一种菜用大豆加工方法及其在治疗糖尿病中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及菜用大豆的加工方法及其在预防、治疗糖尿病方面的应用。
【背景技术】
[0002] 糖尿病及其并发症是威胁人类健康的主要疾病之一，死亡率仅次于肿瘤和心血管 疾病，目前在各种疾病中居于第三位。糖尿病主要分为1型和2型糖尿病，2型糖尿病约占 90%。近年，全球糖尿病患者人数以惊人的速度在迅速增长，据预测到2025年世界糖尿病 患病总人数将达3亿以上。糖尿病已经成为了严重影响人类生活和健康的主要公共卫生问 题。
[0003] 菜用大豆（Glycine max L. Merr)也叫毛豆，日本称枝豆，是指在R6 (鼓粒盛 期）至R7(初熟期）生育期间采青作为食用的大豆，属大豆的专用型品种。此时豆荚鼓粒 饱满，荚色、籽粒呈翠绿色、籽粒还没有达到完全成熟时，但籽粒填充达到荚长的80 %~ 90 % [1]。毛豆富含植物蛋白质、维生素、矿物质、纤维以及大豆异黄酮[2]。研究发现，毛豆 对肥胖、高血脂、高血压、等症有预防和辅助治疗作用，并因其独特的口感和风味，被誉为 最美味、最富营养的绿色保健蔬菜，是深受亚洲人喜爱的特色蔬菜 [3]。如今，毛豆正从亚 洲市场逐渐风靡欧美市场。中国也是毛豆的生产和消费大国，随着生活水平的提高，毛豆 的需求量必将进一步增加。
[0004] 据文献+6]报道，大豆或大豆异黄酮有助于防止2型糖尿病患者的发展。
[0005] 大豆异黄酮（soyaisoflavones)是大豆等豆科植物生长过程中形成的一类次生 代谢物，迄今为止有12种异构体，其中3种为苷元形式即染料木素（genistein)、大 豆黄素 （daidzein )和黄豆黄素（glycitein)，9种为葡糖苷形式[7]。据报道，大豆异 黄酮苷元比糖苷更容易被人体吸收 [8]，并且大豆苷元和染料木素是有益于健康的主要成 分[9]。大豆异黄酮有益于减轻糖尿病患者的体重以及控制患者血浆胰岛素水平和葡萄糖水 平 [1°'11]。卢美萍[12]认为，大豆异黄酮对I型糖尿病有一定治疗作用。卜勇军等 [13]研究 表明，大豆异黄酮可降低糖尿病小鼠肾缺血再灌注损伤后血肌酐（SCr)、尿素氮（BUN)、 血总胆固醇（TC)、甘油三酯（TG)等水平，对预防糖尿病具有一定的意义。尹学哲等 [14] 研究表明，长期食用大豆异黄酮苷元的糖尿病大鼠血小板聚集率显著降低，这对于预防和 控制糖尿病有着重要的意义[15]。
[0006] "菜用大豆在预防治疗糖尿病中的医用用途"（专利【申请号】201310098092. 7)指 出，新鲜毛豆具有治疗2型糖尿病的作用，但新鲜毛豆不易保存，急待寻求一种新的容易保 存又很好地保留活性的方法。很多食品或中药材经过真空冷冻干燥处理后都有较好的效 果，毛豆是否仍然保留降血糖作用，目前尚未见报道。真空冷冻干燥处理后的毛豆会发生许 多物理化学变化，例如，大豆异黄酮苷元在含量上会增加，本发明将予以公开。其他如，维生 素、膳食纤维等都会发生变化。
[0007] 本发明首次公开了真空冷冻干燥的菜用大豆对糖尿病小鼠的降血糖、降血脂作 用。冻干菜用大豆在作为预防和治疗糖尿病方面有着可观的开发和应用价值。
【发明内容】
[0008] 本发明提供了菜用大豆冻干粉制备方法，其特征在于：将带荚新鲜毛豆，放在沸 水中热烫3 min，取出在冰水中冷却，去掉豆荚，置于密封袋中，-80 °C预冷，然后置真空冷 冻干燥装置中，真空冷冻干燥后，将上述原料送入超微粉碎机中，粉碎成120-150目，真空 包装，既得冻干粉。本发明采用HPLC法对不同处理方式（煮沸、冷冻、真空冷冻干燥、烘干） 的菜用大豆异黄酮苷元进行含量测定。并对冻干条件下处理的菜用大豆样品进行了降血糖 降血脂活性的考察。发现真空冷冻干燥的菜用大豆冻干粉对糖尿病小鼠的血糖和血脂有明 显的降下作用。
[0009] 其积极作用在于经过真空冷冻干燥后毛豆对于2型糖尿病仍然具有很好的治疗 效果。
[0010] 本发明的菜用大豆推荐服用量，日剂量为5-20g/天。
[0011]
【附图说明】 附图1对照品色谱图 1大豆苷元2黄豆黄素3染料木素 附图2样品HPLC图 图A煮沸，图B冷冻，图C真空冷冻干燥，图D烘干 1大豆苷元2黄豆黄素3染料木素； 附图3 2型糖尿病小鼠空腹血糖 (*Ρ〈0· 05 ;**P〈0. 01 0· 001) 附图4 2型糖尿病小鼠餐后血糖 附图5 2型糖尿病小鼠口服糖耐量 (*Ρ〈0· 05 ;**P〈0. 01 0· 001) 5具体实施方法： 实施例1煮沸法 将新鲜毛豆去荚后，取200 g新鲜豆粒，用纱布包好，放在沸水中100 g毛豆加水(重量 /体积1:1)煮沸35 min,吸干水分，在冰水中冷却，取出吸干水分。精密秤取干燥至恒重 I g样品，按照实验例1方法进行处理后，测定，得黄酮总苷元28.61yg· f1，大豆苷元、黄 豆黄素、染料木素分别为18.38yg· g'8.49yg· g'1.74yg· g'
[0012] 实施例2冷冻法 将新鲜毛豆去荚后，取200 g新鲜豆粒，用纱布包好，放在沸水中热烫I min，在冰水中 冷却，取出吸干水分。放于密封袋中，-80 °C保存一小时，_20°C保存两周。精密秤取干燥至 恒重I g样品，按照实验例1方法进行处理后，测定，得黄酮总苷元14.51yg· g'大豆苷 元、黄豆黄素、染料木素分别为8.65yg· g'3.92yg· g'L94yg· g'
[0013] 实施例3真空冷冻干燥法 将带荚新鲜毛豆4000g，放在沸水中热烫3 min，取出在冰水中冷却，去掉豆荚，置于密 封袋中，-80 °C预冷，然后置真空冷冻干燥装置中，真空冷冻干燥后，将上述原料送入超微 粉碎机中，粉碎成120-150目，真空包装，既得冻干粉。。精密秤取干燥至恒重I g样品，按 照实验例1方法进行处理后，测定，得黄酮总苷元115. 45μ g · g'大豆苷元、黄豆黄素、染 料木素分别为 63.91yg· g'40.87yg· g'10.66yg· g'
[0014] 实施例4烘干法 将新鲜毛豆去荚后，取200 g新鲜豆粒，置烘箱中干燥。精密秤取干燥至恒重I g样 品，按照实验例1方法进行测定，得黄酮总苷元58. 36 μ g · g'大豆苷元、黄豆黄素、染料木 素分别为 36.38yg· g'18.04yg· g'3.93yg· g'
[0015] 实验例1菜用大豆加工方法对毛豆中大豆异黄酮苷元含量的影响 1实验材料与仪器 1.1材料毛豆，2012年秋季购于长春市农贸市场；染料木素、大豆苷元、黄豆黄素 (纯度> 98%)成都曼斯特生物科技有限公司；甲醇、甲酸均为色谱纯；冰醋酸、乙醇、二甲 苯(分析纯）（北京化工厂)，纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司）， 1.2仪器 Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪（SH)-20A紫外检测器，LC-20AT泵， CT0-10AS VP柱温箱，LC-solution工作站）日本岛津公司；Sartorius BP211D型电子分 析天平德国赛多利斯公司；KQ-250DB型数控超声波清洗器昆山超声波仪器有限公司； FW135中草药粉碎机天津泰斯特仪器有限公司；DK-98-1型电热恒温水浴锅天津泰斯特 仪器有限公司；DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱上海精宏实验设备有限公司；冷冻干燥 机FD-1D-50北京博医康实验仪器有限公司；Sartorius PBlO标准型pH计(德国赛多利斯 公司），HC2517高速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司），FS-2组织匀浆机(江苏金坛 金城国胜实验仪器厂)。
[0016] 供试样品按照实施例1-4进行处理，精密秤取Ig干燥至恒重粉碎的样品I g， 置250 mL容量瓶中，加入50 mL乙醇，20 mL去离子水，8 mL浓盐酸。回流2h，浓缩至10 mL,过滤膜,备用。
[0017] 2黄酮苷元测定 2. 1色谱条件色谱柱：依利特Hypersil C18 (250mmX4. 6mm, 5Mm)，流动相：甲 醇-0. 3 %磷酸溶液（体积比48 :52)，流速0. 7 mL · min-1，测定波长260 nm，柱温25°C， 进样量：20 μL. 2. 2对照品溶液的制备对照品储备液：称取染料木素、大豆苷元、黄豆黄素各5. Omg， 精密称定，分别置于25 mL容量瓶中，用70 %甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为 0. 2 mg 的对照品储备液；对照品溶液：精密量取三种对照品储备液各I mL，混匀，即 得对照品溶液，其中三种大豆异黄酮苷元质量浓度均为〇. 067 mg · mL'
[0018] 结果与分析 结果如图1和图2,具体含量见表1。
[0019] 表1不同处理方式条件下毛豆中大豆异黄酮含量
【主权项】
1. 一种具有抗糖尿病作用菜用大豆冻干粉的制备方法，具体方法：将带荚新鲜毛豆， 放在沸水中热烫3 min，取出在冰水中冷却，去掉豆荚，置于密封袋中，-80 °C预冷，然后置 真空冷冻干燥装置中，真空冷冻干燥后，将上述原料超微粉碎机中，粉碎成120-150目，真 空包装，每袋l〇_15g。
2. 根据权利要求1所得的冻干的菜用大豆具有降血糖降血脂作用。
3. 根据权利要求1所得的菜用大豆具有抗糖尿病作用；可用于制作预防或治疗糖尿病 的药物。
4. 药物组合物，其中含有权利要求1所述物质和药学上可接受的载体和剂型。
【专利摘要】本发明提供了菜用大豆冻干粉制备方法，其特征在于:将带荚新鲜毛豆，放在沸水中热烫3min，取出在冰水中冷却，去掉豆荚，置于密封袋中，-80℃预冷，然后置真空冷冻干燥装置中，真空冷冻干燥后，将上述原料超微粉碎机中，粉碎成120-150目，真空包装。本发明采用HPLC法对不同处理方式（煮沸、冷冻、冻干、烘干）的菜用大豆异黄酮苷元进行定量分析,其中冻干条件下,大豆异黄酮苷元含量最高。观察冻干条件下处理的菜用大豆对高脂饲料饲养的小鼠并用链脲佐霉素诱导的糖尿病小鼠的血糖、血脂的影响。冻干菜用大豆明显降低2型糖尿病小鼠的空腹血糖和血脂。
【IPC分类】A61P3-06, A61K36-48, A61K9-19, A61P3-10
【公开号】CN104666395
【申请号】CN201310625885
【发明人】郑毅男, 杨成志, 刘璐璐, 王洲婷
【申请人】长春瑞博参业有限公司, 郑毅男
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2013年11月28日