用于制备液体组合物的方法与流程

本发明涉及制备包含在油中的活性物质的稳定颗粒(稳定化粒子，stabilisedparticle)的液体组合物的方法，涉及通过所述方法制备的液体组合物，并且涉及这样的液体组合物的使用方法。发明背景在许多情况下，将需要缓慢释放药理活性化合物。例如，许多药物(如用于慢性病症或作为预防药所服用的那些药物)需要定期服用以维持治疗有效浓度，并且差的患者依从性降低其效力。如果可以以维持治疗有效浓度而不需要对患者采取行动的方式施用这样的药物，则患者依从性差的问题将得到改善。一种方案是以这样的方式配制药物，即使得制剂逐渐释放药物，在预定时间期内维持有效浓度。一个特定的实例是将药物包裹在聚合物护套中，其缓慢释放药物。例如在us4,957,119a中，此方法通常用于避孕植入物。然而，此方法并非没有缺点。以避孕植入物为例，需要经过医学培训的专业人员来插入和移除聚合物护套，这是一个不愉快的过程，其降低了此方法在合格患者人群中的使用率。另外，当与高脂膳食一起施用时，许多药物的药代动力学性质得到增强。这导致例如药物的口服生物利用度提高。药物的口服生物利用度的提高可以导致仍具有所需治疗效果的降低的口服剂量，口服剂量的这种降低可以导致不良副作用和长期毒性的相应降低。此外，患者依从性也是口服给药方案的一个问题，因为患者必须在时间安排和含量两个方面使他们的膳食配合他们的用药方案，以获得这种增强的口服生物利用度。如果油可以与药物一起提供，则可以获得增强的生物利用度同时不会给患者带来另外的不便。脂溶性药物可以溶解在脂质中以增强它们的口服生物利用度。水溶性(即酯质不溶性)药物不能溶解在脂质中，因此无法受益于口服生物利用度的这种增强。一种可能的方案是创建水溶性药物的固体药物纳米颗粒(sdn)，并且将它们分散在脂质相中。然而，水溶性药物的sdn很难以有效的方式制备，阻止了这种方法有效地进行。先前发现(如wo2006/079410a1所描述和要求保护的)，可以通过利用以下方法来制备载液，所述方法包括由以下各项制备乳液：a)水相、b)作为挥发性的并且与该水相不混溶的第二液相、c)可溶于乳液的连续相并且在环境温度为液体的载体材料以及d)可溶于乳液的分散相的掺杂剂材料，随后冷却该乳液直至所述连续相和载体材料两者变为固体(即，它们冻结)，接着从冷却的乳液中以蒸汽形式移除水和挥发性的第二相，并且解冻以获得其中分散有掺杂剂材料的液体产品(在环境温度下)。随后将此构思发展为包括不使用乳液的替代方法(如wo2013/030535a2所描述和要求保护的)。替代方法包括制备单相溶液，所述单相溶液包含：a)溶剂或可混溶溶剂的混合物、b)可溶于溶剂(a)的液体载体以及c)也可溶于溶剂(a)的掺杂剂材料；冷却该单相溶液以使溶剂(a)和液体载体(b)冻结；以蒸气形式移除固化的溶剂；并解冻以获得其中分散有掺杂剂材料的液体产品(在环境温度下)。由上述方法获得的液体产品适合于向包含掺杂剂材料以易分散形式不溶或难溶于其中的溶剂的体系提供掺杂剂材料。因此，随着掺杂剂材料快速分散，所述体系中的掺杂剂材料的浓度在短时间期内(大约几秒到几分钟)迅速增加。然而，由于制备这样的液体产品的方法所致，材料的某些组合可能证明不适用于上述方法(例如，就它们的溶解性特性而言)。另外，这样的方法制备了适合于将掺杂剂材料快速释放到它们难溶于其中的溶剂中的组合物。药物是具有药理活性的化合物(活性物质)。如jordheim，l.p.；durantel，d.；zoulim，f.；和dumontet，c.在nat.rev.drugdiscov.2013，12，447中讨论的，活性物质包括核苷和核苷酸的类似物，它们是对于多种药理学应用感兴趣的。例如，核苷酸类似物逆转录酶抑制剂(ntrti)和核苷类似物逆转录酶抑制剂(nrti)是用于治疗病毒感染的有价值药物种类。它们起到通过抑制逆转录酶来阻断由病毒rna合成双链病毒dna的作用。也正在研究核苷和核苷酸的类似物针对癌症的活性和用作癌症的治疗剂。它们起到抑制癌细胞生长和复制的作用。例如，阿糖胞苷(cytarabine)(胞苷的类似物)用于治疗白血病和淋巴瘤。核苷和核苷酸的类似物经常遇到耐药性、口服生物利用度差和长期毒性的问题。ntrti的实例包括替诺福韦(tenofovir)前药，其为核苷酸类似物，具体是一磷酸腺苷的类似物。ntrti用于治疗慢性病毒感染(最常见的是hiv)，以及预防性地用于高危个体。不同寻常地，对于这类药物，替诺福韦前药具有显著的水溶性。典型地，对于这类药物，替诺福韦前药需要高度严控的用药方案以维持效力。如果不维持该方案，则疾病可能在患者中进一步发展，并且增加传播的可能性。本发明的一个目的是提供一种制备液体组合物的方法，所述组合物包含在油中的至少一种活性物质的稳定颗粒，以及提供这样的液体组合物本身，其中至少一种活性物质被逐渐释放，连同它们的应用，所有这些都消除或至少减轻了现有技术中遇到的一些问题或困难。另一个目的是提供包含至少一种活性物质的稳定颗粒的液体组合物，其中活性物质的口服生物利用度得到增强。发明概述第一方面本发明的第一方面提供了一种制备液体组合物的方法，所述液体组合物包含在油中的至少一种活性物质的稳定颗粒(稳定化颗粒，stabilisedparticulate)，所述活性物质选自核苷类似物和核苷酸类似物，所述方法包括以下步骤：1)将至少一种活性物质溶解在第一溶剂中以形成第一溶液；2)将一种或多种稳定剂溶解在第二溶剂中以形成第二溶液，其中第一溶剂和第二溶剂是可混溶的，并且至少一种活性物质在第二溶剂中是不溶的；3)将第一溶液和第二溶液合并以形成至少一种活性物质的稳定颗粒悬浮在混合溶剂中的颗粒悬浮液；4)向颗粒悬浮液中加入油以形成液体混合物，其中至少一种活性物质在所述油中是不溶的；以及5)从颗粒悬浮液中移除第一溶剂和第二溶剂以形成液体组合物。本发明的第一方面是涉及制备液体组合物的方法。液体组合物由这样的油组成，在所述油中悬浮有作为油不溶性的至少一种活性物质的稳定颗粒。为了避免任何疑义，至少一种活性物质可以是一种或多种核苷类似物、一种或多种核苷酸类似物或核苷类似物和核苷酸类似物中每一种的一种或多种。前药意指在展现出其药理作用之前经历生物转化(例如，代谢)的药物或化合物。与母体药物相比，前药通常展现出改善的吸附、分布、代谢和排泄特性，以及改善的生物利用度。为了避免任何疑义，在整个说明书中，“液体”和类似术语意指所讨论的物质(在高于其固化温度但处于或低于40℃的温度下)展现出易于流动和相对较高的不可压缩性的特性的物质状态；所讨论的物质不抵抗形状变化，但是抵抗尺寸变化。因此，出于本发明的目的，凝胶、蜡和其他这样的“半固体”材料将被考虑(根据上面提供的定义)作为是“液体”的物质。“油不溶性的”意指活性物质通常在油中是不溶的，即，引入到液体中的活性物质的固体实体(量为1mg/ml)将保持原样(即固体)而不溶解。稳定(稳定化，stabilised)意指粒子在悬浮于液体中时发生聚集的趋势已得到改善或完全消除。因此，稳定颗粒不发生絮凝并且保持它们独立的特性和运动性。不希望受理论束缚，认为在混合第一溶液和第二溶液时，掺杂剂材料在所得的溶剂混合物中沉淀。然而，稳定剂起到防止固体颗粒聚集或絮凝并且限制它们的尺寸的作用，从而形成活性物质的颗粒的细悬浮液。活性物质的悬浮液是稳定的，如图3所示，其显示替诺福韦前药(富马酸替诺福韦二吡呋酯(tenofovirdisoproxilfumerate))的细悬浮液的超声处理对它们的流体动力学直径或尺寸分布没有影响。在本发明的第一方面的方法中，第一溶剂和第二溶剂可以选自烷烃、低级(c1-c10)醇、有机酸、酰胺、腈、环状烃、卤代烷烃、酯、醛和酮、醚、挥发性环状有机硅和水。更优选地，第一溶剂体系包括至少一种质子溶剂，并且第二溶剂体系包括至少一种非质子或非极性溶剂。溶剂可以选自：·烷烃，例如庚烷、正己烷、异辛烷、癸烷、十二烷；·低级(c1-10)醇，如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、异丁醇、叔丁醇、1-戊醇；·有机酸，如甲酸、乙酸；·酰胺，如甲酰胺、n，n-二甲基甲酰胺；·腈，如乙腈；·环状烃，如甲苯、二甲苯、环己烷；·卤代烷烃，如二氯甲烷、二氯乙烷、三氯甲烷(氯仿)、氟代三氯甲烷、四氯乙烷；·酯，如乙酸乙酯；·醛和酮，如丙酮、2-丁酮、2-己酮；·醚，如二乙醚；·挥发性环状有机硅，如含有4至6个硅原子的环甲硅油，例如道康宁245流体(dowcorning245fluid)和道康宁345流体，可从道康宁公司(dowcorninginc.)获得；和·水。更优选的是第一溶剂包括低级醇并且第二溶剂包括氯代溶剂。最优选的是第一溶剂包括甲醇并且第二溶剂包括二氯甲烷。甲醇是极性的质子溶剂并且是用于许多活性物质的合适溶剂。二氯甲烷是非质子溶剂并且是用于许多稳定剂的合适溶剂。尽管它们的极性不同，但是甲醇和二氯甲烷以任何比率都是完全混溶的，另外，甲醇和二氯甲烷混合物是用于油的合适溶剂。第一溶剂和第二溶剂可以包括另外的合适溶剂。另外的溶剂可以与第一溶剂和第二溶剂一起使用，条件是它们对方法中使用的活性物质、稳定剂或油的溶解性不具有有害影响。可以添加到第一溶剂或第二溶剂中的溶剂是满足方法中规定的要求的那些溶剂。换言之，如果使用另外的溶剂，则第一溶剂必须保持是用于活性物质的溶剂；第二溶剂必须保持是用于稳定剂的溶剂；活性物质必须保持在由第一溶剂和第二溶剂的混合物产生的混合溶剂中是不溶的；并且油必须保持在由第一溶剂和第二溶剂的混合产生的混合溶剂中是可溶的。用于第一溶剂和第二溶剂的每一种的溶剂的混合物不限于二元混合物，而是可以包括三种或更多的组分。可以存在另外的溶剂，条件是它们作为整体在溶剂混合物中是混溶的、不溶解掺杂剂材料并且不会使油在溶剂混合物中不溶。另外的溶剂可以选自上面列出的合适溶剂。优选的是至少一种活性物质在第一溶液中的总浓度为约10至100mg/ml，更优选至少约30mg/ml，进一步优选至少约50mg/ml，还进一步优选至少约70mg/ml，并且最优选至少约80mg/ml。另外，优选的是稳定剂在第二溶液中的浓度为约1至30mg/ml，更优选至少约5mg/ml，进一步优选至少约10mg/ml，还进一步优选至少约15mg/ml，并且最优选至少约20mg/ml。备选地，可以优选的是至少一种活性物质在第一溶液中的总浓度保持在约30至100mg/ml的范围内，为约50至100mg/ml，更优选约70至100mg/ml，并且最优选约80至100mg/ml。作为另外的备选方案，可以优选的是稳定剂在第二溶液中的浓度保持在约1至30mg/ml的范围内，为约5至30mg/ml，更优选约10至30mg/ml，进一步优选约15至30mg/ml，并且最优选约20至30mg/ml。改变活性物质和稳定剂在第一溶液和第二溶液中的浓度使得可以产生具有不同负载量的活性物质的颗粒，而无需改变第一溶液和第二溶液的相对量或所得悬浮液中的颗粒的总浓度。这是重要的，因为改变第一溶剂和第二溶剂的比率会改变活性物质和/或油在所得混合溶剂中的溶解性。第一溶液和第二溶液的体积比可以是满足上面列出的溶解性标准的任何体积比(即，活性物质的沉淀颗粒必须不溶于由第一溶剂和第二溶剂的混合物产生的混合溶剂；并且油必须可溶于由第一溶剂和第二溶剂的混合物产生的混合溶剂)。优选的是第一溶液和第二溶液在混合时的体积比为约2∶1至1∶10，更优选约1∶1至1∶6，并且最优选约1∶4。选择第一溶液和第二溶液的体积比以确保活性物质在所得混合溶剂中的沉淀。混合溶剂还必须能够溶解油。因此，混合溶剂含有活性物质的固体颗粒和处于液体或溶解状态的油。优选的是在合并步骤期间搅拌第一溶液和第二溶液。这种搅拌可以简单地是手动摇动、在平板摇床或其他自动摇床上摇动、在管状滚筒上滚动、用磁力搅拌器搅拌、用机械搅拌器搅拌、涡旋或超声处理。在合并第一溶液和第二溶液的同时用于搅拌的方法也适合于将油混合到悬浮液中。许多常见的实验室方法都适合于用于移除溶剂。优选的方法是冷冻干燥法(即冷冷冻干燥)。在这种方法下，使用冷却介质将含油悬浮液快速冷冻，并且通过减压升华移除溶剂。优选地，冷却介质是液氮(沸点：-196℃)。其他可能的冷却介质包括：·液态空气(沸点：-196℃)；·液氨(沸点：-33℃)；·液化稀有气体，如氩气(沸点：-186℃)；·液化卤代烃，如三氯乙烯；·含氯氟烃，如freontm；和·烃，如己烷、二甲基丁烯、异庚烷、枯烯。冷却介质在冷冻过程期间可以处于其沸点(如液化气体的情形)，或者其可以通过外部冷却装置进行冷却。备选地，冷却介质可以是具有固体二氧化碳的有机溶剂。备选地，可以通过将含油悬浮液放置于保持在低于其冻结点的温度下的环境中，如冰箱或冷冷冻干燥器中，来实现含油悬浮液的冷却。优选地，减压是高真空(例如＜100微巴)。用于冷冻干燥的条件是本领域技术人员熟知的；施加的真空和所需的时间应使得通过升华有效地移除存在的所有溶剂或溶剂混合物。冷冻干燥步骤可以进行长达约72小时，有时约48小时，并且优选少于12小时。冷冻干燥可以用于将溶剂从液体组合物中批量移除，然后分到优选的容器或贮器中。备选地，冷冻干燥可以用于将溶剂从优选容器(例如无菌注射器)中的液体组合物中直接移除。优选的是进行冷冻干燥以制备无菌液体组合物。由本发明的方法得到的液体组合物优选基本上不含溶剂。在本发明的上下文中，术语“基本上不含溶剂”意指组合物和药物制剂中的游离溶剂含量小于15％，优选低于10％，更优选低于5％，并且最优选低于2％。备选地或另外地，组合物的溶剂含量在工业上可接受的药物监管指南(如ich协调指南(ichharmonisedguidelines))的可接受范围内。为了避免疑义，在整个说明书中，除非另有说明，所有百分比均为重量百分比。核苷酸和核苷的类似物是这样的一类化合物，它们中的许多是药理活性的，其结构基于作为rna和dna组分的核苷酸和核苷。核苷由核碱基和核糖组成。dna使用四个核碱基：腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶。核碱基可以根据其结构定义为嘌呤(腺嘌呤和鸟嘌呤)或嘧啶(胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶)。rna使用另外的核碱基尿嘧啶代替胸腺嘧啶。五种天然存在的核苷是腺苷、鸟苷、5-甲基尿苷、尿苷和胞苷。核苷酸由核苷组成，其中糖上附接有磷酸基团(即一磷酸核苷)。五种天然存在的核苷酸是一磷酸腺嘌呤、一磷酸鸟苷、一磷酸5-甲基尿苷、一磷酸尿苷和一磷酸胞苷。由于核苷和核苷酸是生物分子，因此它们的类似物在制药应用中受到相当大的关注。合适的核苷类似物可以是任何核苷的类似物；核苷可以是环状的或无环的。合适的核苷酸类似物可以是任何核苷酸的类似物；核苷酸可以是环状的或无环的。以下提供十种天然存在的核苷和核苷酸的结构，以供参考。为了避免任何疑义，类似物意指结构类似物，也称为化学类似物。类似物的结构类似于同名化合物，但是在某些方面有所不同。换言之，核苷类似物和核苷酸类似物在结构上分别类似于核苷和核苷酸，但是与之不同。对核苷类似物的核碱基和糖进行修饰。核苷酸类似物另外以对磷酸基团的修饰为特征。常见的修饰包括但不限于：核碱基的卤化和n-共轭(n-缀合，n-conjugation)；糖的卤化、甲基化、饱和、羟基化、脱羟基化和开环；以及在磷酸酯上形成酯和p-n键。熟知类别的核苷酸和核苷类似物是核苷酸类似物逆转录酶抑制剂(ntrti)和核苷类似物逆转录酶抑制剂(nrti)。具有抗逆转录酶活性的核苷酸类似物是ntrti。具有抗逆转录酶活性的核苷类似物是ntri。nrti和ntrti是对于逆转录病毒(如人免疫缺陷病毒(hiv)或乙型肝炎)有效的抗病毒药物，起到抑制逆转录酶的作用。nrti可以是腺苷、鸟苷、5-甲基尿苷、尿苷和胞苷的类似物。ntrti可以是一磷酸腺嘌呤、一磷酸鸟苷、一磷酸5-甲基尿苷、一磷酸尿苷和一磷酸胞苷的类似物。优选地，核苷类似物选自腺苷类似物和鸟苷类似物。优选地，核苷酸类似物选自一磷酸腺苷类似物和鸟苷类似物。任选地，腺苷类似物可以选自以下中的一种或多种：阿德福韦(adefovir)前药或替诺福韦前药。替诺福韦前药可以选自替诺福韦二吡呋酯(tenofovirdisoproxil)、替诺福韦艾拉酚胺(特拉芬，tenofoviralafenamide)、它们的盐或其组合。替诺福韦前药可以是药理学上可接受的盐的形式。盐的形成或抗衡离子的取代会对替诺福韦前药的药代动力学和药效学性质具有影响。替诺福韦前药盐可以是有机盐的形式，如乙酸盐、草酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、水杨酸盐、苯甲酸盐、乙醇酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、苹果酸盐、羟乙基磺酸盐(isethionate)、乳糖酸盐(lactobionate)、扁桃酸盐、对香豆酸盐、阿魏酸盐、芥子酸盐、咖啡酸盐、绿原酸盐、咖啡酰酒石酸盐(caftarate)、香豆酰酒石酸盐(coutarate)、对羟基苯甲酸盐、香草酸盐、丁香酸盐、4-(4-苯氧基苯甲酰基)苯甲酸盐、龙胆酸盐、原儿茶酸盐(protocatechuate)、没食子酸盐、硫辛酸盐、天冬氨酸盐、乳清酸盐等。备选地，替诺福韦前药盐可以是无机盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、硫化物、磷酸盐、硝酸盐、氨基磺酸盐等。优选的替诺福韦二吡呋酯盐是富马酸替诺福韦二吡呋酯(tdf)。优选的替诺福韦艾拉酚胺盐是富马酸替诺福韦艾拉酚胺(taf)。应当理解，如果多种活性物质具有相互适合的溶剂、稳定剂和油，则可以组合地使用多种活性物质，从而形成包含多种活性物质的活性物质的颗粒。备选地，这形成多种多样的活性物质的颗粒，其中每种颗粒包含单一活性物质。相互适合意指所选择的溶剂、稳定剂和油适用于本申请的方法，用于制备所考虑的所有活性物质。例如：·相互适合的溶剂意指第一溶剂将溶解所有的活性物质，第二溶剂将溶解所有的稳定剂，活性物质将在混合溶剂中是不溶的，并且油将溶解在混合溶剂中；·相互适合的稳定剂意指组合的稳定剂将防止任何活性物质的聚集；和·相互适合的油意指任何活性物质的颗粒都将不溶解在油中。有利地，一种或多种稳定剂是表面活性剂。优选的是一种或多种表面活性剂选自阴离子型表面活性剂类别。优选的阴离子型表面活性剂包括磺酸盐，更优选磺基琥珀酸盐。优选的阴离子型表面活性剂可以选自磺基琥珀酸二辛酯钠盐(dioctylsodiumsulfosuccinate)、磺基琥珀酸二辛酯钾盐、磺基琥珀酸二辛酯钙盐及其组合。磺基琥珀酸二辛酯钠盐(又名多库酯钠或aot)是特别合适的阴离子型表面活性剂。不希望受理论束缚，认为阴离子型表面活性剂与替诺福韦前药形成盐，或者替代替诺福韦前药盐的抗衡离子，所得的复合物在混合溶剂中是不溶的。这些复合物继续从溶液中沉淀出来，形成颗粒，所述颗粒被任何剩余的稳定剂稳定。另外的稳定剂可以选自阴离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂、两性离子型表面活性剂及其混合物。可以从其中选择表面活性剂的类别及其一些实例包括：·阴离子型表面活性剂，如烷基醚硫酸盐；烷基醚羧酸盐；烷基苯磺酸盐；烷基醚磷酸盐；二烷基磺基琥珀酸盐；肌氨酸盐；烷基磺酸盐；皂；烷基硫酸盐；烷基羧酸盐；烷基磷酸盐；石蜡磺酸盐；仲正烷烃磺酸盐；α-烯烃磺酸盐；羟乙基磺酸盐；藻酸盐；·阳离子型表面活性剂，如脂肪胺盐；脂肪二胺盐；季铵化合物；鏻表面活性剂；锍表面活性剂；sulfonxonium表面活性剂；·两性离子型表面活性剂，如氨基酸(如甘氨酸、甜菜碱、氨基丙酸)的n-烷基衍生物；咪唑啉表面活性剂；氧化胺；酰胺基甜菜碱(amidobetaine)；和·非离子型表面活性剂，如乙氧基化甘油三酯；脂肪醇乙氧基化物；烷基酚乙氧基化物；脂肪酸乙氧基化物；脂肪酰胺乙氧基化物；脂肪胺乙氧基化物；脱水山梨糖醇烷酸酯；乙基化脱水山梨糖醇烷酸酯；烷基乙氧基化物；pluronicstm；烷基聚葡糖苷；油脂剂乙氧基化物；烷基聚糖苷；蔗糖脂肪酸酯；丙二醇单月桂酸酯(lauroglycoltmfcc)；甘油单亚油酸酯(maisinetm35-1)；玉米油peg-6酯(labrafiltmm2125cs)和杏仁油peg-6酯(labrafiltmm1944cs)。另外的稳定剂可以选自聚氧乙烯(2)硬脂醚(brijtms2)、丙二醇单辛酸酯(ii型)(capryoltm90)、丙二醇单辛酸酯(i型)(capryoltmpgmc)、丙二醇二辛酰癸酸酯(labrafactmpg)、杏仁油peg-6酯(labrafiltmm1944cs)、玉米油peg-6酯(labrafiltmm2125cs)、辛酰己酰聚乙二醇-8甘油酯(labrasoltm)、丙二醇单月桂酸酯(ii型)(lauroglycoltm90)、丙二醇单月桂酸酯(i型)(lauroglycoltmfcc)、甘油单亚油酸酯(maisinetm35-1)、丙二醇单棕榈酰硬脂酸酯(monosteoltm)、甘油单油酸酯(pecoltm)、聚甘油-3二异硬脂酸酯(pluroltmdiisosteraque)、聚甘油-6二油酸酯(pluroltmolique)、脱水山梨糖醇油酸酯(spantm80)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单棕榈酸酯(tweentm40)、聚乙二醇脱水山梨糖醇单油酸酯(tweentm80)及其组合。应当理解，稳定剂和另外的稳定剂(如果使用的话)的选择可以对至少一种活性物质的粒子从油中释放的速率具有影响。另外，其可以对混合溶剂和/或油中的粒子的尺寸和/或稳定性具有影响。应当理解，稳定剂的组合和混合物也可以用于本发明的方法。添加到颗粒悬浮液中的油可以选自天然油、矿物油、合成油、硅油及其混合物。合适的油的沸点可以高于溶剂的沸点。合适的油可以不使活性物质溶解。油可以适合于口服剂量以及或者备选地适合于肠胃外施用。优选地，油是天然油。任选地，天然油选自花生油、大豆油、芝麻油、红花油、植物油、鳄梨油、米糠油、霍霍巴油、巴巴苏仁油(babassuoil)、棕榈油、椰子油、蓖麻油、棉籽油、橄榄油、亚麻籽油、菜籽油、金合欢油(acaciaoil)及其混合物。优选地，油是生物相容性的，因为这将使液体组合物能够用于生物学环境，例如用于药物中。油的选择应当使得至少一种活性物质的颗粒是不溶的(即，当分散在油中时它们保持为固体)。油的选择也可以对颗粒从油中释放的速率具有影响。预期油能够形成颗粒的储库(depot)。任选地，这种储库可以置于肌内环境中。进一步任选地，这种储库可以置于皮下环境中。油应当是如在说明书其他地方定义的液体。还预期可以将在环境条件下通常为固体的另外的材料与油混合，条件是所得混合物保持为液体。由于油和所添加的另外的固体材料的性质将决定它们可以混合的比率，因此技术人员将根据具体情况判断可以添加到油中的另外的固体材料的量。优选的是另外的材料将溶解到油中，形成均匀的溶液(尽管有掺杂剂材料的颗粒)。另外的材料可以是油溶性聚合物，其可以用于充当用于液体组合物的稳定剂或充当粘度调节剂。优选的是另外的材料是生物相容性的，因为这将使液体组合物能够用于生物学环境，例如用于药物中。油还可以含有另外的油溶性材料，例如：·维生素，如维生素a的酯(例如，视黄醇棕榈酸酯或乙酸酯)、维生素e的酯(例如，生育酚乙酸酯或生育酚亚油酸酯)、维生素b2、维生素d6、维生素f；·抗炎剂，如没药醇(也称为左旋环烯庚烯醇(levomenol))、甘草亭酸(glycerrethinicacid)、甘草亭酸硬脂基酯(stearylglycerrhetinate)；·羊毛脂及其衍生物；和·润肤剂，如全氢角鲨烯、全氟聚醚。用于本发明第一方面的方法的一种或多种稳定剂可以包括aot和任选的另一种稳定剂。另一种稳定剂可以是丙二醇单月桂酸酯(i型)(lauroglycoltmfcc)或甘油单亚油酸酯(maisinetm35-1)。另一种稳定剂可以是丙二醇单月桂酸酯(i型)(lauroglycoltmfcc)。油可以选自花生油、芝麻油、椰子油和大豆油。油可以是芝麻油。活性物质可以是tdf。悬浮在混合溶剂中的至少一种活性物质的稳定颗粒的悬浮液的固体含量按质量计可以包括约5-95％的活性物质，优选约30-90％的活性物质，并且最优选约60-85％的活性物质。稳定颗粒的其余质量包括稳定剂。如果使用多种稳定剂，则其余质量可以在每种稳定剂之间平均分配。备选地，可以使用较大量的稳定剂中的一种。稳定颗粒可以包括约80％的活性物质、10％的第一稳定剂和10％的第二稳定剂。在一个实施方案中，活性物质是tdf，第一稳定剂是aot，并且第二稳定剂是丙二醇单月桂酸酯(i型)(lauroglycoltmfcc)或甘油单亚油酸酯(maisinetm35-1)，任选地，稳定颗粒包括80％的tdf、10％的aot和10％的第二稳定剂。在另一个实施方案中，活性物质是tdf，第一稳定剂是aot，并且第二稳定剂是丙二醇单月桂酸酯(i型)(lauroglycoltmfcc)，任选地，稳定颗粒包括80％的tdf、10％的aot和10％的丙二醇单月桂酸酯(i型)(lauroglycoltmfcc)。稳定颗粒的悬浮液可以与油混合，以在移除混合溶剂后获得活性物质的预定负载量。负载量可以是至少1mg/ml，优选至少10mg/ml，更优选至少40mg/ml，并且最优选至少60mg/ml。备选地，负载量可以是约1-50mg/ml，约5-25mg/ml，约10-20mg/ml，或约15mg/ml。在一个实施方案中，活性物质是tdf。第二方面本发明的第二方面提供了一种液体组合物，所述液体组合物包含在油中的至少一种活性物质的稳定颗粒，所述活性物质选自核苷类似物和核苷酸类似物。本发明的第二方面还设想了已利用本发明的第一方面的方法制备的液体组合物，所述液体组合物包含在油中的至少一种活性物质的稳定颗粒。在所述液体组合物中，核苷类似物可以选自腺苷类似物和鸟苷类似物。任选地，核苷酸类似物选自磷酸腺苷类似物和磷酸鸟苷类似物。优选地，磷酸腺苷类似物可以选自以下中的一种或多种：阿德福韦前药或替诺福韦前药。替诺福韦前药可以选自替诺福韦二吡呋酯、替诺福韦艾拉酚胺、它们的盐或其组合。优选的替诺福韦二吡呋酯盐是富马酸替诺福韦二吡呋酯(tdf)。优选的替诺福韦艾拉酚胺盐是富马酸替诺福韦艾拉酚胺(taf)。油可以选自天然油、矿物油、合成油、硅油及其混合物，条件是油不溶解所述一种或多种替诺福韦前药。合适的天然油可以选自花生油、大豆油、芝麻油、红花油、植物油、鳄梨油、米糠油、霍霍巴油、巴巴苏仁油、棕榈油、椰子油、蓖麻油、棉籽油、橄榄油、亚麻籽油、菜籽油、金合欢油及其混合物。进一步优选的是，油是生物相容性的。至少一种活性物质的颗粒的z-平均直径通过技术人员已知的任何合适的方法来确定。优选的方法是动态光散射(dls)，其在添加油之前对混合溶剂体系中的颗粒进行。用于至少一种活性物质的颗粒的粒度测量的特别优选方法是采用zetasizernanos仪器(由malverninstrumentsuk制造)的dls。具体地，malverninstrumentsnanos使用红色(633nm)4mw氦-氖激光照射标准光学质量的紫外比色皿，该比色皿含有在混合溶剂体系中的颗粒的悬浮液。在本申请中引述的z-平均直径是利用该设备使用仪器制造商提供的标准方案获得的那些z-平均直径。颗粒可以包括按质量计约5-95％的活性物质，优选约30-90％的活性物质，并且最优选约60-85％的活性物质。至少一种活性物质的颗粒的其余部分由稳定剂组成。如上所解释的，优选的是通过改变第一溶液和第二溶液的相对浓度来改变活性物质的颗粒的组成(即，作为活性物质的颗粒的重量％)，使得混合的第一溶液和第二溶液的每一种的体积和至少一种活性物质的颗粒的总浓度在批次之间是一致的。换言之，为了制备具有不同负载量的活性物质的颗粒，改变第一溶液和第二溶液的浓度，同时保持每种溶液的总体积和活性物质加上稳定剂的总质量是恒定的。优选地，至少一种活性物质的颗粒在液体组合物中的浓度为至少1mg/ml，优选至少10mg/ml，更优选至少40mg/ml，并且最优选至少60mg/ml。液体组合物可以具有至少1mg/ml、优选至少10mg/ml、更优选至少40mg/ml并且最优选至少60mg/ml的活性物质负载量。备选地，负载量可以是约1-50mg/ml，约5-25mg/ml，约10-20mg/ml，或约15mg/ml。在实施方案中，活性物质是tdf。备选地，至少一种活性物质的颗粒在液体组合物中的浓度为约1mg/ml至约100mg/ml，优选约10mg/ml至约80mg/ml，并且最优选约20mg/ml至约60mg/ml。可以简单地通过在冷冻干燥过程之前改变添加的油的体积来精细地调节至少一种活性物质的颗粒在液体组合物中的浓度。高浓度的至少一种活性物质的颗粒导致浓稠的悬浮液，但是仍然可以使用注射器使其通过针头。因此，即使在高浓度的颗粒下，液体组合物也具有适合于注射剂的材料性质。如果选择生物相容性的油，则液体组合物也将具有生物相容性，因此适用于生物应用，如肌内注射。在液体组合物中至少一种活性物质的颗粒的低浓度可以用于更敏感的体外测定中。任何粘度的液体组合物(即，包括太浓稠而不能使用注射器通过针头并且因此不适合用作注射剂的那些液体组合物)能够适用于口服施用。口服施用可以作为液体糖浆。备选地，可以将液体组合物包装到胶囊中。任选地，胶囊可以是凝胶胶囊。任选地，如果包含不同活性物质的多种液体组合物使用相互适合的油，则可以将液体组合物混合，从而得到包含多种颗粒的液体组合物，多种颗粒中的每一种包含单一活性物质或活性物质的组合。根据本发明的第二方面的构成液体组合物的油可以选自花生油、芝麻油、椰子油和大豆油。油可以是芝麻油。如果使用多种稳定剂，则其余质量可以在每种稳定剂之间平均分配。备选地，可以使用较大量的稳定剂中的一种。稳定颗粒可以包括约80％的活性物质、10％的第一稳定剂和10％的第二稳定剂。在实施方案中，活性物质是tdf，并且油选自花生油、芝麻油、椰子油和大豆油，优选芝麻油。任选地，液体组合物中的活性物质负载量为至少1mg/ml，优选至少10mg/ml，更优选至少40mg/ml，并且最优选至少60mg/ml。备选地，活性物质负载量可以是约1-50mg/ml，约5-25mg/ml，约10-20mg/ml，或约15mg/ml。第三方面本发明的第三方面提供了作为液体剂型的药物(组合物)或兽用组合物，其包含根据本发明的第二方面的液体组合物。药物或兽用组合物任选地包含一种或多种另外的(药用)赋形剂。可能的赋形剂包括本领域技术人员已知的任何赋形剂，并且可以从以下类别中选取：填充剂、稀释剂、调味剂、着色剂、防腐剂、甜味剂和媒介物。将理解，可以使用本领域熟知的常规药物赋形剂，通过常规程序获得本发明的不同药物或兽用组合物。药物或兽用组合物还可以包含另外的药理活性化合物。药物或兽用组合物可以是包含另外的药理活性化合物的组合产品。另外的药理活性化合物包括另外的核苷类似物和核苷酸类似物，它们可以适合于或者可以不适合于配制成悬浮在油中的活性物质的颗粒。这样的另外的药理活性化合物可以溶解在油中或作为悬浮在油相中的另外的颗粒存在。可以通过本发明的方法或任何其他合适的方法(例如通过喷雾干燥或乳液途径)来制备另外的颗粒。优选地，另外的药理活性化合物与活性物质具有协同作用。特别优选的药物或兽用组合物是这样的一种组合物，其适合于肠胃外施用，例如通过肌内或皮下注射。更优选地，这样的注射将在注射部位处形成活性物质的储库，其将逐渐地将活性物质释放到注射部位周围的区域中。活性物质的逐渐释放可以在预定时间期内。优选地，活性物质的释放在注射部位周围的区域中维持活性物质的设定浓度范围。任选地，注射部位是肌内或皮下部位，并且注射部位周围的区域是生物组织。待维持的设定浓度范围可以是治疗有效浓度范围。可以认为注射部位周围的区域延伸到所讨论的整个生物系统，或者甚至延伸到整个生物体。药物或兽用组合物可以提供在合适的无菌容器中。优选地，容器是密封的小瓶。更优选地，容器是预填充的注射器。备选地，药物或兽用组合物的形式适合于口服施用。用于口服施用药物或兽用组合物的合适形式可以是填充胶囊或糖浆。口服施用的药物或兽用组合物的优选形式可以是凝胶胶囊。口服施用的药物或兽用组合物的备选形式可以是糖浆。口服服用的活性物质的生物利用度通常通过同时摄入脂肪(例如，肠中的富马酸替诺福韦二吡呋酯的吸收)而增强。将活性物质配制成分散在油中的颗粒增强其口服生物利用度。这种增强不需要患者采取任何进一步的行动(即，将组合物与脂肪餐一起施用)，从而改善了患者依从性的问题。这种提高的口服生物利用度也可以导致较低的给药方案，从而减少不良副作用并且降低长期毒性。第四方面本发明的第四方面提供了根据本发明的第二方面的液体组合物，或根据本发明的第四方面的药物或兽用组合物，其用作药物。第五方面本发明的第五方面涉及根据本发明的第二方面的液体组合物，或根据本发明的第四方面的药物或兽用组合物，其用于治疗和/或预防病毒感染。应当理解，对“预防(preventing)”或“预防(prevention)”的提及涉及预防性治疗，并且包括预防或延迟在人中发展的病状、病症或病况的临床症状的出现，该人可能患有或易患所述病状、病症或病况但是尚未经历或展现所述病状、病症或病况的临床或亚临床症状。应当理解，对“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”病状、病症或病况的提及包括：(1)抑制所述病状、病症或病况，即阻止、减少或延迟疾病或其复发的发展(在维持治疗的情况下)或其至少一种临床或亚临床症状，或(2)消除或缓解疾病，即导致所述病状、病症或病况或其至少一种临床或亚临床症状消退。任选地，病毒感染可以由人免疫缺陷病毒(hiv)引起。第六方面本发明的第六方面是一种治疗和/或预防感染的方法，所述方法包括向患有病毒感染或处于病毒感染风险的患者施用治疗有效量的根据本发明的第二方面的液体组合物或者根据本发明的第四方面的药物或兽用组合物。“治疗有效量”意指当施用至哺乳动物用于治疗疾病时，足以实现对于疾病的这样的治疗的化合物的量。“治疗有效量”将根据化合物、疾病及其严重程度以及待治疗的患者的年龄、体重等而变化。优选地，病毒感染由hiv引起。施用治疗有效量的液体组合物或者药物或兽用组合物可以导致形成悬浮在油中的至少一种活性物质的颗粒的储库。活性物质可以逐渐地从储库中释放。优选的是施用治疗有效量的液体组合物或者药物或兽用组合物导致治疗有效浓度的活性物质保持至少24小时、优选至少36小时、优选至少48小时、更优选至少72小时并且最优选96小时。备选地，将活性物质的治疗有效浓度保持约12小时至约96小时，优选约24小时至约96小时，更优选约48小时至约96小时，并且最优选约72小时至约96小时。换言之，通过结合到上述液体组合物中，活性物质的药代动力学特性分布得到显著增强。图1示出了动物模型中活性物质(如tdf)的预期药代动力学分布曲线。在上图中，活性物质的血浆浓度最初快速增加，然后逐渐降低，在很长时间期内保持治疗有效浓度。在下图中，活性物质的浓度最初增加，但是很快达到稳态，因为活性物质从油中的释放速率近似于通过代谢和排泄从血浆中移除活性物质的速率。因此，可以在长时间期内维持设定浓度，该设定浓度可以是治疗有效浓度。应当理解，活性物质的药代动力学可以落在这些情形之间，或者甚至可以随时间从一种情形变化到另一种情形。许多因素决定了活性物质释放的主要方式，如配方、储库释放速率、代谢和清除。另外，这些因素可能是互斥的，但是它们之间也可以具有一定程度的相互影响。认为可以通过改变活性物质的颗粒的初始浓度和尺寸、稳定剂的类型和数量、油的类型以及油中包含的任何另外的材料的类型和数量来控制活性物质的颗粒的释放速率。例如，活性物质的颗粒将更慢地扩散通过更粘稠的油，从而减慢了活性物质的释放速率。至少一种活性物质的逐渐释放将导致治疗有效量的液体组合物或者药物或兽用组合物的施用以降低的频率进行，从而改善患者的依从性和所述方法的效力。备选地，与活性物质的标准制剂的施用相比，治疗有效量的液体组合物或者药物或兽用组合物的施用可以导致活性物质的口服生物利用度提高。这种提高的口服生物利用度可以导致减少用药，从而改善不良副作用和长期毒性。第七方面本发明的第七方面涉及根据本发明的第二方面的液体组合物或者根据本发明的第四方面的药物或兽用组合物，其用于治疗癌症。第八方面本发明的第八方面是一种治疗癌症的方法，所述方法包括向患有癌症的患者施用治疗有效量的根据本发明的第二方面的液体组合物或者根据本发明的第四方面的药物或兽用组合物。施用治疗有效量的液体组合物或者药物或兽用组合物可以导致形成悬浮在油中的至少一种活性物质的颗粒的储库。活性物质可以逐渐地从储库中释放。优选的是施用治疗有效量的液体组合物或者药物或兽用组合物导致治疗有效浓度的活性物质保持至少24小时、优选至少36小时、优选至少48小时、更优选至少72小时并且最优选96小时。备选地，将活性物质的治疗有效浓度保持约12小时至约96小时，优选约24小时至约96小时，更优选约48小时至约96小时，并且最优选约72小时至约96小时。至少一种活性物质的逐渐释放将导致治疗有效量的液体组合物或者药物或兽用组合物的施用以降低的频率进行，从而改善患者的依从性和所述方法的效力。备选地，与活性物质的标准制剂的施用相比，治疗有效量的液体组合物或者药物或兽用组合物的施用可以导致活性物质的口服生物利用度提高。这种提高的口服生物利用度可以导致给药减少，从而改善不良副作用和长期毒性。附图说明图1示出了预期药代动力学分布曲线，其显示出在动物模型中从储库中缓慢释放活性物质的效果。上图示出了其中活性物质的浓度达到峰值然后逐渐下降的情形，而下图示出了其中活性物质的浓度从施用时起就保持水平的情形。图2是如通过dls测量确定的，在二氯甲烷中具有60、70和80重量％的tdf负载量的实施例2的tdf颗粒的z-平均流体动力学直径的分布曲线图。图3是在超声处理之前和之后，具有60重量％的tdf负载量的实施例2的tdf颗粒的z-平均流体动力学直径的分布曲线图。图4a和4b示出了在单个口服剂量后，对于在多种油中包含tdf的稳定颗粒的多种液体组合物所测得的药代动力学分布曲线。为了比较，每个曲线图还示出了对于未配制的对照所测得的药代动力学分布曲线。图5示出了在42小时内的多个口服剂量后，对于在芝麻油中包含tdf稳定颗粒的液体组合物所测得的稳态药代动力学分布曲线。为了比较，该曲线图还示出了对于未配制的对照所测得的稳态药代动力学分布曲线。实施例粒度测量在掺杂剂材料沉淀之后但在添加油之前，测量掺杂剂材料的颗粒的流体动力学直径和多分散指数。使用dls，具体地zetasizernanos(malverninstruments，malvern，uk)进行分析，参数如下：·将颗粒类型设置为折射率为1.330并且吸收率(absorption)为0.010的纳米颗粒·分散剂是粘度为0.4130并且折射率为1.424的二氯甲烷·样品温度为25℃·使用路径长度为10mm的石英比色皿·测量角度为172°·每个样品进行3次测量·自动选择每次测量的运行次数。冷冻干燥通过冷冻干燥法移除溶剂。使用液氮将待干燥的混合物迅速冷冻，并且连接至virtisbenchtopk冷冻干燥器。冷凝器设定为-100℃，压力保持≤20微巴，并且样品干燥48小时。实施例涉及形成包含富马酸替诺福韦二吡呋酯(tdf)的液体组合物。实施例1-溶剂和稳定剂选择tdf是替诺福韦的水溶性前药，并且已知在甲醇中是可溶的，并且对于本发明的目的而言，发现tdf在这种溶剂中的溶解度高达80mg/ml。因此，甲醇用作第一溶剂。tdf在用作第二溶剂的二氯甲烷中是不溶的。然后测试了一系列稳定剂在二氯甲烷、二氯甲烷和甲醇的混合物以及各种可能的油中的溶解性。在所测试的稳定剂中，发现有五种是合适的，并且在下表1中列出了它们的分子量和hlb值。表1.稳定剂分子量(da)hlb值aot444.5610.5lauroglycoltmfcc258.405maisinetm35-1354.524labrafiltmm2125cs可变的4labrafiltmm1944cs可变的4当单独使用或以二元(按质量计50∶50)组合使用时，如下表2所示，研究了这些稳定剂防止tdf颗粒聚集的能力。表2.制剂id稳定剂a稳定剂bsc1aot-sc2aotlauroglycoltmfccsc3aotlabrafiltmm2125cssc4aotmaisinetm35-1sc5aotlabrafiltmm1944cs实施例2-tdf颗粒的合成根据以上结果来选择组分：sc4用作稳定剂，第一溶剂为甲醇，并且第二溶剂为二氯甲烷。用来合成tdf颗粒的程序为如下。特定浓度的tdf和sc4的储备溶液(参见下表3)通过搅拌分别在甲醇和二氯甲烷中形成目标浓度所需要质量的tdf和稳定剂而制得。搅拌在室温下使用磁力搅拌棒和磁热板而实现。表3.将800μl的含有稳定剂的二氯甲烷溶液移液到4ml体积的玻璃小瓶中。将200μl的含有tdf的甲醇溶液快速移液到同一小瓶中，然后将其密封并且短暂摇动。立即形成白色、混浊的悬浮液。这些溶液的4∶1比率保持恒定，因为发现其对于tdf颗粒的形成是有效的。通过在混合之前改变甲醇和二氯甲烷溶液的浓度来改变颗粒的tdf负载量。应当注意，这种方法使得可以简单地通过增大所添加的体积来制备不同体积的tdf颗粒悬浮液，只要保持二氯甲烷与甲醇的4∶1比率，这使得可以精细控制分散在液体组合物的油中的tdf颗粒的浓度。测定tdf纳米颗粒的流体动力学直径和多分散指数(参见下表4和图2)，并且发现tdf颗粒的直径随tdf负载量而增大。不希望受理论束缚，假定这是由于具有较高tdf负载量的样品具有减少量的稳定剂，从而降低了稳定剂防止沉淀时的颗粒生长的能力。表4.tdf负载量(重量％)z-平均流体动力学直径(nm)多分散指数6011250.1727012360.3958015540.114对tdf颗粒进行超声处理，并且重新测量其流体动力学直径和多分散指数以确定tdf颗粒的稳定性。超声处理对于tdf颗粒的尺寸没有影响(参见图3)，表明tdf颗粒在4∶1的二氯甲烷∶甲醇溶剂体系中是稳定的。实施例3-包含tdf颗粒的液体组合物的合成使用一系列生物相容性天然油来形成液体组合物。选择这些油是因为tdf颗粒在它们中是不溶的，并且这些油可以溶解到混合溶剂体系中。使用的油是花生油、大豆油、芝麻油和红花油。用于合成包含tdf颗粒的液体组合物的程序为如下。经由移液管将油添加到悬浮液中，并且通过涡旋来混合以与混合溶剂体系形成均匀溶液。然后如上所述，通过冻干干燥法来干燥该混合物。通过此方法移除甲醇和二氯甲烷溶剂，使得tdf颗粒悬浮在油中。最初将油相冷冻，但是在室温下静置大约5分钟后恢复为液体形式。通过在冷冻干燥之前改变悬浮液和油的体积，容易地改变油中的tdf颗粒的浓度。利用这些tdf颗粒获得高达60mg/ml的高浓度，形成这样的悬浮液，该悬浮液是浓稠的，但是尽管该悬浮液具有高粘度，其仍然可通过25g针头，证实该液体组合物至少满足用于可注射组合物的物理要求。表5.通过简单地使用更多的tdf悬浮液和油，合成了更大量的液体组合物，另外，通过用更多的油进行稀释而以容易的方式制备较低的浓度(参见上表5)。这些低浓度可以用于更敏感的应用，如体外测定。实施例4-包含tdf颗粒的液体组合物的范围使用实施例2和3中概述的方法来制备一系列具有以上概述的全部范围的稳定剂和油的tdf颗粒的制剂。所有这些都成功的事实突显了本发明的方法的灵活性。使用以上提供的5种稳定剂、4种油和4种tdf负载量，成功地合成了80种制剂(参见下表6)。表6.实施例5-另外的稳定剂按照实施例2中描述的程序，使用以下稳定剂组合来形成tdf颗粒(参见下表7)。表7.稳定剂a稳定剂b成功的沉淀aotbrijtms2是aotcapryoltm90是aotcapryoltmpgmc是aotlabrafactmpg是aotlabrafiltmm1944cs是aotlabrafiltmm2125cs是aotlabrasoltm是aotlauroglycoltm90是aotlauroglycoltmfcc是aotmaisinetm35-1是aotmonosteoltm是aotpecoltm是aotpluroltmdiisosteraque是aotpluroltmolique是aotspantm80是aottweentm40是aottweentm80是发现所有的稳定剂在与aot组合使用时均是有效的。实施例6-来自单个剂量的体内口服生物利用度将成年雄性wistar大鼠(～300g)分为9组(每组3只大鼠，8种tdf颗粒分散体和在金合欢(acacia)媒介物中10重量％tdf的口服对照)。在适应(7天)后，大鼠经由口服管饲(15mg/kg的tdf，1ml/kg)接受单个剂量的tdf颗粒分散体或未配制的tdf对照。在整个过程中随意提供食物和水。用药后在24小时内从尾静脉收集血样(250μl)。在这个实施例中使用的制剂包含以下各项的悬浮液：80重量％的tdf、10重量％的aot以及10重量％的lauroglycolfcc或maisine35-1，浓度为20mg总固体/毫升。然后将1ml的各个悬浮液与1.067ml的油混合，然后冷冻干燥，得到在油中的18.75mg/ml的颗粒浓度，相当于15mg/ml的tdf。在取样之前测定每只大鼠的重量，并且在整个实验中对其进行监测以评估健康状况。在结束时，使用上升的co2梯度然后是颈脱位法来处死大鼠。对于血浆中的tdf使用验证的测定，在tsqendura(thermoscientific)上进行生物分析。经由系列稀释(范围为1.9至500ng/ml)在大鼠血浆中制备tdf的校准曲线。使用固相萃取进行萃取。通过三次独立的标准曲线制备来评价线性。最大允许标准偏差设置为规定值的15％，不包括其中偏差设置为不超过20％的lloq。通过制备三种浓度(在标准曲线10、200和400ng/ml的范围内)来评价测定间和测定内的准确性和精确性，每个制备一式三份。平均值的可接受偏差定义为规定浓度的15％(较低浓度除外，其中偏差<20％)。然后使用prism(v7.0a)来绘制tdf的血浆浓度。使用pksolver插件计算药代动力学参数(cmax、tmax和auc)，并且示于表8(每个测量的标准偏差显示在括号中)以及图4a和4b(每个测量的标准偏差显示为误差条)中。表8从这些结果可以看出，8种tdf颗粒分散体的单个剂量筛选的体内数据证实在24小时时间期内其血浆暴露与对照组所观察到的类似。实施例7-来自多个剂量的体内口服生物利用度选择单一的主要候选物，并且进行多个剂量研究以建立稳态pk。在适应(7天)后，大鼠在42小时内每6小时接受一个剂量(15mg/kg，1ml/kg)。在最后一个剂量后在24小时内从尾静脉收集血样(250μl)。如实施例6中那样监测每只大鼠的健康状况。处死、数据收集和数据分析的方法也与实施例6相同。结果显示在表9(每个测量的标准偏差显示在括号中)和图5(每个测量的标准偏差显示为误差条)中。表9在稳态下，117芝麻(油)的pk表现出显著更高的血浆暴露(cmax2.4倍增加(p＝0.004)，cmin4.1倍增加(p＝0.024)并且auc2.4倍增加(p＝0.026))。这些数据突显了通过使用包含在油中的至少一种活性物质的稳定颗粒的液体组合物对于剂量减少和长效治疗效果的潜力。特别地，它们突显了通过使用包含在油中的tdf的稳定颗粒的液体组合物对于剂量减少和长效治疗效果的潜力。当前第1页1 2 3