乌司他丁在制备治疗宫颈癌药物中的用途及药物组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体设及乌司他了在制备治疗宫颈癌药物中的用途， W及一种含有乌司他了的用于治疗宫颈癌的药物组合物。
【背景技术】
[0002] 宫颈癌是指发生在宫颈阴道部或移行带的鱗状上皮细胞及颈管内膜的柱状上皮 细胞交界处的恶性肿瘤，宫颈癌是女性生殖系统肿瘤中最为常见的子宫颈部恶性肿瘤，主 要的临床表现为月经或白带过多，阴道不规则出血、腰腹部疼痛，贫血、消瘦等全身衰竭性 症状。近年来，宫颈癌的发病率持续上升，发病人群也逐渐向年轻化发展。长期的临床观点 认为宫颈癌化疗的敏感度较差，有效率都低于15%，目前宫颈癌的化疗药物可采用5-氣尿 喀晚、阿霉素等进行静脉或局部注射，然而阿霉素毒性反应较重，且在动物实验中发现致癌 作用，在人体内也存在潜在的致癌、致突变作用，对生殖功能有重大影响。因此急需寻求一 种低毒、效果显著的宫颈癌治疗药物。
[0003] 乌司他了是从健康男性尿中分离纯化而得，分子量约为67000Da的酸性糖蛋白， 是一种广谱的蛋白酶抑制制剂，能够抑制多种蛋白、糖和脂类水解酶的活性。其主要在肝脏 中合成，由肾脏代谢随尿液排出，且其分解形成的低分子量成分也具有很强的抑制水解酶 的作用。1985年由日本首先开发上市，目前常用于治疗急性膜腺炎，慢性复发性膜腺炎，亦 可用于急性循环衰竭的抢救辅助用药。也有研究表明乌司他了对肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌 等癌症细胞有较好的抑制作用，但经检索，尚无发现有乌司他了在治疗宫颈癌的相关研究。
[0004] 青富班醋是一种常用的抗寄生虫药，为还原青富素班巧酸单醋，是具有倍半祗内 醋结构的青富素的衍生物。青富班醋作用于追原虫红内期裂殖体，通过还原青富素抑制细 胞色素氧化酶，达到抑制追原虫表膜一食物泡膜、线粒体膜系细胞色素氧化酶的功能，从而 阻断W宿主细胞浆为营养的供给。对追原虫的无性体有较强的杀灭作用，奏效快，能迅速控 制追疾发作，对脑型追、恶性追和间日追都有较好的疗效，对恶性追的耐氯嗟株同样有效。 尤其对脑型追的效果更显著，其能迅速控制追疾发作。目前尚未发现青富班醋在抗癌方面 的研究。中国专利CN103784942B公开了青富班醋与乌司他了联合治疗膜腺炎的用途。
[0005] 紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物，是一种可W促进微管聚合 和稳定已聚合微管的药物。通过II-III临床研究，紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌，对肺 癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋己瘤、脑瘤也都有一定疗效。马丽华等在《紫杉醇在子宫 颈癌及子宫内膜癌治疗中的应用》（中国现代医生，2013年第02期，第55-58页）公开了紫 杉醇在子宫颈癌及子宫内膜癌的临床治疗之中的疗效显著。然而使用紫杉醇治疗癌症的不 良反应如过敏反应、周围神经病变、脱发等发生率高，加重了患者的痛苦。
【发明内容】
[0006] 本发明的第一个目的在于提供乌司他了在制备治疗宫颈癌药物中的用途。
[0007] 本发明将乌司他了进行抗人宫颈癌化la细胞株活性测试W及人宫颈癌化La细胞 裸鼠移植瘤生长抑制试验，发现乌司他了对人宫颈癌化la细胞具有较强的增殖抑制作用。 为此本发明提供了乌司他了在医药领域的一种新应用，即乌司他了可W作为治疗宫颈癌的 药物使用。
[000引本发明的另一目的在于提供一种治疗宫颈癌的药物组合物，所述药物组合物包括 乌司他了和青富班醋。其中乌司他了和青富班醋的重量比1: (0.01~0.8)，此时乌司他了 和青富班醋的组合物在抑制宫颈癌方面效果显著，与单独给药乌司他了或青富班醋相比， 在抑制宫颈癌方面具有协同作用。优选的，所述药物组合物中乌司他了和青富班醋的重量 比1 : 0.4,此时乌司他了和青富班醋的组合物在抑制人宫颈癌化la细胞增殖作用最强。
[0009] 优选的，所述药物组合物还包括紫杉醇类药物。所述紫杉醇类药物具体为紫杉醇。 所述紫杉醇与乌司他了的重量比为（0.01~0.5): 1。此时乌司他了、青富班醋和的紫杉醇 组合物在抑制宫颈癌方面效果极其显著，与司他了和青富班醋的组合物相比，在抑制宫颈 癌方面具有更显著的协同作用。再优选的，所述紫杉醇与乌司他了的重量比为0.26 :1，此 时乌司他了、青富班醋和紫杉醇的组合物在抑制人宫颈癌化la细胞增殖作用最强。
[0010] 另外，本发明考察了乌司他了和青富班醋的药物组合物W及乌司他了、青富班醋 和紫杉醇的药物组合物的不良反应发生率，通过对试验小鼠毒副作用诸如腹泻、精神萎靡 等观察发现，与单独给药同剂量的乌司他了、青富班醋或紫杉醇相比，乌司他了和青富班醋 的药物组合物W及乌司他了、青富班醋和紫杉醇的药物组合物的不良反应发生率降低约 159(^20%。该为临床上降低紫杉醇药物剂量提供了一种途径，即联合乌司他了和青富班醋同 时给药。
[0011] 为了更好的表达该治疗宫颈癌的药物组合物的形式，本发明所述药物组合物为注 射剂，所述的注射制剂可W按照常规制剂进行制备。
[0012] 总之，与现有技术相比，本发明的优势在于： 第一，本发明提供了乌司他了在医药领域的一种新应用，即乌司他了可W作为治疗宫 颈癌的药物使用，开拓了乌司他了的应用方向，同时也给广大宫颈癌患者提供一种新药。
[0013] 第二，本发明提供了一种治疗宫颈癌的药物组合物，该组合物包括乌司他了和青 富班醋，还可包括紫杉醇，本发明将乌司他了和青富班醋、或乌司他了、青富班醋和紫杉醇 的药物组合物或药物制剂同时给药治疗宫颈癌，极大地方便患者的使用，提高了癌症治疗 的顺应性。同时与单独使用乌司他了、青富班醋或紫杉醇相比，本发明提供的药物组合物在 治疗宫颈癌方面具有显著的协同抗癌作用。
[0014] 第=，本发明治疗宫颈癌的药物组合物药物组合物具有较低的毒副作用。乌司他 了、青富班醋和紫杉醇均存在一定的毒性，但是乌司他了和青富班醋，或乌司他了、青富班 醋和紫杉醇作为组合物使用，在达到同样的抗癌疗效的情况下，可W显著降低乌司他了、青 富班醋和紫杉醇带来的毒副作用。与单独给药同剂量的乌司他了、青富班醋或紫杉醇相比， 本发明药物组合物的不良反应发生率降低约159(^20%。
【具体实施方式】
[0015] W下通过【具体实施方式】进一步描述本发明，但本发明不仅仅限于W下实施例。在 本发明的范围内或者在不脱离本发明的内容、精神和范围内，对本发明进行适当改进、替换 功效相同的组分，对于本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明的 范围之内。
[0016] 实施例1
制备工艺:取处方量的乌司他了和青富班醋，溶于500ml0. 9%生理盐水注射液中，过 滤、灌封，100摄氏度灭菌30min即得。
[0017] 实施例2
制备工艺:取处方量的乌司他了和青富班醋，溶于500ml0. 9%生理盐水注射液中，过 滤、灌封，100摄氏度灭菌30min即得。
[001引 实施例3
制备工艺:取处方量的乌司他了和青富班醋，溶于500ml0. 9%生理盐水注射液中，过 滤、灌封，100摄氏度灭菌30min即得。
[0019] 实施例4
制备工艺；取处方量的乌司他了和青富班醋，溶于500ml0. 9%生理盐水注射液中，过 滤、灌封，100摄氏度灭菌30min即得。
[0020] 实施例5
制备工艺；取处方量的乌司他了和青富班醋，溶于500ml0. 9%生理盐水注射液中，过 滤、灌封，100摄氏度灭菌30min即得。
[0021] 实施例6
制备工艺:取处方量的乌司他了和青富班醋，溶于500ml0. 9%生理盐水注射液中，过 滤、灌封，100摄氏度灭菌30min即得。
[002引 实施例7 _
制备工艺:取处方量的乌司他了和青富班醋，溶于500ml0.9%生理盐水注射液中，过 滤、灌封，100摄氏度灭菌30min即得。
[0023] 试验例一、乌司他了抗人宫颈癌化la细胞株活性测试 测试方法；体外抗肿瘤活性测试方法 A、原理；活细胞粒体中的班巧脱氨酶能使外源性唾挫藍（MTT)还原为水不溶性的藍紫 色结晶甲琐并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚讽能溶解细胞中的甲琐，用酶联 免疫检测仪测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。
[0024] B、细胞；人宫颈癌化la细胞株（中国科学院上海生命科学院细胞库）。
[0025] C、实验步骤； (1)样品的准备；将乌司他了Img用40yL的DMSO溶解配置成25mg/mL的母液，再用DMEM培养基(每lOOOmL培养基中含80万单位青霉素，1.Og链霉素，10%灭活胎牛血清）连 续稀释成乌司他了浓度为 1000yg/mL、100yg/mL、10yg/mL、lyg/mL、0. 1yg/mL的样品 液。运用相同的方法制备5-氣尿喀晚浓度为1000yg/mL、100yg/mL、10yg/mL、lyg/mL、 0.1yg/mL的样品液。
[0026] (2)MIT试验；取对数生长期化la细胞一瓶，弃培养液，将细胞用邸TA-膜酶消化 液于37°C培养箱消化约15s，将消化后的细胞用DMEM培养基稀释成1X106个/mU加到96 孔细胞培养板中，每孔100yL。实验设空白对照组、实验对照组、阳性对照组（5-氣尿喀晚） 和乌司他了组，每组设3个平行孔，置37°C，5%C02培养箱中培养2化后，加入上述配制的样 品液，每孔100y以实验对照组只加培养液