本发明属于生物制药领域，具体涉及一种抑制结直肠癌转移的组合物及其应用。
背景技术：
结直肠癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，近年以来中国发展速度加快，人民生活水平提高，饮食结构改变，结直肠癌在中国近十年的发病率和死亡率都呈现增高趋势。约有一半的结直肠癌患者会发生肿瘤转移，转移患者具有不良预后和较低的5年生存率特点。目前抗肿瘤的化疗药物主要是作用于肿瘤细胞生长繁殖的不同环节上，抑制或杀死肿瘤细胞。但其作用无特异性，可同时杀伤正常组织细胞。使用化疗药物可导致的大量副反应，如脱发、骨髓抑制、胃肠道反应、肝肾损伤等。目前亟待解决的是研究和发明出有效、低毒的减缓结直肠癌进展治疗方法。
肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤微环境内最常见的免疫细胞，其可分为两个部分，一部分为肿瘤固有的巨噬细胞，而另一部分来源于通过识别肿瘤细胞或肿瘤微环境所释放的化学信号募集到肿瘤部位的循环单核细胞，两者在肿瘤中共存。肿瘤相关巨噬细胞在生理和非病理条件下受到不同的信号刺激，其细胞功能被编辑成不同的类型，可促肿瘤亦可抗肿瘤。已有研究表明肿瘤相关巨噬细胞可改变细胞外基质的组成、结构和弹性和相关因子的功能，影响肿瘤细胞的迁移。
乙酰胆碱由机体多种细胞产生的一种神经递质，通过自分泌或旁分泌效应与效应细胞表面的乙酰胆碱受体特异性结合，启动下游信号通路，进而调控效应的发生。α7nchr是烟碱样乙酰胆碱受体的一种亚型。α7nchr对结直肠癌迁移的影响已有报道，该研究通过病理资料和体外实验数据共同表明肿瘤相关巨噬细胞的α7nchr表达可负向调控结直肠癌细胞的转移。巨噬细胞的α7nchr可为预防和治疗转移性结直肠癌的新靶点。目前国内外尚未有5-氟尿嘧啶和胞嘧啶阿糖胞苷组合物通过增加巨噬细胞上α7nchr的表达的机制，应用于减缓结直肠癌细胞转移的报道。
技术实现要素：
为了解决背景技术中的问题，本发明提供了一种抑制结直肠癌转移的组合物及其应用，通过增加巨噬细胞上α7nchr的表达，应用于减缓结直肠癌细胞转移。
本发明采用的技术方案如下：
一、一种抑制结直肠癌转移的组合物
所述组合物主要由5-氟尿嘧啶和胞嘧啶阿糖胞苷组成。
所述5-氟尿嘧啶和胞嘧啶阿糖胞苷的摩尔比为1:3～1:5，优选为1:4。
二、上述抑制结直肠癌转移的组合物的应用
所述组合物用于制备抗癌药物和治疗癌症的其他应用。
所述抗癌药物为注射剂、口服液、片剂或胶囊剂。
所述抗癌药物在抑制癌转移的应用和用途。
所述抗癌药物通过提高巨噬细胞上α7nchr的表达量，以增强巨噬细胞抗癌细胞能力。
所述癌为结直肠癌。
所述抗癌药物的服用量可根据剂型特点、患者年龄和生理状态调整。
本发明的有益效果：
本发明组合物与现有的抗肿瘤药物在作用机理上有显著差异。
1)本发明组合物并非直接作用于肿瘤细胞，抑制增殖，而是间接通过提高巨噬细胞上α7nchr表达量，增强巨噬细胞抗结直肠肿瘤细胞能力，从而发挥抑制结直肠肿瘤转移的作用。
2)本发明组合物中抗肿瘤药物使用量比其目前使用剂量少，降低了抗肿瘤药物对结直肠肿瘤患者的副作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。
实施例1
5-氟尿嘧啶注射剂，胞嘧啶阿糖胞苷注射剂，优选摩尔比为1:4。
实施例2
5-氟尿嘧啶口服液，胞嘧啶阿糖胞苷口服液，优选摩尔比为1:4。
实施例3
5-氟尿嘧啶片剂，胞嘧啶阿糖胞苷片剂，优选摩尔比为1:4。
实施例4
5-氟尿嘧啶胶囊，胞嘧啶阿糖胞苷胶囊，优选摩尔比为1:4。
实施例5
组合物对巨噬细胞α7nchr蛋白质水平上表达影响
1、实验材料
受试试剂1：无菌双蒸水
受试试剂2：5-氟尿嘧啶5.1nm
受试试剂3：胞嘧啶阿糖胞苷21.7nm
受试试剂4：5-氟尿嘧啶5.1nm，胞嘧啶阿糖胞苷21.7nm
2、实验方案及结果
取对数生长期的鼠巨噬细胞株raw264.7，用含10％fbs的dmem培养液调整细胞浓度至2.4×104个/ml，接种于12孔细胞培养板中，1ml/孔，置于含有5％co2的37℃恒温培养箱中培养24h，然后在各孔中加入相应浓度的受试试剂。加试剂后继续培养24小时后，在冰上弃去上清，冰pbs洗两遍，每遍5分钟，弃去最后一遍pbs后，加入100μl/孔蛋白裂解液，收取相应孔中蛋白，100℃金属浴煮5分钟。蛋白变性后进行westernblot实验，电泳110v1.5小时，转膜300ma70分钟，pvdf膜用5％脱脂奶粉封闭2小时后，tbst洗三遍，每遍10分钟，4度孵育α7nchr蛋白对应的一抗过夜，tbst洗三遍，每遍10分钟，室温孵育一抗对应的二抗2小时，tbst洗三遍，每遍10分钟，ecl显影。结果见表1
表1本发明组合物对巨噬细胞α7nchr蛋白质水平上表达的影响
由上表数据可知，受试试剂4即本发明组合物对巨噬细胞α7nchr蛋白质表达水平明显优于其他3种受试试剂，证实了本发明能提高巨噬细胞上α7nchr表达量。
实施例6：
组合物对结直肠癌细胞株转移能力的影响
1、实验材料
受试试剂1：无菌双蒸水
受试试剂2：5-氟尿嘧啶5.1nm
受试试剂3：胞嘧啶阿糖胞苷21.7nm
受试试剂4：5-氟尿嘧啶5.1nm，胞嘧啶阿糖胞苷21.7nm
2、实验方案
取对数生长期的鼠巨噬细胞株raw264.7，用含10％fbs的dmem培养液调整细胞浓度至1.2×104个/ml，接种于24孔细胞培养板中，500μl/孔，置于含有5％co2的37℃恒温培养箱中培养24h，然后在各孔中加入相应浓度的受试试剂。加试剂后继续培养24小时后，吸弃培养液，在各孔中加入600μl的20％fbs的dmem培养液，放入transwell小室，小室上面加入1×105个ct-26细胞，继续培养48小时，吸弃transwell小室培养液，将小室置于冰pbs中洗涤2遍，用棉签擦拭小室上层细胞，冰pbs再洗两遍，置于冰甲醇固定5-10分钟，冰pbs洗涤两遍后，结晶紫染色过夜，用水洗涤干净小室烘箱烘干后，显微镜放大100倍拍照。结果见表2。
表2本发明组合物对结直肠癌细胞株转移能力的影响
由上表可知，受试试剂4即本发明组合物的加入大大降低了小鼠结肠癌细胞(ct-26细胞)的迁移，为四种受试试剂中抑制效果最佳的，证实了本发明组合物能有效抑制结直肠肿瘤转移。
此外，如下表所示，采用本发明组合物制备抗肿瘤药物时，5-氟尿嘧啶和胞嘧啶阿糖胞苷的使用量分别为5.1nm和21.7nm；若单独使用5-氟尿嘧啶和胞嘧啶阿糖胞苷制备抗肿瘤药物，5-氟尿嘧啶的使用量为2.5um，胞嘧啶阿糖胞苷的使用量为0.066-0.102um。本发明组合物使用量远远少于目前使用剂量，降低了抗肿瘤药物对结直肠肿瘤患者的副作用。
表3抗肿瘤药物在组合物中使用量和其目前单独使用量的对比表