23:27阅读:441来源:国知局

本发明属于辣木叶深加工、高值化领域,涉及一种辣木叶提取物,具体涉及一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物及其制备方法与应用。



背景技术:

目前,随着生活水平的提高,高脂血症的发病率逐年增加。高脂血症,即高血脂,是由于脂肪代谢紊乱导致体内血脂水平过高而引发的疾病,同时会引发高血糖、高血压。2016年《中国成人血脂异常防治指南》显示,目前我国成人血脂异常患病率40.40%,比较2002年患病率水平大幅增加,其中高胆固醇血症患病率4.9%,高甘油三酯血症的患病率13.1%,低高密度脂蛋白胆固醇血症的患病率33.9%。我国青少年儿童血脂异常人数也有明显增长。人们对于具有降血脂功能的药品及保健品需求量增长较快。因此,具有降血脂功效、安全性高的植物提取物的开发具有显著的社会经济效益。

胆固醇衍生转化为胆汁酸并通过胆管系统、肠道系统排出体外,是人体内降低胆固醇的主要途径,一旦胆汁酸被排出至体外,就无法在小肠处重吸收经肠肝循环返回肝脏,肝脏就会大量降解胆固醇,从而促进血液中胆固醇流入肝脏,降低血液胆固醇的含量,起到降血脂作用。肝脏内胆固醇衍生转化成胆汁酸,一般以盐的形式存在。人体内的胆酸盐主要包括胆酸钠、甘胆酸钠和牛磺胆酸钠。因此,具有胆酸盐吸附能力、安全性高的植物提取物是开发具有降低血脂的保健品、药品研究的热点。

辣木(moringaoleiferalam.),原产于印度,是辣木科辣木属多年生热带落叶乔木,广泛种植于亚洲和非洲热带和亚热带地区,在我国广东、广西、云南、福建、台湾等地引种栽培。2012年,辣木叶被我国卫生部批准作为新资源食品。辣木叶含有丰富的糖类物质、蛋白质、多酚类化合物、生物碱、维生素等物质,具有抗氧化、抗炎、降血压等多种生理活性。然而,以辣木叶为原料,开发具有胆酸盐吸附作用的提取物用以降低血脂的报道较少。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物的制备方法。该提取物总糖含量>50%,通过体外模拟消化-超高效液相色谱-质谱联用(uplc-ms)验证其具有良好的胆酸盐吸附能力。本发明提取工艺简单、整个工艺流程均可达食品级要求,可应用于药品、保健品和食品等领域当中。

本发明的技术方案如下:

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物的制备方法,以干辣木叶为原料,采用粉碎过筛、乙醇热回流去杂、加水匀浆、超声波处理、纤维素酶酶解、高温提取、离心分离、减压浓缩、乙醇分级沉淀、加水复溶、二次减压浓缩、冷冻干燥等工艺进行纯化,得到一种具有良好胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物。该提取物总糖含量>50%,具有良好的胆酸盐吸附能力。

本发明的具体技术方案如下。

具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物的制备方法,包括以下步骤:

(1)加水匀浆:将干辣木叶粉碎后过筛后,与无水乙醇混合均匀,加热回流去杂,去除上清液,沉淀烘干得辣木叶干粉;将辣木叶干粉与去离子水混合,均质匀浆得混悬液1;

(2)超声波处理:将步骤(1)所得混悬液1进行恒温超声处理,得混悬液2;

(3)纤维素酶酶解:调节步骤(2)所得混悬液2的ph后,加入纤维素酶,恒温搅拌进行酶解,得混悬液3;

(4)高温提取:将步骤(3)所得混悬液3加热,提取多糖,得混悬液4;

(5)离心分离:将步骤(4)所得混悬液4冷却,离心分离后,取上清液作为提取液1;

(6)减压浓缩:将步骤(5)所得提取液1进行减压浓缩,得提取液2;

(7)乙醇分级沉淀:在步骤(6)所得提取液2中加入无水乙醇,匀速搅拌后,一次离心去除大分子多糖、蛋白质,得到上清液a;将上清液a减压浓缩后,加入无水乙醇,静置,二次离心,得沉淀1;

(8)加水复溶:在步骤(7)所得沉淀1中加入去离子水,加热,匀速搅拌,得提取液3;

(9)二次减压浓缩:将步骤(8)所得提取液3进行减压浓缩,得提取液4;

(10)冷冻干燥:将步骤(9)所得提取液4进行冷冻干燥,得所述辣木叶提取物。

进一步地,步骤(1)中,所述过筛是过40~80目筛。

进一步地,步骤(1)中,经过粉碎过筛后的干辣木叶与无水乙醇的料液比为1:8~1:16g/ml。

进一步地,步骤(1)中,所述热回流温度为85~95℃,处理时间为2~3h。

进一步地,步骤(1)中,所述烘干温度为45~65℃,烘干时间为4~6h。

进一步地,步骤(1)中,所述辣木叶干粉与去离子水的料液比为1:10~1:18g/ml。

进一步地,步骤(1)中,所述匀浆的剪切速率为3000~5000rpm,剪切时间10~20min。

进一步地,步骤(2)中,所述超声功率为600~800w,超声温度为40~60℃,处理时间为0.5~1.5h。

进一步地,步骤(3)中,所述混悬液1的ph调节至4.0~5.0。

进一步地,步骤(3)中,所述纤维素酶的加入量为辣木叶干粉质量的1~3%。

进一步地,步骤(3)中,所述纤维素酶酶解温度为45~55℃,搅拌速率为200~400r/min,酶解时间为6~10h。

进一步地,步骤(4)中,所述高温提取,加热温度至90~100℃,提取时间为60~90min。

进一步地,步骤(5)中,所述高速离心,离心力为6000~8000g,离心时间为10~20min。

进一步地,步骤(6)中,所述减压浓缩温度为50~60℃,浓缩液中固形物含量为25~35wt%。

进一步地,步骤(7)中,所述乙醇分级沉淀,是指在提取液2中加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为5~15wt%,所述匀速搅拌为室温下300~600r/min转速搅拌2~4h;所述一次离心的离心力为4000~6000g,离心10~20min;上清液a的减压浓缩温度为45~55℃,浓缩液中固形物含量为35~45wt%,得二次浓缩液。

进一步地,步骤(7)中,所述乙醇分级沉淀,在二次浓缩液中再次加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为40~60wt%,静置时间为4~6h,二次离心的离心力为4000~6000g,离心10~20min,得沉淀1。

进一步地,步骤(8)中,所述加水复溶,即在沉淀1中加入质量为沉淀1质量10~14倍的去离子水,设定温度为50~60℃,所述匀速搅拌为300~600r/min,转速搅拌1~3h,使得固形物浓度为3~5wt%。

进一步地,步骤(9)中,所述减压浓缩,是指浓缩温度为45~55℃,浓缩液中固形物含量为30~40wt%。

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,由上述制备方法制备,所述辣木叶提取物中总糖含量>50%,每克所述辣木叶提取物对胆酸盐的吸附量超过100μmol。

所制得的辣木叶提取物具体涉及体外模拟消化-uplc-ms模型检测胆酸盐吸附能力,可用于制备具有辅助降血脂功效的保健品、食品或辅助性治疗药物。

本发明具有如下优点和效果:

(1)本发明的制备方法制备得到一种主要含辣木叶大分子活性物质的具有良好胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,该提取物总糖含量>50%。

(2)本发明提取工艺简单、整个制备工艺流程均可达食品级要求。

(3)本发明所得辣木叶提取物经过体外模拟消化-uplc-ms模型验证具有良好的胆酸盐吸附能力,每克辣木叶提取物能吸附超过100μmol胆酸盐,可用于制备辅助降血脂功效的保健品、食品或辅助性治疗药物。

具体实施方案

为更好地理解本发明,下面将具体阐明本发明中体外模拟消化-uplc-ms模型的具体操作并结合具体实施例对本发明作进一步说明,但本发明的实施方式不限于此。

1、体外模拟消化实验具体操作:

(1)模拟胃消化:辣木叶提取物(以去离子水替代样品作为空白对照)按料液比1:1mg/ml溶解在0.01mol/lhcl(含胃蛋白酶)中,以模拟胃部条件,在37℃下连续摇动孵育1h,得胃部消化液。

(2)模拟肠道消化:用naoh调节胃部消化液ph至7.0后,加入辣木叶提取物质量1%的胰酶,加入与胃部消化液相同体积的浓度为500μm的胆汁酸(胆酸钠/甘胆酸钠/牛磺胆酸钠)储备溶液(以ph7.0,50mm磷酸缓冲液配制)以模拟肠道条件,随后在37℃下连续摇动孵育1h。将模拟肠液转移到透析袋(mw3000~10000)中,37℃透析3h,取透析袋外液,过0.22μm微孔滤膜,待测。

2、使用uplc-ms测定未被吸附的胆酸盐含量。

(1)色谱条件:acquityuplchsst3色谱柱,(2.1×100mm,1.8μm);流动相为0.1%甲酸水(a)以及甲醇(b),等度洗脱条件:30%b,0-5min;流速:0.2ml/min;进样量5μl;柱温25℃。

(2)四级杆飞行时间质谱条件:离子化模式为正离子模式,正离子电压源为3500v,碰撞能量为7.0ev,雾化气体和干燥气体为高纯氮气,干燥温度180℃,干燥气体流速6.0l/min;离子扫描范围为m/z30~1500da。

(3)胆酸盐吸附能力计算:

确定三种胆酸盐的特征离子碎片为226.9503,提取特征碎片,积分得到峰面积,计算样品对胆酸盐吸附能力(μmol胆酸盐/g辣木叶提取物)。

本发明实施例中使用上述体外模拟消化-uplc-ms模型的具体操作并采用上述方法计算胆酸盐吸附能力。

实施例1

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,具体包括如下步骤:

(1)粉碎过筛:将干辣木叶粉碎后过40目筛,得到辣木叶干粉1。

(2)乙醇热回流去杂:将步骤(1)所得辣木叶干粉1与无水乙醇以料液比为1:8g/ml混合均匀,加热85℃回流提取2h,去除液体,沉淀45℃烘干4h,得辣木叶干粉2。

(3)加水匀浆:将辣木叶干粉2与去离子水以料液比为1:10g/ml混合,均质匀浆,匀浆时剪切速率为3000rpm,剪切时间10min,得混悬液1。

(4)超声波处理:将步骤(3)所得混悬液1进行40℃恒温超声处理0.5h,超声功率为600w,得混悬液2。

(5)纤维素酶酶解:将步骤(4)所得混悬液2的ph调节至4.0,加入纤维素酶(celluclast1.5l),恒温搅拌进行酶解6h,所述纤维素酶加入量为辣木叶干粉2质量的1%,酶解温度为45℃,搅拌速率为200r/min,得混悬液3。

(6)高温提取:将步骤(5)所得混悬液3加热至90℃提取多糖,高温提取60min,得混悬液4。

(7)离心分离:将步骤(6)所得混悬液4冷却,进行离心分离,离心力为6000g,离心时间为10min,取上清液作为提取液1。

(8)减压浓缩:将步骤(7)所得提取液1进行减压浓缩,温度为50℃,浓缩液中固形物含量为25wt%,得提取液2。

(9)乙醇分级沉淀:将步骤(8)所得提取液2中加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为5wt%,室温下300r/min匀速搅拌2h后,一次离心10min去除大分子多糖、蛋白质,得到上清液a,所述一次离心的离心力为4000g;将上清液a减压浓缩,所述减压浓缩温度为45℃,浓缩液中固形物含量为35wt%;所述浓缩液中再次加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为40wt%,静置4h,进行二次离心10min,所述离心力为4000g,得沉淀1。

(10)加水复溶:在步骤(9)所得沉淀1中加入质量为沉淀1质量10倍的去离子水,加热至50℃,300r/min匀速搅拌1h,使得固形物浓度为3wt%,得提取液3。

(11)二次减压浓缩:将步骤(10)所得提取液3进行减压浓缩,浓缩温度为45℃,浓缩液中固形物含量为30wt%,得提取液4。

(12)冷冻干燥:将步骤(11)所得提取液4进行冷冻干燥,得辣木叶提取物1。

实施例2

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,具体包括如下步骤:

(1)粉碎过筛:将干辣木叶粉碎后过60目筛,得到辣木叶干粉1。

(2)乙醇热回流去杂:将步骤(1)所得辣木叶干粉1与无水乙醇以料液比为1:12g/ml混合均匀,加热90℃回流提取2.5h,去除液体,沉淀55℃烘干5h,得辣木叶干粉2。

(3)加水匀浆:辣木叶干粉2与去离子水以料液比为1:14g/ml混合,均质匀浆,匀浆时剪切速率为4000rpm,剪切时间15min,得混悬液1。

(4)超声波处理:将步骤(3)所得混悬液1进行50℃恒温超声处理1h,超声功率为700w,得混悬液2。

(5)纤维素酶酶解:将步骤(4)所得混悬液2的ph调节至4.5,加入纤维素酶(celluclast1.5l),其加入量为辣木叶干粉2质量的2%,恒温搅拌进行酶解8h,酶解温度为50℃,搅拌速率为300r/min,得混悬液3。

(6)高温提取:将步骤(5)所得混悬液3加热至95℃提取多糖,高温提取75min,得混悬液4。

(7)离心分离:将步骤(6)所得混悬液4冷却,进行离心分离,离心力为7000g,离心时间为15min,取上清液,得提取液1。

(8)减压浓缩:将步骤(7)所得提取液1进行减压浓缩,温度为55℃,浓缩液中固形物含量为30wt%,得提取液2。

(9)乙醇分级沉淀:将步骤(8)所得提取液2中加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为10wt%,室温下450r/min匀速搅拌3h,一次离心15min去除大分子多糖、蛋白质,得到上清液a,所述一次离心的离心力为5000g;将上清液a减压浓缩,减压浓缩温度为50℃,浓缩液中固形物含量为40wt%;所述浓缩液中再次加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为50wt%,静置5h,进行二次离心15min,所述离心力为5000g,得沉淀1。

(10)加水复溶:在步骤(9)所得沉淀1中加入质量为沉淀1质量12倍的去离子水,加热至55℃,450r/min匀速搅拌2h,使得固形物浓度为4wt%,得提取液3。

(11)二次减压浓缩:将步骤(10)所得提取液3进行减压浓缩,浓缩温度为50℃,浓缩液中固形物含量为35wt%,得提取液4。

(12)冷冻干燥:将步骤(11)所得提取液4进行冷冻干燥,得辣木叶提取物2。

实施例3

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,具体包括如下步骤:

(1)粉碎过筛:将干辣木叶粉碎后过80目筛,得到辣木叶干粉1。

(2)乙醇热回流去杂:将步骤(1)所得辣木叶干粉1与无水乙醇以料液比为1:16g/ml混合均匀,加热95℃回流提取3h,去除液体,沉淀65℃烘干6h,得辣木叶干粉2。

(3)加水匀浆:辣木叶干粉2与去离子水以料液比为1:18g/ml混合,均质匀浆,匀浆时剪切速率为5000rpm,剪切时间20min,得混悬液1。

(4)超声波处理:将步骤(3)所得混悬液1进行60℃恒温超声处理1.5h,超声功率为800w,得混悬液2。

(5)纤维素酶酶解:将步骤(4)所得混悬液2的ph调节至5.0,加入纤维素酶(celluclast1.5l),其加入量为辣木叶干粉2质量的3%,恒温搅拌进行酶解酶10h,解温度为55℃,搅拌速率为400r/min,得混悬液3。

(6)高温提取:将步骤(5)所得混悬液3加热至100℃提取多糖,高温提取90min,得混悬液4。

(7)离心分离:将步骤(6)所得混悬液4冷却,进行离心分离,离心力为8000g,离心时间为20min,取上清液,得提取液1。

(8)减压浓缩:将步骤(7)所得提取液1进行减压浓缩,温度为60℃,浓缩液中固形物含量为35wt%,得提取液2。

(9)乙醇分级沉淀:将步骤(8)所得提取液2中加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为15wt%,室温下600r/min匀速搅拌4h;一次离心20min去除大分子多糖、蛋白质,得到上清液a,所述一次离心的离心力为6000g;将上清液a减压浓缩,减压浓缩温度为55℃,浓缩液中固形物含量为45wt%;所述浓缩液中再次加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为60wt%,静置6h,进行二次离心20min,所述离心力为6000g,得沉淀1。

(10)加水复溶:在步骤(9)所得沉淀1中加入质量为沉淀1质量14倍的去离子水,加热至60℃,600r/min匀速搅拌3h,使得固形物浓度为5wt%,得提取液3。

(11)二次减压浓缩:将步骤(10)所得提取液3进行减压浓缩,浓缩温度为55℃,浓缩液中固形物含量为40wt%,得提取液4。

(12)冷冻干燥:将步骤(11)所得提取液4进行冷冻干燥,得辣木叶提取物3。

对比例1

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,具体包括如下步骤:

(1)粉碎过筛:将干辣木叶粉碎后过60目筛,得到辣木叶干粉1。

(2)乙醇热回流去杂:将步骤(1)所得辣木叶干粉1与无水乙醇以料液比为1:12g/ml混合均匀,加热90℃回流提取2.5h,去除液体,沉淀55℃烘干5h,得辣木叶干粉2。

(3)加水匀浆:辣木叶干粉2与去离子水以料液比为1:14g/ml混合,均质匀浆,匀浆时剪切速率为4000rpm,剪切时间15min,得混悬液1。

(4)高温提取:将步骤(3)所得混悬液1加热至95℃提取多糖,高温提取75min,得混悬液2。

(5)离心分离:将步骤(4)所得混悬液2冷却,进行离心分离,离心力为7000g,离心时间为15min,取上清液,得提取液1。

(6)减压浓缩:将步骤(5)所得提取液1进行减压浓缩,温度为55℃,浓缩液中固形物含量为30wt%,得提取液2。

(7)乙醇分级沉淀:将步骤(6)所得提取液2中加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为10wt%,室温下450r/min匀速搅拌3h;一次离心15min去除大分子多糖、蛋白质,得到上清液a,所述一次离心的离心力为5000g;将上清液a减压浓缩,减压浓缩温度为50℃,浓缩液中固形物含量为40wt%;所述浓缩液中再次加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为50wt%,静置5h,进行二次离心,离心力为5000g,离心15min,得沉淀1。

(8)加水复溶:在步骤(7)所得沉淀1中加入质量为沉淀1质量12倍的去离子水,加热至55℃,450r/min匀速搅拌2h,使得固形物浓度为4wt%,得提取液3。

(9)二次减压浓缩:将步骤(8)所得提取液3进行减压浓缩,浓缩温度为50℃,浓缩液中固形物含量为35wt%,得提取液4。

(10)冷冻干燥:将步骤(9)所得提取液4进行冷冻干燥,得辣木叶提取物4。

对比例2

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,具体包括如下步骤:

(1)粉碎过筛:将干辣木叶粉碎后过60目筛,得到辣木叶干粉1。

(2)乙醇热回流去杂:将步骤(1)所得辣木叶干粉1与无水乙醇以料液比为1:12g/ml混合均匀,加热90℃回流提取2.5h,去除液体,沉淀55℃烘干5h,得辣木叶干粉2。

(3)加水匀浆:辣木叶干粉2与去离子水以料液比为1:14g/ml混合,均质匀浆,匀浆时剪切速率为4000rpm,剪切时间15min,得混悬液1。

(4)超声波处理:将步骤(3)所得混悬液1进行50℃恒温超声处理1h,超声功率为700w,得混悬液2。

(5)高温提取:将步骤(4)所得混悬液2加热至95℃提取多糖,高温提取75min,得混悬液3。

(6)离心分离:将步骤(5)所得混悬液3冷却,进行离心分离,离心力为7000g,离心时间为15min,取上清液,得提取液1。

(7)减压浓缩:将步骤(6)所得提取液1进行减压浓缩,温度为55℃,浓缩液中固形物含量为30wt%,得提取液2。

(8)乙醇分级沉淀:将步骤(7)所得提取液2中加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为10wt%,室温下450r/min匀速搅拌3h;一次离心15min去除大分子多糖、蛋白质,得到上清液a,所述一次离心的离心力为5000g;将上清液a减压浓缩,减压浓缩温度为50℃,浓缩液中固形物含量为40wt%;所述浓缩液中再次加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为50wt%,静置5h,进行二次离心15min,离心力为5000g,得沉淀1。

(9)加水复溶:在步骤(8)所得沉淀1中加入质量为沉淀1质量12倍的去离子水,加热至55℃,450r/min匀速搅拌2h,使得固形物浓度为4wt%,得提取液3。

(10)二次减压浓缩:将步骤(9)所得提取液3进行减压浓缩,浓缩温度为50℃,浓缩液中固形物含量为35wt%,得提取液4。

(11)冷冻干燥:将步骤(10)所得提取液4进行冷冻干燥,得辣木叶提取物5。

对比例3

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,具体包括如下步骤:

(1)粉碎过筛:将干辣木叶粉碎后过60目筛,得到辣木叶干粉1。

(2)乙醇热回流去杂:将步骤(1)所得辣木叶干粉1与无水乙醇以料液比为1:12g/ml混合均匀,加热90℃回流提取2.5h,去除液体,沉淀55℃烘干5h,得辣木叶干粉2。

(3)加水匀浆:辣木叶干粉2与去离子水以料液比为1:14g/ml,均质匀浆,匀浆时剪切速率为4000rpm,剪切时间15min,得混悬液1。

(4)纤维素酶酶解:将步骤(3)所得混悬液1的ph调节至4.5,加入纤维素酶(celluclast1.5l),其加入量为辣木叶干粉2质量的2%,恒温搅拌进行酶解酶8h,酶解温度为50℃,搅拌速率为300r/min,得混悬液2。

(5)高温提取:将步骤(4)所得混悬液2加热至95℃提取多糖,高温提取75min,得混悬液3。

(6)离心分离:将步骤(5)所得混悬液3冷却,进行离心分离,离心力为7000g,离心时间为15min,取上清液,得提取液1。

(7)减压浓缩:将步骤(6)所得提取液1进行减压浓缩,温度为55℃,浓缩液中固形物含量为30wt%,得提取液2。

(8)乙醇分级沉淀:将步骤(7)所得提取液2中加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为10wt%,室温下450r/min匀速搅拌3h,一次离心15min去除大分子多糖、蛋白质,得到上清液a,所述一次离心的离心力为5000g;将上清液a减压浓缩,减压浓缩温度为50℃,浓缩液中固形物含量为40wt%;所述浓缩液中再次加入无水乙醇,使体系中乙醇浓度为50wt%,静置5h,进行二次离心15min,离心力为5000g,得沉淀1。

(9)加水复溶:在步骤(8)所得沉淀1中加入质量为沉淀1质量12倍的去离子水,加热至55℃,450r/min匀速搅拌2h,使得固形物浓度为4wt%,得提取液3。

(10)二次减压浓缩:将步骤(9)所得提取液3进行减压浓缩,浓缩温度为50℃,浓缩液中固形物含量为35wt%,得提取液4。

(11)冷冻干燥:将步骤(10)所得提取液4进行冷冻干燥,得辣木叶提取物6。

对比例4

一种具有胆酸盐吸附能力的辣木叶提取物,具体包括如下步骤:

(1)粉碎过筛:将干辣木叶粉碎后过60目筛,得到辣木叶干粉1。

(2)乙醇热回流去杂:将步骤(1)所得辣木叶干粉1与无水乙醇以料液比为1:12g/ml混合均匀,加热90℃回流提取2.5h,去除液体,沉淀55℃烘干5h,得辣木叶干粉2。

(3)加水匀浆:辣木叶干粉2与去离子水以料液比为1:14g/ml混合,均质匀浆,匀浆时剪切速率为4000rpm,剪切时间15min,得混悬液1。

(4)纤维素酶酶解:将步骤(3)所得混悬液1的ph调节至4.5,加入纤维素酶(celluclast1.5l),其加入量为辣木叶干粉2质量的2%,恒温搅拌进行酶解酶8h,酶解温度为50℃,搅拌速率为300r/min,得混悬液2。

(5)高温提取:将步骤(4)所得混悬液2加热至95℃提取多糖,高温提取75min,得混悬液3。

(6)离心分离:将步骤(5)所得混悬液3冷却,进行离心分离,离心力为7000g,离心时间为15min,取上清液,得提取液1。

(7)减压浓缩:将步骤(6)所得提取液1进行减压浓缩,温度为55℃,浓缩液中固形物含量为30wt%,得提取液2。

(8)冷冻干燥:将步骤(7)所得提取液2进行冷冻干燥,得辣木叶提取物7。

辣木叶提取物的总糖含量及体外胆酸盐吸附能力

辣木叶提取物的总糖含量及体外胆酸盐吸附能力如表1所示。本发明制备得到的辣木叶提取物1、2、3具有良好的胆酸盐吸附能力,总糖含量>50%,每克辣木叶提取物能吸附超过100μmol胆酸盐。而对比例中,辣木叶提取物4的制备过程缺少了超声波处理和纤维素酶酶解关键步骤,总糖含量为33.36%,每克辣木叶提取物4能吸附54.29-57.31μmol胆酸盐;辣木叶提取物5的制备过程缺少了纤维素酶酶解关键步骤,总糖含量为38.21%,每克辣木叶提取物5能吸附57.92-69.14μmol胆酸盐;辣木叶提取物6的制备过程缺少了超声波处理关键步骤,总糖含量为41.02%,每克辣木叶提取物6能吸附77.16-83.34μmol胆酸盐;辣木叶提取物7的制备过程缺少了乙醇分级沉淀、加水复溶以及二次减压浓缩这三个关键步骤,总糖含量为25.64%,每克辣木叶提取物7能吸附36.44-40.87μmol胆酸盐。所以本发明的制备方法中超声波处理及纤维素酶酶解步骤为关键步骤,可有效提升辣木叶提取物的总糖含量及其胆酸盐吸附能力。

表1辣木叶提取物的总糖含量及其体外胆酸盐吸附能力

本发明实施例可见,整个制备工艺流程简单、各环节均可达食品级要求,制备成本低。

以上实施例仅为本发明较优的实施方式,仅用于解释本发明,而非限制本发明,本领域技术人员在未脱离本发明精神实质下所作的改变、替换、修饰等均应属于本发明的保护范围。

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