包含式x1-gqretpegaeakpwy-x2的环肽的药物组合物及其体外处理肺的用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种体外处理肺方法从而在移植前调节/改善肺功能。
【背景技术】
[0002] 在肺移植中，部分或整个病变的肺被替换为已故的捐赠者的健康肺来提高生活质 量，甚至延长接受者的生存时间。肺移植最常见的适应症是慢性阻塞性肺疾病（COPD)，包 括肺气肿、原发性肺纤维化和囊性纤维化。其他适应症包括a1-抗膜蛋白酶缺乏症肺气 月中、原发性肺动脉高压和肉样瘤病。肺供体和接受者的平均年龄分别是约35和50岁。成 人肺移植的未调整的基准存活率介于3个月时约90%和10年时约30%。总体平均生存期 (或"半衰期"）一般地为约5. 5年。，在肺移植后的成年接受者在前30天内和在第1年内 的主要死亡原因是移植失败和非巨细胞病毒感染。！年后，闭塞性细支气管炎度0巧成为 发病率和死亡率的另一个主要危险因素（AmJRespir化itCareMed. 2011年11月1日； 184巧）：1055-61)。
[0003] 关键时期缺血后对器官恢复血液供应导致了器官的实质损伤和功能障碍，其被称 为再灌注损伤巧I)。缺血再灌注损伤（IRI)在器官移植、主要脏器切除和休克中是常见的。 尽管在肺保存的精细化方面W及手术技术和围术期护理的改进方面，缺血再灌注引起的肺 损伤仍然是肺移植后早期发病率和死亡率的重要原因。该综合征通常会在移植后的前72 小时内发生，并W非特异性肺泡损伤、肺水肿和低氧血症为特征。临床谱的范围可从与在胸 部X光片上的一些浸润相关的轻度低氧血症到需要正压通气、药物治疗和偶尔体外膜肺氧 合的非常严重情况化ingRC等人，AnnIlioracSurg. 2000年6月；69 (6): 1681-5)。一些 术语已被用于描述运种综合征，但缺血再灌注损伤是最常用的，其具有归因于常常导致72 小时后死亡或延长的机械通气的损伤的最严重形式的原发性移植失败。除了早期术后阶段 的显著发病率和死亡率，严重缺血再灌注损伤还可与可导致长期移植肺功能障碍的急性排 斥反应的增加的风险相关（FiserSM等人，AnnHioracSurg. 2002年4月；73(4):1041-7; 讨论 1047-8)。
[0004] IRIW不良氧合为特征作为主要的条件标准，还W如由病理学上弥漫性肺泡损伤 (IDAD)所掲示的低肺部顺应性、间质/肺泡水肿、胸部射线照片上的肺部浸润、增加的肺血 管阻力、肺内分流和急性肺泡损伤为特点。在临床上，患者面临着长期通气、长期停留在ICU 和医院总体内、增加的医疗费用和增加的发病率和死亡率的风险。 阳0化]对于临床管理，肺移植已成为治疗患有难治性末期肺部疾病患者的主要依靠。然 而，列出的肺移植患者的数量大大超过了可用的供体。全世界只有15至20%的脑死亡供体 所提供的肺被使用，而80%的肺因为不符合供体的选择标准而被拒绝。诸如可导致移植后 移植肺功能障碍和失败的不良气体交换或胸部X光浸润的临床发现显示出供体肺损伤。许 多策略都提倡增加供体肺的数量。一些肺移植与活体亲属肺供体项目有关，而另一些则主 要集中在非屯、脏跳动供体为策略来最终帮助减轻供体的缺乏。虽然活体亲属非供体已经在 一些中屯、成功地使用，并且非屯、脏跳动供体的使用已被证明在人类中是可行的，整体而言 运些策略由于技术、医学和伦理方面的考虑仍然仅限于少数病人。
[0006] 虽然在过去10年里，扩大的供体肺的使用已导致整体肺移植活性逐渐增加，一 些研究已经表明，运些肺的大量使用可导致更长的ICU入住时间，较高的早期死亡率和 在第一年时较差的肺活量测定化awutSM等人，Transplantation. 2005年2月15日； 79 (3): 310-6;PierreAF等人，JIlioracCardiovascSurg. 2002 年 3 月；123 (3) :421-7; 4, 5)。
[0007] 因此，分别对每个供体进行认真考虑，其在选择用于移植的扩大的供体肺可能承 担的风险，应总是与在等候名单上的接受者死亡的风险进行权衡。供体肺的准确评估是 选择可安全用于移植的器官的关键因素。不幸的是，使用目前的临床供体选择标准的移植 后结果的预测是不准确的，而如胸部射线照片评价和支气管镜检查的发现的一些标准是 相当主观的。在确定移植后结果中临床参数的不准确性偶尔导致使用了具有导致严重的 原发性移植肺功能障碍（PGD)的无法识别的损伤的肺。更重要的是，据估计，如果更详细 的器官评价是可能的，约40%当前临床上拒绝移植的肺可能已被安全地使用（WareLB等 人，Lancet. 2002年8月24日；360巧333): 619-20)。运些肺会显著增加总供体肺的可用 性。
[000引基于使用来自屯、脏骤停后供体的肺的一般思路，可使用"离体"灌注巧VL巧技 术来评估肺的肺功能，否则不能"体内"评价。经过60到90分钟短时间的"离体"评估 后，捐赠的肺可成功地用于人体肺移植（SteenS等人，Ann化oracSurg. 2007年6月； 83 巧）：2191-48 ;IngemanssonR等人，AnnHioracSurg. 2009 年 1 月；87(1): 255-60)。
[0009] 其他研究也W实验的方式地展示了W充足的溶液进行短期"离体"灌注W便 评估动物模型中肺功能和临床上不匹配人类肺中肺功能的可行性巧egaFR等人，Ann Surg. 2003 年 12 月；238 (6) :782-92ErasmusME等人，TransplInt. 2006 年 7 月； 19 (7): 589-93;EganTM等人，AnnIlioracSurg. 2006 年 4 月；81 (4): 1205-1310-12)。
[0010] 运种EVLP技术后进行肺移植的设想已经成功地转移到临床实践中。然而，目前为 止EVLP仅被用于评价"离体"供体肺功能，并且EVLP尚未用于再调节供体肺和/或将治疗 性活性药物给药到肺部。
[0011] 本文中例举的肤已作为药品被公开于：
[0012]-WO2006/013183 (肤与肺表面活性物质一起给药），
[0013]-WO2010/099556 (高通透性的治疗），
[0014]-WO2011/085423所描述的（肺或胃肠外应用），
[0015] -Parastoo等人，J.Med.Chem. 2010, 53, 8021-8029 (A549 细胞中阿米洛利敏感钢 流的激活）。
[0016] 然而，任何运些出版物没有描述体外处理肺。
[0017]Vadasz等人 2008 年在CritCarMed的 36 卷第 5 期的 1543-1550 页和在Elia等 人2003年在AmJRespandCritCarMed的168卷第9期的1043-1050页中描述了动物 模型，其中，为了显示所使用的肤的活性对肺进行体外处理。没有表明或意图用于改善肺功 能的体外处理和将由此处理的肺移植进接受者。此外，由于上皮/内皮屏障的损坏，根据运 些出版物所使用的肺不适合重新植入。
[0018] 令人惊奇地发现，在植入前可对供体肺进行"离体"灌注和通气，由此可在植入前 通过给药生物活性化合物对离体处理的肺进行调节W在移植前改进肺的换气性能。
【发明内容】
[0019] 一方面，本发明提供了一种体外调节/改善肺功能的方法，其包括W式I的氨基酸 序列的环化化合物处理离体肺：
[0020] X1-GQRETPEGAEAKPWY-X2I 其中
[0022] Xi包含具有1至4个、特别是1至3个残基的氨基酸（序列），所述氨基酸包含天 然或非天然氨基酸，特别是选自氨基酸（序列）(：、松？、1(、鸟氨酸、4-氨基下酸、0-丙氨酸， 和
[0023] Xz包含选自天然氨基酸的一种氨基酸，特别是选自C、D、G和E的组一种氨基酸，
[0024] 并且其中
[00巧]Xi包含在其第一左侧位置的N-末端氨基酸和X2包含在其最后右侧位置的C-末 端氨基酸。
[00%] 在本发明的方法中的氨基酸序列中有用的天然氨基酸是已知的，并且包括例如G、 A、V、L、I、M、P、F、WS、T、N、Q、C、U、Y、D、E、H、K、R。
[0027] 在本发明的方法中的氨基酸序列中有用的非天然氨基酸包括
[0028] -具有天然氨基酸的主要结构、但不同于a -氨基酸的氨基酸，
[0029] -D形式（即不同于天然心形式）的天然氨基酸，即烷基基团不在k构型，而在 D-构型中的天然氨基酸，
[0030]-包含2至12个（例如2至6个）碳原子，至少一个氨基基团（例如一个或两 个），和至少一个簇基基团（例如一个或两个）的非天然氨基酸，例如任选地除了在天然氨 基酸中存在的取代基，如例如0H、-C0NH2、-NH-C(=畑2)畑2、5山咕4)烷基-S-、苯基、杂环 基（例如包含5或6环元件并包含至少一个选自N、0、S(优选地为脚的杂原子（例如一个 或两个脚，任选地与另一个例如苯基（例如包括脯氨酸基、吗I噪基、咪挫基）的环稠合。
[0031] 在本发明的方法中的氨基酸序列中的非天然氨基酸包括鸟氨酸、4-氨基下酸、 0-丙氨酸。
[0032] 另一方面，式I的氨基酸序列的环化化合物包括
[0033]-沈QIDNO=I序列
[0034]环（CGQRETPEGAEAKPWYC)
[0035] 其中两个末端半脫氨酸残基形成二硫键；
[0036]-沈Q ID NO:2 序列
[0037]环化SPGQRETPEGAEAKPWYE)
[003引其中酷胺键形成于连接到N末端赖氨酸残基的e-碳原子的氨基基团和连接到C末端谷氨酸残基的丫-碳原子的侧链簇基基团之间；
[00