厚朴萃取物及其制备方法与用图
【专利说明】厚朴萃取物及其制备方法与用途 【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物萃取物及其制备方法与用途，更具体而言，涉及以色谱分离原理 配合特定的处理方式来制备植物活性萃取物的量产方法。 【现有技术】
[0002] 牙周病又称牙周炎，是牙周组织的疾病，为侵犯牙龈、牙周、牙周膜、牙周韧带及牙 槽骨等组织的慢性炎症。常见的慢性牙周病一般可分为牙龈炎和牙周炎，这两种临床症状 不尽相同的疾病一般笼统合称为牙周病。牙周病是一种破坏性疾病，由积聚在牙龈边缘的 牙菌膜所分泌的毒素令牙周组织发炎所致，其主要特征为牙周袋的形成及袋壁的炎症、牙 槽骨吸收和牙齿逐渐松动。
[0003] 厚朴为木兰科植物厚朴（Magnoliaofficina)或凹叶厚朴（Magnoliabiloba)的 干燥树皮、枝皮或根皮，呈半环状，淡棕色。厚朴为一种传统中药，性温，味苦辛，入脾、胃、 肺、大肠经，其具有燥湿消痰、下气除满的功能，主治湿滞伤中、脘痞吐泻、腹胀便秘、痰饮喘 咳。厚朴可以配合木香、干姜、草蘧、陈皮、茯苓、半夏、藿香等同用。如湿邪较重（胸闷少食、 舌苔白厚而腻、脉濡、滑、缓），可再加用苍朮、炒苡米、砂壳等。如寒邪化热，热结肠胃而出现 腹部胀满、痞硬不喜按、大便秘结、下午身热、谵语等症，可配枳实、生大黄、芒硝等同用，例 如伤寒论中的大承气汤（厚朴、枳实、生大黄、芒硝）、小承气汤（厚朴、枳实、生大黄）等。 因厚朴能降气，故对胸腹胀满、气上逆而喘咳之症，也常配用，例如桂枝加厚朴杏仁汤（桂 枝、白芍、炙草、生姜、大枣、厚朴、杏仁），可用于外感风寒、自汗的咳喘；苏子降气汤（苏子、 半夏、炙草、前胡、厚朴、陈皮、当归、生姜、肉桂），可用于痰多气逆、胸满咳喘等症。厚朴目前 已被发现的药效有抗病毒、抗肿瘤、抗菌、抗溃疡、镇痛抗炎、抗氧化、以及对自主神经活动 有抑制作用，其中主要有效成分为厚朴酚（magnonol)及和厚朴酚（honokinol)。 【
【发明内容】
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[0004] 本发明涉及一种厚朴萃取物及其制备方法与用途；更具体而言，涉及以色谱分离 原理配合特定的处理方式来制备植物活性萃取物的方法，该方法包括将厚朴干品以水煮沸 萃取后，将水萃取物以大孔吸附树脂吸附处理后再分别以不同比例的水和乙醇混合溶液搅 拌处理和分离，最后获得厚朴活性萃取物，产率为0. 4%。经细胞试验证实其活性萃取物具 有抗菌及抗发炎之功效，且由结扎诱导牙周病动物试验亦证实可有效抑制牙槽骨流失的效 果。化学成分分析以HPLC指纹分析图谱证实。经由本制程产出的活性萃取物并不含过去 已知成分厚朴酚及和厚朴酚，反之包含其他成分如厚朴木脂体C(MagnolignanC)、厚朴木 脂体A(MagnolignanA)、丁香脂素（syringaresinol)、柳杉二醇（cryptomeridiol)及台湾 擦木酚（randaiol)等，并且具有有效抑制口腔细菌、发炎及牙槽骨流失的功效。
[0005] 除非本文另外界定，否则本发明所用的科学及技术术语应具有本领域技术人员通 常所理解的含义。这些术语的含义及范畴应为清晰的；然而， 在任何潜在歧义的情况下，本文所提供的定义优于任何辞典或外在定义。
[0006] 除非另外指出，否则如本公开内容所用的以下术语应理解为具有以下含义。
[0007]如本文所用的术语"大孔吸附树脂"或"大孔树脂"（彼此可互换使用）意指一种 吸附树脂，其由聚合单体和交联剂、致孔剂、分散剂等添加剂经聚合反应制备而成。大孔吸 附树脂在干燥状态下其内部具有较高的孔隙率，且孔径较大，在约50nm至2000nm之间。大 孔吸附树脂的一个实例为（包括但不限于）DiaionHP20树脂。
[0008]如本文所用的术语"大孔吸附树脂柱"意指主要利用"大孔吸附树脂"或"大孔树 月旨"的色谱柱，例如（包括但不限于）Diaion?HP-10、Diaion?丨丨卜20、Diaion?HP-30、 Diaion?HP-40、Diaion?HP-50、Amberlite?XAD-4、Amberlite?XAD-6、Amberlite? XAD-7、Amberlite?XAD-16、Amberlite?XAD-1180 或Amberlite?XAD-1600。
[0009]如本文所用的术语"萃取物"意指针对一物质进行萃取所得的产物，通常是藉由将 所欲萃取的物质浸泡或混合于溶剂中而获得的溶液或浓缩制剂。典型地，萃取物制备自新 鲜植物或经研磨或干燥的植物样本。本领域已知有各种萃取方法，包括但不限于浸渍、渗 滤、再渗滤、消解、逆流萃取、涡轮萃取、挤压/压挤/压榨或超临界流体二氧化碳萃取。适 当的溶剂包括但不限于水、乙醇、乙醇/水混合物、甲醇、丁醇、正丁醇、异丁醇、丙酮、己烷、 正己烷、石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷或其他溶剂。可视需要选择溶剂的种类或调 配溶剂的浓度，以达适当极性而进行萃取，例如，低极性溶剂包括但不限于石油醚、正己烷、 二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、70-100%乙醇；高极性溶剂包括但不限于水、50%或以 下的乙醇、甲醇、丁醇、异丁醇、80%或以下的丙酮。待萃取物质与溶剂的比例可为约1:1至 约 1:100(w/v(g/ml))，优选为约 1:1 至约l:50(w/v(g/ml))，更优选为约 1:1 至约l:20(w/ v(g/ml)),甚至更优选为约1:15或1:10(w/v(g/ml))。萃取可在适当温度下进行,例如,在 约5°C至约KKTC、约KTC至约KKTC、约20°C至约KKTC、约40°C至约KKTC、约60°C至约 KKTC下进行，优选为室温25°C或在100°C下煮沸。不同阶段的萃取物可相互合并，亦可于 后续再进行浓缩步骤，例如蒸发，或纯化或分离步骤，例如过滤、离心和色谱分析。在一实例 中，将新鲜植物或干燥的植物样本的全部或部分（视需要经切碎或磨碎）与适当的溶剂混 合或浸泡于其中并搅拌达一段足够的时间，例如4小时或以上、6小时或以上、8小时或以 上、10小时或以上、12小时或以上、14小时或以上、或16小时或以上，在室温下进行或加热 进行，经由过滤移除固体残留物（滤渣），然后收集所获得的汁液（萃取液）；视需要重复浸 泡或混合步骤，合并所得汁液，进一步予以浓缩、纯化或分离。
[0010] 如本文所用的术语"预防"是指延迟罹患疾病个体的症状发作或减少疾病出现。
[0011] 如本文所用的术语"治疗"表示缓解或改善感病个体的症状。
[0012] 术语"载体"是指本领域技术人员所熟知的用以制备组合物的稀释剂、赋形剂、接 纳体或类似物。
[0013] 当本文中提及乙醇浓度时，其指的是乙醇与乙醇水溶液的体积比（v/v)，例如，60% 乙醇指的是100mL的乙醇溶液里有60ml的乙醇。
[0014] 除非本文另外需要，否则单数术语应包括复数且复数术语应包括单数。
[0015] 本发明提供各种形式的厚朴萃取物及其制备方法，其中这些厚朴萃取物均含有厚 朴木脂体C、厚朴木脂体A、丁香脂素、柳杉二醇及台湾擦木酚，但不含厚朴酚亦不含和厚朴 酚。本发明的厚朴萃取物藉由以下步骤制备：(a)以水萃取厚朴以取得水萃取液；以及（b) 将该水萃取液通入大孔吸附树脂柱，以30-60%乙醇洗脱并收集洗脱液。优选地，步骤（b) 的乙醇是40-60%乙醇。更优选地，步骤（b)的乙醇是60%乙醇。
[0016] 在优选实施方案中，该厚朴萃取物具有如图1中E或F所示的化学指纹图谱。
[0017] 本发明亦提供一种组合物，其包含本发明的厚朴萃取物及视情况可接受的载体。
[0018] 本发