酸性糖蛋白ORM在制备提高胰岛素敏感性和降低血糖的药物中的应用

酸性糖蛋白orm在制备提高胰岛素敏感性和降低血糖的药物中的应用
技术领域
1.本发明涉及医药技术领域，具体地说，是酸性糖蛋白orm在制备降低血糖和提高胰岛素敏感性的药物中的应用。


背景技术：

2.酸性糖蛋白orosomucoid(orm，α1-acid glycoprotein)是一种急性期蛋白，为血清黏蛋白的主要成分，是人类血浆中含糖量最高、酸性最强的糖蛋白，分子量为37-54kda，糖基化程度较高(45％)。酸性糖蛋白orm具有多种活性，包括免疫调节、药物结合和转运、维持毛细血管屏障作用等。
3.发明人前期orm是一个内源性抗疲劳蛋白，可作为慢性疲劳综合征的分子标记物，并且外源性给予orm可显著提高小鼠强迫游泳和跑台实验的时间以及离体骨骼肌耐力。发明人同时发现orm还可显著降低小鼠的摄食量和体重，具有治疗肥胖的潜在应用。发明人在上述研究基础上，已针对酸性糖蛋白orm的抗疲劳作用，降低摄食和减肥作用分别申请了发明专利并已获授权。专利1：α1-酸性糖蛋白的应用，专利号：zl201110002009.2；专利2：α1-酸性糖蛋白在制备减肥药物中的应用，专利号：zl201510230870.2。(参考文献1.lei h,sun y,luo z,et al.fatigue-induced orosomucoid 1 acts on c-c chemokine receptor type 5 to enhance muscle endurance.sci rep.2016；6:18839.；2.qin z,wan jj,sun y,et al.orm promotes skeletal muscle glycogen accumulation via ccr5-activated ampk pathway in mice.front pharmacol.2016；7:302.；3.sun y,yang yl,qin z,et al.the acute-phase protein orosomucoid regulates food intake and energy homeostasis via leptin receptor signaling pathway.diabetes.2016；65:1630-1641)。
4.目前，尚无酸性糖蛋白orm对提高胰岛素敏感性和降低血糖方面的任何报道。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供酸性糖蛋白orm的新用途，具体是酸性糖蛋白orm在降糖和胰岛素增敏中的新的应用。
6.本发明的第一方面，提供酸性糖蛋白orm在制备降低血糖和/或提高胰岛素敏感性的药物中的应用。
7.所述的酸性糖蛋白orm(orosomucoid，α1-acid glycoprotein)是人体内存在的一种内源性酸性糖蛋白，可从美国sigma-aldrich公司购得。
8.进一步的，所述的药物中，酸性糖蛋白orm的给药剂量为50mg/kg。
9.本发明的第二方面，提供酸性糖蛋白orm在制备降低血糖和/或提高胰岛素敏感性的食品中的应用。
10.本发明的第三方面，所述的酸性糖蛋白orm在制备降低血糖和/或提高胰岛素敏感
性的保健品中的应用。
11.本发明的第四方面，提供酸性糖蛋白orm在制备治疗糖尿病的药物、食品和保健品中的应用。
12.进一步的，所述的酸性糖蛋白orm通过降低血糖和提高胰岛素敏感性在制备治疗糖尿病的药物中的应用。
13.本发明的第五方面，提供一种降低血糖和提高胰岛素敏感性的药物，其包含：
14.(a)有效量的酸性糖蛋白orm；以及
15.(b)药学上或免疫学上可接受的载体或赋形剂。
16.本发明的实验证明：动物腹腔注射orm后，可以显著降低正常小鼠和db/db鼠的血糖水平，还可以显著提高正常小鼠和db/db鼠的胰岛素敏感性。
17.相比于现有技术，本发明的有益效果如下：
18.本发明提供了酸性糖蛋白orm在制备降低血糖和提高胰岛素敏感性的药物中的应用，还提供了酸性糖蛋白orm在制备治疗糖尿病的药物中的应用，由于酸性糖蛋白orm是机体内源性蛋白质，因此作为药物的安全性很高。
附图说明
19.图1是正常c57bl/6j小鼠尾静脉注射orm溶液后血糖浓度变化对比实验。其中，空心点折线代表对照组；实心点折线代表orm实验组。
20.图2是患糖尿病的db/db鼠尾静脉注射orm溶液后血糖浓度变化对比实验。其中，空心点折线代表对照组；实心点折线代表orm实验组。
21.图3是正常c57bl/6j小鼠腹腔注射胰岛素后血糖浓度变化对比实验(胰岛素耐量实验)。其中，空心点折线代表对照组；实心点折线代表orm实验组。
22.图4是患糖尿病的db/db鼠腹腔注射胰岛素后血糖浓度变化对比实验(胰岛素耐量实验)。其中，空心点折线代表对照组；实心点折线代表orm实验组。
具体实施方式
23.下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。
24.下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
25.实验材料：
26.orm购于美国sigma-aldrich公司；
27.c57bl/6j小鼠，雄性，8周龄，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司；
28.db/db鼠，雄性，8周龄，购自常州卡文斯实验动物有限公司。
29.实施例1：正常c57bl/6j小鼠尾静脉注射orm溶液后血糖浓度变化对比实验。
30.1.实验方法：
31.(1)c57bl/6j小鼠随机分为2组(orm实验组和对照组)，每组n＝6-8。
32.(2)orm实验组小鼠提前24小时尾静脉注射orm溶液(50mg/kg)，对照组同时注射等计量体积的生理盐水。
33.(3)2组小鼠于第二天早上8:00开始禁食，禁食6小时。
34.(4)禁食后称取小鼠体重。
35.(5)尾尖采血，第一滴血弃之，用鱼跃血糖仪和血糖试纸测量小鼠血糖，并做好记录。
36.(6)然后测量c57bl/6j小鼠30min、120min两个时间点血糖浓度，并做好记录。
37.(7)根据所测血糖值绘制血糖曲线。
38.2.结果与分析
39.图1是正常c57bl/6j小鼠尾静脉注射orm溶液后血糖浓度变化对比实验。其中，空心点折线代表对照组；实心点折线代表orm实验组。
40.由图1可见，尾静脉注射orm后，可以显著降低正常小鼠的血糖水平。
41.表1
[0042][0043]
注：**表示与对照组比较，p＜0.01；****表示与对照组比较，p＜0.0001。
[0044]
实施例2：患糖尿病的db/db鼠尾静脉注射orm溶液后血糖浓度变化对比实验。
[0045]
1.实验方法：
[0046]
(1)患糖尿病的db/db小鼠随机分为2组(orm实验组和对照组)每组n＝5。
[0047]
(2)orm实验组小鼠提前24小时尾静脉注射orm溶液(50mg/kg)，对照组同时注射等计量体积的生理盐水。
[0048]
(3)2组小鼠于第二天早上8:00开始禁食，禁食6小时。
[0049]
(4)禁食后称取小鼠体重。
[0050]
(5)尾尖采血，第一滴血弃之，用鱼跃血糖仪和血糖试纸测量小鼠血糖，并做好记录。
[0051]
(6)然后测量db/db小鼠0.5h、2h、4h、6h四个时间点血糖浓度，并做好记录。
[0052]
(6)根据所测血糖值绘制血糖曲线。
[0053]
2.结果与分析
[0054]
图2是患糖尿病的db/db小鼠尾静脉注射orm溶液后血糖浓度变化对比实验。其中，空心点折线代表对照组；实心点折线代表orm实验组。
[0055]
由图2可见，尾静脉注射orm后，可以显著降低患糖尿病的db/db小鼠的血糖水平。
[0056]
表2
[0057][0058]
注：**表示与对照组比较，p＜0.01。
[0059]
实施例3：正常c57bl/6j小鼠腹腔注射胰岛素后血糖浓度变化对比实验(胰岛素耐量实验)。
[0060]
1.实验方法
[0061]
(1)c57bl/6j小鼠随机分为2组(orm实验组和对照组)，每组n＝7-8。
[0062]
(2)orm实验组小鼠提前24小时腹腔注射orm溶液(50mg/kg)，对照组同时注射等计量体积的生理盐水。
[0063]
(3)2组小鼠于第二天早上8:00开始禁食，禁食6小时。
[0064]
(4)禁食后称取小鼠体重。
[0065]
(5)尾尖采血，第一滴血弃之，用鱼跃血糖仪和血糖试纸测量小鼠血糖，并做好记录。
[0066]
(6)c57bl/6j小鼠腹腔注射胰岛素(0.75u/kg)，然后测量30min、60min、90min、120min四个时间点血糖浓度，并做好记录。
[0067]
(7)根据所测血糖值绘制血糖曲线。
[0068]
2.结果与分析
[0069]
图3是正常c57bl/6j小鼠腹腔注射胰岛素后血糖浓度变化对比实验。其中，空心点折线代表对照组；实心点折线代表orm实验组。
[0070]
由图3可见，腹腔注射胰岛素后，正常c57bl/6j小鼠的orm实验组与对照组血糖浓度变化在15min后无显著性差异。说明orm不影响正常小鼠的胰岛素敏感性。
[0071]
表3
[0072][0073]
注：*表示与对照组比较，p＜0.05。
[0074]
实施例4：患糖尿病的db/db鼠腹腔注射胰岛素后血糖浓度变化对比实验(胰岛素耐量实验)。
[0075]
1.实验方法：
[0076]
(1)患糖尿病的db/db小鼠随机分为2组(orm实验组和对照组)，每组n＝6。
[0077]
(2)orm实验组小鼠提前24小时腹腔注射orm溶液(50mg/kg)，对照组同时注射等计量体积的生理盐水。
[0078]
(3)2组小鼠于第二天早上8:00开始禁食，禁食6小时。
[0079]
(4)禁食后称取小鼠体重。
[0080]
(5)尾尖采血，第一滴血弃之，用鱼跃血糖仪和血糖试纸测量小鼠血糖，并做好记录。
[0081]
(6)db/db小鼠腹腔注射胰岛素(0.75u/kg)，然后测量30min、60min、90min、120min四个时间点血糖浓度，并做好记录。
[0082]
(7)根据所测血糖值绘制血糖曲线。
[0083]
2.结果与分析
[0084]
图4是患糖尿病的db/db鼠腹腔注射胰岛素后血糖浓度变化对比实验。其中，空心点折线代表对照组；实心点折线代表orm实验组。
[0085]
由图4可见，腹腔注射胰岛素后，orm实验组的糖尿病小鼠15min后血糖降低变化与对照组有显著差异，说明orm可提高糖尿病小鼠的胰岛素敏感性。
[0086]
表4
[0087][0088]
注：*表示与对照组比较，p＜0.05；***表示与对照组比较，p＜0.001。
[0089]
以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本技术权利要求所限定的范围内。