本发明属于医药技术领域，具体涉及一种注射用托拉塞米的制备方法。
背景技术：
托拉塞米，分子式c16h20n4o3s，是一种新型长效毗啶磺酰脲类利尿剂。1993年在欧洲、美国和日本等国家和地区上市，2003年于我国上市。主要用于治疗水肿性疾病，如充血性心力衰竭、肝硬化腹水、肾脏疾病所导致的水肿，能够迅速利尿。10mg托拉塞米的利尿作用与20-40mg呋塞米相当，相较下，托拉塞米的心血管不良反应发生的概率更低，从药物经济学角度分析，托拉塞米能够缩短住院时间和总住院花费，与已广泛应用于治疗充血性心力衰竭和水肿的袢利尿药物呋塞米相较，托拉塞米具有临床和经济上的优势。
托拉塞米抑制亨氏袢对na+和cl-的重吸收，而远端伸段不能完全代偿，进而产生排na+和利尿的作用。虽然托拉塞米的利尿作用强，但排k+作用弱于其他袢利尿药，不会出现袢利尿药常见的不良反应——低血钾。上述的优点都使得托拉塞米成为了新一代的高效髓袢利尿剂，得以在临床上被广泛地推广使用。
为了提升注射用托拉塞米的储存的稳定性，目前常使用冻干的方法制备注射用托拉塞米，干燥后的药品十分稳定，便于长时间贮存，且内部形成多孔的海绵状，具有良好的复水性。如申请号为201710513464.6的中国发明专利，公开了一种注射用托拉塞米及其制备工艺，使用冷冻干燥的方法，于2.5-5h内全速降温至-40℃保温2-4h；真空度25pa以下，4h内升至-20℃，保温4h；再在4h内升温至0℃，保温2h，4h内温度升温至20-25℃，保温2-4h，制备得到托拉塞米冻干粉针制剂。再如申请号为201611125793.5的中国发明专利公开了一种注射用托拉塞米冻干制剂冻干曲线优化的方法，-40℃，2h；-30℃，保持30min；-15℃，保持4h；-5℃，保持2h；10℃，保持1h；40℃解析干燥，保持2小时。但目前托拉塞米冻干制剂仍存在热稳定性差，以及复溶速度不够快的问题。
技术实现要素：
为了克服上述现有技术的缺陷，本发明所要解决的技术问题是：提供一种热稳定性强且复溶快的注射用托拉塞米的制备方法。
为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：注射用托拉塞米的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、托拉塞米溶液进行预冻，得到预冻后的托拉塞米；
步骤2、预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0-5℃，真空度90-100mbar，保持4h；二级：温度8-12℃，真空度300-500mbar，保持3h，三级：温度8-12℃，真空度50-70mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为5-8℃/h；
步骤3、升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，得到注射用托拉塞米。
本发明的有益效果在于：本发明提供的注射用托拉塞米的制备方法，通过对升华干燥工艺的改进，采用三级升华，控制每一级的真空度和保温温度以及升温速率，降低了废品量，使得所得具有良好的溶解性和优异的复溶性能，所得成品同时还具有良好的稳定性和均一性，在贮存和运输过程品质更加稳定，本发明提供的制备方法，重复性好，废品量低，易于实现工业化生产。
具体实施方式
为详细说明本发明的技术内容、所实现目的及效果，以下结合实施方式予以说明。
本发明最关键的构思在于：通过对真空干燥过程中升华干燥工艺的改进，采用三级升华，精确控制每一级的真空度和保温温度以及升温速率，提高所得成品注射用托拉塞米的稳定性，缩短复溶时间。
本发明的注射用托拉塞米的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、托拉塞米溶液进行预冻，得到预冻后的托拉塞米；
步骤2、预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0-5℃，真空度90-100mbar，保持4h；二级：温度8-12℃，真空度300-500mbar，保持3h，三级：温度8-12℃，真空度50-70mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为5-8℃/h；
步骤3、升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，得到注射用托拉塞米。
从上述描述可知，本发明的有益效果在于：发明人发现，在通过真空干燥制备注射用托拉塞米冻干剂时，升华干燥的工艺会显著影响所得成品的复溶时间，而预冻和解吸干燥影响较小。本发明提供的注射用托拉塞米的制备方法，通过对升华干燥工艺的改进，采用三级升华，控制每一级的真空度和保温温度以及升温速率，降低了废品量，使得所得具有良好的溶解性和优异的复溶性能，所得成品同时还具有良好的稳定性和均一性，在贮存和运输过程品质更加稳定，本发明提供的制备方法，重复性好，废品量低，易于实现工业化生产。
进一步的，所述逐步后1中托拉塞米溶液的制备方法为：甘露醇加注射用水溶解得到甘露醇溶液，备用；将托拉塞米溶解于碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水，过滤，分装。
由上述描述可知，使用碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液溶解托拉塞米制备得到的托拉塞米溶液，一定程度上有助于提升成品复溶的效果，降低复溶所需的时间。
进一步的，所述碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液的ph为9.51-11.5，使用量为总体积的30-75％。
由上述描述可知，上述ph范围的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液，利于后期进行ph的调节，使得最终溶液ph稳定在9.5-11.5之间，有利于提升溶液的稳定性。
进一步的，所述步骤1预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率18-25℃/h。
进一步的，所述步骤3中解吸干燥的温度20-25℃，真空度50-70mbar，保持4h。
进一步的，注射用托拉塞米的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、甘露醇加注射用水溶解得到甘露醇溶液，备用；将托拉塞米溶解于碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水，过滤，分装，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度100mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度400mbar，保持3h，三级：温度8℃，真空度70mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为8℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度25℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
实施例1：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于1000ml的ph为10.53的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度100mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度400mbar，保持3h，三级：温度8℃，真空度70mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为8℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度25℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
实施例2：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于600ml的ph为11.5的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率18℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度5℃，真空度90mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度300mbar，保持3h，三级：温度12℃，真空度50mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为5℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度20℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
实施例3：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于1500ml的ph为9.51的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率20℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度100mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度500mbar，保持3h，三级：温度12℃，真空度60mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为6℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度22℃，真空度70mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
对比例1：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米和20g碳酸氢钠溶解于1000ml的注射用水中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-40℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行升华干燥，真空度20pa，5℃/h的速率升温至-20℃，保持12h，5℃/h的速率再升温至0℃，保持2h，5℃/h的速率再升温至20℃，保持4h，得到注射用托拉塞米。
对比例2：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于1000ml的ph为10.53的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度100mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度100mbar，保持3h，三级：温度8℃，真空度100mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为8℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度25℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
对比例3：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于1000ml的ph为10.53的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度100mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度400mbar，保持3h，三级：温度8℃，真空度70mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为15℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度25℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
对比例4：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于1000ml的ph为10.53的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度-20℃，真空度100mbar，保持4h；二级：温度0℃，真空度400mbar，保持3h，三级：温度20℃，真空度70mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为8℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度40℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
对比例5：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米和20g碳酸氢钠溶解于1000ml的注射用水中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度100mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度400mbar，保持3h，三级：温度8℃，真空度70mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为8℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度25℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
对比例6：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于1000ml的ph为10.53的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度70mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度100mbar，保持3h，三级：温度8℃，真空度400mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为8℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度25℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
对比例7：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于1000ml的ph为10.53的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度400mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度100mbar，保持3h，三级：温度8℃，真空度70mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为8℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度25℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
对比例8：
注射用托拉塞米的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、50g甘露醇加200ml注射用水溶解，加入0.1％的针剂用活性碳搅拌30min，脱碳后得到甘露醇溶液，备用；将10g托拉塞米溶解于1000ml的ph为10.53的0.05mol/l的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中，然后加入甘露醇溶液，补加注射用水至总体积2000ml，加入0.05％的针用活性炭，搅拌15min，脱碳后经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液质检合格后，分装1000瓶于西林瓶中，得托拉塞米溶液；
步骤2、将步骤1所得托拉塞米溶液进行预冻，预冻的温度-45℃，保持2.5h，降温速率25℃/h，得到预冻后的托拉塞米；
步骤3、将步骤2所得预冻后的托拉塞米进行三级升华干燥，一级：温度0℃，真空度100mbar，保持4h；二级：温度8℃，真空度70mbar，保持3h，三级：温度8℃，真空度400mbar，保持6h，得到升华干燥后的托拉塞米；
其中，升华干燥过程中的升温速率为8℃/h；
步骤4、将步骤3升华干燥后的托拉塞米进行解吸干燥，解吸干燥的温度25℃，真空度50mbar，保持4h，得到注射用托拉塞米。
分别使用实施例1-3和对比例1-8各生产3个批次的产品，分别计算废品量(瓶)，每组取100瓶进行复溶，复溶的时间范围及平均值(取小数点后一位)见表1和表2所示。
表1
表2
从表1中可以看出，实施例1-3的废品量和显著低于对比例。复溶时间显著小于对比例，说明本发明提供的注射用托拉塞米的制备方法，能够显著降低成品的废品量，降低生产成本，提升复溶的效果，相较于恒定的真空度，真空度先升高后降低的方法有助于降低废品量同时达到缩短复溶时间的效果，且可以看出温度差的提高并没有显著影响，而较低的温度差也有利于降低冻干所消耗的能量，有助于降低成本；升温速率会较为显著的影响到废品量，且相较于现有技术真空度25pa以下的真空条件，本发明通过对升华干燥工艺的改进，进一步降低了废品量提升了复溶效果，有助于降低真空干燥的成本。
对实施例1的三个批次的成品进行稳定性测试。
将成品置于密封洁净容器中，于60±2℃温度下放置10d，于第5d和第10d取样，按稳定性重点考察项目进行检测，试验结果与0d比较；
将成品置于密封洁净容器中，在25±2℃相对湿度90±5％的条件下放置10d，于第5d和第10d取样，按稳定性重点考察项目进行检测，试验结果与0d比较；
将成品置于密封洁净容器中，于照度为4500lx的条件下放置10d，于第5d和第10d取样，按稳定性重点考察项目进行检测，试验结果与0d比较。
不溶性微粒采用光阻法进行检测；
上述稳定性测试的结果见表3所示。
表3
对实施例1-3和对比例1-8的废品量最低的一个批次的产品的稳定性进行检测，将上述成品置于密封结晶容器中，于40℃±2℃，75％rh±5％rh条件下放置6个月(第180天)，与于第0天和6个月末取样进行检测，结果见表4所示。
表4
从表3-4中可以看出，本发明提供的注射用托拉塞米的制备方法制备所得注射用托拉塞米的热稳定性良好。
综上所述，本发明提供的注射用托拉塞米的制备方法，通过对升华干燥工艺的改进，采用三级升华，控制每一级的真空度和保温温度以及升温速率，降低了废品量，使得所得具有良好的溶解性和优异的复溶性能，所得成品同时还具有良好的稳定性和均一性，在贮存和运输过程品质更加稳定，本发明提供的制备方法，重复性好，废品量低，易于实现工业化生产。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等同变换，或直接或间接运用在相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。