一种新型蔗糖铁复合物及其制备方法与流程

1.本发明属于制药领域，涉及一种新型蔗糖铁复合物及其制备方法。


背景技术：

2.铁是人体必须的微量元素，缺铁的治疗对缺铁性贫血的病人是十分必要的，静脉注射铁剂是治疗多种缺铁性疾病的有效手段，如严重的缺铁性贫血、肠内铁吸收障碍、肠内铁吸收不耐受、口服无效的缺铁性疾病(如透析患者)。
3.蔗糖铁复合物是目前广泛应用的抗缺铁性贫血的补铁剂，相比传统意义上的口服补铁剂(如硫酸亚铁，富马酸铁等)，具有吸收好、副作用低的优点，特别适用于肾脏疾病血液透析所导致的缺铁性贫血。
4.蔗糖铁复合物原研厂家为瑞士维福国际公司，通常而言，原研厂家详细的制备工艺参数都是企业的核心机密，无法通过公开渠道获得。本实验室参考现有文献报道的制备方法制备蔗糖铁注射液，结果发现产品t75结果远大于20分钟，而根据原研厂家维福公司报道的专利cn1685227b，其中要求蔗糖铁体外t75应不超过20分钟。
5.蔗糖铁复合物区别于常规的小分子化合物，在国际上通常将其划分为非生物复杂类化合物(non-biological complexes drugs，简称nbcds)，由于其化学结构难以准确表征，美国食品和药品监督管理局(简称fda)在2013年发布了针对本品仿制药开发的技术指南《draft duides on iron sucrose》，对本品的体内生物等效性研究提出了具体的要求：
6.研究类型：空腹
7.设计：单剂量、随机、平行的体内研究
8.规格：100mg/5ml(剂量100mg)
9.研究对象：健康男性和女性，普通人群
10.额外注释：该产品需不经稀释地、在超过5分钟的时间缓慢静脉注射100mg。
11.(在适当的体液中)需测定的被分析物：测定如下的每一项：
12.1.血清[总铁]
[0013]
2.血清[转铁蛋白结合铁](tbi)
[0014]
生物等效性(90％置信区间)基于：
[0015]
·
在所有时间点测定的总铁和转铁蛋白结合铁的浓度差异的最大值；以及
[0016]
·
总铁的auc和转铁蛋白结合铁的auc的差异。


技术实现要素：

[0017]
本发明的目的是提供一种新型蔗糖铁复合物及其制备方法，本发明提供的蔗糖铁复合物与原研药物体内生物等效，同时制备方法较现有公开技术具有条件温和、生产设备要求低、能耗低、操作简单等特点。
[0018]
本实验室研究人员通过反复试验，在蔗糖铁原料药工艺开发过程中意外发现，当蔗糖中加入葡萄糖、麦芽糖、糊精、糖浆的任意一种后，在较现有公开技术更温和的络合反
应条件下，如更低的络合反应温度下，制得的蔗糖铁原料药与原研药物体内生物等效。我们认为上述添加的糖组分在强碱性条件下产生的降解产物可能与蔗糖铁复合物存在协同作用而影响体内生物过程，同时降低了反应活化能。目前，现有公开技术均存在制备工艺条件较苛刻、能耗较高的缺点，且均未表明产物与原研药物的体内生物等效性。
[0019]
本发明的目的可以通过如下技术方案实现：
[0020]
具体的，本发明涉及一种用于制备注射剂的蔗糖铁复合物，包含与氢氧化铁复合的游离糖以及少量与氢氧化铁复合的结合糖，其必须同时满足以下条件：蔗糖铁复合物中(1)铁含量与总糖含量的质量比为1:11.9至1:16.5；(2)蔗糖铁复合物ph在9.0—11.0；(3)游离糖的质量百分含量介于80-95％；(4)复合物的氧化还原t75小于20分钟。
[0021]
优选的用于制备注射剂的蔗糖铁复合物，包含与氢氧化铁复合的游离糖以及少量与氢氧化铁复合的结合糖，其同时满足以下条件：蔗糖铁复合物中(1)铁含量与总糖含量的比例为1:12.5至1:14.6；(2)蔗糖铁复合物ph在9.0—10.5；(3)游离糖的质量百分含量介于83-95％；(4)复合物的氧化还原t75小于18分钟。
[0022]
进一步优选的用于制备注射剂的蔗糖铁复合物，包含与氢氧化铁复合的游离糖糖以及少量与氢氧化铁复合的结合糖，其同时满足以下条件：(1)铁含量与总糖含量的比例为1:12.5至1:14.0；(2)蔗糖铁复合物ph在9.0—10.0；(3)游离糖的质量百分含量介于83-92％；(4)复合物的氧化还原t75小于15分钟。
[0023]
进一步优选，本发明所述蔗糖铁复合物通过以下方法制备得到：
[0024]
(1)将铁盐溶解用1-1.2倍重量的纯化水溶解，然后加入铁盐重量1.7-2倍当量的碳酸钠溶液；
[0025]
(2)室温下反应11-14个小时，再用碳酸钠溶液调ph值9.0-13.5；
[0026]
(3)制备的氢氧化氧铁胶体溶液过滤，然后再按照一定重量比加入多糖混合物与纯化水，接着用氢氧化钠溶液调ph值；所述的多糖混合物由两种糖组成，其中之一为蔗糖，另一种为麦芽糖、葡萄糖、糊精、糖浆的任意一种，两种糖的重量比为10.0:1-17.0:1；
[0027]
(3)升温络合，直至反应温度上升到50-80℃，再继续反应12-24小时后，反应结束，料液冷却后出料；
[0028]
(4)上述方法制备的原料药用纯化水按每1ml含20mg铁配成药液，药液再经过121℃高温灭菌15分钟后即得到最终的制剂产品。
[0029]
本发明所述蔗糖铁复合物的制备方法，包含以下步骤：
[0030]
(1)将铁盐溶解用1-1.2倍重量的纯化水溶解，然后加入铁盐重量1.7-2倍当量的碳酸钠溶液；
[0031]
(2)室温下反应11-14个小时，再用碳酸钠溶液调ph值9.0-13.5；
[0032]
(3)制备的氢氧化氧铁胶体溶液过滤，然后再按照一定重量比加入多糖混合物与纯化水，接着用氢氧化钠溶液调ph值；所述的多糖混合物由两种糖组成，其中之一为蔗糖，另一种为麦芽糖、葡萄糖、糊精、糖浆的任意一种，两种糖的重量比为13.0:1-17.0:1；
[0033]
(3)升温络合，直至反应温度上升到50-80℃，再继续反应12-24小时后，反应结束，料液冷却后出料；
[0034]
(4)上述方法制备的原料药用纯化水按每1ml含20mg铁配成药液，药液再经过121℃高温灭菌15分钟后即得到最终的制剂产品。
[0035]
作为本发明的一种优选，步骤(1)所述水溶性铁盐为氯化铁。
[0036]
作为本发明的一种优选，步骤(3)多糖与铁(以铁计)的投加重量比为10.5：1至18.5：1，氢氧化钠溶液调ph值8.5至10.5；步骤(4)步骤(4)所述反应温度50-70℃，反应时间12-16小时。
[0037]
作为本发明的进一步优选，步骤(3)糖与铁的投加重量比为11.0：1至14.5：1，氢氧化钠溶液调ph值9.0至10.5；步骤(4)所述反应温度50-65℃，反应时间12-14小时。
[0038]
作为本发明的更进一步优选，步骤(3)所述糖与铁的投加重量比为11.0：1至13.0：1，氢氧化钠溶液调ph值9.5至10.5；步骤(4)所述反应温度55-65℃，反应时间12-13小时。
[0039]
本发明的有益效果：
[0040]
与现有技术相比，本发明提供一种新型的蔗糖铁复合物及其制备方法。所述蔗糖铁复合物与原研药物体内生物等效，且制备方法具有工艺条件温和、设备要求低、能耗低、操作简单等优点，能够使其在临床用药上替代原研药物，有效降低患者的用药成本。
具体实施例
[0041]
实施例1
[0042]
将5kg三氯化铁和5kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液9.5kg，室温下反应12小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.2。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入24kg的多糖混合物(蔗糖和葡萄糖重量比为10.3:1)、24kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值8.7，升温络合，75℃反应18小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0043]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0044]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果285mg/ml265mg/ml14.3:110.719.3分钟
[0045]
实施例2
[0046]
将5kg三氯化铁和6kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液9.0kg，室温下反应11小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.8。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入18.8kg的多糖混合物(蔗糖和麦芽糖重量比为13.8:1)、18.8kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值8.7，升温络合，70℃反应16小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0047]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0048]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果278mg/ml259mg/ml13.6:110.117.5分钟
[0049]
实施例3
[0050]
将5kg三氯化铁和5.4kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液9.6kg，室温下反应12小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.2。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入31.5kg的多糖混合物(蔗糖和玉米糖浆重量比13.8:1)、31.5kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值9.2，升温络合，55℃反应14小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0051]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0052]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果275mg/ml250mg/ml13.8:110.015.9分钟
[0053]
实施例4
[0054]
将5kg三氯化铁和6kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液9.9kg，室温下反应12小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.2。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入20.7kg的多糖混合物(蔗糖和麦芽糊精重量比为15.8:1)、23.5kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值10.0，升温络合，58℃反应12小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0055]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0056]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果260mg/ml234mg/ml13.8:19.511.3分钟
[0057]
实施例5
[0058]
将5kg三氯化铁和5.6kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液8.8kg，室温下反应13小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.2。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入27kg的多糖混合物(蔗糖和葡萄糖重量比为16.8:1)、27kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值10.4，升温络合，78℃反应20小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0059]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0060]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果285mg/ml268mg/ml14.3:110.819.0分钟
[0061]
实施例6
[0062]
将5kg三氯化铁和6kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液10kg，室温下反应12小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.2。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入25kg的多糖混合物(蔗糖和麦芽糊精重量比为14.0:1)、25kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值8.7，升温络合，65℃反应14小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0063]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0064]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果289mg/ml265mg/ml14.5:19.316.5分钟
[0065]
实施例7
[0066]
将5kg三氯化铁和6kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液9.7kg，室温下反应11小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.2。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入24kg的多糖混合物(蔗糖和玉米糖浆重量比为13.2:1)、24kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值8.6，升温络合，80℃反应24小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0067]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0068]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果296mg/ml275mg/ml14.8:111.319.7分钟
[0069]
实施例8
[0070]
将5kg三氯化铁和5.2kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液10kg，室温下反应12小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.2。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入22.5kg的多糖混合物(蔗糖和葡萄糖重量比为13.1:1)、22.5kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值8.9，升温络合，70℃反应16小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0071]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0072]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果245mg/ml200mg/ml12.3:110.316.9分钟
[0073]
实施例9
[0074]
将5kg三氯化铁和6kg纯化水加入到反应釜中，加入20％碳酸钠溶液10kg，室温下反应13小时，再用20％碳酸钠溶液调ph值13.2。制备的氢氧化氧铁胶体过滤后转移到反应釜中，再加入22.5kg的蔗糖、22.5kg纯化水到反应釜中，再用20％氢氧化钠溶液调ph值9.5，升温络合，63℃反应15小时，反应后料液冷却至室温，用纯化水配制每1ml含20mg铁的料液，再经过滤、121℃灭菌15分钟制备成品。
[0075]
样品测定总糖含量、游离糖含量、糖铁比、ph、t75，结果如下：
[0076]
项目总糖含量游离糖含量糖铁比pht75结果280mg/ml263mg/ml14.0:110.835.6分钟
[0077]
选择实施例四所得的样品，原研药物选择国内上市的蔗糖铁注射液(商品名：维乐福，浓度：20mgfe/ml，有效期：2022.01)，选择健康人群，每组12例，在体内开展生物等效性试验，试验结果如下表：
[0078][0079]
由上表可知，自制产品和原研药物各pk参数差异比值90％置信区间均落在80.00-125.00％等效区间内，说明自制产品和原研药物体内生物等效。
[0080]
本发明所涉及的名词和方法：
[0081]
1、游离糖：蔗糖铁复合物中未与氢氧化铁胶体或羟基氧化铁结合的糖。
[0082]
2、结合糖：蔗糖铁复合物中与氢氧化铁胶体或羟基氧化铁结合的糖。
[0083]
3、ti：血液中总铁。
[0084]
4、tbi：血液中转铁蛋白结合铁。
[0085]
5、cmax：最高血药浓度(以铁计)。
[0086]
6、auc
0-t,ti-tbi
：0到t时血药浓度峰面积。
[0087]
7、auc
0-∞,ti-tbi
：0到无穷大时血药浓度峰面积。
[0088]
8、游离糖测定方法：配制20mg铁/ml的蔗糖铁复合物溶液，置500-1,000da透析膜中，并将透析袋置纯化水中放置24h，测定透析前、后蔗糖铁复合物溶液中的总糖含量，总糖含量之差即为游离糖含量。
[0089]
9、总糖测定方法：
[0090]
本方法参照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录v d)测定。
[0091]
色谱条件与系统适用性试验：以苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为填充剂，以水为流动相；柱温50℃；流速0.5ml/min；示差折光检测器，检测器温度为50℃。
[0092]
对照品溶液的制备：精密称取葡萄糖对照，加水溶解并定量稀释1ml含葡萄糖为0.5、0.6、0.8、1.0、1.5和2.0mg的溶液。
[0093]
供试品溶液的制备：取样品0.2g，精密称定，置100ml盐水瓶中，加25ml的5％硫酸溶液(m/v)使溶解，加塞密封，置121℃高压灭菌锅中加热10分钟，放冷至室温，转移到100ml的烧杯中，加10ml的10％氢氧化钠溶液，并用10％的氢氧化钠调ph至5.5～6.5，然后转移至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，用0.02μm的滤膜滤过，取续滤液，即得。
[0094]
测定法取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，通过标准曲线计算葡萄糖含量。
[0095]
10、t75测试方法
[0096]
溶液a配制：称取9.00g氯化钠置1000ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，制备成0.9％的氯化钠稀释溶液(溶液a)，然后将其溶液保存在37℃水浴中。
[0097]
溶液b配制：称取约8.8g抗坏血酸置50ml容量瓶中，然后加入需要量的溶液a，同样将该溶液保存在37℃水浴中。
[0098]
蔗糖铁注射液储备液制备：精密量取样品溶液5ml置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，将该溶液保存在37℃水浴中。
[0099]
监测溶液的制备：待上述溶液温度稳定在37℃
±
1℃时，分别量取20.0ml溶液a、4.0ml溶液b和1.0ml蔗糖铁注射液贮备溶液加入25ml容量瓶中。将该溶液充分混合，然后取适量转移至在设定为37℃
±
1℃的控温uv/vis分光光度计中的1cm石英池中，以5分钟的时间间隔测定在450nm下的吸收，总反应时间为80分钟，选用溶液a作为空白校正。
[0100]
线性方程拟定：以“log(三价铁浓度百分数)为纵坐标，时间为横坐标(60分钟内)，进行线性回归，相关系数应不低于0.98。计算公式：
[0101]
三价铁浓度百分数(％)＝100*【(吸收度测定值-吸收度终值)/(吸收度初始值-吸收度终值)】
[0102]
t75＝(1.3979-b)/m
[0103]
其中b代表上述“log(三价铁浓度百分数)”对“时间”线性方程在y轴上截距；m为线性方程的斜率；1.3979为在75％还原时间点(即三价铁浓度百分数＝25％)的三价铁浓度百分数的绝对值。