一种用于治疗奶牛乳腺炎的复方制剂及其制备方法
【技术领域】
[0002] 本发明涉及兽药技术领域，具体涉及一种用于治疗奶牛乳腺炎的复方制剂及其制 备方法。
【背景技术】
[0003] 奶牛乳腺炎最常见的发病原因是病原微生物通过奶牛乳头管侵入乳腺，原奶为病 原微生物生长提供了优越的环境，病原微生物在乳腺内大量繁殖，产生毒素与酶，刺激脆弱 的乳腺组织，使乳腺发炎。据报道，引起奶牛乳腺炎的病原微生物多达150余种，较常见的有 20余种，其中，金黄色葡萄球菌、链球菌具有国际广泛性，约占整个奶牛乳腺炎病例的70%， 占我国病例的90%以上。
[0004] 抗生素疗法目前仍是国内外所采用的治疗乳腺炎最常用的方法，在乳腺炎治疗及 控制奶品质量的综合防治中具有重要作用。对于临床型乳腺炎目前国内外都选用抗生素进 行治疗，抗生素疗法作用快速，可直接杀灭病原菌，但有的病原菌易产生耐药性，对于泌乳 期奶牛来说，大量应用抗生素还会导致抗生素在乳中残留，对人类健康造成威胁。因此近年 来人们逐渐把目光转移到了中药治疗上，中药属纯天然物质，毒性低，不会造成严重的药物 残留，不易产生抗药性，克服了使用抗生素的不足，应用复方中药制剂替代抗生素，预防药 物，已逐渐被广大用户所接受。国内外研究表明，天然植物精油对日常生产生活中的致病菌 有很好的抑制作用。如薰衣草精油对单核细胞增多性李斯特菌、沙门氏菌等常见的食物传 播性致病菌有很强的抑菌活性。肉桂精油对肠炎沙门氏菌和单核细胞增多性李斯特单核细 胞菌具有抑制作用。其后又通过对抑菌范围的测定，发现牛至精油可以在食品中起到抑菌 作用。研究发现，牛至精油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母、黑曲霉、青 霉等食品常见污染菌有广谱抑菌作用。
[0005] 透皮吸收促渗剂有助于药物克服皮肤角质层的障碍，其促渗机制是溶解皮肤脂质 或使皮肤蛋白变性，可逆地改变皮肤角质层的屏障作用，且不损伤任何活性细胞，达到增加 药物在皮肤的溶解度，使药物透皮吸收率增加的目的。早期的透皮促渗剂研究多限于有机 溶剂如丙二醇、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等，这类化合物使用浓度较高，其中以二甲基亚 砜促渗效果最好，但其毒性和对皮肤的刺激性限制了它的临床应用。目前多采用添加氮酮 等化学性促渗剂，近年来氮酮已广泛应用于药物的外用制剂，在提高治疗效果、减少药物的 不良反应、开发制剂新品种等方面起了重要作用，但是在对中药透皮促渗剂中因为中药成 分复杂故效果一般。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种用于治疗奶牛乳腺炎 的复方制剂及其制备方法。主要是利用植物挥发油即有抗菌作用又有促进渗透作用的特 性，研制动物乳腺的局部用药，可以有效治疗感染性疾病。
[0007] 为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为:一种用于治疗奶牛乳腺炎的复方 制剂，是由按照重量份计的以下物质组成的：薰衣草精油1份，肉桂精油1-2份，牛至精油1-3 份，辅料3_6份。
[0008] 进一步的，上述的一种用于治疗奶牛乳腺炎的复方制剂，是由按照重量份计的以 下物质组成的：薰衣草精油1份，肉桂精油2份，牛至精油3份，辅料6份。
[0009] 进一步的，上述的一种用于治疗奶牛乳腺炎的复方制剂，所述辅料中各物料的重 量比为硬脂酸:甘油:单硬脂酸甘油酯:尼泊金乙酯：十二烷基硫酸钠:凡士林:蒸馏水为20: 40:2:2:20:1:200。
[0010] 进一步的，上述的一种用于治疗奶牛乳腺炎的复方制剂，所述复方制剂的剂型为 软膏剂。
[0011] 本发明得第二个目的是提供了上述一种用于治疗奶牛乳腺炎的复方制剂的制备 方法，包括以下步骤： 1) 于无菌条件下，按配比称取薰衣草精油、肉桂精油和牛至精油，水浴加热，70~80°C 水浴保温〇. 5小时，得到主料混合物； 2) 按配比称取辅料中各物料并混合，水浴加热至融化得到辅料液，在70~80°C保温 0.5小时后将辅料液缓缓加入步骤1)得到的主料混合物中，边加边向一个方向搅拌，3000 转/分钟搅拌乳化15分钟，冷凝即得到复方制剂半成品； 3) 将步骤2)得到的复方制剂半成品分装到固定容器后，蒸汽灭菌，灭菌温度为HKTC， 时间为10分钟，得到用于治疗奶牛乳腺炎的复方制剂。
[0012] 本发明的有益效果为： 本发明提供的一种用于治疗奶牛乳腺炎的复方制剂及其制备方法，具有以下优点： 1、 采用植物精油作为有效成分，具有很好的清热解毒、抗菌消炎的作用，治疗奶牛临床 型乳腺炎效果极好，治愈率80%以上，有效率90%以上；由于采用纯植物精油制剂，不含任何 化药成分，故有利于奶制品的安全，也不易产生耐药性； 2、 通过软膏搅拌得均用的固体，性质稳定且质量可控，非常有利于工业化生产； 3、 作为一种有效治疗奶牛乳腺炎的中药，其效果确切，从实施例提供的药效学试验及 临床可以看出，复方软膏在兽医临床上使用方便、安全、不污染奶源有较高的应用价值。
【具体实施方式】
[0013] 实施例1: 1、复方软膏的配方(W/W):主料精油的配方及来源如表1所示。
[0014] 表1
2、复方软膏的制备： 2.1通过多年的试验及应用，已经确定了最佳的复方软膏辅料的配方(重量比）为:硬脂 酸1，甘油2,单硬脂酸甘油酯0.1，尼泊金乙酯0.1，十二烷基硫酸钠1，凡士林0.05,蒸馏水 10。
[0015] 2.2按照表1中精油的比例，总精油与总软膏辅料量的配比为1:1(W/W)。
[0016] 2.3制法:无菌条件下，按比例称取各种精油，水浴上加热，70~80°C水浴保温0.5 小时。另取辅料中各成分加在一起，水浴加热至融化，在70~80°C，0.5小时后将该液体缓 缓加入精油中，边加边向一个方向搅拌，3000转/分钟搅拌乳化15分钟，冷凝即得。分装到固 定容器后，蒸汽灭菌的温度为l〇〇°C，时间为10分钟。
[0017] 实施例2: 体外抑菌试验： 为了评价3种精油及复合后的抑菌效果，从中筛选药物的配方，故进行了的精油及复方 精油的抑菌试验。
[0018] 1、材料与方法： 1.1试验药品： 试验样品1、2、3号药均由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程研究室制 备，按表1中购得后精油，并按照不同比例配制，不加辅料。对照药:乳立宁(双丁注射液），河 北远征药业生产(生产批号20131622)。
[0019] 1.2奶牛乳腺炎病原菌的分离鉴定： 1.2.1样品的采集： 乳样采自兰州市某奶牛场，共采集5头有明显乳腺炎症状患牛的牛乳各一份。奶牛乳腺 按常规消毒后，每个乳头挤去头2把乳，后无菌取乳样约15mL于灭菌采乳管中，标明牛号和 日期后放入冰桶，送回实验室进行细菌检验，如当天不能检验，则放入40°C保存，不超过 48h〇
[0020] 1.2.2病原菌的分离： 将乳样分别划线接种于普通琼脂培养基、鲜血琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基，置37 °(：温箱培养24h后观察菌落形态特征，挑取典型菌落涂片，革兰氏染色，镜检。根据菌体形态 及染色特性初步判定细菌类属，然后进一步纯化培养，培养方法同上，链球菌需要用血平板 培养基进行培养，纯培养后进行镜检细菌，将无杂菌者保存于试管斜面培养基内，然后可按 有关生化鉴定方法进行鉴定。
[0021 ] 1.2.3供试菌液的制备： 将本试验中分离鉴定的临床型奶牛乳腺炎主要致病菌无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、 大肠杆菌3种细菌液，用接种环轻取接种于肉汤琼脂培养基，按照菌种所需的培养条件进行 培养，在37°C恒温培养箱中分别培养18-20h后，稀释，用分光光度计在波长为625nm处比 色，吸光度为〇. 08-0.1时的稀释浓度为所需浓度，即含细菌数约为1-2 X IO8个/mL，备用。
[0022] 1.2.4抑菌试验： 将药品精油相应浓度，用管碟法进行试验，抑菌圈的大小表示抑菌作用的强弱；用二倍 稀释法测定精油的最低抑菌浓度，抑菌浓度的高低表示抑菌作用的弱强。
[0023] 2、结果： 2.1体外抑菌试验： 经过预实验确定植物精油配比3号抑菌效果最好，故正式试验以3号配比为准。试验结 果表明，本发明的植物精油不同配比对无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的体外抑菌 效果和对照药抑菌效果比较结果如表2、3所示。经过试验结果证明配比3号对三种抑菌效果 最好，故以中药复方软膏选用3号的配比，再赋予辅料为制备的药物。
[0024] 表2
3、结论： 从表2、3精油的体外抑菌试验和体内抗菌活性试验结果可以看出，复方3号精油的抑菌 作用较乳立宁强，特别是对大肠埃希氏菌，故对奶牛乳腺炎有治疗作用。
[0025] 实施例3: 抗炎试验： 无论临床型还是隐性奶牛乳腺炎，其临床表现症状都是炎性反应。炎症是引起乳房损 伤和产奶量下降的直接原因。而许多中药具有非特异性抗炎作用而缓解临床症状。中药抗 炎作用也是中药抗感染作用机理的重要组成部分。所以，中药抗炎作用是一项必不可少的 指标，故对该药进