马钱苷在制备改善睡眠的药物或保健品中的应用
【专利摘要】本发明属于化合物药物领域，涉及马钱苷的药物新用途，尤其是马钱苷在制备改善睡眠的药物或保健品中的用途。本发明提供的马钱苷(Loganin)系山茱萸科植物山茱萸(Cornus officinalis)的主要化学成分之一，化学式为C17H26O10，分子量为390.38；经动物实验证实，马钱苷可显著地延长小鼠睡眠总时长，且具有剂量依赖性地增加睡眠量的特点；初步的作用机制研究表明，马钱苷可能是通过增加小鼠脑内5?HT水平来诱导睡眠。综上，马钱苷可制备成具有镇静催眠作用的药物及保健品，制成的剂型包括颗粒剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、口服液、滴丸、微丸或注射剂。
【专利说明】
马钱苷在制备改善睡眠的药物或保健品中的应用
技术领域
[0001] 本发明属药物领域，涉及马钱苷的药物新用途，尤其是马钱苷在制备改善睡眠的 药物或保健品中的应用。 技术背景
[0002] 人生的三分之一在睡眠中度过，只有拥有良好的睡眠才能维持正常的生活、工作 和学习，可以说睡眠是维持人类一切活动的前提和基础。但是，近年来随着社会竞争愈来愈 激烈和人们生活节奏的不断加快，睡眠障碍问题逐渐成为了人们的困扰，其中突出的表现 为失眠。据世界卫生组织研究报道，全球目前约66%的人存在睡眠障碍，在我国失眠率也高 达10%~20%。失眠不仅容易导致器质性的疾病，还会使人免疫力下降，使人的身体消耗较 大，长期失眠更易造成生理及心理的损害。总之，失眠已成为严重影响人们身心健康的社会 问题之一。
[0003] 治疗失眠的药物主要有巴比妥类，苯二氮卓类、非苯二氮卓类。这些早期的镇静催 眠药物长期服用容易产生依赖性，较大剂量时常会引起头晕乏力，注意力分散，学习记忆能 力下降，长期用药突停会出现反跳现象或戒断症状等不良反应。因此人们一直致力于追求 安全窗口更大的，对睡眠影响结构更小的，不良反应更轻的新型镇静催眠药物。
[0004] 许多中药在改善和治疗睡眠障碍方面有长期的临床应用历史，这些中药疗效确 切，而且不良反应小，日益成为人们研究的热点。研究发现，酸枣仁、柏子仁、灵芝、五味子等 中药及其提取物具有明显的改善和促进睡眠的作用。因此，从中药中寻找研制改善和治疗 睡眠障碍的新药具有重要的意义。
[0005] 马钱苷（Loganin)属于环稀醚砲类化合物，是山茱萸科（Cornaceae)植物山茱萸 (Cornus officinalis)的主要有效成分之一。研究表明，马钱苷具有降血糖(Toxicology， 2011，290(1): 14-21)、抗氧化、抗炎(现代药物与临床，2009,24(5) :272-275)等功效，可用 以改善肝脏等器官的代谢紊乱，有助于抑制代谢性疾病(如高血糖、高血脂），氧化应激和炎 症的形成(Drug Discov Ther，2010,4(4) :223-234.)。然而，马钱苷改善或治疗睡眠障碍、 延长睡眠时间等方面的药理作用及临床应用，迄今尚未见任何研究。
[0006] 目前有关马钱苷的中国发明专利仅可见制备方法(CN104447910A)、含量测定方法 (CN103808811A)和制备治疗糖尿病药物方面(CN103110651A)，未见在改善睡眠方面的任何 报道。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一种马钱苷的新的药用用途，发现马钱苷在改善睡眠方面有 良好的作用，所述改善睡眠包括催眠和改善睡眠质量。
[0008] 本发明的技术方案如下：
[0009] -种马钱苷在制备改善睡眠的药物或保健品的应用，其特征在于，所述马钱苷为 如下式(1)化合物：
[0011 ] 所述马钱苷的英文名：loganin;分子量:390.38;分子式:Ci7H26〇io。
[0012] 所述改善睡眠包括催眠作用和改善睡眠质量作用。
[0013] 所述改善睡眠作用是通过马钱苷逆转5-HT受体拮抗剂PCPA诱导的失眠来实现的。 [0014] 具体的应用中，马钱苷的用量为5-80mg/kg，优选45-65mg/kg。
[0015] 进一步地，上述药物或保健品中，可根据需要加入一种或多种药学上可接受的载 体。
[0016] 进一步地，上述药物或保健品可以制备成颗粒剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、口 服液、滴丸、微丸或注射剂。
[0017] 所述药物制备成片剂，所述片剂包含如下组分:马钱苷、微晶纤维素、滑石粉、维生 素 C、硬脂酸镁、无水乙醇，各组分用量按照该制剂的一般用量即可。
[0018] 所述药物制备成胶囊剂，所述胶囊剂包含如下组分:马钱苷、淀粉、焦亚硫酸氢纳、 硬脂酸镁、无水乙醇，各组分用量按照该制剂的一般用量即可。
[0019] 所述药物制备成颗粒剂，所述颗粒剂包含如下组分:马钱苷、淀粉、亚硫酸氢钠、硬 脂酸镁、无水乙醇，各组分用量按照该制剂的一般用量即可。
[0020] 所述药物制备成滴丸剂，所述滴丸剂包含如下组分：马钱苷、维生素 C、聚乙二醇 6000,各组分用量按照该制剂的一般用量即可。
[0021] 所述药物制备成微丸剂，所述微丸剂包含如下组分:马钱苷、蔗糖、亚硫酸氢钠、羟 丙甲基纤维素、滑石粉，各组分用量按照该制剂的一般用量即可。
[0022] 所述药物制备成注射剂，所述注射剂包含马钱苷、维生素 C、氯化钠、碳酸氢钠、注 射用水，各组分用量按照该制剂的一般用量即可。
[0023] 优选地，所述药物或保健品制备成口服液，其特征在于，每100ml 口服液中包含如 下组分：
[0024] 活性成分:马钱苷90-110mg;
[0025] 稳定剂:苯甲醇0.1-1.5ml;
[0026] 增溶剂:β_环糊精或十二烷基硫酸钠或其混合物0.1-1.5mg;
[0027] 矫味剂:D_葡萄糖醛酸-δ内脂0.01-0.2mg;
[0028] 溶剂:草酸的水溶液，其中每100ml水中含有草酸0.75g。
[0029]优选地，所述马钱苷的用量为95-100mg;更优选98mg;
[0030] 优选地，所述增溶剂为β-环糊精与十二烷基硫酸钠重量比为1:1的混合物;优选增 溶剂的用量为lmg。
[0031] 制备上述马钱苷口服液的工艺方法，包括以下步骤：
[0032] (1)在所述溶剂草酸的水溶液中加入所述矫味剂D-葡萄糖醛酸-δ内脂，搅拌至全 部溶解；
[0033] (2)接着加入所述活性成分马钱苷、增溶剂，搅拌至均匀溶解；
[0034] (3)再加入所述稳定剂苯甲醇，搅拌均匀后，加医用活性碳，过滤后即制备得到所 述马钱苷口服液。
[0035]关于本发明的技术效果:通过马钱苷对阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间及 睡眠潜伏期影响实验、与阈下剂量戊巴比妥钠对小鼠入睡率的协同作用实验及对氯苯丙氨 酸(PCPA)诱导的失眠模型的干预实验，考察了马钱苷改善睡眠动物睡眠的影响。
[0036]此外，
【申请人】出人意外地发现，将马钱苷与特定的助剂混合制备成上述口服液使 得马钱苷的稳定性得以改善，特别地，相比添加其它的增溶剂如聚乙烯吡咯烷酮或PEG-400 等，本申请具有优良的稳定性。
[0037] 研究结果显示，马钱苷可显著缩短小鼠睡眠潜伏期并延长小鼠睡眠总时长;且马 钱苷可逆转5-HT受体拮抗剂PCPA诱导的失眠;结果证实，所述马钱苷具有镇静催眠，改善睡 眠障碍作用，其诱导睡眠作用与5-HT受体密切相关。加之马钱苷具有来源广泛，低毒性等优 点，因此其在制备催眠类药物方面具有很好的应用开发前景。
【附图说明】
[0038]图1马钱苷对阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠潜伏期的影响
[0039] 图2马钱苷对阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间的影响
[0040] 图3马钱苷对PCPA诱导小鼠失眠模型睡眠潜伏期的影响 [0041 ]图4马钱苷对PCPA诱导小鼠失眠模型睡眠时间的影响
【具体实施方式】
[0042]为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对 本发明作进一步的详细说明，但这并不意味着对本发明的保护范围的任何限制。
[0043]实施例1马钱苷对阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间及睡眠潜伏期的影响 [0044]取体重为20_24g的雄性ICR小鼠（由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动 物合格证号：SCXK(京）2012-0001 )，将其按体重随机分为空白溶剂对照组，艾司唑仑 (Estazolam，由山东信谊有限公司生产，批号：150910) 1 · 375mg/kg组，马钱苷5mg/kg组、 20mg/kg组和50mg/kg组，每组15只，灌胃给药，并记录给药时间，20min后腹腔注射阈上剂量 戊巴比妥钠(45mg/kg)。以翻正反射消失为入睡时间，翻正反射恢复为苏醒时间，记录小鼠 睡眠潜伏期与睡眠持续时间。
[0045] 实验结果如表1所示，马钱苷20、50mg/kg灌胃给药时，均可明显延长阈上剂量戊巴 比妥钠所致小鼠睡眠总时长(P<〇.05)，并明显缩短小鼠睡眠潜伏期，且呈剂量依赖关系。 [0046]表1马钱苷对阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间及睡眠潜伏期的影响(Mean 土S.E.M)
[0048] 注:*表示与对照组比较P<0.05
[0049] 实施例2马钱苷对阈下剂量戊巴比妥钠腹腔注射小鼠入睡率的影响
[0050] 取体重为20_24g的雄性ICR小鼠，将其按体重随机分为空白溶剂对照组，艾司唑仑 1 · 375mg/kg组，马钱苷5mg/kg组、20mg/kg组和50mg/kg组，每组20只，灌胃给药，并记录给药 时间，20min后腹腔注射阈下剂量戊巴比妥钠(22mg/kg)，观察并记录小鼠入睡情况。
[0051]实验结果如表2所示，马钱苷20、50mg/kg灌胃给药，均可明显增加阈下剂量戊巴比 妥钠所致小鼠入睡数量(P<〇.05)，实验结果表明，马钱苷与阈下剂量戊巴比妥钠具有协同 催眠的作用。
[0052]表2马钱苷与阈下剂量戊巴比妥钠对小鼠入睡率的协同作用
[0054] 注表示与对照组比较P<0.05
[0055] 实施例3马钱苷对PCPA诱导的失眠模型的干预
[0056] 取体重为20_24g的雄性ICR小鼠，将其按体重随机分为空白溶剂对照组、PCPA(对 氯苯丙氨酸，购自 Sigma，350mg/kg，i ·ρ ·)组、马钱苷(50mg/kg，i .g.)组和PCPA(350mg/kg， i . p.)+马钱苷(50mg/kg，i . g.)组。给药方式为首先连续腹腔注射PCPA3天，建立小鼠失眠模 型，在第3天腹腔注射PCPA lh后，灌胃给予马钱苷，20min后腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥 钠，以翻正反射消失为入睡时间，翻正反射回复为苏醒时间，记录小鼠睡眠潜伏期与睡眠持 续时间。
[0057] 实验结果如表3所示，马钱苷可逆转PCPA诱导的失眠模型，在PCPA模型组中，马钱 苷可显著增加小鼠的睡眠总时长(P<〇.05)。实验结果表明，马钱苷可能通过增加小鼠脑内 5-HT水平从而诱导睡眠。
[0058] 表3马钱苷对PCPA诱导的失眠模型的干预(Mean 土 S. E .M)
[0061 ] 注:*表示与对照组比较P<0.05，#表示与PCPA模型组比较P<0.05
[0062] 制备实施例1制备马钱苷口服液
[0063] 在溶剂草酸的水溶液中加入所述矫味剂D-葡萄糖醛酸-δ内脂，搅拌至全部溶解； 接着加入所述活性成分马钱苷、增溶剂，搅拌至均匀溶解;再加入所述稳定剂苯甲醇，搅拌 均匀后，加医用活性碳，过滤后即制备得到所述马钱苷口服液，在制得的马钱苷口服液中， 含有98mg马钱苷，lml苯甲醇、重量比为1:1的β-环糊精与十二烷基硫酸钠的混合物lmg、 0. lmg的D-葡萄糖醛酸-δ内脂;溶剂草酸的水溶液中，每100ml纯水中溶解有草酸0.75g，制 得本发明的马钱苷口服液。
[0064] 实施例2
[0065] 除增溶剂为β_环糊精外，其余同实施例1。
[0066] 实施例3
[0067] 除增溶剂为十二烷基硫酸钠外，其余同实施例1。
[0068] 对比例1
[0069] 除不含有增溶剂外，其余同实施例1。
[0070] 对比例2
[0071] 除增溶剂为聚乙烯吡咯烷酮外，其余同实施例1。
[0072] 对比例3
[0073]除增溶剂为PEG-400外，其余同实施例1。
[0074]马钱苷口服液稳定性试验：
[0075]对生产的马钱苷口服液进行外观性状检测，观察一开始制得的上述实施例1-3和 对比实施例1-3所制得的马钱苷口服液，肉眼观察口服液澄明，无漂浮物，无沉淀现象;随后 将各样品置于低速离心机，lOOOrpm/minlO分钟，观测稳定性变化；同时还进行将口服液分 别于低温(4°C)、室温(25°C)、高温(45°C)放置30天，观测稳定性变化;具体观测指标如下： [0076] A一一肉眼观测澄明，无漂浮物，无沉淀现象；
[0077] B一一肉眼观测基本透明，漂浮物小于5%，沉淀小于5% ;
[0078] C--肉眼观测少许浑浊，漂浮物5-15%，沉淀5-15% ;
[0079] D--肉眼观测较为浑浊，漂浮物15-25%，沉淀15-25% ;
[0080]表4马钱苷口服液稳定性试验结果
[0082]从表4中可以看出，本发明实施例1-3的马钱苷口服液中加入增溶剂相比不加入增 溶剂的对比例1，以及加入其它增溶剂聚乙烯吡咯烷酮或PEG-400的对比例2和3具有在稳定 性方面更优；同时，当增溶剂为1:1的β-环糊精与十二烷基硫酸钠的混合物时，其相比加入 单独的β-环糊精或十二烷基硫酸钠在稳定性方面更胜一筹。
[0083]本发明的马钱苷在制备改善睡眠的药物或保健品中的应用已经通过具体的实例 进行了描述，本领域技术人员可借鉴本
【发明内容】
，适当改变原料、工艺条件等环节来实现相 应的其它目的，其相关改变都没有脱离本发明的内容，所有类似的替换和改动对于本领域 技术人员来说是显而易见的，都被视为包括在本发明的范围之内。
【主权项】
1. 一种马钱巧在制备改善睡眠的药物或保健品的应用，其特征在于，所述马钱巧为如 下式(1)化合物：2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述改善睡眠包括催眠作用和改善睡眠质 量作用。3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述改善睡眠作用是通过马钱巧逆转5-HT 受体括抗剂PCPA诱导的失眠来实现的。4. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述马钱巧的用量为5-80mg/kg。5. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述马钱巧的用量为45-65mg/kg。6. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，在所述药物或保健品中，加入一种或多种 药学上可接受的载体。7. 根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物或保健品制备成颗粒剂、片剂、胶 囊剂、颗粒剂、冲剂、日服液、滴丸、微丸或注射剂。8. 根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物制备成口服液，其特征在于，每 1 OOml 口服液中包含如下组分： 活性成分:马钱巧90-1 IOmg; 稳定剂:苯甲醇0.1-1.5ml; 增溶剂:e-环糊精或十二烷基硫酸钢或其混合物0.1-1.5mg; 矫味剂:D-葡萄糖醒酸-6内脂0.01-0.2mg; 溶剂:草酸的水溶液，其中每100mL水中含有草酸0.75g。9. 根据权利要求8的应用，其特征在于，所述马钱巧的用量为98mg。10. 根据权利要求8的应用，其特征在于，所述增溶剂为(6-环糊精与十二烷基硫酸钢重 量比为1:1的混合物。
【文档编号】A61K31/352GK105902536SQ201610375109
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年6月1日
【发明人】续洁琨, 张维库, 乔灏祎, 赫军, 叶贤胜
【申请人】北京中医药大学