一种抗球虫用阿德呋啉羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药学领域，具体涉及一种抗球虫用阿德呋啉羟丙基-环糊精包合 物的制备方法。
【背景技术】
[0002] 阿德呋啉是新一代的化工合成的抗球虫药物，其主要结构与其他抗球虫药物不 同：与其他抗球虫药无交叉耐药性。实验室研究证实，阿德呋啉具有广谱抗球虫活性，对各 种小肠球虫都有抑制和杀灭作用，是一种高效、广谱、低毒的抗球虫药。
[0003] 阿德呋啉通过干扰球虫的嘌呤代谢而发挥抗球虫作用。抗球虫活性主要集中在球 虫的无性生殖期，对卵囊的孢子化也有一定的抑制作用。阿德呋啉在动物机体内肝脏中药 酶的作用下，可氧化成阿德呋啉_氮-氧化物，其氧化物的抗球虫活性比原药强。
[0004] 阿德呋啉是一种新型广谱抗球虫药物，与其他抗球虫药无交叉耐药性，但在使用 时也应注意穿梭给药和轮换给药。
[0005] 阿德呋啉有以下特点： (1)广谱抗球虫：本品对临床常见小肠球虫和盲肠球虫等均有良好的抑杀效果。
[0006] (2)疗效确切：本品作为新型广谱抗球虫药物，与其他抗球虫药物不存在交叉耐药 性，因此本品对临床常见球虫病均有着较好的控制效果。（3)促生长作用：可以提高营养物 质的吸收作用，促进盲肠和大肠内纤维素发酵生成挥发性脂肪酸。
【发明内容】
[0007] 本发明目的在于克服阿德呋啉现有剂型在使用时的不足，提供一种能够溶于水、 且毒性低的阿德呋啉新剂型。
[0008] 本发明的第二个目的是提供一种抗球虫用阿德呋啉羟丙基-P _环糊精包合物的 制备方法。
[0009] 本发明采取的技术方案如下： 一种抗球虫用阿德呋啉羟丙基-(6-环糊精包合物的制备方法，其特征是由重量比为 阿德呋啉：羟丙基-(6-环糊精：PVP (聚乙烯吡咯烷酮）：聚乙二醇（PEG):泊洛沙姆 =30 : (60-70) : (0.5-1) : (0.15-0.5) : (0.2-0. 5)的原料制成，并按如下步骤进行： (1) 将干燥后的聚乙二醇（PEG)、泊洛沙姆粉碎后制成150-200目粉； (2) 在装有球形冷凝管的三口烧瓶中，将羟丙基-P -环糊精与有机溶剂按质量体积比 (60g~70g) : (80 mL ~120mL)混合，在60~80°C水浴条件下搅拌至溶解； (3) 将PVP、聚乙二醇（PEG)、泊洛沙姆用乙醇溶解后加入步骤（3)的溶液中； (4) 称取阿德呋啉用冰醋酸溶解，缓慢加入步骤（3)的溶液中，在60~80°C水浴条件下 揽摔 20~60min ; (5) 将步骤（4)的包被液减压蒸馏收回溶剂，蒸至浓浆状停止蒸馏，减压干燥，收集产 品，粉碎得抗球虫用阿德呋啉羟丙基-环糊精包合物。
[0010] 较好地，步骤（2 )中的有机溶剂为冰醋酸、DMF (二甲基甲酰胺)、DMAC (二甲基乙 酰胺)、无水甲醇、95v%乙醇或无水乙醇； 所述的PVP为PVPkl7、PVPk30、PVPk60中的一种或两种的混合，聚乙二醇为聚乙二醇 4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000中的一种或两种的混合； 步骤（4)中阿德呋啉冰醋酸溶液的加入方法为恒压滴液漏斗加入或采用其它缓慢加入 的装置分批或连续缓慢地加入。
[0011] 本发明的优点为： 首先，增加阿德呋啉的溶解度，可以提高其生物利用度，也为新剂型的开发和与其他药 物的合理配伍奠定基础； 其次，增加其安全范围，降低阿德呋啉的毒性，可以增加其使用的安全剂量，减少中毒 事件的发生； 再次，通过增加其溶解度提高了生物利用度，使其在胃肠道内缓慢释放，可以延长其半 衰期，维持较长时间的血药浓度。
【具体实施方式】
[0012] 下面将通过具体的实施例对本发明做详细的介绍。
[0013] 实施例1 一种抗球虫用阿德呋啉羟丙基-0 _环糊精包合物的制备方法，包括如下步骤： (1) 先将干燥后的聚乙二醇（PEG4000) 0. 5g、泊洛沙姆0. 2g粉碎后制成200目粉； (2) 在装有球形冷凝管的三口烧瓶中将羟丙基-P -环糊精70g与SOmL冰醋酸混合，在 60°C水浴条件下搅拌至溶解； (3) 将PVPkl7 0. 5g和步骤（1)所得物用50mL 95v%乙醇溶解后缓慢加入步骤（2)的 溶液中； (4) 再称取阿德呋啉30g，用冰醋酸40mL溶解后，用恒压漏斗滴入到步骤（3)溶液中， 在60°C水浴条件下搅拌30min ; (5) 包被结束后，将包被液减压蒸馏回收溶剂，蒸至浓浆状停止蒸馏，减压干燥，收集 产品，粉碎得阿德呋啉羟丙基-0 -环糊精包合物。
[0014] 实施例2 一种抗球虫用阿德呋啉羟丙基-0 -环糊精包合物的制备方法，包括如下步骤： (1) 先将干燥后的聚乙二醇（PEG6000) 0. 15g、泊洛沙姆0. 5g粉碎后制成150目粉； (2) 在装有球形冷凝管的三口烧瓶中，将羟丙基-P -环糊精60g与IOOmLDMF混合，在 70°C水浴条件下搅拌至溶解； (3) 将PVPk30 Ig和步骤（1)所得物用60mL 95v%的乙醇溶解后缓慢加入步骤（2)的 溶液中； (4) 再称取阿德呋啉30g，用冰醋酸50mL溶解，缓慢加入到步骤（3)的溶液中，在80°C 水浴条件下搅拌20min ; (5) 包被结束后，将包被液减压蒸馏回收溶剂，蒸至浓浆状停止蒸馏，减压干燥，收集产 品，粉碎得阿德呋啉羟丙基-0 -环糊精包合物。
[0015] 实施例3 一种抗球虫用阿德呋啉羟丙基-0 -环糊精包合物的制备方法，包括如下步骤： (1) 先将干燥后的聚乙二醇（PEG8000) 0. 3g、泊洛沙姆0. 3g粉碎后制成200目粉； (2) 在装有球形冷凝管的三口烧瓶中，将羟丙基-P -环糊70g与120mL无水乙醇混合， 在80°C水浴条件下搅拌至溶解； (3) 将PVPk60 0. 8g和步骤（1)所得物用70mL 95v%的乙醇溶解后缓慢加入步骤（2) 的溶液中； (4) 再称取阿德呋啉30g，用冰醋酸60mL溶解，缓慢加入到步骤（3)的溶液中，在70°C 水浴条件下搅拌60min ; (5) 包被结束后将包被液减压蒸馏回收溶剂，蒸至浓浆状停止蒸馏，减压干燥，收集产 品，粉碎得阿德呋啉羟丙基-0 -环糊精包合物。
[0016] 本发明所制备出的阿德呋啉羟丙基-环糊精包合物采用高效液相色谱法视差 折光检测器检测，包合率在98%以上。
[0017] 试验例：阿德呋啉包合物对人工感染鸡球虫病的疗效试验 1材料与方法 I. 1试验鸡选择与分组：选择刚出壳的罗曼蛋鸡雏鸡1200羽，饲喂不含任何药物的饲 料，自由饮水，无球虫饲养至20日龄，经粪检确认无球虫卵囊后供试验用，随机分为4组，阿 德呋啉包合物组300羽、普通阿德呋啉粉剂组300羽、阳性对照组300羽，阴性对照组300 羽，试验组按照100g阿德呋啉包合物和普通阿德呋啉粉剂拌料50-100kg饲料饲喂，对照组 饲喂基础日粮。
[0018] 1.2试验药物阿德呋啉包合物(实施例1)，普通阿德呋啉粉剂，河南亚卫动物药 业有限公司生产。
[0019] 1. 3人工感染及给药方法：人工给实验组接种球虫卵囊前24h，给各实验组拌料 给药，连续用药7d，阳性对照组感染不给药，阴性对照组不感染不给药。
[0020] 1.4试验期限及临床观察：试验期为7 d，每日观察鸡的发病情况，记录血便和死 亡数等。人工感染后第7至第8天，将各组鸡分别称重并全部扑杀，观察并记录试验鸡的增 重及盲肠和小肠病变情况。
[0021] 1.5药效判定标准 1. 5. 1相对增重率：试验开始及结束时分别称鸡只体重，计算平均增重和相对增重率。 以不感染不给药组在试验期间相对增重率为100%，计算其他各组的相对增重率，相对增重 率X 100即为相对增重率得分。1.5.2存活率：记录各组死亡鸡数，算出死亡率及存活 率。1.5.3病变值：感染后第8天宰杀各组全部鸡只，参照设计的病变记分法，记录每只 鸡的病变记分，将每组各鸡的病变记分相加得病变值总分。肠道正常、无肉眼可见病变记 〇分，有少量散在病变记1分，较多稀疏病变记2分，有融合性大面积病变记3分，病变 广泛融合、肠壁增厚记4分。
[0022] 1.5.4卵囊值：根据卵囊比数计算卵囊值(表1)。卵囊比数（％ )=(各试验 组卵囊数/感染不给药卵囊数）X100。
[0023] 1.5.5抗球虫指数(ACI) :ACI =(存活率+相对增重率）-(病变值+卵囊值)。 ACI < 120，为无效；ACI在120~160范围内，为低效;ACI在160~180之间，为中效； ACI > 180,为高效。
[0024] 2 结果 2.1临床观察感染不给药组鸡感染卵囊后，逐渐出现采食减少、羽毛蓬乱、精神差、 昏睡等反应，第5天起，有血便出现，第6~7天开始死亡。死亡鸡经剖检发现，盲肠肿大， 有血水郁积，盲肠和小肠上有出血点；阴性对照组无临床症状和死亡。 2. 2抗球虫疗效试验结果如表1所示。
[0025] 表1阿德呋啉包合物对人工感染鸡球虫病的防治效果
【主权项】
1. 一种抗球虫用阿德呋啉羟丙基-0 -环糊精包合物的制备方法，其特征在于，由重 量比为阿德呋啉：羟丙基-(6-环糊精：PVP :聚乙二醇：泊洛沙姆=30 : (60-70): (0. 5-1) : (0. 15-0. 5) : (0. 2-0. 5)的原料制成，并按如下步骤进行制备： (1) 将干燥后的聚乙二醇、泊洛沙姆粉碎后制成150-200目粉； (2) 将羟丙基-P -环糊精与有机溶剂按质量体积（60g~70g) : (80mL~120mL)混合，在 60~80°C水浴条件下搅拌至溶解； (3) 将PVP、聚乙二醇、泊洛沙姆用乙醇溶解后加入步骤（2)所得的溶液中； (4) 称取阿德呋啉用冰醋酸溶解，加入步骤（3)所得的溶液中，在60~80°C水浴条件下 搅拌20~60min，获得包被液； (5) 将步骤（4)所得的包被液进行减压浓缩、减压干燥，收集产品，粉碎得阿德呋啉羟丙 基-(6-环糊精包合物。2. 根据权利要求书1所述抗球虫用阿德呋啉羟丙基-P _环糊精包合物的制备方法，其 特征在于所述的PVP为PVPk 17、PVPk30、PVPk60中的一种或两种的混合，聚乙二醇为聚乙二 醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000中的一种或两种的混合。3. 根据权利要求书1所述抗球虫用阿德呋啉羟丙基-P _环糊精包合物的制备方法，其 特征在于，步骤（2)中的有机溶剂为冰醋酸、DMF、DMAC、无水甲醇、95v%乙醇或无水乙醇。4. 根据权利要求书1所述抗球虫用阿德呋啉羟丙基-P _环糊精包合物的制备方法，其 特征在于，步骤（4)中阿德呋啉用冰醋酸溶解后加入步骤（3)所得的溶液中的方法为恒压 滴液漏斗加入。
【专利摘要】本发明属于药物技术领域，具体涉及一种抗球虫药物阿德呋啉羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法。该方法以羟丙基-β-环糊精、PVP、聚乙二醇（PEG）、泊洛沙姆为主分子，阿德呋啉为客分子，在冰醋酸溶液中主分子与客分子进行包被，包被结束将混合溶液经旋转蒸发，减压干燥，粉碎得白色粉末状阿德呋啉羟丙基-β-环糊精包合物。该包合物制备方法具有包合率高、包合时间短、包合成本低及包合物的水溶性好等优点，所得包合物不但使阿德呋啉的溶解度大大增加，且可以降低阿德呋啉的毒性，可以用来制作阿德呋啉的可溶性粉剂或者水溶液制剂。
【IPC分类】A61K31/52, A61K47/32, A61K47/48, A61K47/34, A61P33/02
【公开号】CN105079819
【申请号】CN201510584276
【发明人】郭芳茹, 张遂平, 刘钊锋, 章四新, 吴胜耀, 杨慧敏, 郭菊, 刘杨, 王菊萍, 牛咏梅
【申请人】河南亚卫动物药业有限公司
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年9月15日