本发明涉及一种护肝解酒组合物及其制备方法，具体涉及一种猪肝提取物护肝解酒组合物及其制备方法，属于生物技术及功能保健技术领域。
背景技术：
酒，在我国有着悠久的历史。因其酒味醇香，品种繁多一直受到人们的喜爱。同时，健康合理的饮酒可用于祛寒壮神，和血通脉以及温养脾胃等。但是，不健康的饮酒方式会造成体内乙醇脱氢酶活性降低，进而导致身体一定程度的损伤。每年因饮酒造成肝脏不同程度损害的案例不计其数，更甚者出现过度饮酒而死亡的案例。目前，市场上已存在各式各样的解酒产品，但其大多是化学合成的物质，只有清醒和缓解头痛头晕等作用，并不能达到解酒护肝的效果，甚至会在解酒的同时对肝和肾脏带来一定的代谢负担和损伤。少数的解酒产品是通过激活乙醇脱氢酶促进人体乙醇代谢达到解酒护肝效果。由此可见，目前大部分的解酒产品并不能真正起到解酒护肝的作用。开发有效的解酒产品是众人所期待的。
乙醇脱氢酶（adh）广泛存在于人、动物的肝脏中以及植物和微生物中。它是一种广泛专一性的含锌金属酶，在生物体内起到十分关键的生理作用。乙醇脱氢酶在人和哺乳动物体内参与了乙醇代谢过程。乙醇被adh氧化成乙醛，乙醛被乙醛脱氢酶（aldh）氧化成乙酸，乙酸经下一步的转化成为乙酰辅酶a，最后进入三羧酸循环，完成乙醇代谢。上述酶促反应使人体乙醇浓度降低，可减少乙醇对人体的毒害。如今有效的解酒产品主要是通过提取物激活乙醇脱氢酶，促进乙醇代谢，降低乙醇浓度，达到解酒护肝的目的。
猪是最常见的家畜之一，提供了全球最大的肉类食品资源。而且，猪的某些遗传以及生理特性与人类相似，这让猪成为研究医药产业以及人类疾病的重要资源。猪肝是猪解毒的重要场所。猪肝约占猪体重的1.4%，由国家统计局发布数据显示，2017年我国猪肉产量5340万吨，2017年猪肝产量约为74.79万吨。猪肝含有丰富的营养成分，具有养肝明目、补血等功效。猪肝除了被食用外，大部分都会被舍弃丢掉，这无疑是一种浪费。到目前为止，国内对解酒活性的相关研究材料基本上是植物和水产品，并未见猪肝解酒产品的相关报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种以猪肝为原料的天然护肝护肝解酒组合物。
本发明的技术方案为：一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物15-30、猪肝酶解产物70-200。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c中的任一种或任两种或任意多种的组合；所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda；所述猪肝酶解产物b的平均分子量为3kda-8kda；所述猪肝酶解产物c的平均分子量为8kda-30kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物20-50、猪肝酶解产物a20-70。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物20-50、猪肝酶解产物a20-70、猪肝酶解产物b22-48。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物20-50、猪肝酶解产物a20-70、猪肝酶解产物b22-48、猪肝酶解产物c15-30。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c中的任一种或任两种或任意多种的组合；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:1-1:7（w/v），于40-100℃恒温水浴中浸提6-15小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:1-1:5（w/v），煮沸提取10-60分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:1-1:7（w/v），调节浆的ph值为3-7.5，添加1000-3000u/g原料质量的蛋白酶，所述的蛋白酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、动物蛋白水解复合酶或碱性蛋白酶中的一种或几种的组合；s2.在40-65℃下酶解2-8小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为8-30%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:1-1:7（w/v），调节浆的ph值为3-7.5，添加1000-3000u/g原料质量的蛋白酶，所述的蛋白酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、动物蛋白水解复合酶或碱性蛋白酶中的一种或几种的组合；s2.在40-65℃下酶解2-8小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为8-30%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda、8kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda、3-8kda和>8kda三个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液，3-8kda的组分为猪肝酶解产物b酶解液，将>8kda的组分再过30kda的超滤膜，滤过的组分为猪肝酶解产物c酶解液；s4.将s3得到的三个分级组分通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，分别得到猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c。
本发明中，所述水解度（dh）的测定可通过任一现有技术实现，优选的，所述水解度的测定使用现有技术的甲醛滴定法。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
本发明采用的猪肝，在我国产量巨大，来源广泛，可实现猪肝的高值化利用；猪肝营养丰富，具有护肝、安神、清热解毒等作用。本发明护肝解酒组合物容易被身体吸收，无毒副作用，安全性高；且使用方便，可以做成多种形式的产品。
基于进入人体的酒精80%是通过乙醇脱氢酶(adh)途径降解，乙醇经肝细胞中的adh和微粒体乙醇氧化酶系统(meos)转变为乙醛，再经乙醛脱氢酶（aldh）催化成乙酸，最后形成二氧化碳和水排出体外。
本发明中的猪肝提取物护肝解酒组合物由猪肝浸提物和猪肝酶解物组成，猪肝浸提物中含有丰富的小分子肽、游离氨基酸（如亮氨酸、异亮氨酸等）和维生素，其独特氨基酸组成，服用后快速吸收进入人体，提高血液中丙氨酸、亮氨酸的浓度，稳定乙醇代谢所需nad+供应而实现促进可以激活肝脏adh活性，将肝细胞细胞质中的乙醇经肝微粒体乙醇氧化酶系统((microsomeethanoloxidationsystem，meos)氧化为乙醛，再在乙醛脱氢酶aldh作用下转化为乙酸而减少乙醇对人体的伤害；猪肝酶解产物a（平均分子量小于3kda），含有大量的低分子量活性肽和支链氨基酸，通过抑制cyp2e1的活性，下调过表达的cyp2e1蛋白和mrna水平起到改善酒精性肝损伤作用。猪肝酶解产物b（平均分子量3kda-8kda），含有丰富的生物活性肽，活性肽独特的氨基酸序列特有活性位点可与adh酶接触而产生对adh激活作用，另一方面猪肝酶解过程中释放大量的活性酶可以及时清除乙醇代谢产生的自由基，对乙醇代谢产生的大量氧自由基具有平衡作用，从根本上抑制自由基对机体造成的损伤。猪肝酶解产物c为大分子肽，在胃肠道途径中，通过减缓对乙醇的吸收速度和增加其代谢速率，延缓胃排空，延长醉酒时间，从而降低血液中的乙醇浓度，提高解酒速度。
本申请发明人通过大量创造性试验，提供了一种以猪肝为原料制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物获得的猪肝提取物护肝解酒组合物，本发明的组合物中含有丰富的小分子肽和游离氨基，被人体摄入后，可以使氨基和含碳物从肌肉转化到肝脏，为nad+提供足够的补充，并有效增强体内的三羧酸（tca）循环，对乙醇的代谢具有明显的促进作用。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
实施例1
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物22、猪肝酶解产物130。
进一步的，所述猪肝酶解产物为猪肝酶解产物a。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:4（w/v），于65℃恒温水浴中浸提12小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:3（w/v），煮沸提取40分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:4（w/v），调节浆的ph值为7.0，添加2000u/g原料质量的中性蛋白酶和动物蛋白水解复合酶组合(1:1，w/w)；s2.在55℃下酶解5小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为20%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda和>3kda两个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液；s4.将s3得到的酶解产物a酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解产物a。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例2
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物22、猪肝酶解产物130。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物35、猪肝酶解产物a58。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:4（w/v），于65℃恒温水浴中浸提12小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:3（w/v），煮沸提取40分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:3（w/v），调节浆的ph值为3.8，添加2000u/g原料质量的胃蛋白酶；s2.在55℃下酶解5小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为20%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:4（w/v），调节浆的ph值为6.5，添加2000u/g原料质量的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组合（1:1，w/w）；s2.在55℃下酶解5小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为20%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda和>3kda三个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液；s4.将s3得到的猪肝酶解产物a酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，分别得到猪肝酶解产物a。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例3
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物22、猪肝酶解产物130。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda；所述猪肝酶解产物b的平均分子量为3kda-8kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物30、猪肝酶解产物a55、猪肝酶解产物b29。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:4（w/v），于65℃恒温水浴中浸提12小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:3（w/v），煮沸提取40分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:3（w/v），调节浆的ph值为4.0，添加2000u/g原料质量的胃蛋白酶；s2.在40℃下酶解5小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为20%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:4（w/v），调节浆的ph值为4.0，添加2000u/g原料质量的胃蛋白酶；s2.在40℃下酶解5小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为20%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda、8kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda、3-8kda和>8kda三个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液，3-8kda的组分为猪肝酶解产物b酶解液；s4.将s3得到的猪肝酶解产物a和b分别通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，分别得到猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例4
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物22、猪肝酶解产物130。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda；所述猪肝酶解产物b的平均分子量为3kda-8kda；所述猪肝酶解产物c的平均分子量为8kda-30kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物28、猪肝酶解产物a45、猪肝酶解产物b26、猪肝酶解产物c18。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:4（w/v），于65℃恒温水浴中浸提12小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:3（w/v），煮沸提取40分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:3（w/v），调节浆的ph值为6.5，添加2000u/g原料质量的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶（1:1，w/w）；s2.在50℃下酶解5小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为20%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:4（w/v），调节浆的ph值为6.5，添加2000u/g原料质量的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶（1:1，w/w）；s2.在50℃下酶解5小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为20%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda、8kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda、3-8kda和>8kda三个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液，3-8kda的组分为猪肝酶解产物b酶解液，将>8kda的组分再过30kda的超滤膜，滤过的组分为猪肝酶解产物c酶解液；s4.将s3得到的三个分级组分通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，分别得到猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例5
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物15、猪肝酶解产物70。
进一步的，所述猪肝酶解产物为猪肝酶解产物a。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:1（w/v），于40℃恒温水浴中浸提15小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:1（w/v），煮沸提取10分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:2（w/v），调节浆的ph值为6.8，添加1200u/g原料质量的动物蛋白水解复合酶；s2.在所添加蛋白酶最适酶解温度45℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为12%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda和>3kda两个个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液；s4.将s3得到的酶解产物a酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解产物a。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例6
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物15、猪肝酶解产物70。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物20、猪肝酶解产物a20。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:1（w/v），于40℃恒温水浴中浸提15小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:1（w/v），煮沸提取10分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:2（w/v），调节浆的ph值为7.0，添加1300u/g原料质量的木瓜蛋白酶和动物蛋白水解复合酶(1:1，w/w)；s2.在55℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为15%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:2（w/v），调节浆的ph值为7.0，添加1300u/g原料质量的木瓜蛋白酶和动物蛋白水解复合酶(1:1，w/w)；s2.在55℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为12%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda和>3kda两个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液；s4.将s3得到的酶解产物a酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解产物a。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例7
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物15、猪肝酶解产物70。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda；所述猪肝酶解产物b的平均分子量为3kda-8kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物20、猪肝酶解产物a20、猪肝酶解产物b22。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:1（w/v），于40℃恒温水浴中浸提15小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:1（w/v），煮沸提取10分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:2（w/v），调节浆的ph值为7.2，添加1300u/g原料质量的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶(1:1，w/w)；s2.在55℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为15%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:2（w/v），调节浆的ph值为7.2，添加1300u/g原料质量的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶(1:1，w/w)；s2.在55℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为12%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda、8kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda、3-8kda和>8kda三个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液，3-8kda的组分为猪肝酶解产物b酶解液；s4.将s3得到酶解产物a酶解液和酶解产物b酶解液分别通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，分别得到猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例8
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物15、猪肝酶解产物70。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda；所述猪肝酶解产物b的平均分子量为3kda-8kda；所述猪肝酶解产物c的平均分子量为8kda-30kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物20、猪肝酶解产物a20、猪肝酶解产物b22、猪肝酶解产物c15。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:1（w/v），于40℃恒温水浴中浸提15小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:1（w/v），煮沸提取10分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:2（w/v），调节浆的ph值为5.5，添加1300u/g原料质量的动物蛋白水解复合酶；s2.在45℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为15%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:2（w/v），调节浆的ph值为5.5，添加1300u/g原料质量的动物蛋白水解复合酶；s2.在45℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为12%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda、8kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda、3-8kda和>8kda三个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液，3-8kda的组分为猪肝酶解产物b酶解液，将>8kda的组分再过30kda的超滤膜，滤过的组分为猪肝酶解产物c酶解液；s4.将s3得到的三个分级组分通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，分别得到猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例9
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物30、猪肝酶解产物200。
进一步的，所述猪肝酶解产物为猪肝酶解产物a。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:6（w/v），于80℃恒温水浴中浸提6小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:4（w/v），煮沸提取48分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:6（w/v），调节浆的ph值为7.0，添加2800u/g原料质量的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶（1:1，w/w）；s2.在58℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为24%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda、8kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda和>3kda两个个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液；s4.将s3得到的猪肝酶解产物a酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解产物a。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例10
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物30、猪肝酶解产物200。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物45、猪肝酶解产物a65。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:6（w/v），于80℃恒温水浴中浸提6小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:4（w/v），煮沸提取48分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:6（w/v），调节浆的ph值为3.5，添加2500u/g原料质量的胃蛋白酶；s2.在40℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为22%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:6（w/v），调节浆的ph值为3.5，添加2500u/g原料质量的胃蛋白酶；s2.在40℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为24%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda和>3kda两个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液；s4.将s3得到的猪肝酶解产物a酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解产物a。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例11
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物30、猪肝酶解产物200。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda；所述猪肝酶解产物b的平均分子量为3kda-8kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物42、猪肝酶解产物a61、猪肝酶解产物b40。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:6（w/v），于80℃恒温水浴中浸提6小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:4（w/v），煮沸提取48分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:6（w/v），调节浆的ph值为6.5，添加2500u/g原料质量的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶（1:1，w/w）；s2.在55℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为22%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:6（w/v），调节浆的ph值为6.5，添加2500u/g原料质量的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶（1:1，w/w）；s2.在55℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为24%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda、8kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda、3-8kda和>8kda三个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液，3-8kda的组分为猪肝酶解产物b酶解液；s4.将s3得到的猪肝酶解产物a酶解液和b酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，分别得到猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实施例12
一种猪肝提取物护肝解酒组合物，其特征在于，包含以下重量份数计组分：猪肝浸提物30、猪肝酶解产物200。
进一步的，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c。
进一步的，所述猪肝酶解产物a的平均分子量为0.5kda-3kda；所述猪肝酶解产物b的平均分子量为3kda-8kda；所述猪肝酶解产物c的平均分子量为8kda-30kda。
进一步的，所述猪肝酶解产物包含以下重量份数计组分：猪肝酶解初产物36、猪肝酶解产物a57、猪肝酶解产物b43、猪肝酶解产物c20。
本发明还提供一种猪肝提取物护肝解酒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备猪肝浸提物、猪肝酶解产物，所述猪肝酶解产物包括猪肝酶解初产物、猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c；将猪肝浸提物、猪肝酶解产物按比例混合，得到猪肝提取物护肝解酒组合物。
进一步的，所述的猪肝浸提物的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:6（w/v），于80℃恒温水浴中浸提6小时，粗过滤后得到一次浸提液；s2.残渣再加水至1:4（w/v），煮沸提取48分钟，过滤后得二次浸提液，收集残渣备用，合并一次浸提液和二次浸提液，得到猪肝浸提液；s3.将s2中的猪肝浸提液通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃，预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温，达到25℃，并保持到干燥终点，得到猪肝浸提物。
进一步的，所述猪肝酶解初产物的制备方法为：s1.取上述猪肝浸提过程收集的残渣，使料水比为1:6（w/v），调节浆的ph值为5.5，添加2500u/g原料质量的中性蛋白酶；s2.在55℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为22%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝蛋白酶解液；s3.将s2中的猪肝蛋白酶解液通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，得到猪肝酶解初产物。
进一步的，所述猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c的制备方法为：s1.取猪肝搅碎成肉糜，使料水比为1:6（w/v），调节浆的ph值为7.0，添加2800u/g原料质量的动物蛋白水解复合酶；s2.在58℃下酶解3小时，期间不断进行搅拌，待酶解至水解度为24%时沸水浴灭酶10分钟；然后将水解液在6000r/min的条件下离心10分钟，取上清液，得到猪肝酶解液；s3.采用截留分子量为3kda、8kda的超滤膜，将s2得到的猪肝酶解液分级为<3kda、3-8kda和>8kda三个分级组分，将<3kda的组分再过0.5kda的超滤膜，截留的组分为猪肝酶解产物a酶解液，3-8kda的组分为猪肝酶解产物b酶解液，将>8kda的组分再过30kda的超滤膜，滤过的组分为猪肝酶解产物c酶解液；s4.将s3得到的三个分级组分通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃，进样速度为50ml/min，离心雾化器转速为25000r/min，分别得到猪肝酶解产物a、猪肝酶解产物b、猪肝酶解产物c。
进一步的，所述的猪肝提取物护肝解酒组合物可以制成粉状、罐装为胶囊、压制成片剂、溶解为水溶液，应用于具有护肝解酒功效的保健品或药品中。
实验效果测试
1、对adh激活率的影响
实验方法：对实施例1-11制备的组合物样品，分别使用南京建成生物工程研究所的乙醇脱氢酶（adh）试剂盒测定，根据用量现配ahd试剂盒的试剂一（1：1超纯水稀释），取干净的2ml离心管，各组分别加入试剂一0.26ml，试剂二0.02ml，8μl样品（对照加入8μl超纯水），12μl现配adh酶（1u/ml）。空白组加入试剂一0.28ml，试剂二0.02ml。充分震荡混匀后，取离心管中混合液75μl置于干净的紫外酶标板孔隙内，37℃温育5min，弹出加入现配的75μl辅酶试剂三（粉剂，加入10ml超纯水溶解并混匀），立即推入且全程保持恒温，340nm下10s扫描测定一次各反应孔被吸光值至第20min截止，取线性关系良好的反应曲线。曲线中初始吸光值为a1，结束吸光值为a2，计算各组adh活力。
表1实施例样品对adh激活率的影响
2、实施例组合物对雄性小鼠醉酒度的影响
实验方法：50只雄性小鼠按体重随机分为模型对照组、阳性对照组、实施例3组合物低、中、高剂量组，10只/组。各组小鼠灌胃给予相应的受试样品，给药体积为20ml/kg，给药频率为2次/天，给药间隔约4小时，给药期限为1天。于末次给药0.5h后，各组小鼠按20ml/kg体重灌胃给予56度红星二锅头，制备小鼠醉酒模型。记录各组小鼠醉酒时间(从灌完酒到翻正反射消失时间)、醉酒数、酒醒时间(从翻正反射消失到恢复所需的时间)、死亡数，计算各组小鼠的死亡率、2h内醉酒率。
数据统计方法：数据采用（
醉酒时间、醉酒数、酒醒时间、死亡数、死亡率、2h内醉酒率（见表2）：与模型对照组比较，阳性对照组、实施例组合物组小鼠酒醒时间偏低，具有统计学差异（p<0.05），其余组别无统计学差异（p﹥0.05）；各组小鼠醉酒时间、醉酒数、死亡率、2h内醉酒率均无统计学差异（p﹥0.05）。
表2实施例3组合物对雄性小鼠醉酒度的影响各项指标结果（g，♀）
注：与模型对照组比较，体重、醉酒时间采用单因素方差分析；酒醒时间采用秩和检验；醉酒数、2h内醉酒率采用卡方检验。与模型对照组比较，“*”p<0.01。
3、对动物体内酒精代谢过程的影响
实验方法：155只小鼠按体重随机分为阴性对照组、模型对照组、阳性对照组、实施例3组合物低、中、高剂量组，其中，阴性对照组为5只，其余组别为30只/组。各组小鼠灌胃给予相应的受试样品，给药体积为20ml/kg，给药频率为2次/天，给药间隔约4小时，给药期限为1天。于末次给药0.5h后，除阴性对照组外，其余各组小鼠按10ml/kg体重灌胃给予56度红星二锅头。阴性对照组于给药后1h眼眶采血，其余各组小鼠分别于给予红星二锅头后0.5h、1h、2h、3h、4h每组各取6只小鼠眼眶采血，快速检测血液中的乙醇浓度。
表3实施例3组合物对动物体内酒精代谢过程的影响试验及乙醇浓度结果（♂）
注：阴性对照组与模型对照组比较，采用独立样本t检验；各给予受试物组与模型对照组比较，体重、造模后0.5h采用单因素方差分析，其余时间点，采用秩和检验。与阴性对照组比较，“**”p<0.01。与模型对照组比较，“▲”p<0.05，“▲▲”p<0.01。
4、对小鼠酒精性肝损伤的影响
实验方法：60只小鼠根据体重随机分为阴性对照组、模型对照组、阳性对照组、实施例3组合物低、中、高剂量组，10只/组。灌胃给予相应的样品，1次/d，连续30d。在给予受试物第26-30天，阴性对照组小鼠每天给与普通饲料，其余组小鼠每天给与高脂饲料；同时，每天给予受试物后4小时，阴性对照组灌胃给予纯净水，其余组灌胃给予50%的乙醇，灌胃体积为12ml/kg体重，1次/天，连续5天。末次灌胃乙醇后禁食约16小时，摘眼球采血，离心取血清，测定谷丙转氨酶（alt）、谷草转氨酶（ast）、甘油三酯（tg）、总胆固醇（tc）；采血完毕，处死小鼠，取部分肝脏，测定丙二醛（mda）、甘油三酯（tg）、还原型谷胱甘肽（gsh）的含量；
表4实施例3组合物对急性酒精性肝损伤小鼠模型的影响血清及肝脏各项指标结果（
注：阴性对照组与模型对照组比较，采用独立样本t检验；各给予受试物组与模型对照组比较，血清tc、肝脏mda、gsh，采用单因素方差分析，其余指标，采用秩和检验。与阴性对照组比较，“*”p<0.05，“**”p<0.01。与模型对照组比较，“▲”p<0.05，“▲▲”p<0.01。
需要注意的是，本发明的其它实施例制备的护肝醒酒组合物，在相关的护肝醒酒效果测试评价中可达到与实施例3相当的水平。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。需注意的是，本发明中所未详细描述的技术特征，均可以通过本领域任一现有技术实现。