一种具有降血糖作用的铁皮石斛根提取物及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及铁皮石斛新的药用部位的开发，具体涉及一种具有降血糖作用的铁皮 石斛根提取物及其用途。
【背景技术】
[0002] 糖尿病（Diabetes Mellitus，DM)是由于体内胰岛素分泌绝对或相对不足（革巴组 织细胞对胰岛素敏感性降低），进而引起糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列的代谢紊 舌L以高血糖为主要共同标志的一类全身性代谢疾病。随着生活水平的提高、饮食结构和生 活方式的改变，我国糖尿病的发病率正逐年升高。目前临床上用于降血糖的主导药物是西 药，包括口服降血糖药和胰岛素制剂。西药治疗糖尿病疗效肯定，但存在一定的消化道反应 和肝、肾损害等副作用，且不能有效控制并发症。而中药治疗糖尿病疗效稳定，作用温和，不 良反应少，具有综合治疗作用，能够有效防治并发症。因此，积极开发安全、有效的中药降血 糖药物，对糖尿病的防治具有重要意义。
[0003] 铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo的干燥 茎，是我国传统的名贵中药材。其味甘、性微寒，归胃、肾经，具有益胃生津、滋阴清热的功 效，可用于阴伤津亏，口干烦渴等症。现代药理研究表明，铁皮石斛具有良好的降糖效果，并 发现多种降糖的活性成分，如多糖、黄酮和微量元素等。目前研究发现，非药用的根也含有 和药用（茎）相类似的化学成分，有部分类似的功能。但是，《中国药典》记载铁皮石斛以茎 入药，在其生产领域，一般都认为根为非药用部位，从来不考虑对其加以药物应用，但其产 量很大，造成了资源的大量浪费。
[0004] 目前，可查询到的关于铁皮石斛根的专利只有一篇，是一种具有降压作用的铁皮 石斛根提取物及用途（申请号=201310743001.0)，主要涉及水提取物在降血压药品食品制 备方面的应用。本专利发明人以降低血糖、改善糖耐量为主要药效指标，观察并比较了铁 皮石斛根的水和乙醇提取物经长期给药对糖尿病小鼠的影响，筛选出药效明显的乙醇提取 物，具有良好的开发前景，并为铁皮石斛合理利用和综合开发提供了新的途径。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种具有降血糖作用的铁皮石斛根 提取物及其用途。
[0006] 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种具有降血糖作用的铁皮石斛 根提取物，所述铁皮石斛根提取物通过以下方法制备得到：铁皮石斛根洗净、干燥后，机械 粉碎，每克铁皮石斛根加入5~20毫升乙醇与水的混合溶液，在70~KKTC下提取1~3 次，每次1~3h，所述乙醇与水的混合溶液由乙醇和水按体积比60~85 : 15~40混合组 成，合并滤液，减压浓缩得铁皮石斛根提取物。
[0007] 该铁皮石斛根提取物可用于制备预防和治疗糖尿病的药品或食品。该铁皮石斛根 提取物可以与药剂或食品上认可的辅料，采用现代制剂技术，制成以铁皮石斛根提取物为 主的浸膏，片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、散剂、口服液等各种剂型。
[0008] 本发明的有益效果是：本发明通过比较非药用的铁皮石斛根与药用（茎）的化学 成分，猜测根部可能具有类似功能。因此本发明选用铁皮石斛根作为依托，开发其功效，扩 大铁皮石斛新的药用资源和实现资源的综合利用。动物实验研究表明：该铁皮石斛根提取 物能够显著降低糖尿病小鼠的空腹血糖（FGB)和糖化血红蛋白（HbAlc)，有效改善口服糖 耐量（OGTT)，具有良好的降糖效果，可制成以铁皮石斛根提取物为主的浸膏，片剂、颗粒剂、 丸剂、胶囊剂、散剂、口服液等以防治高血糖为主要功能的药品及保健食品。
【具体实施方式】
[0009] 下面根据实施例进一步描述本发明，本发明的效果将体现得更加明显。
[0010] 实施例1
[0011] 铁皮石斛根洗净、干燥后，机械粉碎，依次加入20倍、15倍、15倍量的乙醇与水的 混合溶液，所述乙醇与水的混合溶液由乙醇和水按体积比85 : 15混合组成，90°C提取3 次，每次lh，合并滤液，减压浓缩得铁皮石斛根提取物。
[0012] 实施例2
[0013] 铁皮石斛根洗净、干燥后，机械粉碎，依次加入20倍、15倍、15倍量的乙醇与水的 混合溶液，所述乙醇与水的混合溶液由乙醇和水按体积比60 : 40混合组成，KKTC提取2 次，每次I. 5h，合并滤液，减压浓缩得铁皮石斛根提取物。
[0014] 实施例3
[0015] 铁皮石斛根洗净、干燥后，机械粉碎，分别加入10倍量的乙醇与水的混合溶液，所 述乙醇与水的混合溶液由乙醇和水按体积比70 : 30混合组成，85°C提取3次，每次lh，合 并滤液，减压浓缩得铁皮石斛根提取物。
[0016] 实施例4
[0017] 铁皮石斛根提取物经长期给药发现对高糖高脂饲料联合链脲佐菌素（STZ)制备 的实验性糖尿病模型小鼠的空腹血糖（FGB)和糖化血红蛋白（HbAlc)具有显著的降低作 用，对口服糖耐量（OGTT)具有良好的调节作用。
[0018] 1实验材料与仪器
[0019] 1.1 动物
[0020] 清洁级ICR小鼠，雄性，体质量20±2g，由浙江省实验动物中心提供，实验动物生 产许可证号：SCXK (浙）2008-0033。
[0021] 1.2药物配置
[0022] I. 2. 1 受试药
[0023] 铁皮石斛根，由浙江旺旺野生植物开发公司提供，提取物配置成5. Og生药/kg， 4 °C冰箱冷藏备用。
[0024] 1. 2. 2 阳性药
[0025] 格华止（盐酸二甲双胍片），规格0. 5g/片，购自中美上海施贵宝制药有限公司，批 号1307093,临用前用蒸馈水配置成15mg/mL。
[0026] 1. 3主要试剂
[0027] 链脲佐菌素（STZ，美国sigma公司，批号20131211);葡萄糖、糖化血红蛋白（GLU、 HbAlc，宁波美康生物科技股份有限公司，批号20140505、20140429)。
[0028] 1. 4主要仪器
[0029] BA-40FR(ACCUTE)全自动生化分析仪（日本东芝）；Microcll7微量离心机（美国 Thermo);雅培安妥超越血糖仪，安培超越血糖试纸（美国Abbott公司）；HX1001T电子天 平（慈溪市天冬衡器厂）；YF_40型微压循环中药煎药机（北京东华原医疗设备有限公司）； R-501旋转蒸发器（上海申顺生物科技有限公司）。
[0030] 2实验方法
[0031] 2.1分组与给药
[0032] ICR小鼠适应性喂养1周后，随机抽取10只作为正常组，其余为造模组。模型采用 高糖高脂饲料喂养后腹腔注射链脲佐菌素制备。给药前，眼眶取血测定造模小鼠的血糖值， 筛选出血糖满足要求的小鼠。然后将造模成功的小鼠按血糖和体重随机分层法分组，即：模 型组、盐酸二甲双胍组和铁皮石斛根85 %乙醇提取物组，每组10只。盐酸二甲双胍按0. 3g/ kg/d剂量给药，铁皮石斛根85 %乙醇提取物按10.0 g/kg/d剂量给药，正常组和模型组给予 等量蒸馏水。灌胃容积为〇. lmL/lOg体重，2次/日，连续给药10周。
[0033] 2. 2观察指标
[0034] 于给药前，给药第6、8、10周禁食（不禁水）8h眼眶取血，分离血清用葡萄糖氧化 酶法测定各组小鼠空腹血糖。给药10周后，眼眶取血，加 m)TA抗凝，用酶比色法检测小鼠 全血中的糖化血红蛋白浓度。
[0035] 2. 3 口服糖耐量试验（OGTT)
[0036] 给药8周后，各组小鼠先禁食（不禁水）6h，然后灌胃给药，给药后2h尾静脉取血 并用血糖仪测定记为Oh的血糖值（GB。），然后各组经口给予2. Og/kg的葡萄糖溶液。尾静 脉取血测定给葡萄糖后lh、2h的血糖值（GB1和GB2)，并计算各组曲线下面积（AUC)。
[0037] AUC = (GBo+GBi) X 0. 5+ (GB^GB2) X 0. 5
[0038] 2. 4统计与分析
[0039] 数据用SPSS 13. 0软件统计并分析，计量资料数据结果均采用Γ ± S表示，组间差 异做两样本均数比较的t检验，以p < 0. 05为差异有统计学意义。
[0040] 3实验结果
[0041] 3. 1给药期间各组血糖变化情况
[0042] 与正常组相比，模型小鼠空腹血糖均明显升高（P<0.01);与模型组比较，给药6 周后，铁皮石斛根85%乙醇提取物能明显降低模型小鼠的空腹血糖（P<0. 05);且降糖效 果平稳持续。结果见表1。
[0043] 表1连续给药对模型小鼠 FGB的影响（T ±5·, mmol/L)
[0045] 注：与正常组比较，ΔΡ < 0· 05, ΔΔΡ < (λ 01 ;与模型组比较，*P < (λ 05，**P < (λ 01
[0046] 3. 2给药8周各组口服糖耐量（OGTT)变化情况
[0047] 与正常组相比，模型组小鼠 OGTT中各时间点的血糖值及AUC均显著升高（Ρ < 0. 01)，糖耐量异常；与模型组比较，给药8周后，铁皮石斛根85%乙醇提取物能显著降低 模型小鼠各时间点的血糖值及AUC(Ρ < 0. 01，P < 0. 05)，能明显改善模型小鼠的糖耐量。 结果见表2。
[0048] 表2连续给药8周对模型小鼠 OGTT的影响（r ± s，mmol/L)
[0050] 注：与正常组比较，ΔΡ < 0· 05, ΔΔΡ < 0· 01 ;与模型组比较，*Ρ < 0· 05，**P < 0· 01
[0051] 3· 3给药10周各组糖化血红蛋白（HbAlc)变化情况
[0052] 与正常组相比，模型组小鼠 HbAlc显著升高（Ρ<0. 01);与模型组比较，给药10周 后，铁皮石斛根85%乙醇提取物能显著降低模型小鼠的HbAlc (Ρ < 0. 01)，稳定血糖。结果 见表3。
[0053] 表3连续给药10周对模型小鼠 HbAI c的影响（r ± 5 )
[0055] 注：与正常组比较，><0.05/泎<0.01;与模型组比较，卞<0.05，，<0.01。
【主权项】
1. 一种具有降血糖作用的铁皮石斛根提取物，所述铁皮石斛根提取物通过以下方法制 备得到：铁皮石斛根洗净、干燥后，机械粉碎，每克铁皮石斛根加入5~20 _升乙醇与水的 混合溶液，在70~KKTC下提取1~3次，每次1~3h，所述乙醇与水的混合溶液由乙醇和 水按体积比60~85 : 15~40混合组成，合并滤液，减压浓缩得铁皮石斛根提取物。2. -种权利要求1所述铁皮石斛根提取物在制备预防和治疗糖尿病的药品和食品中 的应用。
【专利摘要】本发明涉及铁皮石斛新的药用部位的开发，公开了一种具有降血糖作用的铁皮石斛根提取物及其用途。所述铁皮石斛根提取物通过以下方法制备得到：铁皮石斛根洗净、干燥后，机械粉碎，每克铁皮石斛根加入5～20毫升乙醇与水的混合溶液，在70～100℃下提取1～3次，每次1～3h，所述乙醇与水的混合溶液由乙醇和水按体积比60～85∶15～40混合组成，合并滤液，减压浓缩得铁皮石斛根提取物。通过动物实验证明，铁皮石斛根提取物在降低血糖和改善糖耐量方面疗效稳定，可应用于防治高血糖为主要功能的药品及保健食品；本发明选用铁皮石斛根作为依托，开发其功效，扩大铁皮石斛新的药用资源和实现资源的综合利用。
【IPC分类】A61P3/10, A61K125/00, A61K36/8984
【公开号】CN105434886
【申请号】CN201410482159
【发明人】吕圭源, 陈素红, 宓文佳, 李燕
【申请人】浙江中医药大学
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2014年9月19日