售铁皮石解茶）、B组（对比例制备得到的铁皮石解速溶茶） 和C组（本发明实施例3制备得到的铁皮石解速溶茶）。
[0054] 2、试验方法： 阳化日](1)铁皮石解粗体物制备提取方法：取A组、B组和C组的铁皮石解速溶茶lOg，按 料液比1 :25加水提取，提取Ξ次，合并提取液，浓缩至一定体积，加3倍95%的乙醇沉淀， 取上清液浓缩、干燥，得铁皮石解粗提物备用。
[0056] 似还原力的测定：样品将铁氯化钟（即6佑脚6)还原成亚铁氯化钟化4FeKN)6)， 亚铁氯化钟再与化作用，生成亚铁氯化铁（普鲁±蓝），W在700nm波长处检测普鲁±蓝 的吸光度表示还原力的大小，吸光度越高，样品的还原力就越强，抗氧化性越强。在700nm 波长处，分别测定浓度为5mg/ml的A组、B组和C组的铁皮石解粗提取物的吸光值。
[0057] (3)清除超氧阴离子实验：在产生超氧阴离子自由基（妒·）的反应体系中，分别 加入浓度为5mg/ml的A组、B组和C组的铁皮石解粗提取物，测定它们清除率。
[00郎](4)清除径基自由基的实验：FeS〇4与Η2〇2反应产生-0H，在体系内加入水杨酸，可 捕捉径基自由基并产生有色物质，该物质在510nm处有最大吸收，当反应体系中存在·0Η自 由基清除剂时，此氧化过程受到抑制，吸光度值则降低。在化S〇4与Η2〇2反应体系中，分别 加入浓度为30mg/ml的A组、Β组和C组的铁皮石解粗提取物，测定清除率。
[0059] (5)模拟胃液抑条件下的N妒清除反应作用：清除亚硝酸盐是有效防止N-亚硝 基化合物致癌的途径之一。在模拟体系中加入分别加入浓度为14mg/ml的A组、B组和C组 的铁皮石解粗提取物，测定清除率。
[0060] 化)DPK1法测定铁皮石解抗氧化活性：DPK1 ·在有机溶剂中是一种稳定的自由基， 广泛用于抗氧化评价体系中。在体系中，分别加入浓度为30mg/ml的A组、B组和C组的铁 皮石解粗提取物，测定清除率。
[0061] 3、试验结果：
[0062] 表1不同组别的铁皮石解粗提取物的还原能力
[0063]
W64] 表1结果表明，A组、B组和C组的铁皮石解粗提取物具有还原能力，C组还原能力A组和B组，B组优于A组。 阳0化]表2不同组别的铁皮石解粗提取物清除超氧阴离子的能力[0066]
[0067] 表2表明，A组、B组和C组的铁皮石解粗提取物都具有清除超氧阴离子的能力，C 组清除能力优于A组和B组，B组优于A组。
[0068] 表3不同组别的铁皮石解粗提取物清除径基自由基的能力
[0069]
[0070] 表3表明，A组、B组和C组的铁皮石解粗提取物都具有清除径基自由基的能力，C 组清除能力优于A组和B组，B组优于A组。
[00川表4不同组别的铁皮石解粗提取物对N妒清除作用
[0072]
[0073] 表4表明，A组、B组和C组的铁皮石
解粗提取物对胃W2都有清除作用，C组清除能 力优于A组和B组，B组优于A组。
[0074] 表5不同组别的铁皮石解粗提取物对DPPH清除效果 阳0巧]
[0076] 表5表明，A组、B组和C组的铁皮石解粗提取物对DPPH都有清除效果，C组清除 效果优于A组和B组，B组优于A组。
[0077] 综合上述氧化反应体系试验结果，可知A组、B组和C组的铁皮石解速溶茶具有抗 氧化性，而C组显著优于A组和B组，B组优于A组，说明本发明的方法能够增强铁皮石解 的抗氧化性，而本发明的中药添加剂能够进一步增强铁皮石解的抗氧化性。
[007引试验例2:本发明方法制备得到的铁皮石解速溶茶抗癌的作用效果
[0079] 1、实验动物：健康昆明种小鼠，体重（20±2)g，雌雄各半，由广西医科大学实验动 物中屯、提供。
[0080] 2、肿瘤细胞株：小鼠肉瘤Sis。腹水型瘤株，由广西肿瘤防治研究所提供。
[0081] 3、铁皮石解药剂制备：
[0082] 分别取A组（一般市售铁皮石解茶）、B组（对比例制备得到的铁皮石解速溶 茶）和C组（本发明实施例3制备得到的铁皮石解速溶茶）的铁皮石解速溶茶lOg，置于 lOOOmL的玻璃烧杯中，加水500mU浸泡比后，置于火上煎熬，先武火煮沸后改为文火，再煎 熬60min后焰火，将药液3500r/min离屯、5min，取出上清药液。然后再向沉渣中加入300血 水，用同样方法再煎熬两次。将3次上清药液混合后置于文火上，浓缩定容成200mL，制成含 生药5%的原药液，将该药液密封，置于冰箱冷藏保存备用。
[0083] 4、实验方法：
[0084] 取（20±^g小鼠40只，前肢皮下分别接种经昆明系小鼠传代第7天的小鼠肉瘤 Sis。瘤株细胞（经台吩兰染色活细胞数大于95%)的腹腔稀释液0.2mU其浓度SXloVmL。 将注射瘤细胞后的小鼠随机分为4组，每组10只，雌雄各半：对照组，同侧同位注射生理盐 水0. 5mL;A组，同侧同位注射A组原药液稀释液0. 25mU终剂量为每只小鼠注射铁皮石解 成分0. 5mg;B组，同侧同位注射铁皮石解汤剂稀释液0. 25mL，终剂量为每只小鼠注射铁皮 石解成分0. 5mg;C组，同侧同位注射铁皮石解汤剂稀释液0. 25mU终剂量为每只小鼠注射 铁皮石解成分0. 5mg。观察小鼠的生活状态、肿瘤生长状况及小鼠的生存情况。
[00化]5、试验结果：
[0086] 自实验之日起，随时观察每只小鼠的生活状况。对照组小鼠1周开始出现肉眼可 见肿块（约0. 15cmX0. 15cm)，而A组、B组和C组则未见肉眼可见的肿块。A组、B组和C组小鼠全部存活。继续观察至实验第18天起，对照组小鼠开始逐渐死亡，至37天对照组全 部死亡。而A组、B组和C组小鼠则全部存活，且均未出现肉眼可见肿块。继续观察至第86 天，A组小鼠出现肉眼可见肿块，继续观察至实验第102天起，A组小鼠开始逐渐死亡，至114 天A组小鼠全部死亡，B组和C组小鼠全部存活，未出现肉眼可见肿块。继续观察至118天 B组小鼠开始逐渐死亡，至135天B组小鼠全部死亡，C组小鼠全部存活，未出现肉眼可见肿 块。继续观察至151天C组仍全部存活。本实验共重复4次，结果基本相同。小鼠的生存 情况见表6。
[0087] 表6不同组别的铁皮石解速溶茶抗小鼠Sis。腹水型肉瘤的实验观察结果
[0088]
[0089] 上表表明，A组、B组和C组铁皮石解速溶茶对Sis。腹水型肉瘤细胞有抑制作用，但 是C组铁皮石解速溶茶抑制效果较为显著，B组铁皮石解速溶茶抑制效果又优于A组铁皮 石解速溶茶，说明本发明的方法能够提高铁皮石解的抗癌功效，而本发明的中药添加剂又 能够进一步增强铁皮石解的抗癌功效。
【主权项】
1. 一种铁皮石斛速溶茶的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤： 1) 取20~40重量份中药添加剂分别洗净，粉碎，然后向中药添加剂中加入其重量 0. 04%~0. 08 %的酵母粉和中药添加剂总重量7~12倍水，搅拌均匀，在20~33°C下发 酵3~7天，得到发酵物； 2) 再取90~130重量份干铁皮石斛，粉碎至100目，然后与步骤1)得到的发酵物混合 均匀，放入高压罐中，加压至1. 5~3MPa，并保持5~lOmin，恢复常压，得到膏状浆液； 3) 将步骤2)得到的膏状浆液喷雾干燥，得到铁皮石斛速溶茶； 所述的中药添加剂，由以下重量份的原料制成：芦根40~60份，天花粉30~50份，金 钱草20~40份，垂盆草10~30份，谷芽5~15份。2. 根据权利要求1所述的铁皮石斛速溶茶的制备方法，其特征在于，所述的中药添加 剂，由以下重量份的原料制成：芦根45~55份，天花粉35~45份，金钱草25~35份，垂 盆草15~25份，谷芽7~12份。3. 根据权利要求2所述的铁皮石斛速溶茶的制备方法，其特征在于，所述的中药添加 剂，由以下重量份的原料制成：芦根50份，天花粉40份，金钱草30份，垂盆草20份，谷芽10 份。4. 根据权利要求1~3任意一项所述方法制备得到的铁皮石斛速溶茶。
【专利摘要】本发明涉及铁皮石斛的深加工技术领域，特别涉及一种铁皮石斛速溶茶的制备方法，包括以下步骤：将中药添加剂分别洗净，粉碎，发酵，与干铁皮石斛混合，高压处理，喷雾干燥，得到铁皮石斛速溶茶；所述的中药添加剂，由以下重量份的原料制成：芦根40～60份，天花粉30～50份，金钱草20～40份，垂盆草10～30份，谷芽5～15份。本发明的制备方法简单，水溶性好，携带、使用方便，便于保存和运输，其中的中药添加剂能够提高铁皮石斛的抗氧化性和抗癌功效。
【IPC分类】A61P39/06, A61K36/899, A61K36/8984, A61P35/00
【公开号】CN105412618
【申请号】CN201511026294
【发明人】李荣轩
【申请人】广西扬桂生物科技有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月31日