一种减肥降脂和血脂的中药配方、制剂、制备方法及用途与流程

本发明涉及减肥降脂和血脂的药物研发技术领域，更具体地说，涉及一种减肥降脂和血脂的中药配方、制剂、制备方法及用途。

背景技术：

脂肪组织是人体内甘油三酯的主要储存场所，脂肪以甘油三酯形式储存,脂肪分解产生的甘油和游离脂肪酸对机体能量代谢起着至关重要的作用。当体内能量匮乏时,通过相关的酶动员,分解脂肪组织中的脂肪,脂肪分解为自由脂肪酸和甘油进入血浆,运至其它的组织进行代谢为肌体提供能量。脂肪代谢失调是肥胖发生发展的重要原因。另外，不良的饮食习惯，尤其是过多的脂肪摄入以及静止的生活方式，由此引起热量摄入与消耗的失衡，进而脂肪沉积过多。所以，促进脂肪的分解、抑制脂肪吸收可以达到减肥、保持体型的目的。

血浆中所含脂类统称为血脂，是血浆中的甘油三酯和类脂(磷脂、糖脂、胆固醇、类固醇)的总称，广泛存在于人体中。它们是生命细胞的基础代谢必需物质。一般说来，血脂中的主要成分是甘油三酯和胆固醇，其中甘油三酯参与人体内能量代谢，而胆固醇则主要用于合成细胞浆膜、类固醇激素和胆汁酸。所有的血脂都和蛋白质结合成脂蛋白。而脂蛋白的基本结构是以不同含量的甘油三酯为核心，周围包围一层磷脂、胆固醇和蛋白质分子。脂蛋白根据密度分为：乳糜微粒cm、极低密度脂蛋白vldl、低密度脂蛋白ldl、高密度脂蛋白hdl，它们的生理功能是有区别的。

高脂血症是指血浆中血脂水平过高。高血脂可直接引起一些严重危害人体健康的疾病，如动脉粥样硬化、冠心病等。因此，为防止血脂过高，控制血浆胆固醇和甘油三酯水平成为预防和治疗高血脂的重点目标，在必要的时候，为防止血脂过高应该遵医嘱服用药物。

现今伴随生活条件的改善，肥胖病患者越来越多，肥胖与高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病、中风、2型糖尿病等有密切关系，因此，积极治疗肥胖有重要意义。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术的上述缺陷，提供一种减肥降脂和血脂的中药配方；还提供了一种制备方法、制剂及用途。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

构造一种减肥降脂和血脂的中药配方，其中，按重量配比包含以下组分：

荷叶1-5份；

罗布麻叶1-5份；

玫瑰花1-2份；

大黄1-3份；

炙甘草1-3份。

本发明所述的减肥降脂和血脂的中药配方，其中，按重量配比包含以下组分：

荷叶1-3份；

罗布麻叶1-3份；

玫瑰花1-2份；

大黄1-2份；

炙甘草1-2份。

本发明所述的减肥降脂和血脂的中药配方，其中，按重量配比包含以下组分：

荷叶1-5份；

罗布麻叶1-5份；

玫瑰花1份；

大黄1-2份；

炙甘草1-2份。

本发明所述的减肥降脂和血脂的中药配方，其中，按重量配比包含以下组分：

荷叶1-2份；

罗布麻叶1-2份；

玫瑰花1-2份；

大黄1-3份；

炙甘草1-3份。

本发明所述的减肥降脂和血脂的中药配方，其中，按重量配比包含以下组分：

荷叶4-5份；

罗布麻叶4-5份；

玫瑰花1-2份；

大黄1-3份；

炙甘草1-3份。

一种减肥降脂和血脂的中药制剂，根据上述的减肥降脂和血脂的中药配方，其中，所述减肥降脂和血脂的中药制剂以所述减肥降脂和血脂的中药配方为原料制成。

本发明所述的减肥降脂和血脂的中药制剂，其中，所述减肥降脂和血脂的中药制剂由荷叶、罗布麻叶、玫瑰花、大黄和炙甘草水或醇的提取物为活性成分，加上药学可以接受的辅料制备而成。

本发明所述的减肥降脂和血脂的中药制剂，其中，每克所述减肥降脂和血脂的中药制剂的提取物含提取物含大黄素(c15h10o5)不得少于0.5mg。

一种减肥降脂和血脂的中药制剂制备方法，根据上述的减肥降脂和血脂的中药配方，其制备方法如下：

按组分配比取料；

荷叶、罗布麻叶、玫瑰花、大黄、炙甘草加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，静置12小时，过滤，滤液减压浓缩成流浸膏；

加乙醇使含醇量达50％，静置12小时以上，过滤，滤液回收乙醇，浓缩备用；

加辅料，制成需要的药物制剂。

一种减肥降脂和血脂的中药制剂的用途，根据上述的减肥降脂和血脂的中药制剂，其中，所述减肥降脂和血脂的中药制剂用于降解脂肪。

本发明的有益效果在于：本申请的中药配方以及制剂，以荷叶清热燥湿、消脂减肥，配以大黄破积滞泻热毒，行淤血、软坚散结，加强化顽痰死血、降血脂、通便消脂，再以罗布麻叶降压消脂、清肝火、通瘀滞，以利气机之枢；再以玫瑰花凉血活血、解毒利滞、调肝安神、清除肠胃不洁之瘀物，清肠爽胃、排毒轻身；炙甘草具有益气补中、清热解毒、缓急止痛、缓解药性之功用，方中调和诸药，保护心主不为诸药所伤，达到减肥消脂的目的；本方各药物原料配伍使用，发挥协同增效的作用，药效可靠，制剂安全，并且制剂质量稳定、重现性好、可控性强，为临床患者减肥降脂和血脂(脂肪和血脂)提供了一种新的选择。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将结合附图及实施例对本发明作进一步说明，下面描述中的附图仅仅是本发明的部分实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图：

图1是本申请较佳实施例的减肥降脂和血脂的中药制剂脂肪细胞的脂肪溶解示意图；

图2是本申请较佳实施例的减肥降脂和血脂的中药制剂对分化3t3-l1脂肪细胞的脂肪转化的抑制作用示意图；

图3-1至图3-6是本申请较佳实施例的减肥降脂和血脂的中药制剂小鼠血浆脂蛋白akta分离图谱；

图4是本申请较佳实施例的减肥降脂和血脂的中药制剂制备方法流程图。

具体实施方式

为了使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本发明的部分实施例，而不是全部实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。

本发明较佳实施例的减肥降脂和血脂的中药配方，按重量配比包含以下组分：

荷叶1-5份；

罗布麻叶1-5份；

玫瑰花1-2份；

大黄1-3份；

炙甘草1-3份；

本申请的中药配方以及制剂，以荷叶清热燥湿、消脂减肥，配以大黄破积滞泻热毒，行淤血、软坚散结，加强化顽痰死血、降血脂、通便消脂，再以罗布麻叶降压消脂、清肝火、通瘀滞，以利气机之枢；再以玫瑰花凉血活血、解毒利滞、调肝安神、清除肠胃不洁之瘀物，清肠爽胃、排毒轻身；炙甘草具有益气补中、清热解毒、缓急止痛、缓解药性之功用，方中调和诸药，保护心主不为诸药所伤，达到减肥消脂的目的。

优选的，按重量配比包含以下组分：

荷叶1-3份；

罗布麻叶1-3份；

玫瑰花1-2份；

大黄1-2份；

炙甘草1-2份。

优选的，按重量配比包含以下组分：

荷叶1-5份；

罗布麻叶1-5份；

玫瑰花1份；

大黄1-2份；

炙甘草1-2份。

优选的，按重量配比包含以下组分：

荷叶1-2份；

罗布麻叶1-2份；

玫瑰花1-2份；

大黄1-3份；

炙甘草1-3份。

优选的，按重量配比包含以下组分：

荷叶4-5份；

罗布麻叶4-5份；

玫瑰花1-2份；

大黄1-3份；

炙甘草1-3份。

本中药制剂是用于治疗肥胖的经验方，由荷叶、罗布麻叶、玫瑰花、大黄、炙甘草组成，具有消痰化滞、行气通阳、活血解毒、减肥消脂的功效。

荷叶为睡莲科植物莲nelumbonuciferagaertn.的干燥叶。夏、秋二季采收，晒至七八成十时，除去叶柄，折成半圆形或折扇形，干燥。性味:苦，平。归经:归肝、脾、胃经。功效:清热解暑，升发清阳，凉血止血。

罗布麻叶为夹竹桃科植物罗布麻apocynumvenetuml.的干燥叶。夏季采收，除去杂质，干燥。性味:甘、苦，凉。归经:归肝经。功效:平肝安神，清热利水。

玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰rosarugosathunb.的干燥花蕾。春末夏初花将开放时分批采收，及时低温干燥。性味:甘、微苦，温。归经:归肝、脾经。功效:行气解郁，和血，止痛。

大黄为家科植物掌叶大黄rheumpalmatuml.唐古特大黄rheumtangicummaxim.exbalf.或药用大黄rheumofficinalebaill.的干燥根及根茎。秋末茎叶枯萎或次春发芽前采挖.除去细报，到去外皮，切瓣或段，绳穿成串干燥或直接干燥。性味:苦，寒。归经:归脾、胃、大肠、肝、心包经。功效:泻热通肠，凉血解毒，逐瘀通经。

炙甘草为豆科植物甘草glycyrrhizuralensisfisch.、胀果甘草glycyrrhizainflatabat.或光果甘草glycyrrhizaglabral.的干燥报及根茎。春、积二季采挖，除去须根，晒干，并经炮制加工而成。性味:甘，平。归经:归心。肺、脾、胃经。功效:补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。

一种减肥降脂和血脂的中药制剂，根据上述的减肥降脂和血脂的中药配方，减肥降脂和血脂的中药制剂以减肥降脂和血脂的中药配方为原料制成。

优选的，减肥降脂和血脂的中药制剂由荷叶、罗布麻叶、玫瑰花、大黄和炙甘草水或醇的提取物为活性成分，加上药学可以接受的辅料制备而成。

优选的，每克减肥降脂和血脂的中药制剂的提取物含提取物含大黄素(c15h10o5)不得少于0.5mg。

采用目前医药工业领域的常规制剂技术，可以将上述处方中的原料制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、软胶囊剂等。

一种减肥降脂和血脂的中药制剂制备方法，根据上述的减肥降脂和血脂的中药配方，如图4所示，其制备方法如下：

s01:按组分配比取料；

s02:荷叶、罗布麻叶、玫瑰花、大黄、炙甘草加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，静置12小时，过滤，滤液减压浓缩成流浸膏；

s03:加乙醇使含醇量达50％，静置12小时以上，过滤，滤液回收乙醇，浓缩备用；

s04:加辅料，制成需要的药物制剂；

辅料采用中药上制作药物制剂的常规添加剂即可，如食品添加剂、粘合剂等。

一种减肥降脂和血脂的中药制剂的用途，根据上述的减肥降脂和血脂的中药制剂，减肥降脂和血脂的中药制剂用于降解脂肪。

实施例一

称取各重量比的原料：荷叶2份、罗布麻叶2份、玫瑰花1份、大黄1.5份、炙甘草1.5份，等成分，加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，静置12小时，过滤，滤液减压浓缩的流浸膏。加乙醇使含醇量达50％，静置12小时以上，过滤，滤液回收乙醇，浓缩成浸膏。加适量淀粉、糊精制粒，整粒后加适量硬脂酸镁混合均匀，压片，即得片剂。

实施例二

称取各重量比的原料：荷叶1份、罗布麻叶1份、玫瑰花1.5份、大黄2份、炙甘草2份，等成分，加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，静置12小时，过滤，滤液减压浓缩的流浸膏。加乙醇使含醇量达50％，静置12小时以上，过滤，滤液回收乙醇，浓缩成浸膏。加适量淀粉、糊精制粒，整粒后装袋，即得颗粒剂。

实施例三

称取各重量比的原料：荷叶2份、罗布麻叶2份、玫瑰花3份、大黄1份、炙甘草1份，等成分，加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，静置12小时，过滤，滤液减压浓缩的流浸膏。加乙醇使含醇量达50％，静置12小时以上，过滤，滤液回收乙醇，浓缩成浸膏。加适量淀粉、糊精制粒，整粒后填入空心胶囊，即得胶囊剂。

实施例四

称取各重量比的原料：荷叶1份、罗布麻叶2份、玫瑰花2份、大黄3份、炙甘草2份，等成分，加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，静置12小时，过滤，滤液减压浓缩的流浸膏。加乙醇使含醇量达50％，静置12小时以上，过滤，滤液回收乙醇，浓缩成浸膏。制成浸膏粉后，加入蜂蜜与水制成软材，用制丸机制丸，干燥，即得丸剂。

实施例五

称取各重量比的原料：荷叶3份、罗布麻叶1份、玫瑰花2份、大黄2份、炙甘草3份，等成分，加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮2小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，静置12小时，过滤，滤液减压浓缩的流浸膏。加乙醇使含醇量达50％，静置12小时以上，过滤，滤液回收乙醇，浓缩成浸膏，加入植物油、甘油，研磨均匀后，以明胶为囊材，采用软胶囊机制丸，即得软胶囊剂。

应用本发明制得的减肥降脂(脂肪和血脂)的中药制剂进行有关毒性和药效的研究，结果如下：

第一部分毒理学

一、中药制剂急性毒性试验

1.材料

该中药浸膏：黑褐色浸膏状物，6.545g(生药)/1g浸膏(1.436g浸膏/1ml)，可溶于水；生理盐水：无色澄明溶液，500ml/瓶，由四川科伦药业股份有限公司生产，批号：a060418；电子天平：electronicscalet100型，由美国双杰兄弟(集团)有限公司出；动物：昆明种小鼠20只，雌雄各半，体重18-21g，由四川大学实验动物中心提供。使用许可证号：第10号。

2.药物配制

称取14.36g(占体积10ml)中药浸膏，加入6ml生理盐水，使其完全溶解，配成89.75％(即0.8975g/1ml或5.874g生药/1ml)的溶液，供实验用。

3.实验方法

取健康昆明种小鼠20只，雌雄各半。每鼠按89.75％的中药浸膏溶液，以0.8ml/20g(最大体积)一日内给小鼠灌服给药一次，给药后连续观察14天，观察动物死亡情况。按表1观察动物出现的主要毒性症状。第7、14天称存活动物体重。

表1主要毒性症状观察

4.实验结果

4.1.每鼠按89.75％的中药浸膏溶液，0.8ml/20g最大体积给小鼠一日内灌服给药一次，给药后连续观察14天，20只小鼠无一死亡，平均体重由给药前18.52g增长至30.7g。

4.2.给药30分钟，小鼠呼吸频率减慢，自主活动减少。给药2小时后，呼吸及自主活动恢复正常。3～4小时排出棕黑色便，有的小鼠排出棕黑色稀便；皮肤色泽发黑、进食减少；各天然孔无异常分泌物，其他外观体征均未见异常。

4.3.给药前后小鼠体重的变化见表2

表2中药浸膏对小鼠体重的影响(mean±sd)

5.结论

中药浸膏小鼠灌服给药的最大耐受量为234.97g(生药)/1kg(约相当于人用剂量的1175倍)或ld50>234.97g(生药)/1kg。

二、中药制剂长期毒性试验

1.试验材料

该中药浸膏人日用量为0.2g(生药)/1kg。供试品为棕黑色浸膏状(9.4g生药/1ml)，由sub提供，批号：061001。用生理盐水配成400％、200％浓度，供高、中剂量组试验用，对照组给予生理盐水。灌胃给药剂量为1ml/100g。

sd大鼠60只(雌雄各30只)，体重90～120g，年龄5周龄，许可证号：第10号，动物级别：一级，由四川大学实验动物中心提供。大鼠购回饲养观察1周，作药前体重记录。按性别分组，动物每笼5只。全价饲料及饮水自由采食，每周更换垫料2次，保持大鼠活动环境干燥干净，每周更换并清洗、消毒一次笼具。鼠用全价颗粒料由四川大学实验动物中心提供，合格证号医动字24105103。室温空调保持18～23℃，相对湿度60～70％。

电子天平bs210(sartorius)。全自动血球分析仪kx-21n(日本)。半自动-4001血凝测定仪(德国)。半自动生化分析仪(法国secomam公司)。hc-9883电解质分析仪(深圳航创医疗设备有限公司)。定量移液器5、10、20、500μl和10～100μl可调移液器(德国hightechlab公司)。显微镜等。

血球稀释液(批号：c5244)、溶血素(批号：c6019)，由四川迈克科技有限公司配套提供；血凝时间检测试剂pt(批号060626a1法国)；血凝时间检测试剂appt(批号20060623陕西方舟医学科技有限公司)；血液生化检测试剂：ast(060171)、alt(060361)、alp(060151)、tp(0705051)、ggt(2006005)、ck(060171)、alb(0406101)、crea(0806131)、ureaa(0906161)、t-bil(060131)、tc(0706101)、tg(0606081)、glu(0806101)，其中ast、alt、alp、ck、t-bil、为中生北控生物科技股份有限公司产品，ggt为长春汇力生物技术有限公司产品，其它血清检测试剂均为四川迈克科技有限公司产品。血清k+、na+、cl+离子检测试剂，a标准液批号20060107，b标准液批号20050131，深圳市航创医疗设备有限公司产品。甲醛(分析纯)、乙醇(95％分析纯)、二甲苯(分析纯)等均为市购。

2.试验方法

2.1.给药剂量与分组

见表3。

表3给药剂量与分组

2.2.给药方法

按动物每100g体重灌胃给药1ml，一次/日，高、中剂量组按等体积不同浓度给药。每周给药6天，连续90天。每周称一次体重，并根据体重调整本周给药剂量。

2.3.各项检测指标的检测方法以及检测时间.

2.3.1.各项检测指标的检测观察方法

1)一般观察：每日给药前后观察各剂量组每只动物的外观体征，行为活动，大小便形状、颜色，各天然孔有无异常分泌物等。

2)体重：药前称体重1次，给药期间每周称体重一次。

3)外周血象：处死动物取血，全自动血球分析仪kx-21n(日本)测定，wbc(白细胞)、rbc(红细胞)、hgb(血红蛋白)、hct(红细胞压积)、mcv(平均红细胞体积)、mch(平均红细胞血红蛋白量)、mchc(红细胞平均血红蛋白浓度)、rdw-cv(红细胞分布宽度变异数)、plt(血小板计数)、ret(网织红细胞)。

4)血液生化检测：处死动物时，股动脉、静脉切断取血分离血清，用半自动生化分析仪(法国secomam公司)、hc-9883电解质分析仪(深圳航创医疗设备有限公司)检测。ast(天冬氨酸氨基转移酶)酶法、alt(丙氨酸氨基转移酶)酶法、alp(碱性磷酸酶)速率法、tp(总蛋白)双缩脲法、alb(白蛋白)bcg法、tbil(总胆红素)重氮法、bun(尿素氮)脲酶-波氏比色法、glu(葡萄糖)fod-pod法、tc(总胆固醇)ce-cod-pod法、crea(肌肝)苦味酸两点法、tg、na、k、c1离子。

5)系统尸解：按照试验设计方案动物处死后，进行全面系统尸解。按本实验室《实验动物尸体解剖操作规程》进行。对心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、肾上腺、睾丸、附睾、子宫、卵巢等进行肉眼观察，记录有异常的脏器，并称重计算脏器系数。

6)组织病理学检查：取动物的心、肝、脾、肺、肾、脑、气管、胰腺、肾上腺、睾丸、子宫、卵巢、胃、十二指肠、甲状腺、附睾、小肠等组织。用10％甲醛固定。

7)给药90天检测：给药90天随机抽取，各组处死12只动物(雌雄各半)，共36只动物，动物均作上述指标的观察、检测。

8)停药恢复期观察：停药观察第15天，各组处死余下8只动物(雌雄各半)，共24只，作上述相同检查。

结果用spss.13统计软件，进行统计学处理。

2.3.2.检测时间

见表4

表4检测项目和检测时间

3.试验结果

3.1.一般观察

高剂量组药前动物外观体征、行为活动未见异常。给药后14天内动物体重下降，动物排出稀水样大便，且颜色黑褐色。部分动物被毛耸起，采食不良。以上症状尤以雄性动物明显。动物鼻孔，眼、耳、生殖器等天然孔均无异常分泌物。给药3周后动物体重逐渐恢复正常，外观体征、行为活动等均与对照组无明显差异。

中剂量组药前动物外观体征、行为活动未见异常。给药后动物排出稀便，且颜色黑褐色。部分动物被毛耸起，采食不良。动物鼻孔，眼、耳、生殖器等天然孔均无异常分泌物。给药3周后动物体重逐渐恢复正常，外观体征、行为活动等均与对照组无明显差异。

对照组，外观体征、行为活动未见异常，被毛光泽，口、眼、鼻、耳、生殖器等天然孔均无异常分泌物。呼吸系统、神经系统、消化系统、大、小便等均未见异常。体重增长正常。

停药观察15天，各动物均未见异常。

3.2.体重变化

各组动物体重增长明显，给药90天与给药前(0天)比，动物体重平均增长：高剂量175.65g、中剂量197.50g、对照组213.90g，高、中剂量组体重增长低于对照组，具有显著性差异。

停药恢复观察15天，20g(生药)/1kg组动物体重增长恢复较快，与对照组比较无显著差异。而40g(生药)/1kg组动物体重增长恢复缓慢，与对照组比较有显著差异。

3.3.外周血象检查

高、中两个剂量组90天灌胃给药，对动物的外周血象个别指标有一定影响，如高剂量组的wbc、mch和rdw-cv值和中剂量组的mcv、mch和plt值与对照组相比有统计学差异p<0.05或p<0.01；停药观察15天，未见异常。

3.4.对血液生化的影响

给药90天，高剂量和中剂量对动物血液生化有一些影响。如高剂量的t-bil和tp的测定值、中剂量的t-bil、ast、tc和钠离子的测定值与对照组相比有统计学差异p<0.05或p<0.01；停药15天观察对动物血液生化无影响。

3.5.系统尸解和脏器系数

给药90天，停药观察15天末次给药24小时，股动脉切断处死。各动物外观天然孔，被毛等未见明显异常。

解剖肉眼观察：给药90天，高、中剂量组及对照组各动物胸腔心肺等组织排列正常，各动物组织无肉眼可见异常，肺组织，色质正常，胸腔无积液。腹腔解剖肝、脾、肾、胰腺等组织排列正常，无粘连无异常分泌物；性腺等均未见异常；停药15天各组动物各脏器未见异常。

取心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、肾上腺、睾丸、附睾、子宫、卵巢称重，并计算脏器系数。高、中两个剂量组连续90天灌胃给药，各脏器系数与对照组比较均无统计学差异(p>0.05)。

3.6.组织病理学检查

给药90天，停药观察15天，高、中剂量和对照组，共60只动物，分别取心、肝、脾、肺、肾、脑、气管、胰腺、肾上腺、睾丸、附睾、子宫、卵巢、甲状腺、胃、十二指肠、小肠等组织。10％甲醛固定。镜检结果表明除个别动物肺组织有轻度炎变外，其它各动物组织均未见异常。

4.结论

中药高、中两个剂量组连续90天给予大鼠，给药组动物少数有耸毛现象；给药14天内有排出稀水样黑褐色大便的现象；以后恢复正常。动物各天然孔无异常分泌物；各组动物饲料消耗量一致，体重增长和平均体重与对照组相比较低。对外周血象的部分指标有一定影响；且血液生化检查的部分指标与对照组比较具有统计学差异(p<0.05或p<0.01)。

解剖观察各组动物，除有个别动物肺组织有轻度炎变外，其它组织均无肉眼可见病变；各脏器系数组间比较，给药90天高、中剂量组各脏器系数均无统计学差异；给药90天，停药15天组织病理检查，高剂量组和对照组心、肝、脾、肺、肾、脑、气管、胰腺、肾上腺、睾丸、附睾、子宫、卵巢、胃、十二指肠、小肠、甲状腺组织，各组织均未见异常。

第二部分：药效学

一、中药制剂减肥降解和抑制脂肪积累作用的研究

1、脂肪细胞测定

1.1.材料:

-磷酸盐缓冲液和hanks平衡盐溶液(hbbs)由gibco提供。

-异丙肾上腺素，10％无菌bsa溶液，甲醇和dmso由sigmaaldrich提供。

-用于组织培养的塑料制品由greinerbio-one提供。

-脂肪分解测定试剂盒购自chemiconint公司。

1.2.方法：

1.2.1.中药制剂的提取

300mg的中药制剂用4ml甲醇提取。蒸发甲醇后，将提取物溶于100μldms中。

1.2.2.组织培养细胞的维持和分化

使用的细胞系：3t3-l1前脂肪细胞细胞系(从atcc获得)。培养3t3-l1细胞，并将其从前脂肪细胞分化为完全生长的脂肪细胞。

1.2.3.中药制剂培养脂肪细胞

为了进行脂解测定，首先除去细胞培养孔中的生长培养液，然后，用hbss洗涤每个培养孔细胞两次，每次使用hbss1ml。然后，向每个孔中加入250μl含有2％bsa和2.5μldmso溶解的中药制剂的hbss溶液；加入2.5μl浓度为1mm异丙肾上腺素的dmso溶液作为阳性对照物(异丙肾上腺素的最终浓度是10μm)。做为β-肾上腺素能激动剂，异丙肾上腺素能够增加甘油三酯的水解。加2.5μldmso(dmso对照)或不加任何物质(空白)做为阴性对照。培养三小时，测量甘油的释放。

对于脂肪转化测定，在细胞分化开始时与培养液一起，加不同的浓度的中药制剂。每次更换培养液后，也需要添加新的中药制剂。培养9天，测定细胞的脂肪转化。

1.3.结果和结论

1.3.1.脂肪溶解测定

图1所示，与阴性对照相比，中药制剂提取物明显增加培养液中的甘油含量。

图1.加中药制剂(分别稀释500倍和2500倍)温育后，3t3-l1脂肪细胞中脂肪分解释放出甘油；20μm异丙肾上腺素是dmso溶液；测定中dmso的终浓度为1％；测定值是平均值+sd(n＝3)。

结论：由于脂肪分解过程被激活,该中药制剂能够增加脂肪细胞脂肪的溶解，促进甘油的释放。

1.3.2.脂肪转化测定

在这项研究中，我们测定了中药制剂对3t3-l1脂肪细胞中脂肪积累的影响。图2显示随着浓度的增加，中药制剂抑制脂肪生成的百分数明显增加。与阴性对照(0％和0.1％dmso)相比，在5000x稀释度下，细胞中约有70％的脂肪(抑制30％)；稀释1000倍时，细胞中的脂肪含量为55％(抑制45％)；稀释500倍时，细胞中的脂肪含量为0％(抑制100％)。tnf-α(肿瘤坏死因子-α)用作阳性对照，显示出100％的抑制作用。

图2中药制剂对分化3t3-l1脂肪细胞的脂肪转化的抑制作用。

结论：该中药制剂具有抑制脂肪生成的作用，具有浓度依赖性。

二、中药制剂降血脂作用的研究

1.材料和实验动物：

中药制剂，阳性对照样品rimonabant，30只雌性apoe*3leiden小鼠(10-14周)，小鼠食物为半合成的西方饮食(含0.2％胆固醇w/w和15％可可油脂)，由hopefarms荷兰提供。估计这种食物可导致小鼠血脂温和增加(血浆胆固醇大约在14-18mmol/l之间)。

2.方法：

30只雌性apoe*3leiden小鼠磨合期为4周，然后，将小鼠的体重，血浆胆固醇和甘油三酯匹配(禁食4小时后)，分成3组，每组8只，它们分别是空白对照组、阳性对照组(rimonabant)和实验组(中药制剂组)。将中药制剂或阳性对照品rimonabant添加到小鼠食料里，为了掩盖中药可能的味道，将含茴香的糖块(33.3克/千克食物)还添加到所有实验动物组的食料中在指定的时间点测量小鼠体重和食物摄入量。在规定的时间点采集血样并进行相关测量。

食料的准备工作：将冻干的饮食块在黑暗中储存在真空袋中，该容器储存在-20℃环境里。

3.结果和结论

在实验过程中，各组小鼠没有发现有任何异常现象。

3.1.对实验小鼠血浆胆固醇的影响

结果：见表5。

表5：各组实验小鼠的血浆胆固醇浓度(mmol/l)(mean±sd)

*表示实验组在第2周与第4周与空白对照比较有显著性差异p<0.01。

在治疗2周和4周后，与空白对照组相比，中药实验组的血浆胆固醇显著降低p<0.01；阳性对照组与空白对照组相比血浆胆固醇也降低，但并不显著。

结论：该中药制剂有显著降总血浆胆固醇的作用，延长服药时间没有发现反弹现象。

3.2.对实验小鼠血浆甘油三脂的影响

结果：见表6。

表6：各组实验小鼠的血浆甘油三脂浓度(mmol/l)(mean±sd)

*表示实验组和阳性对照组与空白对照比较有显著性差异p<0.05。

在治疗2周后，中药制剂组的小鼠血浆甘油三酯显著降低，与对空白对照组相比p<0.05；治疗4周后，小鼠血浆甘油三酯有所反弹，但是，仍然低于对照组38％。

结论：该中药制剂有显著降低血浆甘油三脂的作用，延长服药时间会有反弹现象。但是，血浆甘油三脂的水平仍然低于空白对照组38％。

3.3.对实验小鼠血浆高密度脂蛋白的影响

结果：见表7.

表7：各组实验小鼠血浆高密度脂蛋白的浓度(mmol/l)(mean±sd)

*表示与空白组对照有显著性差异p<0.05。

小鼠实验4周后，与对照组相比，中药制剂组小鼠血浆高密度脂蛋白显著增加p<0.05。

结论：高密度脂蛋白是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子，俗称“血管清道夫”。该中药制剂能够显著地增加小鼠血浆高密度脂蛋白浓度。

3.4.对实验小鼠血浆脂蛋白谱的影响

小鼠血浆脂蛋白经过superose柱分离分别获得不同的流份，流份4-7是极低密度脂蛋白(vldl)、流份8-9是中密度脂蛋白(idl)、流份10-15是低密度脂蛋白(ldl)，流份16-23是高密度脂蛋白(hdl)。

结果：见图3-1至图3-6小鼠血浆脂蛋白akta分离图谱；

经4周实验后，阳性对照组和实验组(中药制剂组)的极低密度脂蛋白流份的血浆胆固醇，甘油三酯和磷脂水平，与空白对照组相比降低，实验组降低的最为明显。此外，在实验组的高密度脂蛋白流份中观察到磷脂增加。磷脂是高密度脂蛋白的重要组成部分。因此，在极低密度脂蛋白观察到的胆固醇和甘油三脂变化和在高密度脂蛋白观察到的磷脂变化与前面的检测总血浆胆固醇，甘油三酸酯水平下降和高密度脂蛋白升高的结果是一致的。

结论：实验小鼠血浆脂蛋白谱的研究结果与前面对血浆胆固醇，甘油三酸酯和高密度脂蛋白的研究结果是一致的，证明该中药制剂具有显著的降血脂作用。

3.5.对实验小鼠血浆胆固醇酯转移蛋白(cetp)水平和活性的影响

结果：见表8

表8各组实验小鼠血浆胆固醇酯转移蛋白(cetp)水平和活性(mean±sd)

*表示与空白对照组相比p<0.01。

实验4周后，实验组的小鼠血浆胆固醇酯转移蛋白(cetp)水平和活性较空白对照组明显降低p<0.01。人体胆固醇酯转移蛋白(cetp)会造成胆固醇酯从高密度脂蛋白(hdl)向低密度脂蛋白(ldl)或极低密度脂蛋白(vldl)的转移，从而增加人体患心血管疾病的危险性。这个结果与前面的该中药制剂能够升高高密度脂蛋白的结论是一致的。

结论：该中药制剂不仅具有升高高密度脂蛋白的作用，而且还能够通过降低小鼠血浆胆固醇酯转移蛋白(cetp)水平和活性，来减少高密度脂蛋白向低密度脂蛋白或极低密度脂蛋白的转移。

该中药制剂与空白对照组相比具有显著地降低血浆胆固醇和甘油三脂的作用。而且，还有通过降低胆固醇和甘油三酯达到降低极低密度脂蛋白，以及升高磷脂达到升高高密度脂蛋白，从而改善脂蛋白图谱的作用。此外，该中药制剂还能够减低实验小鼠血浆胆固醇酯转移蛋白(cetp)水平和活性。这些结果表明该中药制剂有明显的减肥降血脂的作用。

应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。