卵磷脂化超氧化物歧化酶作为有效成分在制备慢性阻塞性肺疾病改善剂中的应用
【专利说明】卵磷脂化超氧化物歧化酶作为有效成分在制备慢性阻塞性 肺疾病改善剂中的应用
[0001 ] 本申请是分案申请，其原申请的国际申请号为PCT/JP2010/053317，中国国家申请 号为201080011243. 5,申请日为2010年3月2日，发明名称为"慢性阻塞性肺疾病改善剂"。
技术领域
[0002] 本发明涉及卵磷脂化超氧化物歧化酶作为有效成分在制备慢性阻塞性肺疾病 改善剂中的应用，详细地说，涉及含有卵磷脂化超氧化物歧化酶（以下，有时也简称为 PC-S0D)作为有效成分的慢性阻塞性肺疾病改善剂。
【背景技术】
[0003] 超氧化物歧化酶（以下，有时也简称为S0D)是1965年由Huber等人从牛的血液 中作为抗炎蛋白提取的生理活性蛋白，已解明其可特异性地清除作为活性氧之一的超氧阴 离子（〇2)。在生物体内，活性氧主要由嗜中性粒细胞、巨噬细胞等吞噬细胞释放以用于杀 菌，通常对于剩余的活性氧，存在以SOD为首的各种抗氧化物质，以防御活性氧对正常细胞 的伤害。
[0004] 但是，若活性氧过量存在并超出SOD等抗氧化物质所产生的抗氧化能力，则其附 近存在的物质（特别是细胞膜）会被活性氧攻击，表现出各种病状。事实上，自从活性氧的 强大的组织损伤性被证明以来，已解明其是导致炎症、过敏、缺血再灌注所致的组织损伤、 抗癌剂所致的肺纤维化等多种病状发生及加重的因素。
[0005] 在这样的状况下，人们发现了可特异性清除活性氧的S0D，对其临床应用的可能性 进行了广泛的研究。本发明人也对SOD的临床应用性进行了深入研究并认识到，为了提高 SOD的临床效果，重要的是抑制SOD从肾脏排泄以维持血中浓度，以及提高SOD对细胞膜的 亲和性清除细胞膜上存在的过量的活性氧，本发明人对各种修饰型SOD进行了研究，提出 了卵磷脂化超氧化物歧化酶（PC-SOD)(专利文献1、专利文献9)。
[0006] 该PC-SOD是利用基因重组技术制备Cu/Zn-人超氧化物歧化酶（SOD)后，以化学 方式使每1分子SOD (二聚体）上键合平均4分子卵磷脂衍生物（磷脂酰胆碱衍生物：PC) 而得到的卵磷脂化SOD。PC-SOD对细胞膜具有高亲和性，已确认其对于缺血/再灌注损伤、 蒽环类抗癌药诱发心肌症等活性氧作为发症因子在病变部位以参与的疾病的治疗效果高， 已经提出了各种以该PC-SOD作为有效成分的急性心力衰竭治疗剂（专利文献2)、抗病毒剂 (专利文献3)、狼疮肾炎治疗剂（专利文献4)、与脑血管疾病相伴的功能障碍改善剂（专 利文献5)、抗纤维化剂（专利文献6)或者抗过敏疾病处置剂（专利文献7)、烧烫伤治疗剂 (专利文献8)、间质性肺炎治疗剂（专利文献10)等。
[0007] 那么，慢性阻塞性肺疾病（COPD :Chronic Obstructive Pulmonary Disease)因各 种原因（特别是吸烟）而在肺中产生慢性的炎症，由此引起肺泡的破坏、支气管粘液腺的肥 大，结果产生气喘，咳嗽和咳痰增加。以前被称为肺气肿（PE :pulmonary emphysema)的疾 病与被称为慢性支气管炎（CB :chronic bronchitis)的疾病两者多以各种比例合并，与由 该两者所引起的闭塞性肺病一起被称为慢性阻塞性肺疾病（以下，记为COPD)。
[0008] 根据世界卫生组织（WHO)的估算，2005年全世界一年有300万人因 COPD而丧命， 占死亡原因的第4位，并预测在今后10年间还会增加30%。根据厚生劳动省的统计，在日 本，2005年日本人的全部死亡人数的1.3%是因 COPD而死亡，为死亡原因的第10位，若仅 限于男性则占第7位。
[0009] COPD的最大原因为吸烟。coro患者的90%为吸烟者（非专利文献1)，与非吸烟 者相比吸烟者中coro的发病风险为6倍以上。吸烟者的约10~15%会患C0PD，若仅限于 高龄者则近50%为C0PD。作为其他原因，可以举出室内空气污染、大气污染、化学物质或粉 尘的吸入、遗传所致的原因、幼儿期的肺炎/支气管炎等。
[0010] 作为其病状，其是特征在于气流受限、即难以呼气的疾病，但病状的本质为呼吸道 的慢性炎症。由于吸烟或吸入物质，从中央气道至末梢支气管以各种水平引起肺的炎症。其 结果，认为由于蛋白酶/抗蛋白酶的不均匀、和氧化剂/抗氧化剂的不均匀等而引起肺泡的 破坏、支气管粘液腺的肥大。
[0011] 该coro产生不可逆的呼吸道的破坏，因此是无法治愈的疾病。只能通过禁烟；利 用支气管扩张剂、祛痰剂、止咳剂等给药的药物疗法；氧疗法等来缓解症状，其为极其麻烦 的疾病。
[0012] 从上述观点出发，迄今为止提出了各种coro改善剂或改善方法（例如，专利文献 11、12)，但现状是期待更优异的coro改善剂的出现。
[0013] 现有技术文献
[0014] 专利文献
[0015] 专利文献1 :日本特开平9-117279号公报
[0016] 专利文献2 :日本特开平9-52843号公报
[0017] 专利文献3 :日本特开平9-59178号公报
[0018] 专利文献4 :日本特开平9-110717号公报
[0019] 专利文献5 :日本特开平10-338645号公报
[0020] 专利文献6 :日本特开2001-2585号公报
[0021] 专利文献7 :日本特开2001-151695号公报
[0022] 专利文献8 :日本特开2006-169128号公报
[0023] 专利文献9 :日本特开2001-64199号公报
[0024] 专利文献10 :日本特愿2007-099201
[0025] 专利文献11 :日本特开2006-56890号公报
[0026] 专利文献12 :日本特开2008-189667号公报
[0027] 非专利文献
[0028] 非专利文献 I :Annual Review of Medicine, 40:1989, pp411-429
[0029] 若COPD的发病与肺组织中的炎症有关，则其诱发与超氧阴离子等活性氧、铁络合 物有关，因此认为，通过利用sod等清除这些活性氧来抑制其诱导，结果能够改善coro症 状。
[0030] 于是，本发明人立足于该观点，研究了之前提出的细胞亲和性高的卵磷脂化超氧 化物歧化酶（PC-SOD)在COPD中的应用，结果确认到该PC-SOD对于COPD症状的改善极其 有效，从而完成了本发明。
【发明内容】
[0031] 因此，鉴于上述现状，本发明的课题在于提供一种以PC-SOD作为有效成分的安 全、有效的coro改善剂。
[0032] 为了解决上述课题，本发明的基本方式在于一种coro改善剂，其特征在于，其以 如下通式（I)表示的卵磷脂化超氧化物歧化酶作为有效成分。
[0033] SOD'（Q-B)ni (I)
[0034] (式中，SOD'表示超氧化物歧化酶的残基，Q表示化学交联，B表示从在甘油部的2 位具有羟基的溶血卵磷脂中的所述羟基上除去氢原子后的残基，m为溶血卵磷脂在1分子 超氧化物歧化酶上的平均键合数，且表示1以上的整数。）
[0035] 更优选的是一种coro改善剂，其特征在于，在本发明中使用的式（I)表示的卵磷 脂化超氧化物歧化酶中，Q为-C (0) - (CH2) n-c (0)-(式中，η表示2以上的整数）。
[0036] 此外，更具体地说，本发明涉及一种coro改善剂，其特征在于，S0D'为人超氧化物 歧化酶的残基，具体地说，S0D'为人超氧化物歧化酶的氨基酸序列中的第111位氨基酸变 成S-(2-羟乙基硫代）半胱氨酸的超氧化物歧化酶修饰体的残基。
[0037] 最具体地说，本发明涉及一种coro改善剂，其特征在于，超氧化物歧化酶为在活 性中心含有铜和锌的超氧化物歧化酶。
[0038] 此外，本发明涉及一种coro改善剂，该coro改善剂含有卵磷脂化超氧化物歧化酶 的同时还含有其稳定化剂，作为稳定化剂，含有糖成分、特别是蔗糖。
[0039] 更具体地说，本发明涉及一种coro改善剂，其特征在于，其为注射剂的形态或吸 入剂的形态。
[0040] 本发明中，COPD的发病是在从中央气道至末梢支气管的呼吸道产生慢性炎症的疾 病，其诱发与超氧阴离子等活性氧、铁络合物有关，因此通过利用SOD等清除这些活性氧来 有效地抑制其诱导，其结果能够进行COPD的有效的改善治疗。
[0041] 在迄今为止不存在有效的coro改善剂的状况下，通过给予特异性的PC-SOD能够 改善其症状，从这方面来看，本发明在医疗上的效果是极其特异的。
[0042] 另外，本发明中使用的PC-SOD与细胞膜的亲和性优于现有的S0D，清除病变部位 的超氧阴离子的能力高。而且，通过作为稳定化剂一同含有糖成分、特别是蔗糖，能够使 PC-SOD自身的稳定性优异，可以持续地发挥半衰期短的SOD的效果，能够进行coro的改善， 从该方面出发本发明是特别优异的。
【附图说明】
[0043] 图1是表示试验例1中的肺泡清洗液中的总细胞数的图。
[0044] 图2是作为试验例1中的炎性细胞数表示肺泡巨噬细胞的结果的图。
[0045] 图3是作为试验例1中的炎性细胞数表示嗜中性粒细胞的结果的图。
[0046] 图4是作为试验例1中的炎性细胞数表示淋巴细胞的结果的图。
[0047] 图5是试验例1中经H&E染色的肺组织的显微镜照片。
[0048] 图6是表示试验例1中的肺泡平均截距（Mean Linear