)，使形成W / 〇初乳；
[0127] 称取25g聚乙二醇6000溶解于3000mL水，形成外水相；
[0128] 将初乳加入到外水相中，通过剪切方式，制备成W / 0 / W复乳；
[0129] 将W / 0 / W复乳转移到0. 8%的氯化钠水溶液中，冷冻干燥除去有机溶剂，离心， 收集所得微球；
[0130] 将前体目标物加入洗涤水相中洗涤，再离心收集，冷冻干燥，即得。
[0131] 本品的二氯甲烷残留llppm，包封率94. 2%。
[0132] 申请人对实施例所制备的艾塞那肽长效微球进行了外释放曲线试验研究，药效学 试验研究，结果如下：
[0133] 第一部分艾塞那肽长效注射液目前达到的效果
[0134] 1艾塞那肽长效注射微球体外释放曲线
[0135] 精密称取微球10mg，置于具塞试管中，加入1ml释放介质。样品放入37°C恒温台 式振荡器中，以转速为IOOrpm振荡。定时取出样品管，在12000rpm冷冻离心10min后，取 出上清液，再加入1ml释放介质，继续放入37°C恒温台式振荡器中。按照测定载药量方法测 定上清液中含药量，计算累计释放量。
[0136] 艾塞那肽微球在释放过程中，前24h释放12. 62%，30天释放82. 43%，基本释放完 全。
[0137] 第二部分艾塞那肽长效注射微药效学研究
[0138] 1实验动物分组与处理
[0139] 6只SPF级C57BL / 6鼠，11-12周龄，体质量（30±2)g，均为雄性，自由摄食、饮水， 作为C57对照组。SPF级自发性2型糖尿病KKAy小鼠24只，11-12周龄，体质量（35±2) g，均为雄性，自由摄食、饮水。动物室内设置12h昼夜循环，并维持室温在（22±2)°C。用 含10%蔗糖、10%脂肪的KKAy小鼠专用高能量饲料喂养。随机分为空白对照组，阳性对照 组、制剂组，各6只。模型组皮下注射无菌0. 5% NaCl溶液，阳性对照组每日早上皮下注射 艾塞那肽原料药水溶液，剂量为〇. 6ug /只。制剂组皮下注射微球的0. 5% NaCl溶液，剂量 为24ug /只。
[0140] 2药效学结果
[0141] 2. 1艾塞那肽微球对KKAy小鼠体重的影响
[0142] 试验小鼠给药后，记录14天内体重变化，除空白对照组小鼠体重持续升高，C57组 小鼠体重基本维持不变，给药组都有一定程度的降低。
[0143] 2. 2艾塞那肽微球对KKAy小鼠血糖的影响
[0144] KKAy小鼠给专用高脂饲料，C57小鼠给正常鼠粮。制剂组于第0天，14天，28天分 别给制剂一次，给药后定期测定血糖。
[0145] 第28天时KKAy小鼠停止食用高脂饲料，给予正常饲料，第35天测定所有小鼠血 糖，所有组小鼠血糖均有降到正常血糖的趋势。由此可知，艾塞那肽能够有效地使高于正常 水平的血糖降到正常范围，而对于正常的血糖值，没有继续降低的作用，是一种很安全的降 糖药物。2. 3糖耐量试验
[0146] 第一次给药后3天，以每公斤体重3g葡萄糖给小鼠灌胃，分别测定服糖前、服糖后 0. 5h、lh、2h及3h血糖。空白对照组小鼠灌胃后，血糖值迅速上升，2小时后没有恢复到正 常水平；而阳性对照组、制剂组和C57对照组血糖值Ih就已经基本恢复到正常范围。
[0147] 实验结果表明，艾塞那肽长效注射液能够有效地减少2型糖尿病小鼠的体重，降 低血糖至正常水平，效果与每日一次的注射液效果基本一致，降低了注射频率，能够增加患 者的顺应性。
【主权项】
1. 一种艾塞那肽长效缓释剂在糖尿病中的应用及制备方法。2. 根据权利要求1所述，还涉及其采用复乳-溶剂挥发法（W/O/W)制备艾塞那肽 长效缓释制剂的技术方案： 称取一定量的艾塞那肽和内核物质A溶解与水，形成内水相； 取有机物质溶解于有机相中形成内有机相； 将内水相和内有机相混合，通过特殊搅拌方式制备成W/O初乳； 称取一定量的外核物质B溶解于水，形成外水相； 将初乳加入到外水相中，通过特殊搅拌方式制备成W/O/W复乳； 将W/O/W复乳转移到溶液C中，通过特殊方法①除去其中的有机相，得到前体目标 物； 将前体目标物加入洗涤水相中洗涤，通过特殊方法②，即可得到目标物。3. 根据权利要求2所述： 艾塞那肽是指载药量〇. 1 %~10 %的艾塞那肽； 内核物质A是指能溶于水的天然高分子材料、半合成高分子材料、合成高分子材料等， 在此，能溶于水是指包含常温、加热、调节PH值、照射光或者搅拌、超声、均质、振摇等方式 促使内核物质A溶解于内水相或与内水相形成均一体；并且配置成的内水相中内核物质A 的浓度为1 %~40%，优选5%~30% ; 所述天然高分子材料包含但不局限于精制淀粉、明胶、卡拉胶、印度胶、海藻酸盐、壳聚 糖、人或牛血清蛋白、玉米蛋白、鸡蛋白、酪蛋白等； 所述半合成高分子材料包含但不局限于羧甲基纤维素盐类、邻苯二甲酸醋酸纤维素、 甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素以及聚氧乙烯类化合物、聚乙二醇类化合物、聚三梨醇类 等； 所述合成高分子材料包含但不局限于聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、泊洛沙姆、聚乳酸/ 乙醇酸共聚物（PLGA)、聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物、聚丙烯酸酯等。4. 根据权利要求2所述： 有机物质是指能溶于有机相的天然高分子材料、半合成高分子材料、合成高分子材料 等； 天然高分子材料包含但不局限于硬脂酸、单硬脂酸甘油脂、单双甘油酯、黄蜡、白蜡、石 錯等； 半合成高分子材料包含但不局限于短链脂肪酸甘油三酯、中链脂肪酸甘油三酯、长链 月旨肪酸甘油三酯、乙基纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素等； 合成高分子材料包含但不局限于聚碳酯、聚氨基酸、聚乳酸、聚乳酸/乙醇酸共聚物 (PLGA)、聚乳酸羟基乙醇、聚丙烯酸酯等； 有机相是指有机溶剂类，包括：芳香烃类：甲苯、二甲苯等；脂肪烃类：戊烷、己烷、辛烷 等；脂环烃类：环己烷、环己酮、甲苯环己酮等；卤化烃类：氯苯、二氯苯、二氯甲烷等；卤代 烃类：一氯甲烷，二氯甲烷，三氯甲烷；醇类：甲醇、乙醇、异丙醇等；醚类：乙醚、环氧丙烷 等；酯类：醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸丙酯等；酮类：丙酮、甲基丁酮、甲基异丁酮等；二醇衍 生物：乙二醇甲醚、乙二醇单乙醚、乙二醇单丁醚等。5. 根据权利要求2所述： 通过特殊的搅拌方式是指包含但不局限于搅拌、剪切、均质、超声、震荡等使内水相和 内有机相混合的方式； 称取一定量的外核物质B溶解与水是指： 外核物质B是指能溶于水的天然高分子材料、半合成高分子材料、合成高分子材料等， 在此，能溶于水是指包含常温、加热、调节PH值、照射光或者搅拌、超声、均质、振摇等方式 促使外核物质B溶解于外水相或与外水相形成均一体；并且配置成的内水相中内核物质A 的浓度为〇. 5%~10%，优选1 %~6% ; 天然高分子材料包含但不局限于精制淀粉、明胶、卡拉胶、印度胶、海藻酸盐、壳聚糖、 人或牛血清蛋白、玉米蛋白、鸡蛋白、酪蛋白等； 半合成高分子材料包含但不局限于羧甲基纤维素盐类、邻苯二甲酸醋酸纤维素、甲基 纤维素、羟丙基甲基纤维素以及聚氧乙烯类化合物、聚乙二醇类化合物、聚三梨醇类等； 合成高分子材料包含但不局限于聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、泊洛沙姆、聚乳酸/乙醇 酸共聚物（PLGA)、聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物、聚丙烯酸酯等。6.根据权利要求2所述： 将初乳加入到外水相中，通过特殊搅拌方式制备成W/O/W复乳是指： 通过特殊的搅拌方式是指包含但不局限于搅拌、剪切、均质、超声、震荡等使内水相和 内有机相混合的方式； 将W/O/W复乳转移到溶液C中，通过特殊方法①除去其中的有机相，得到前体目标 物；是指： 溶液C是指浓度为0. 5%~20 %的盐溶液，优选浓度0. 8%~6 %，包含但不局限于氯 化钠、氯化钾、氯化钙、氯化铵、碳酸钾、碳酸钠、碳酸钙、碳酸铵等溶液； 特殊方法①是指通过加热蒸发、减压、蒸馏、喷雾干燥、冷冻干燥等除去上述有机相的 方法； 将前体目标物加入洗涤水相中洗涤，通过特殊方法②，即可得到目标物；是指： 所述特殊方法②是指通过离心、冷冻干燥、喷雾干燥、减压干燥等方法。
【专利摘要】本发明公开了一种艾塞那肽长效缓释剂在糖尿病中的应用及制备方法。该长效缓释制剂通过复乳-溶剂挥发法制备而得：将主药和明胶、泊洛沙姆等高分子材料为内水相，PLGA等材料溶于有机溶剂为油相，通过特殊搅拌方式制备成初乳，之后将初乳加入外水相中，通过特殊搅拌方式制备成载药量0.1％～10％的W／O／W成品。本发明较现有产品疗效长、用药顺应性好且几乎无有机溶剂残留。
【IPC分类】A61P3/10, A61K38/22, A61K9/113
【公开号】CN104922660
【申请号】CN201410102929
【发明人】唐星, 毛幼桦, 王璞修, 李力, 熊俊峰
【申请人】陕西天森药物研究开发有限公司
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2014年3月19日