一种具有抗抑郁作用的中药提取物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种中药提取物，特别是设及一种具有抗抑郁作用的中药提取物及其 制备方法与应用。
【背景技术】
[0002] 抑郁症，是一种W显著而持久的屯、境低落为主要临床特征的病症，同时伴有失眠， 记忆缺失，饮食失调等症状，严重者可出现自杀念头和行为。据报道，人群中有16%的人在 一生的某个时期会出现抑郁症状。若运些症状持续两周W上无明显改善，患者可确诊为抑 郁症。据世界卫生组织统计，抑郁症已成为世界第4大疾患，并且预计到2020年，可能成为仅 次于冠屯、病的第二大疾病。抑郁症患者不能适应社会，注意力下降，是自杀的高危人群。不 仅如此，临床还发现，抑郁症与老年痴呆症常呈现共存状态，抑郁症患者更易发展成为老年 痴呆症，从而带来沉重的经济负担与社会负担。
[0003] 长期W来，单胺类神经递质调控素乱假说被认为是抑郁症的主要发病机理。该假 说认为，神经元突触间隙内神经递质五径色胺（serotonin，5-刖），去甲肾上腺素 (norepin邱herine，肥），多己胺（dopamine, DA)含量降低，神经传导异常，是导致抑郁症的 主要原因，因此会出现记忆缺失与情绪低落等症状。因此，现有的治疗抑郁症的药物，包括： S环类抗抑郁药(TCAs),如丙咪嗦（impiramine)等;五径色胺重摄取抑制剂(SSRI)，如氣西 汀(Fluoxetine)等;单胺氧化酶抑制剂(MAOI )，如苯乙阱等，均W提高神经元突触间隙神经 递质的浓度，抑制神经递质的重摄取为治疗与药物开发祀点。
[0004] 近年来研究发现，神经营养因子调控失常是抑郁症的另一个重要的致病机理。临 床研究发现，抑郁症患者血清中神经营养因子，尤其是脑源性神经营养因子(抓NF)的含量 下降。除了抓NF之外，神经生长因子(NGF)与胶质细胞源神经营养因子(GDNF)的水平在抑郁 症病人血清中的含量也同样低下。动物研究证明，抑郁症动物脑中NGF、抓NF与GDNF的含量 表达下降，尤其是在与抑郁症发病最密切相关的海马与前额皮质部位。离体细胞实验证明， 运些部位神经营养因子的缺乏，将直接导致神经元损伤，死亡，影响正常的神经生长过程。 因此，神经营养因子在抑郁症发病机理中意义重大，是抑郁症诊断的重要指标与药物开发 的重要祀点。可是，目前尚无针对此祀点的有效药物，严重影响了抑郁症病人的治疗与康 复。
【发明内容】
[0005] 发明目的:本发明的目的在于提供一种疗效可靠，安全性好，具有很好的抗抑郁作 用的中药提取物。本发明的另一目的是提供上述提取物的制备方法和应用。
[0006] 技术方案:为了实现W上目的，本发明采取的技术方案为：
[0007] -种具有抗抑郁作用的中药提取物，其特征在于，该中药提取物由如下方法制成： [000引步骤1:选取如下原料药:人参300-600份、远志200-400份、石富蒲200-400份、巧等 300-600份；
[0009 ]步骤2:取步骤I的原料药，加水提取，取提取液浓缩，得浓缩液；
[0010] 步骤3:取步骤2的浓缩液，通过大孔树脂柱洗脱，得洗脱液，浓缩。
[0011] 作为优选方案，W上所述的具有抗抑郁作用的中药提取物，原料药的组成为:人参 300份、远志200份、石富蒲200份、巧等300份。
[0012] 作为优选方案，步骤2中，将原料药用加水回流提取2-4次，每次提取1-2小时。作为 更加优选方案，步骤2所述的水提取条件为:首先加入中药原料药重量8倍体积量的提取溶 剂水，100°C回流提取120min，过滤后加入药材重量10倍体积量的提取溶剂水，100°C回流提 取120min。
[0013] 作为优选方案，将步骤2所得的提取物进行浓缩，得浓度为1.0g/mL，W3000转/分 钟的转速离屯、IOmin。
[0014] 作为优选方案，步骤3所述的大孔树脂洗脱条件为:吸附流速为1.0-2. OmL/min，洗 脱液依次用水和体积浓度为10-90%的乙醇，分别洗脱3-7倍树脂体积，洗脱流速为1.0-2. OmL/min，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得。
[0015] 作为更加优选的方案，步骤3所述的大孔树脂洗脱条件为:优选1.25L 860021型大 孔吸附树脂，吸附流速为2.OmL/min,大孔树脂柱径高比为1:10,上样液浓度为l.Og/mL，水 洗脱2倍树脂体积进行除杂，除杂流速为1. OmL/min。W10%，30%，50%，70%，90%依次洗 脱大孔树脂柱5倍柱体积，收集体积浓度90 %乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得。
[0016] 本发明提供的中药提取物，动物模型实验结果表明，90%乙醇大孔树脂洗脱液可 明显缓解动物抑郁样症状，细胞模型试验结果表明，可增加神经递质合成，抑制神经递质降 解，增加神经营养因子的表达。并且本发明通过对比试验结果表明，90%乙醇洗脱液的抗抑 郁功效明显高于其它体积浓度(10% ,30% ,50% ,70%乙醇）的洗脱液。
[0017] 并且本发明通过对比试验研究，结果表明，中药组合物先采用水提取后，再通过大 孔树脂吸附纯化，并采用优选的90%乙醇洗脱液的中药提取物有效部位，其抗抑郁功效明 显优于中药水提液。表明本发明采用大孔树脂吸附，优选比例乙醇洗脱后，可得到抗抑郁效 果明显的中药提取物的精制部位。
[0018] 本发明通过大量实验筛选得到的中药提取物有效部位，该部位在小鼠悬尾与游泳 抑郁模型上显示出显著的抗抑郁活性，能显著提升脑内神经递质与神经营养因子的的表 达。在PC12神经元细胞上能够促进神经递质合成酶的合成，抑制降解;在C6胶质瘤细胞模型 上可促进神经营养因子合成。上述研究表明本发明提供的中药提取物对抑郁症有显著的改 善作用，可用于制备具有改善抑郁症状的药品或保健品，适合抑郁症患者。
[0019] 本发明所述的具有抗抑郁作用的中药提取物的制备与应用，将此中药提取物和药 学上可接受的载体制成片剂、丸剂、散剂、汤剂、颗粒剂、煎膏剂或浸膏剂剂型的药物，临床 服用方便，并且本发明提供的中药提取物，实验过程中未发现明显毒副作用，安全性好。
【附图说明】
[0020] 图1为中药提取物对悬尾小鼠不动时间影响的柱状图。
[0021] 图2为中药提取物对强迫游泳小鼠不动时间影响的柱状图。
[0022] 图3为中药提取物对抑郁小鼠脑内神经递质影响的柱状图。
[0023] 图4为中药提取物对抑郁小鼠脑内神经营养因子影响的柱状图。
[0024] 图5为中药提取物对PC12细胞中神经递质合成酶表达测试结果的柱状图。
[0025] 图6为中药提取物对PC12细胞中神经递质降解酶表达测试结果的的柱状图。
[0026] 图7为中药提取物对C6细胞中神经营养因子表达影响的柱状图。
【具体实施方式】
[0027] 下面结合具体实施例进一步阐明本发明，应理解运些实施例仅用于说明本发明而 不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形 式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
[0028] 实施例1
[0029] -种具有抗抑郁作用的中药提取物，其特征在于，该中药提取物由如下方法制成：
[0030] 步骤1:选取如下原料药:人参300份、远志200份、石富蒲200份、巧等300份；
[0031 ]步骤2:取步骤1的原料药，首先加入中药原料药重量8倍体积量的提取溶剂水，100 °(：回流提取120min，过滤后加入药材重量10倍体积量的提取溶剂水，100°C回流提取 120min。取提取液浓缩，得浓度为1. Og/mL浓缩液；
[0032] 步骤3:取步骤2的浓缩液，通过大孔树脂柱洗脱，大孔树脂洗脱条件为:选用1.25L 860021型大孔吸附树脂，吸附流速为2. OmL/min，大孔树脂柱径高比为1:10，上样液浓度为 l.Og/mL，水洗脱2倍树脂体积进行除杂，除杂流速为l.OmL/min。然后W体积浓度为10%， 30 %，50 %，70 %，90 %乙醇依次洗脱大孔树脂柱，各5倍柱体积，收集体积浓度90 %乙醇洗 脱液，回收溶剂，减压干燥，即得。
[0033] 实施例2中药提取物抗抑郁实验研究
[0034] -、实验材料与药物
[0035] 1.实验仪器
[0036] 动物多重行为测试仪(上海吉量仪器有限公司）；BT125型电子天平(赛多利斯科学 仪器有限公司）;KQ-250E型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司）。
[0037] 2.药物
[0038] 氣西汀购自TCI(上海)化成工业发展有限公司。
[0039] 受试药物:本发明实施例1制备得到的中药提取物(低剂量、中剂量、高剂量分别为 l、3、10ug/mL)。
[0040] 3.实验动物