] (1)白及淀粉水解:粉碎干燥白及，加入淀粉酶水溶液，使淀粉酶的终浓度为2U以 上，30-50 °C下处理3-7小时，得水解混合液；
[0025] (2)白及水溶性多糖提取:将水解混合液加热至60-80°C进行回流提取60-180min， 加入石油醚搅拌10~30min后，静置1~3小时分层去除含有石油醚的上层溶液，得不含有石 油醚的下层溶液，再经5000~8000rpm离心10~30min得上清液和沉淀I;
[0026] (3)醇沉:将上清液在50~60 °C减压浓缩至一定体积，再加入95 %乙醇至终浓度达 到65 %以上，醇沉10~20h，进行过滤，得滤液Π 和滤渣Π ，滤液Π 进行减压浓缩至原有体积 的1/10~1/20,对浓缩液进行常规结晶处理得葡萄糖晶体；
[0027] (4)白及水溶性多糖柱纯化：向滤渣Π 中加入少量的水进行溶解，将其溶液上 SEPHADEX G-15柱分离，用3BV~6BV的水进行洗脱并收集洗脱液，并浓缩洗脱液至原有体积 的1/15~/25,再上硅胶柱分离用3BV~6BV的水进行洗脱并收集白及水溶性多糖成分浓缩 至干，获得白及水溶性多糖。
[0028] 在一个实施方案中，步骤(1)中所述淀粉酶水溶液的体积(L)与白及重量(kg)比为 8~20:1;淀粉酶由津市市新型发酵有限责任公司提供，也可以从市场上购买，淀粉酶使用 终浓度为2U以上(其中U是指国际酶活力单位）。所用淀粉酶只能水解葡萄糖与葡萄糖连接 的糖苷键。
[0029]在一个实施方案中，步骤(2)中所述石油醚是采用90~120°C沸程规格的石油醚， 其体积L与水解混合液的体积L比为2~5:1。
[0030] 在一个实施方案中，步骤(3)中所述过滤:膜孔径为0.22μπι的陶瓷膜过滤一次。
[0031] 在一个实施方案中，步骤(3)中所述一定体积是指原有体积的1/10~1/40。
[0032] 在一个实施方案中，步骤(4)中用少量的水溶解滤渣Π 时，所用水的体积L与滤渣 Π 重量kg比例为1~2.5:1; BV是指柱体积。
[0033] 上述白及护肤产品可以直接用于各种患者伤口的止血、皮肤愈合等材料中，也可 直接用于化妆品中保水材料等方面的应用，也可以用于抑制各种病原菌等医用材料中。 [0034]技术效果
[0035] 1、白及水溶性多糖与壳聚糖混合使用，充分利用了壳聚糖的广谱抑菌作用和亲水 又不溶于水的易成膜特性。
[0036] 2、该产品利于白及水溶性多糖在同一部位的充分吸收，不易出现流失的现象，加 强了多方面的调理作用，副作用小，保水效果好，止血效果快，促进伤口快速愈合作用。
[0037] 3、由于淀粉酶只能水解葡萄糖之间形成的糖苷键，利用淀粉酶可对白及中淀粉进 行水解，防止淀粉在高温水溶液中转变成糊精，不利于白及水溶性多糖快速释放到水相中， 能缩短过滤时间，利于彻底去除酚类物质，有效地提高白及多糖的产量。
[0038] 4、利用SEPHADEX G-IO柱和硅胶柱分离白及多糖，利用小分子物质与多糖分子分 离，获得更高含量的白及护肤产品，与采用DE-52或DEAE-纤维素柱离子交换柱分离纯化相 比，白及多糖是一种中性杂多糖，采用葡聚糖凝胶分离效果更好。
[0039] 5、采用石油醚等有机溶剂将酚类物质、有机酸和色素萃取出，并使酶和蛋白质变 性，在后期多糖纯化过程中减少蛋白质乳化作用的干扰。
[0040] 6、采用乳酸进行溶解壳聚糖，既能防止水溶性多糖的水解，又能促进壳聚糖溶解 性，还能增加白及护肤产品的粘性，更利于其产品的应用如面膜等护肤性产品。
【具体实施方式】
[0041] 下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一 个或类似实例。
[0042] 实施例1:白及水溶性多糖的制备方法
[0043]粉碎干燥白及I OOkg，加入1000L的淀粉酶水溶液，使淀粉酶的终浓度为2U以上，40 °C保温处理4小时，得水解混合液;将水解混合液加热至60-80 °C进行回流提取140min，向提 取液中直接加入2倍石油醚搅拌20min后，静置1~3小时分层去除含有石油醚的上层溶液， 得不含有石油醚的下层溶液，再经5000~8000rpm离心10~30min得上清液和沉淀I;将上清 液在50-60°C减压浓缩至原有体积的1/15,再加入95%乙醇至终浓度达到65%以上，醇沉 15h，进行0.22μπι的陶瓷膜过滤一次，得滤液Π 和滤渣Π 43.8kg，滤液Π 进行减压浓缩至原 有体积的1/15，对浓缩液进行常规结晶处理得葡萄糖晶体；向滤渣Π 中加入50kg的水进行 溶解，将其溶液上SEPHADEX G-15柱分离，用3BV~6BV的水进行洗脱并收集洗脱液，并浓缩 洗脱液至原有体积的1/20,再上硅胶柱分离用3BV~6BV的水进行洗脱并收集白及水溶性多 糖成分浓缩至干，获得白及水溶性多糖12.45kg。经蒽酮一浓硫酸法测定，其中白及水溶性 多糖含量为99.57%。
[0044] 对照实施例1
[0045] 按公开号为CN101906169A所介绍的白及多糖制备工艺方法：用预装1.2mm筛网的 万能粉碎机将白及饮片IOkg粉碎，使全部通过二号筛，得白及粗粉。将白及粗粉与500kg的 一级反渗透水共置搅拌混合罐中，搅拌15分钟，使混合均匀成白及混悬液。将白及混悬液输 入高压压均质机，调节高压均质机栗体压力45~55MPa。高压均质的匀浆经三足离心机离 心，收集离心液。在离心液中加入滑石粉和硅藻土各2kg，混合均匀，经硅藻土过滤器循环过 滤至滤液几无色澄清时，收集滤液。将介质滤液经串联500nm和200nm陶瓷膜的微滤过滤器 过滤至保留液量45kg，得胶状白及多糖浓缩液。浓缩液中加入乙醇，使含醇量达55 %，静置6 小时，沉降离心，收集白色的沉淀;沉淀用乙醇洗涤2~3次，沉降离心，收集沉淀。将乙醇洗 涤后的沉淀均匀的薄铺在烘盘内，-0. 〇9MPa、65°C以下干燥至水分7%，粉碎，得白色白及多 糖3.34kg。收率33.4%，经蒽酮一浓硫酸法测定多糖含量为96.2%。取所获得的白及多糖 Ikg加入500mL水溶液，加入100克的淀粉酶，使淀粉酶的终浓度为2U以上，40 °C保温处理3小 时，80 °C以上灭酶处理IOmin，离心去除沉淀，加入95 %乙醇至终浓度达到65 %以上，醇沉 10-2011，5000~8000印1]1离心10~30111；[11得沉淀，干燥沉淀得450〖，经蒽酮一浓硫酸法测定多 糖含量为98.24%。
[0046] 对照实施例2
[0047] 按公开号为CN103044560A所介绍白及多糖的制备方法:取白及块茎IOkg，粉碎，过 20目筛，加入其2~4倍质量体积为70~90%的乙醇浸泡4h，沥干乙醇后，再加入原料质量的 10~20倍去离子水进行提取，温度60~80°C，搅拌浸提3~4h，过滤分离滤渣，滤液SOOOr/ min离心15min，上清液经旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/3，按其体积2~4倍加入80~95 %乙 醇，4~8°C静置沉淀8h，过滤、洗涤得白及粗多糖，真空干燥后得白及粗多糖，其浓度为2~ 5 %，加入木瓜蛋白酶1~12mg/g进行水解，水解体系的pH为5.5~8.5，水解温度为40~60 °C，水解时间为30~240min，酶解完成后在水解液中加入3倍体积的95%乙醇，于4°C冰箱静 置沉淀5h，过滤，并用75 %乙醇洗涤沉淀，沉淀干燥得白色白及多糖3.78kg。收率37.8 %，经 蒽酮一浓硫酸法测定多糖含量为96.5%。取Ikg白及多糖加入500mL水溶液，加入100克的淀 粉酶，使淀粉酶的终浓度为2U以上，40°C保温处理3小时，80°C以上灭酶处理lOmin，离心去 除沉淀，加入95%乙醇至终浓度达到65%以上，醇沉10_2011，5000~8000印1]1离心10~30111；[11 得沉淀，干燥沉淀得530kg，经蒽酮一浓硫酸法测定多糖含量为98.21 %。
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