GGF2处理。将GGF2每天静脉内以0. lmg/kg递送10天。当结扎后1天起始治疗 时身体摆动分值显著好于媒质，及相比结扎后3或7天起始治疗的媒质改善。（*，Y，+表 示通过重复的测量ANOVA及后-hoc Tukey，分别在第1，3及7天处理组显著不同于媒质）。
[0051] 图6A~D显示全长GGF2的核酸及氨基酸序列。
[0052] 图7~12显示表皮生长因子样（EGFL)结构域1~6的核酸及氨基酸序列。
[0053] 图13显示来自NRG-I基因的表皮生长因子样肽的核酸及氨基酸序列。
[0054] 图14显示来自NRG-I的表皮生长因子样（EGFL) β片段的核酸及氨基酸序列。
[0055] 图15显示来自NRG-I的表皮生长因子样（EGFL) α片段的核酸及氨基酸序列。
[0056] 图16显示来自NRG-2a的表皮生长因子样（EGFL) α片段的核酸及氨基酸序列。
[0057] 图17显示来自NRG-2P的表皮生长因子样（EGFL) α片段的核酸及氨基酸序列。
[0058] 图18显示各EGF-样肽的氨基酸序列比对。EGF-样结构域可定义为NRG的亚结构 域，序列比对显示，其与人EGF分子（序列P01133 I 971~1023,在图中比对底部）相比，在 氨基酸序列上具有至少 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31，32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39,40,41，42,43， 44或45%同源性。同源氨基酸具有相同的，保守的或半-保守的物理-化学及结构性质， 如分别通过符号： '及'标识。
[0059] 图19显示转染Cho (dhfr-)细胞的表达载体（pSV-AHSG)。 图20显示含人GGF2的编码序列的pCMGGF2载体。 图21显示为增强转录，将GGF2编码序列放置在EBV BMLF-I干扰序列（MIS)后。 【发明详述】
[0060] 如所示本文中，缺血性中风的非-减轻性治疗迄今限于在中风后急性期施用治疗 剂。
[0061] 急性期期间观察到至少部分由于氧剥夺的立即细胞死亡。此外，如图1中所示，血 流阻塞导致细胞内贮存的自由基，谷氨酸盐，及钙及钠释放，这被理解为毁坏脑组织及扩展 损伤区。
[0062] 神经损伤后大致6小时~2天（或通过一些定义是3天）的半-急性期的特征在 于持续的自由基释放，谷氨酸盐清除，钙及钠释放，阻塞的区的氧剥夺，及立即局限的细胞 死亡。至今，无已知的用于人中风后半-急性期期间的临床上获得批准的试剂。
[0063] 如图1中所示，药学神经损伤后治疗的有限的窗至少部分被病理生理学及暂时的 损伤进展解释。例如阻塞的数分钟内，在梗塞核心的神经元毁坏。阻塞后数小时时，自由基， 兴奋毒性及炎症试剂释放/产生，及这些分子持续毁坏脑组织及扩展损伤区。如上所述，损 伤的程度可有限，通过恢复血流（使用临床上获得批准的溶栓剂，即，tPA)从而达到疫区的 再-氧合作用。
[0064] 如通过科学文献所示，各化合物似乎在急性及半-急性时期呈现功效。但是，CNS 神经损伤后24, 36或48小时标记后，潜在治疗进行性丧失治疗损伤的能力。实际上，在急 性时期具有效应的一些治疗剂模式，例如tPA，随着损伤后时间经过开始具有严重的，威胁 生命的禁忌症。
[0065] 缺血性事件后数天，数周或数个月，在中风后慢性期期间，治疗必需旨在促进神经 恢复。创伤性事件（例如中枢神经系统中的中风）后神经恢复的促进相比前-慢性窗中所 采用的涉及明显不同的生理学现象及治疗性策略。前-慢性治疗通常涉及旨在恢复血流及 减少急性细胞死亡的试剂。相反，可在损伤后48小时或更久，或72小时或更久时有效施用 的治疗剂通过其不改变缺血性损伤大小而恢复功能的能力从急性期治疗剂分化出。在一实 施方式中，本发明的治疗在缺血性CNS损伤的基本上完全损伤后死亡后开始；"缺血性CNS 损伤的基本上完全损伤后死亡"是指直接导致缺血性事件的CNS细胞死亡将发生，其他由于 年龄或治疗（无关治疗是否设计用于解决缺血）的细胞死亡不在此定义的范围内。
[0066] 如所示本文中，本发明人展示，神经调节蛋白对在神经创伤性损伤的慢性期期间 恢复神经性功能有效。在一实施方式中，神经创伤性损伤是缺血性中风。如本文所述，本发 明人作出惊人的发现，神经调节蛋白在缺血性事件后慢性期期间起始施剂时有效。甚至更 惊人的是发现神经调节蛋白甚至当晚至在缺血性事件后7天时起始施剂时有效。
[0067] 本数据显示，达到的有利的结果不通过与发现在立即缺血后治疗中有效的机理相 同的机理发生。中风后慢性期期间的神经调节蛋白处理不改变缺血性损伤的大小（见表 1)。此明显显示，病理生理学的急性及半-急性期完全在这些期，及慢性期期间施用的神经 调节蛋白促进神经恢复，而非建立再灌注及保护神经元。
[0068] 表1 :梗塞体积（％ )
[0069]
【主权项】
1. 给哺乳动物施用包括表皮生长因子-样（EGF-样）结构域的多肽的方法，所述方法 包括： 在所述哺乳动物神经损伤后施用包括表皮生长因子-样（EGF-样）结构域的多肽；及， 在神经损伤后至少2天时起始所述施用。
2. 权利要求1的方法，其中所述起始步骤在神经损伤后至少3天时开始。
3. 权利要求1的方法，其中所述起始步骤在神经损伤后至少7天时开始。
4. 权利要求1的方法，其中所述EGF-样结构域由神经调节蛋白（NRG)-I基因，（NRG)-2 基因，（NRG)-3基因，（NRG)-4基因编码。
5. 权利要求1的方法，其中所述多肽是GGF2。
6. 权利要求1的方法，其中所述哺乳动物是人。
7. 给哺乳动物施用包括表皮生长因子-样（EGF-样）结构域的多肽的方法，所述方法 包括： 在所述哺乳动物神经损伤后施用包括表皮生长因子-样（EGF-样）结构域的多肽； 在神经损伤后6小时内起始所述施用；及， 持续所述施用步骤至多于损伤后6小时的时期。
8. 权利要求7的方法，其中所述持续步骤包括持续施用步骤至多于损伤后48小时的时 期。
9. 权利要求7的方法，其中所述持续步骤包括持续施用步骤至多于损伤后72小时的时 期。
10. 权利要求7的方法，其中所述EGF-样结构域由神经调节蛋白（NRG) -1基因， (NRG) -2基因，（NRG) -3基因，（NRG) -4基因编码。
11. 权利要求7的方法，其中所述多肽是GGF2。
12. 权利要求7的方法，其中所述哺乳动物是人。
13. 在哺乳动物缺血性中枢神经系统神经损伤后施用包括表皮生长因子-样 (EGF-样）结构域的多肽的方法，所述方法包括： 在所述哺乳动物神经损伤后施用所述肽；及， 在哺乳动物达到完全损伤后缺血性损伤细胞死亡体积后起始所述施用。
14. 权利要求13的方法，其中所述EGF-样结构域由神经调节蛋白（NRG)-I基因， (NRG) -2基因，（NRG) -3基因，（NRG) -4基因编码。
15. 权利要求13的方法，其中所述多肽是GGF2。
【专利摘要】本发明涉及在CNS神经性损伤后非-急性期间处理的组合物及方法。具体而言，本发明涉及在神经损伤后在急性窗后或在慢性时期治疗神经损伤。
【IPC分类】A61K38-18, A61P25-00, A61P9-10
【公开号】CN104707130
【申请号】CN201410811890
【发明人】A·卡加诺, J·艾希
【申请人】阿索尔达治疗公司
【公开日】2015年6月17日
【申请日】2009年8月17日
【公告号】CA2734766A1, CN102159237A, EP2328606A1, EP2328606A4, US20110269682, WO2010019275A2, WO2010019275A9