一种栀子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物及其制备方法
【专利摘要】本发明提供一种栀子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物，其由栀子厚朴汤超临界提取物和环糊精或其衍生物组成，其中所述栀子厚朴汤超临界提取物与所述环糊精或其衍生物的质量比为1∶1～1∶50。本发明也提供制备所述栀子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物的方法。本发明所述栀子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物对光、对热的稳定性得到提高，同时其溶解度也得到一定程度的提高。
【专利说明】一种栀子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合 物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药【技术领域】，涉及一种桅子厚朴汤超临界提取物包合物及其制备方 法，具体涉及一种桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 抑郁症是由各种原因引起的以抑郁为主要症状的一组心境障碍或情感性障碍，一 组以抑郁心境自我体验为中心的临床症状群或状态。主要表现为情绪低落、思维迟钝、言语 动作减少、自罪感、工作无兴趣、常有自杀倾向，与癌症及艾滋病并驾齐驱，被公认为是新世 纪的三大疾病。
[0003] 抑郁症目前主要是西医治疗为主，中医治疗为辅，包括以下几种治疗方法：化学药 物治疗、心理治疗、物理治疗和中药治疗。化学药物治疗主要用药：丙咪嗪、氯西汀、帕罗西 汀、文拉法汀、度洛西汀、安非他酮、瑞波西汀、米氮平、奈法唑酮和曲唑酮等。西医治疗中， 抗抑郁药物由于不良反应多、成瘾性大且禁忌证多，严重制约了临床的使用。心理治疗即通 过心理学的相关方法，帮助抑郁症患者走出抑郁。随着心理学的研究不断进步，也逐渐在治 疗抑郁症等心理疾病中占有重要位置。物理治疗：针灸，现在应用针灸治疗抑郁症疗效确 切，已经引起国内外的广泛关注。中药治疗：临床上中药的一种或几种为配方，如柴胡加龙 骨牡蛎糖、丹桅逍遥散、贯郁胶囊等用于抑郁症治疗，获得良好效果。
[0004] 中药复方成分多、作用环节多、靶点多，有较好的协同作用，降低副作用的同时提 高疗效。因此具有巨大的研究潜力。故本发明旨在寻找能够有确切疗效的抗抑郁复方进行 多种提取研究，为中药抗抑郁研究奠定基础。
[0005] 桅子厚朴汤是张仲景《伤寒论》中除烦泄满的代表方剂，临床广泛用于治疗抑郁 症、神经官能症、焦虑症、失眠等症。以下为桅子厚朴汤的方剂：
[0006] 【组成】桅子9个（劈），厚朴12克（炙，去皮），枳实9克（水浸，炙令黄）
[0007]【煎服方法】上三味，以水三升半，煮取一升半，去滓。分二服，温进一服。得吐者， 止后服。
[0008] 【方证研究】热扰心胸，则心烦，或卧起不安；热壅脾胃，浊气滞涩，则脘腹胀满；浊 气气滞胸中，则胸闷；胃气不降，则食欲不振，或呕吐；舌红，苔黄，脉数均为热郁胸腹之征。 其治当清热除烦，宽胸消满。
[0009] 方中桅子清泻郁热，降泄结气。枳实破结气，消胀满，和胃气。厚朴消胀除满，行气 下气。均为除烦泄满的药材，通过这三味药材的配伍组成的复方在古书中常有记载。当代 对此也在临床上有所运用。萧美珍等均有文献记载使用桅子厚朴汤进行抑郁症的治疗。
[0010] β-环糊精是一种常用的包合辅料，其具有特殊的结构，能将大小合适的疏水性物 质或基团嵌入其中，形成包合物，从而增加药物的稳定性、增加溶解度的作用。
【发明内容】
toon] 本发明人对十种不同提取方法得到的桅子厚朴汤进行经典小鼠强迫游泳实验，通 过考察其不动时间筛选显著药效样品，结果发现超临界提取物具有明显的抗抑郁作用。经 谱效相关性研究结果显示和厚朴酚与厚朴酚是桅子厚朴汤的主要抗抑郁活性成分，这一研 究结果与文献报道一致。
[0012] 桅子厚朴汤超临界提取物为油状物，为了提高其稳定性及溶解度，发明人用环糊 精包合技术将桅子厚朴汤超临界提取物进行包合，并采用正交试验得到最佳包合工艺。
[0013] 因此，本发明的第一个目的是提供一种桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍 生物的包合物，其由桅子厚朴汤超临界提取物和环糊精或其衍生物组成，其中所述桅子厚 朴汤超临界提取物与所述环糊精或其衍生物的质量比为1 : 1?1 : 50。
[0014] 根据本发明一个优选的实施方式，所述桅子厚朴汤超临界提取物与所述环糊精或 其衍生物的质量比可以为1 : 2?1 : 20。最优选的质量比范围为1 : 6?1 : 9。
[0015] 根据本发明另一个优选的实施方式，所述桅子厚朴汤超临界提取物占所述包合物 的质量百分比为4. 8%?33%，优选10%?14% ;所述环糊精或其衍生物占所述包合物的 质量百分比为67%?95. 2%。
[0016] 根据本发明一个优选的实施方式，所述的环糊精或其衍生物可以选自β-环糊 精、羟丙基-β -环糊精、二羟丙基-β -环糊精、α -环糊精、Υ -环糊精葡萄糖环糊精、麦芽 糖环糊精或麦芽三糖环糊精中的一种或几种。其中优选环糊精或羟丙基环糊精
[0017] 本发明的第二个目的是提供制备所述的桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其 衍生物的包合物的方法，所述方法包括以下步骤：
[0018] 在搅拌下将桅子厚朴汤超临界提取物加入到用溶剂溶解的环糊精或其衍生物的 溶液中，搅拌、放置、抽滤、洗涤，干燥后得到桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物 的包合物。
[0019] 根据本发明一个优选的实施方式，所述溶剂可以选自水、乙醇、甲醇、异丙醇、乙二 醇、丙三醇或丙酮中的一种或几种。
[0020] 根据本发明一个特别优选的实施方式，所述方法包括以下步骤：
[0021] 准确称取一定量的环糊精溶于一定温度（20°C?60°C )的蒸馏水中并使其完全溶 解，在搅拌状态下（密闭）缓慢加入桅子厚朴汤超临界提取物溶液中（1 : 2?1 : 10，V/ V)，搅拌数小时后，冷藏，抽滤得到包合物，再用无水乙醇洗涤，30°C?50°C下真空干燥，可 得包合物。
[0022] 本发明的第三个目的是提供另一种制备所述的桅子厚朴汤超临界提取物的环糊 精或其衍生物的包合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
[0023] 将环糊精或其衍生物与桅子厚朴汤超临界提取物混合，加入水共同充分研磨得膏 状物，干燥后得到桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物。
[0024] 根据本发明一个特别优选的实施方式，所述方法包括以下步骤：
[0025] 称取一定量的环糊精，置于研钵中，加入少量水，研匀，再加入一定量的提取物乙 醇溶液，充分研磨后得到膏状物，用乙醇等有机溶剂洗涤以除去包合物中未反应的提取物， 得到环糊精包合物，置于真空干燥器中干燥，得到提取物环糊精包合物。
[0026] 在上述两种制备方法中，所述桅子厚朴汤超临界提取物可以是桅子厚朴汤超临界 提取物本身或是用有机溶剂溶解的桅子厚朴汤超临界提取物溶液。所述有机溶剂可以选自 乙醇、甲醇、异丙醇、乙二醇、丙三醇或丙酮中的一种或几种。其中优选乙醇或甲醇。
[0027] 本发明的第四个目的是提供一种药物组合物，其包含所述的桅子厚朴汤超临界提 取物的环糊精或其衍生物的包合物和药学上可接受的载体或添加剂（乳糖、微晶纤维素、 淀粉等），可以制成任何药剂学上公知的剂型。
[0028] 根据本发明一个优选的实施方式，所述药物组合物为片剂、胶囊、颗粒剂、分散片、 口崩片、合剂、口服液或糖浆剂形式。
[0029] 本发明的第五个目的是提供所述的桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生 物的包合物在制备抗抑郁药物中的应用。
[0030] 本发明所述方法利用环糊精包合物作用，将桅子厚朴汤超临界提取物进行包合， 因此所得的桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物对光、对热的稳定性得 到提高，同时其溶解度也得到一定程度的提高。本发明所述方法使液态提取物粉末化，可用 于制备多种制剂，工艺简单，且对制剂的包装及贮藏环境无特殊要求。
【专利附图】
【附图说明】
[0031] 图1为薄层色谱分析结果（1%香草醛硫酸溶液），其中：1为和厚朴酚对照品，2为 厚朴酚对照品，3为β -CD对照品，4为本发明实施例2获得的包合物，5为本发明实施例2 获得的包合物无水乙醇溶液，6为实施例2获得的包合物水溶液。
[0032] 图2为扫描电镜照片（X500)，用扫描电镜（SEM)观察β -CD和实施例15获得的 包合物两种粉末的外部形态，其中a为β -⑶；b为包合物。
[0033] 图3为取β -⑶、桅子厚朴汤超临界萃取物和实施例4获得的包合物物适量置样品 室中，调节升温速率为l〇K/min，温度测定范围为0?350°C，分别记录样品的差示热扫描升 温曲线（DSC图谱），其中a为β -⑶；b为桅子厚朴汤超临界萃取物；c为实施例4获得的包 合物。
[0034] 图4为和厚朴酚、厚朴酚对照品HPLC图谱；
[0035] 图5为实施例2获得的包合物HPLC图谱。
【具体实施方式】
[0036] 桅子厚朴汤超临界提取物按照以下方法制备：将桅子、枳实、厚朴药材粉碎至40 目，取150克混合药材粉末（桅子：厚朴：枳实的重量比=3 : 4 : 3)，在萃取温度45°C， 萃取压力 2510^;〇)2流速为 40L/h;分离釜 I : 5MPa，T = 40°C;分离釜 II : 5.0MPa，T = 30. 0°C ;萃取时间lh，收集分离釜内的提取物即得。
[0037] 包合物回收率和包和率按照以下步骤进行计算：包合结束，包合物冷藏24小时， 抽滤，所得包合物用少量石油醚洗涤，50°C减压干燥，即得奶黄色固体粉末，精密称重。经 HPLC检测。按下列公式计算包合物回收率、和厚朴酚及厚朴酚包合率。
[0038] 包合物回收率=包合物实际重量/[β -环糊精（g) +提取物加入量（g)] X100% ;
[0039] 包合率=[包合物中实际测定值（g)/提取物中实际含量]X 100%。
[0040] 实施例1
[0041] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇2ml使溶解；再称取β -环糊精 2g用一定量的水溶解，在30°C?60°C恒温水浴中制成饱和溶液，在600rpm搅拌下缓慢加入 桅子厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌3小时，置4°C下24h，抽滤即得。经测 定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为54. 2%和55. 1 %，包合物回收率为76. 4%。
[0042] 实施例2
[0043] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 6g用一定量的水溶解，在30°C?60°C恒温水浴中制成饱和溶液，在500rpm搅拌下缓慢加入 桅子厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌2小时，冷藏24h，抽滤即得。经测定和 厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为90. 9%和89. 1%，包合物回收率为77. 9%。
[0044] 实施例3
[0045] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取α -环糊精 50g用一定量的水溶解，在30°C?60°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的 加入桅子厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌2小时，冷藏24h，抽滤即得。经测 定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为91. 9%和90. 6%，包合物回收率为83. 9%。
[0046] 实施例4
[0047] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 l〇g混合，加入水共同充分研磨得膏状物，干燥后得到桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或 其衍生物的包合物，测定包合物回收率为82. 1%。经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别 为 96. 5%和 94. 1%。
[0048] 实施例5
[0049] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取羟丙 基-β -环糊精6g溶于无水乙醇中，混合，搅拌，冷藏，抽滤得到桅子厚朴汤超临界提取物的 环糊精或其衍生物的包合物，测定包合物回收率为80. 1%。经测定和厚朴酚及厚朴酚的包 封率分别为76. 5%和74. 3%。
[0050] 实施例6
[0051] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入甲醇5ml使溶解；再称取一定量羟丙 基-β -环糊精lg溶于50ml水中在70°C制备成饱和溶液，混合，搅拌（300rpm) 2h，旋干得 到桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物，测定包合物回收率为82. 1%。 经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为60. 5%和64. 1%。
[0052] 实施例7
[0053] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入甲醇5ml使溶解；再称取二羟丙基-β -环 糊精3g用一定量的水溶解，在40°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加 入桅子厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌1小时，冷藏24h，抽滤即得，低温 干燥得，经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为70%和68. 9%。测定包合物回收率为 75. 4%。
[0054] 实施例8
[0055] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取γ -环糊精 3g用一定量的水溶解，在50°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入桅子 厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌2小时，冷藏24h，抽滤即得，低温干燥得， 经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为81. 5%，81. 6%，包合物回收率为73. 2%。
[0056] 实施例9
[0057] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 3g用一定量的水溶解，在60°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入桅子 厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌2小时，冷藏24h，抽滤即得，低温干燥得。 经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为67. 8%和68. 2%，包合物回收率为66. 4%。
[0058] 实施例10
[0059] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 6g用一定量的水溶解，在40°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入桅子 厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌2小时，冷藏24h，抽滤即得，低温干燥得。 经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为62. 8%和63. 5%，包合物回收率为43. 6%。
[0060] 实施例11
[0061] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 6g用一定量的水溶解，在50°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入桅子 厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌3小时，冷藏24h，抽滤即得，低温干燥得。 经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为80. 5%和82. 3%，包合物回收率为76. 5%。
[0062] 实施例12
[0063] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 20g用一定量的水溶解，在60°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入桅 子厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌1小时，冷藏24h，抽滤即得，低温干燥 得。经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为68. 5%，74. 3%，包合物回收率为78. 7%。
[0064] 实施例13
[0065] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 9g用一定量的水溶解，在40°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入桅子 厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌3小时，冷藏24h，抽滤即得，低温干燥得。 经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为94. 3%和92. 6%，包合物回收率为82. 2%。 [0066] 实施例14
[0067] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 9g用一定量的水溶解，在50°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入桅子 厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌1小时，冷藏24h，抽滤即得，低温干燥得。 经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为98. 9%，99. 6%，包合物回收率为81. 9%。
[0068] 实施例15
[0069] 称取桅子厚朴汤超临界提取物lg，加入无水乙醇5ml使溶解；再称取β -环糊精 9g用一定量的水溶解，在60°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入桅子 厚朴汤超临界提取物的无水乙醇溶液，继续搅拌2小时，冷藏24h，抽滤即得，低温干燥得。 经测定和厚朴酚及厚朴酚的包封率分别为88. 1%，90. 6%，包合物回收率为73.9%。
[0070] 实施例16
[0071] 称取桅子厚朴汤提取物lg，加入无水乙醇2ml使溶解；再称取β -环糊精9g用一 定量的水溶解，在60°C恒温水浴中制成饱和溶液，在300rpm搅拌下缓慢的加入提取物无水 乙醇溶液，继续搅拌2小时，置4°C下24h，抽滤即得。经HPLC测定，计算得和厚朴酚、厚朴 酚的包合率分别为90. 3%和88. 64%。
[0072] 实施例17
[0073] 取桅子厚朴汤超临界提取物环糊精包合物100g，加入糊精200g，乳糖100g，用 80%乙醇制粒，过18目筛，40°C干燥5h以上，整粒，分装成50袋。
[0074] 实施例18
[〇〇75] 取桅子厚朴汤超临界提取物环糊精包合物100g，加入微晶纤维素200g，乳糖适量 混匀，直接压片即得。
【权利要求】
1. 一种桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物，其由桅子厚朴汤超临 界提取物和环糊精或其衍生物组成，其中所述桅子厚朴汤超临界提取物与所述环糊精或其 衍生物的质量比为1 : 1?1 : 50。
2. 根据权利要求1所述的包合物，其特征在于，所述桅子厚朴汤超临界提取物与所述 环糊精或其衍生物的质量比为1 : 2?1 : 20,优选1 : 6?1 : 9。
3. 根据权利要求1所述的包合物，其特征在于，所述桅子厚朴汤超临界提取物占所述 包合物的质量百分比为4. 8%?33%，优选10%?14% ;所述环糊精或其衍生物占所述包 合物的质量百分比为67%?95. 2%。
4. 根据权利要求1所述的包合物，其特征在于，所述的环糊精或其衍生物选自环糊 精、羟丙基-β -环糊精、二羟丙基-β -环糊精、α -环糊精、Υ -环糊精葡萄糖环糊精、麦芽 糖环糊精或麦芽三糖环糊精中的一种或几种。
5. 制备权利要求1-4任一项所述的桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的 包合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： 在搅拌下将桅子厚朴汤超临界提取物加入到用溶剂溶解的环糊精或其衍生物的溶液 中，搅拌、放置、抽滤、洗涤，干燥后得到桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包 合物。
6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述溶剂选自水、乙醇、甲醇、异丙醇、乙 二醇、丙三醇或丙酮中的一种或几种。
7. 制备权利要求1-4任一项所述的桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的 包合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： 将环糊精或其衍生物与桅子厚朴汤超临界提取物混合，加入水共同充分研磨得膏状 物，干燥后得到桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合物。
8. 根据权利要求5或7所述的方法，其特征在于，所述桅子厚朴汤超临界提取物是桅子 厚朴汤超临界提取物本身或是用有机溶剂溶解的桅子厚朴汤超临界提取物溶液。
9. 根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、异丙醇、乙 二醇、丙三醇或丙酮中的一种或几种。
10. -种药物组合物，其特征在于，其包含权利要求1-4任一项所述的桅子厚朴汤超临 界提取物的环糊精或其衍生物的包合物和药学上可接受的载体。
11. 根据权利要求10的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物为片剂、胶囊、颗粒 齐U、分散片、口崩片、合剂、口服液或糖浆剂形式。
12. 权利要求1-4任一项所述的桅子厚朴汤超临界提取物的环糊精或其衍生物的包合 物在制备抗抑郁药物中的应用。
【文档编号】A61K36/752GK104107243SQ201310140925
【公开日】2014年10月22日 申请日期:2013年4月22日 优先权日:2013年4月22日
【发明者】杨义芳, 黄春跃, 屈晓晟, 胡晓 申请人:上海医药工业研究院, 中国医药工业研究总院