一种治疗宫颈癌的药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法，本发明药物组合物是以紫柚木、紫麻、桑呋喃C、染料木苷为原料药，配比而成，可按常规制剂工艺制成各种剂型，治疗宫颈癌疗效显著。
【专利说明】
一种治疗宫颈癌的药物组合物
技术领域
[0001] 本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方 法。
【背景技术】
[0002] 近年来宫颈癌发病率有着逐渐年轻化的趋势，西医针对宫颈癌主要采用手术及术 后放化疗的治疗方式，但随之而来的是一系列的术后并发症以及放化疗所带来的不良反 应。祖国医学对于宫颈癌的发生发展有着较为独特的认识，认为宫颈癌发病原因主要在于 房劳多产、饮食不节，情志不舒等所致的湿热、痰浊、瘀毒等邪气外袭胞宫，郁而不解，损伤 冲任带脉，根本原因则是正虚邪实。近年来众多研究表明，中药对于促进宫颈癌细胞凋亡， 减少化放疗的副作用有较好的效果。但相关基础研究仍较薄弱，许多中药的有效成分及发 挥作用的机制不甚明了，复方的研究缺乏多中心、大样本的长期随访研究。
[0003] 宫颈癌的多学科综合治疗是如今一个大的发展趋势，中医学对于宫颈癌的认识有 助于全面综合的了解宫颈癌患者术前术后的机能状态，有利于抑制或延缓肿瘤进程，减少 或避免一系列术后并发症的发生，促进术后患者的康复。目前，中医药治疗宫颈癌主要通过 两条途径：一是针对病邪的直接作用，如调节肿瘤细胞周期、抑制增殖、加快凋亡、促进分 化等；西医的多种放化疗药物也主要是通过影响肿瘤细胞周期和诱导凋亡来达到抑制肿 瘤细胞增殖的目的，但与此同时对于机体的正常细胞也具有一定杀伤作用，从而引发一系 列不良反应。因此，寻找疗效确切的天然药物具有重要的意义。二是通过提高机体免疫力从 整体发挥其抵御病邪的间接作用。其中，尤其重视调理气血，通过扶助正气达到祛邪外出、 治病求本的目的。同时，在宫颈癌发生发展的各个阶段及时的施以有效干预，力求达到"未 病先防、既病防变"。但目前多数的中药实验研究多显示作用效果与时间、剂量相关，具体则 仍有待继续深入探索。
[0004] 紫柚木:本品为马鞭草科柚木属植物柚木Tectona grandis L.f.的莖、叶。春、夏、 秋季均可采收，切碎晒干。【性味】味苦；微辛；微温。【功能主治】和中止呕；祛风止痒。主恶 心；呕吐；风疹瘙痒。【化学成份】叶含有柚木砲二醇（tectograndinol)，柚木萘醌 (tectograndone)，叶绿素 （chlorophyl 1 )a和b，类胡萝卜素及酸类化合物（phenolic compounds)。种子油脂肪酸成分：辛酸（carplic acid)，癸酸（capricacid)，月桂酸 (lauric acid)，十四烧酸(myristic acid)，棕桐酸(palmitic acid)，硬脂酸（stearic acid)，油酸(oleic acid)，亚油酸（linoleic acid)，亚麻酸（linolenic acid)及花生酸 (arachidicacid)等，其中以亚麻酸含量最高（>53%)。根含拉杷醇（lapachol)，茜草色素 (mujistin)，去氢-α-拉杷醌(dehydro-a-lapachone)，β_拉杷醌(β-lapachone)，抽木属醇 (tec-tol)，乌楠醌（tecgnuinone)，去氢抽木属醇（dehydrotecd)，β_ 谷甾醇（0_ sit06terol)，1-羟基_2_甲基-蒽醌（l-hydroxy-2-methyl-anthraquinone)，美决明子素 (obiusifolin)，白桦脂酸(betulinicacid)和帕奇巴星(nachybasin)。【药理作用】抗癌作 用;抑制一氧化氮合成、抗原虫作用。收载于中药大辞典。
[0005] 紫麻:本品为荨麻科紫麻属植物紫麻Oreocnide frutescens(Thunb. )Miq. [Ur-tica frutescens Thunb.]的全株。夏、秋季采收，洗净，晒干。【性味】甘;性凉。【功能主治】 清热解毒;行气活血;透疹。主感冒发热;跌打损伤;牙痛;麻疹不透;肿疡。【性状】全株有毛， 长达lm。茎上有棱槽。叶皱缩，展平后卵状长圆形或卵状披针形，长4-12cm，宽1.7-5cm，先端 渐尖，基部楔形，边缘有锯齿;叶柄长l_4cm。果实卵形。气微，味微甜。收载于中药大辞典。
[0006] 染料木苷(Genistin) : CAS号529-59-9，分子式C21H2Q〇1()，分子量432.38。【药理作 用】有雌激素活性，服后能增加雄性和切除卵巢的仓鼠的食欲和体重。【用途】性激素。【成分 来源】豆科植物染料木（金雀花）Genista tionctoria Linn·，大豆Glycine max (L.) Merr.种子，槐Sophora japonica L.实果，黄羽扁豆Lupinus luteus L.根，尼泊尔黄花 木Piptanthus nepalensis (Hook.) D. Don莖。
[0007] 桑咲喃C (Mulberrofuran C ) : CAS号77996-04-4，分子式C34H28O9，分子量 580.58。【药理作用】降血压。【成分来源】桑科植物1〇1〇18 13〇11^5^丨8根皮。
[0008] 2个原料药化学结构：
【发明内容】
[0009] 本发明的目的是克服【背景技术】的不足，提供一种有效治疗宫颈癌的药物组合物及 其制备方法。
[0010] 本发明是采用如下技术方案实现的： 制成该治疗宫颈癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为： 紫柚木7060-7080重量份紫麻400-410重量份桑呋喃C30-34重量份染料木苷50-52 重量份。
[0011] 优选的用于治疗宫颈癌的药物组合物，是由如下重量份的原料药组成： 紫柚木7070重量份紫麻405重量份桑呋喃C32重量份染料木苷51重量份。
[0012] -种治疗宫颈癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方 法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
[0013] -种治疗宫颈癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的治 疗宫颈癌药物。
[0014] -种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备： 原料药的组成和重量份为:紫柚木7060-7080重量份紫麻400-410重量份桑呋喃C30- 34重量份染料木苷50-52重量份； 制备方法： (1) 按原料药配比取紫柚木、紫麻、桑呋喃C、染料木苷，混匀，用重量百分比浓度42%乙 醇作为溶剂，在26°C温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为 原料药总重量的64倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07， 滤过，药液通过FU-16大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱 FU-16大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提 取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度90%乙醇作为溶剂，加热回流提取28次，每次提 取时间为0.45小时，每次溶剂用量为药渣A重量的52倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B 回收乙醇，浓缩至相对密度1.13,滤过，药液通过LSA-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用 重量百分比浓度60%乙醇溶液洗脱LSA-8大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度60%乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0015] 优选的一种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备： 原料药的组成和重量份为：紫柚木7070重量份紫麻405重量份桑呋喃C32重量份染 料木苷51重量份； 制备方法： (1) 按原料药配比取紫柚木、紫麻、桑呋喃C、染料木苷，混匀，用重量百分比浓度42%乙 醇作为溶剂，在26°C温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为 原料药总重量的64倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07， 滤过，药液通过FU-16大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱 FU-16大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提 取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度90%乙醇作为溶剂，加热回流提取28次，每次提 取时间为0.45小时，每次溶剂用量为药渣A重量的52倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B 回收乙醇，浓缩至相对密度1.13,滤过，药液通过LSA-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用 重量百分比浓度60%乙醇溶液洗脱LSA-8大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度60%乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0016] -种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂 学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
[0017] -种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中 药组成治疗宫颈癌药物。
[0018] 药物组合物治疗宫颈癌疗效显著。
【具体实施方式】
[0019] 实施例1:治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法 治疗宫颈癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：紫柚木7070g紫麻405g桑呋 喃C32g染料木苷51g; 制备方法： (1) 按原料药配比取紫柚木、紫麻、桑呋喃C、染料木苷，混匀，用重量百分比浓度42%乙 醇作为溶剂，在26°C温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为 原料药总重量的64倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07， 滤过，药液通过FU-16大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱 FU-16大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提 取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度90%乙醇作为溶剂，加热回流提取28次，每次提 取时间为0.45小时，每次溶剂用量为药渣A重量的52倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B 回收乙醇，浓缩至相对密度1.13,滤过，药液通过LSA-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用 重量百分比浓度60%乙醇溶液洗脱LSA-8大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度60%乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0020]实施例2:治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法 治疗宫颈癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：紫柚木7060g紫麻410g桑呋 喃C30g染料木苷52g; 制备方法： (1) 按原料药配比取紫柚木、紫麻、桑呋喃C、染料木苷，混匀，用重量百分比浓度42%乙 醇作为溶剂，在26°C温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为 原料药总重量的64倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07， 滤过，药液通过FU-16大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱 FU-16大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提 取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度90%乙醇作为溶剂，加热回流提取28次，每次提 取时间为0.45小时，每次溶剂用量为药渣A重量的52倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B 回收乙醇，浓缩至相对密度1.13,滤过，药液通过LSA-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用 重量百分比浓度60%乙醇溶液洗脱LSA-8大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度60%乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0021 ]实施例3:治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法 治疗宫颈癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：紫柚木7080g紫麻400g桑呋 喃C34g染料木苷50g; 制备方法： (1) 按原料药配比取紫柚木、紫麻、桑呋喃C、染料木苷，混匀，用重量百分比浓度42%乙 醇作为溶剂，在26°C温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为 原料药总重量的64倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07， 滤过，药液通过FU-16大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱 FU-16大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提 取物A; (2) 取步骤(1)药渣A，用重量百分比浓度90%乙醇作为溶剂，加热回流提取28次，每次提 取时间为0.45小时，每次溶剂用量为药渣A重量的52倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B 回收乙醇，浓缩至相对密度1.13,滤过，药液通过LSA-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用 重量百分比浓度60%乙醇溶液洗脱LSA-8大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度60%乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3)将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
[0022]实施例4:片剂的制备 取实施例1药物组合物93g，加入淀粉105g，混匀，制粒，干燥，加微晶纤维素35g，硬脂酸 镁8g，混匀，压制成150片，即得药物组合物片剂。
[0023]实施例5:胶囊的制备 取实施例2药物组合物76g，加入淀粉106g，混匀，制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁， 混匀，装胶囊100粒，即得药物组合物胶囊。
[0024]实施例6:滴丸的制备 称取聚乙二醇6000 80g水浴(80°C)加热煮熔，加入实施例3药物组合物7g，充分搅拌 均匀，以液体石蜡为冷却剂，置玻璃管(4*80cm)中，冷却温度为-1°C，滴口内外径为7.0/1.5 (mm/mm)，滴口距液面为1.9cm，滴速以每分65滴为最佳条件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝 剂，即得药物组合物滴丸。
[0025]实验例1:治疗宫颈癌作用试验研究 1材料与方法 1.1仪器与试剂 酶标仪（美国Bio Rad3550)、C〇2培养箱（Forma Sientific Inc)、培养板（美国 Coming);人宫颈癌细胞株HeLa取自2006年华中科技大学同济医学院附属同济医院细胞库； MTT、DMS0均为Sigma公司产品；阳性对照药为5-氟尿嘧啶(批号:091120,南通精华制药厂）， 用前以0.9%氯化钠溶液配制并稀释;药物组合物(实施例1药物组合物批号20060910)。 [0026] 1.2药物组合物的制备 实施例1药物组合物，用前以0.9%氯化钠溶液配制并进行倍量稀释。
[0027] 1.3人宫颈癌细胞株HeLa细胞的分离培养及鉴定 将人宫颈癌细胞株HeLa以含10%胎牛血清的RPMI1640(含青霉素100 U.m!/1，链霉素 1 OOyg. ml/1)在37 °C，5%C02孵育箱中培养，取对数生长期的细胞进行实验。
[0028] 1.4细胞增殖抑制试验 取对数生长期的HeLa细胞接种于96孔培养板(细胞数为每孔5 X 104个，每孔100yL)，加 入不同浓度的药物组合物溶液和阳性对照，使其终浓度分别为0.01，0.10，1.00, 50.00， 100.00，200.00yg .ml/1'最后用培养基补充至每孔200yL，5%C02孵箱中培养72h后，每孔加入 5g. L-VTT溶液20yL，继续培养4h后，1 000r. min-1，弃去孔内培养基，每孔加入DMS0 150yL， 37°C温摇10min，使其充分溶解，酶联检测仪在570nm波长处测定吸光度(A值）。抑制率(％) = (1-实验组平均A值/对照组平均A值）X 100%，并按点斜法计算出半数抑制浓度(IC50)。 [0029] 2结果 2.1培养的人宫颈癌HeLa细胞特征 显微镜下观察，细胞在24h有部分贴壁生长，12d细胞几乎长满，需要传代，呈典型的梭 形，细胞数目增多形成细胞小结，呈现"峰与谷"的特征，表明经过5或6代后已形成人宫颈癌 HeLa细胞。
[0030] 2.2药物组合物对细胞增殖的抑制作用 将不同浓度的药物组合物分别与HeLa细胞作用72h后，用MTT法测得细胞存活率，进而 计算抑制率，结果表明，药物组合物的细胞毒作用较明显，并有一定的量效关系，其IC5Q值分 别为 42yg.mL-、
【主权项】
1. 一种治疗宫颈癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重 量份为： 紫柚木7060-7080重量份紫麻400-410重量份桑呋喃C30-34重量份染料木苷50-52 重量份。2. 根据权利要求1所述一种治疗宫颈癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物 的原料药的组成和重量份为： 紫柚木7070重量份紫麻405重量份桑呋喃C32重量份染料木苷51重量份。3. 根据权利要求1所述一种治疗宫颈癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采 用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。4. 根据权利要求1所述一种治疗宫颈癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学 药或中药组成的治疗宫颈癌药物。5. -种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备： 原料药的组成和重量份为：紫柚木7060-7080重量份紫麻400-410重量份桑呋喃C30-34重量份染料木苷50-52重量份； 制备方法： (1) 按原料药配比取紫柚木、紫麻、桑呋喃C、染料木苷，混匀，用重量百分比浓度42%乙 醇作为溶剂，在26°C温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为 原料药总重量的64倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07， 滤过，药液通过FU-16大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱 FU-16大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提 取物A; (2) 取步骤（1)药渣A，用重量百分比浓度90%乙醇作为溶剂，加热回流提取28次，每次提 取时间为0.45小时，每次溶剂用量为药渣A重量的52倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B 回收乙醇，浓缩至相对密度1.13,滤过，药液通过LSA-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用 重量百分比浓度60%乙醇溶液洗脱LSA-8大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度60%乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。6. 根据权利要求5所述一种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下 步骤制备： 原料药的组成和重量份为：紫柚木7070重量份紫麻405重量份桑呋喃C32重量份染 料木苷51重量份； 制备方法： (1) 按原料药配比取紫柚木、紫麻、桑呋喃C、染料木苷，混匀，用重量百分比浓度42%乙 醇作为溶剂，在26°C温浸提取，提取次数为27次，每次提取时间为0.5小时，每次溶剂用量为 原料药总重量的64倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07， 滤过，药液通过FU-16大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱 FU-16大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提 取物A; (2) 取步骤（1)药渣A，用重量百分比浓度90%乙醇作为溶剂，加热回流提取28次，每次提 取时间为0.45小时，每次溶剂用量为药渣A重量的52倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B 回收乙醇，浓缩至相对密度1.13,滤过，药液通过LSA-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用 重量百分比浓度60%乙醇溶液洗脱LSA-8大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度60%乙醇洗 脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B; (3)将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。7. 根据权利要求5所述一种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组 合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。8. 根据权利要求5所述一种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组 合物与化学药或中药组成治疗宫颈癌药物。
【文档编号】A61K36/85GK106038830SQ201610501390
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月30日
【发明人】不公告发明人
【申请人】济南星懿医药技术有限公司