一种具有抗肿瘤作用的山药提取物组合物及用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及具有抗肿瘤作用的山药提取物制备方法，属于中药技术领域。
【背景技术】
[0002] 山药为薯菌科植物薯菌（Dioscorea opposita Thunb.)的干燥根莖。味甘，性平。 归脾、肺、肾经。具有补脾养胃，生津益肺，补肾涩精的功效。常用于脾虚食少，久泻不止，肺 虚喘咳，肾虚遗精，带下，尿频，虚热消渴等症。现代药理表明，山药还具有降糖、抗衰老、调 节免疫、抗突变、降血脂等新功能。山药含有薯蓣皂苷元、尿囊素、儿茶酚胺、盐酸山药碱、山 药素 I、山药素 IV、多巴胺、多酚氧化酶、止权素 H、淀粉酶、胆碱、维生素及微量元素等。
[0003] 尿囊素（allantoin)，是尿酸的衍生物，即尿酸的氧化产物脲基海因 (ureidohydantoin)，具有消除坏死组织，促进肉芽组织生长和伤口愈合的作用。山药中的 尿囊素具有抗刺激物、麻醉镇痛和消炎抑菌等作用，常用于治疗手足皲裂、鱼鳞病、多种角 化皮肤病。目前，尿囊素正作为外用制剂广泛用于皮肤科临床，为手足皲裂、鱼鳞病、银肩 病、多种角化性皮肤病及消化性溃疡的治疗提供了新的制剂。
[0004] 山药总皂苷包含薯蓣皂苷、胆留醇、麦角留醇等留体化合物。药理研宄结果表明， 薯蓣皂苷具有祛痰、脱敏、抗炎、降脂、抗肿瘤等作用。薯蓣皂苷广泛存在于薯蓣科、百合科、 豆科等植物中，其中在薯蓣科植物中含量丰富，如穿龙薯蓣、山药、盾叶薯蓣等。薯蓣皂苷 口服后经肠道菌群代谢产生的薯蓣皂苷元是发挥作用的真正有效成分。由于山药中薯蓣皂 苷含量较低，因此目前对山药中皂苷类成分的研宄较少，其总皂苷的药理活性尚不明确。
[0005] 山药作为一种药食同源药材，由于无毒副作用而被广泛应用。目前对其药理活性 研宄主要集中在抗氧化、抗衰老、提高免疫等方面，而抗肿瘤作用鲜有报道。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种对肿瘤抑制率高的具有抗肿瘤 作用的山药提取物组合物。
[0007] 本发明的第二个目的是提供一种具有抗肿瘤作用的山药提取物组合物在制备抗 肿瘤药物中的用途。
[0008] 本发明的技术方案概述如下：
[0009] -种具有抗肿瘤作用的山药提取物组合物，由质量比1:10~20的山药皮提取物 与山药饮片提取物组成。
[0010] 优选的是：山药皮提取物和山药饮片提取物的质量比为1:15。
[0011] 山药皮提取物优选下述方法提取：将洗净的厚度为〇. 5~Imm的山药皮放在80~ 90°C的热水中焯20-40s，捞出后于40-60°C条件下烘干，粉碎，用6~12质量倍的体积比 60% -80%的乙醇水溶液浸泡1~3小时，加热回流提取2~3次，每次2~3小时，过滤， 合并滤液并浓缩至无醇味，浓缩液用石油醚或乙酸乙酯萃取，取水相I，水相I再加水饱和 正丁醇、萃取，取水相II，过滤，干燥，得山药皮提取物。
[0012] 山药饮片提取物优选下述方法提取：将山药饮片用6~10倍量体积比95%的乙 醇水溶液回流1-2次，每次l_2h，过滤，滤渣干燥，干燥滤渣用10~20质量倍的蒸馏水浸泡 1~2小时，加热回流提取2~3次，每次2~3小时，过滤，合并滤液，静置18~24小时， 离心，取上清液，用Sevage法除蛋白，滤液减压浓缩，干燥，干燥物粉碎，过100~200目筛， 即得山药饮片提取物。
[0013] 上述具有抗肿瘤作用的山药提取物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
[0014] 本发明的一种具有抗肿瘤作用的山药提取物组合物通过动物体内试验证明具有 抗癌功效。对小鼠 H22肝癌、艾氏腹水瘤（EAC)和人源H印G2肝癌抑制率均在30%以上。 并且，动物的免疫器官指数（如脾指数和胸腺指数）明显提高，证明本发明的组合物在抑制 肿瘤生长的同时可以提高机体免疫功能，发挥了中药的抗癌优点，是癌症患者迫切需求的。
【附图说明】
[0015] 图1为实施例1山药皮提取物HCLP图。
[0016] 图2为实施例2山药皮提取物HCLP图。
[0017] 图3为实施例3山药皮提取物HCLP图。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
[0019] 下面的实施例是为了使本领域的技术人员能够更好地理解本发明，但并不对本发 明作任何限制。
[0020] 实施例1
[0021] 山药皮提取物由下述方法提取：
[0022] 将洗净的厚度为0. 5~Imm的山药皮放在80°C的热水中焯40s，捞出后于50°C条 件下烘干，粉碎，用6质量倍的体积比80%的乙醇水溶液浸泡1小时，加热回流提取3次，每 次2小时，过滤，合并滤液并浓缩至无醇味，将浓缩液置于分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取，取 水相I，水相I再加水饱和正丁醇、萃取，取水相II，过滤，干燥，得山药皮提取物。
[0023] 实施例2
[0024] 山药皮提取物由下述方法提取：
[0025] 将洗净的厚度为0. 5~Imm的山药皮放在90°C的热水中焯30s，捞出后于40°C条 件下烘干，粉碎，用12质量倍的体积比60%的乙醇水溶液浸泡2小时，加热回流提取2次， 每次3小时，过滤，合并滤液并浓缩至无醇味，将浓缩液置于分液漏斗中，用石油醚萃取，取 水相I，水相I再加水饱和正丁醇、萃取，取水相II，过滤，干燥，得山药皮提取物。
[0026] 实施例3
[0027] 山药皮提取物由下述方法提取：
[0028] 将洗净的厚度为0. 5~Imm的山药皮放在85°C的热水中焯20s，捞出后于60°C条 件下烘干，粉碎，用10质量倍的体积比70%的乙醇水溶液浸泡3小时，加热回流提取3次， 每次2小时，过滤，合并滤液并浓缩至无醇味，将浓缩液置于分液漏斗中，用石油醚萃取，取 水相I，水相I再加水饱和正丁醇、萃取，取水相II，过滤，干燥，得山药皮提取物。
[0029] 实施例4
[0030] 山药饮片提取物由下述方法提取：
[0031] 将山药饮片用6倍量体积比为95%的乙醇水溶液回流2次，每次lh，过滤，滤渣干 燥，干燥滤渣用10质量倍的蒸馏水浸泡2小时，加热回流提取2次，每次3小时，过滤，合并 滤液，静置18小时，离心，取上清液，用Sevage法除蛋白，滤液减压浓缩，干燥，干燥物粉碎， 过100目筛，即得山药饮片提取物。
[0032] 实施例5
[0033] 山药饮片提取物由下述方法提取：
[0034] 将山药饮片用10倍量体积比为95%的乙醇水溶液回流1次，每次2h，过滤，滤渣 干燥，干燥滤渣用16质量倍的蒸馏水浸泡1小时，加热回流提取3次，每次2小时，过滤，合 并滤液，静置20小时，离心，取上清液，用Sevage法除蛋白，滤液减压浓缩，干燥，干燥物粉 碎，过200目筛，即得山药饮片提取物。
[0035] 实施例6
[0036] 山药饮片提取物由下述方法提取：
[0037] 将山药饮片用8倍量体积比为95%的乙醇水溶液回流2次，每次2h，过滤，滤渣干 燥，干燥滤渣用20质量倍的蒸馏水浸泡2小时，加热回流提取3次，每次2小时，过滤，合并 滤液，静置24小时，离心，取上清液，用Sevage法除蛋白，滤液减压浓缩，干燥，干燥物粉碎， 过100目筛，即得山药饮片提取物。
[0038] 实施例7
[0039] 一种具有抗肿瘤作用的山药提取物组合物，由质量比1:10的实施例1制备的山药 皮提取物与实施例4制备的山药饮片提取物组成。
[0040] 实施例8
[0041] 一种具有抗肿瘤作用的山药提取物组合物，由质量比1:20的实施例2制备山药皮 提取物与实施例5制备山药饮片提取物组成。
[0042] 实施例9
[0043] 一种具有抗肿瘤作用的山药提取物组合物，由质量比1:15的实施例3制备山药皮 提取物与实施例6制备山药饮片提取物组成。
[0044] 实施例10 [0045] 成分测定
[0046] 1山药皮提取物中尿囊素的含量测定（HPLC法）
[0047] I. 1色谱条件
[0048] 高效液相色谱仪：Agilent 1100系列；
[0049] 色谱柱：Kromasil C18 色谱柱（4mmX 250mm i. d.，5 μ m);
[0050] 流速lml/min ;柱温35°C ;紫外检测波长210nm ;进样量20 μ I ;
[0051 ] 水为流动相A，甲醇为流动相B，按照以下条件进行梯度洗脱：0-7min，10 % ; 7-8min, 100% ；8-15min, 100% ；15-16min, 10% ；16-20min, 10%
[0052] I. 2对照品溶液的制备
[0053] 精密称取尿囊素标准品0. 54mg，溶解于40%甲醇溶液中定容至500 μ L作为 母液，加40%甲醇分别制备成含有标准品浓度分别为I. 08、0. 54、0. 27、0. 135、0. 0675、 0· 03375mg/mL的对照品溶液