专利名称：降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法
技术领域：
本发明涉及的是对降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法，具体讲是通过对虎杖片中的大黄素和白藜芦醇甙含量以分光光度法进行检测鉴别的方法。
虎杖片是由虎杖浸膏粉制备而成，因具有降低胆固醇和甘油三酯功能而被用于高血脂症治疗的药物。目前对其有效成份的检测，采用的是用氯仿提取后的水液加醋酸乙酯振后，分别将其醋酸乙酯提取物再用乙醚提取并用乙醇溶解后的乙醇溶液在紫外光灯下显示的蓝色荧光以比色法，以及在上述水层中加入三氯化铁后的显色反应进行的。从方法学角度讲，比色法和显色法的专属性和灵敏性均较低，且易受外界环境和存在的其它成份的干扰，特别是在定量检测鉴别时，其误差和差错的情况更是难以避免。
鉴于此，本发明的目的是为解决上述问题提供一种对降血脂药物虎杖片的检测鉴别，特别是进行定量检测鉴别时的在专属性和准确性方面更加理想的方法。
本发明所说的对降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法，是将无糖衣的待测虎杖药片粉碎后，置索式提取器中，用氯仿在水浴加热回流下提取至氯仿无黄色时止，分离氯仿提取液另置备用，提取后的残渣用含量至少为95％的乙醇用索式提取器水浴加热继续回流3小时，将乙醇提取液浓缩至100毫升以内后用95％乙醇定容稀释，然后按以下操作用分光光度法分别进行鉴别检测(1)精密量取不同体积但来源于同一经精密称量的大黄素用氯仿配制所成的大黄素氯仿对照用溶液两份，以及上述另置备用的待测药物氯仿提取液，分别除尽氯仿，各残渣分别加入由等量的精密配制的2％氨溶液和5％(均为重量％)氢氧化钠溶液混合所成的溶液溶解后，以该混合溶液为空白，分别测定其在520纳米波长处的吸收度，以两对照品为参照，计算待测药物中的大黄素含量；(2)将精密称量的对照用的白藜芦醇甙用95％乙醇定容配制成具有已知含量梯度的对照品试液后，以95％乙醇溶剂作空白对照制作其在306纳米波长处的标准吸收度曲线，然后将上述经95％乙醇定容稀释后的待测药物溶液在以溶剂为空白对照的条件下，测定其在306纳米波长处的吸收度后，由该标准吸收度曲线换算其含量。
在上述方法中，所说的配制大黄素对照品时，可以使精密称量并用氯仿配制成的对照品溶液中的大黄素含量为100微克/毫升；取自该同一对照品溶液并精密量取的两份不同体积对照品溶液可以分别为2毫升和3毫升。检测时，所说的待测虎杖片药物用量一般可以为由20片，并由其被粉碎后的药物中精密称取300毫克置于索式提取器中，用130毫升氯仿提取。再精密量取10毫升该提取液按所说的方法处理后进行检测，其中溶解时所用的由等量2％氨溶液和5％氢氧化钠混合所成的溶液的用量为20毫升。
上述方法中所说的作为对照品用的白藜芦醇甙的用量一般可以为10毫克，用95％乙醇定容至50毫升后，再按0.5毫升、1.0毫升、2.0毫升、3.0毫升、4.0毫升、5.0毫升、6.0毫升和7.0毫升的梯度分别精密量取后，再分别以95％乙醇各自均定容稀释成50毫升，用于测定和制作标准吸收度曲线。与上述检测大黄素时所用的20片待测药物的用量相配合时，对其氯仿提取后的残渣再用乙醇提取，该乙醇提取液浓缩并可用95％乙醇定容稀释成100毫升，然后量取该待测药物溶液1毫升和2毫升，再以95％乙醇定容稀释至25毫升后，按所说的方法测定其在306纳米波长处的吸收度。
由此可以理解，本发明上述方法是通过采用分光光度仪，对虎杖片药物中的大黄素和白藜芦醇甙在特定波长处的特征性紫外吸收度进行测定为依据，并通过与相应对照品的吸收度或由其绘制成的标准吸收度曲线进行换算而实现的。试验结果表明，本发明方法与前述的目前以比色法和显色法进行的检测鉴别，能实现同样的检测鉴别目的，但在检测效果上，其特定性、专属性、及其检测的准确性等各方面均大为提高。特别是在进行定量性的检测鉴别时，其检测鉴别的结果能有更加确实可靠的保证。
以下通过具体的实施例对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围局限于以下的实例。
取待检测的无糖衣或剥除糖衣后的虎杖药片20片，研细，精密称取300毫克置索式提取器中，用130毫升氯仿，在水浴加热回流下提取至氯仿不显黄色时止(约3小时)，分离氯仿提取液另置备用，作为供检测大黄素用的待检测试液A。氯仿提取后的残渣用95％乙醇或无水乙醇130毫升，置索式提取器中再浴加热下继续回流约3小时。将乙醇提取液蒸发浓缩至100毫升以内后，用95％乙醇定容稀释至100毫升，作为测定白藜芦醇甙用的待检测试液B。
精密称取大黄素对照品10毫克，用氯仿定容至100毫升，成为大黄素含量为100微克/毫升的对照品溶液。分别精密量取此对照品溶液2毫升和3毫升各一份，以及精密量取的上述待检测试液A10毫升，分别除尽其氯仿，各份残渣分别各自精密加入由等量的2％氨溶液和5％(均为重量％)氢氧化钠溶液混合所成的溶液溶解后，以该混合溶液为空白，分别测定其在520纳米波长处的吸收度，并以两对照品为参照，计算待测药物中的大黄素含量；精密称量对照用的白藜芦醇甙10毫克，用95％乙醇定容配制成50毫升后，分别精密量取0.5毫升、1.0毫升、2.0毫升、3.0毫升、4.0毫升、5.0毫升、6.0毫升和7.0毫升，再以95％乙醇定容稀释至50毫升，作为已知含量梯度的对照品测试液，以95％乙醇溶剂作空白对照，制作其在306纳米波长处的标准吸收度曲线。量取1毫升或2毫升上述待检测试液B，用95％乙醇定容稀释成25毫升后，以溶剂为空白对照，测定其306纳米波长处的吸收度，由上述对照用白藜芦醇甙的标准吸收度曲线换算其含量。
权利要求
1.降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法，其特征在于将无糖衣的待测虎杖药片粉碎后，置索式提取器中，用氯仿在水浴加热回流下提取至氯仿无黄色时止，分离氯仿提取液另置备用，提取后的残渣以含量至少为95％的乙醇用索式提取器水浴加热继续回流3小时，将乙醇提取液浓缩至100毫升以内后，用95％乙醇定容稀释，然后按以下操作用分光光度法分别进行鉴别检测(1)精密量取不同体积但来源于同一经精密称量的大黄素用氯仿配制所成的大黄素氯仿对照用溶液两份，以及上述另置备用的待测药物氯仿提取液，分别除尽氯仿，各残渣中分别加入由等量的精密配制的2％氨溶液和5％氢氧化钠溶液混合所成的溶液溶解后，以该混合溶液为空白，分别测定其在520纳米波长处的吸收度，以两对照品为参照，计算待测虎杖片药物中的大黄素含量；(2)将精密称量的对照用白藜芦醇甙用95％乙醇定容配制成具有已知含量梯度的对照品试液后，以95％乙醇溶剂作空白对照制作其在306纳米波长处的标准吸收度曲线，然后将上述经95％乙醇定容稀释后的待测药物溶液在以溶剂为空白对照的条件下，测定其在306纳米波长处的吸收度后，由该标准吸收度曲线换算其含量。
2.如权利要求1所述的降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法，其特征在于所说的精密称量并用氯仿配制所成的大黄素氯仿溶液对照品中的大黄素含量为100微克/毫升，取自该对照品溶液精密量取的两份不同体积对照品分别为2毫升和3毫升。
3.如权利要求1或2所述的降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法，其特征在于所说的待测虎杖片药物的用量为由20片被粉碎后的药物中精密称取300毫克，置索式提取器中用130毫升氯仿提取，精密量取10毫升该提取液按所说的方法处理后进行检测，其中溶解时所用的由等量2％氨溶液和5％氢氧化钠混合所成的溶液的用量为20毫升。
4.如权利要求1所述的降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法，其特征在于所说的对照用的白藜芦醇甙的用量为10毫克，用95％乙醇定容溶解为50毫升后，按0.5毫升、1.0毫升、2.0毫升、3.0毫升、4.0毫升、5.0毫升、6.0毫升和7.0毫升的梯度分别精密量取，并分别再以95％乙醇定容稀释成50毫升后，用于测定和制作标准吸收度曲线。
5.如权利要求4所述的降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法，其特征在于所说的待测药物用量为20片，其乙醇提取液浓缩后用95％乙醇稀释的待测药物溶液体的定容积为100毫升，量取该待测药物的定容溶液1毫升或2毫升，再以95％乙醇定容稀释至25毫升后，按所说的方法测定其在306纳米波长处的吸收度。
全文摘要
本发明涉及的是对降血脂药物虎杖片的鉴别检测方法:将无糖衣的待测药片粉碎后置索式提取器中,用氯仿水浴加热回流下提取至氯仿无黄色止,分离氯仿提取液另置备用;残渣以含量至少95%的乙醇用索式提取器水浴继续回流3小时,乙醇提取液浓缩至100毫升以内后用95%乙醇定容稀释。将上述氯仿提取液和乙醇定容稀释液用分光光度法分别测定在520纳米和306纳米波长处的吸收度,再分别由对照用大黄素和白藜芦醇甙标准对照物的吸收度或标准吸收度曲线换算其各自的相应含量。
文档编号G01N33/15GK1361423SQ00120628
公开日2002年7月31日 申请日期2000年12月26日 优先权日2000年12月26日
发明者尹述凡, 肖华, 万小川, 李一忠, 夏都灵, 唐成贵, 卢燕君, 张永昱, 陈乐 申请人:四川巴中普瑞制药有限公司