用于同步授精时间的方法和组合物的制作方法
【专利说明】用于同步授精时间的方法和组合物
[0001] 本申请是申请日2010年4月23日，申请号201080029042. 8 (PCT/ US2010/032258)，发明名称为"用于同步授精时间的方法和组合物"的发明专利申请的分案 申请。
[0002] 相关申请的交叉引用
[0003] 对于2009年4月23日提交的美国临时申请第61/172, 009号，本申请要求35U. S.C. § 119(e)下的优先权，该申请特别地通过引用结合到本文中。 发明领域
[0004] 本发明设及用于在动物中同步授精时间的方法和组合物。更具体而言，该发明设 及没有发情检测化eatdetection)的同步猪的授精时间的方法和组合物。
[000引发明背景
[0006] 促性腺素释放激素是一种10个氨基酸的肤，也被称为促黄体激素释放激素 (LHRH)。促性腺素释放激素在下丘脑中生成，负责滤泡刺激激素和促黄体激素从垂体释放。 促性腺素释放激素从下丘脑的神经元中释放，在滤泡刺激激素和促黄体激素释放的复杂调 节中起作用。滤泡刺激激素和促黄体激素W结合形式调节性腺的功能，在睾丸产生睾酬和 在卵巢产生孕酬和雌激素，和调节配子的产生和成熟。例如，滤泡刺激激素在卵巢刺激未成 熟的卵泡的生长和补充，促黄体激素触发排卵。
[0007] 雌性和雄性的促性腺素释放激素的分泌具有差别。在雄性中，促性腺素释放激素 W恒频脉冲分泌，但在雌性中，该脉冲频率在发情周期期间变化，并且临排卵时有大量高涨 的促性腺素释放激素。促性腺素释放激素的分泌在所有脊椎动物中是脉动的，且对恰当的 生殖功能是必须的。因此，促性腺素释放激素控制雌性的滤泡生长、排卵和黄体保持和雄性 的精子发生的复杂过程。
[0008] 促性腺素释放激素已被分离，并具有十肤的特征。可应用合成形式的促性腺素释 放激素，并且对促性腺素释放激素的十肤结构的修饰已得到多种促性腺素释放激素类似 物，它们刺激（例如促性腺素释放激素激动剂）或抑制（例如促性腺素释放激素括抗剂） 促性腺素类（比如促黄体激素和滤泡刺激激素）的释放。
[0009] 对于商业猪的生产而言，重要的是最大化生殖的效率，W使得猪生产更有利润。已 经严重依赖个体雌性猪的每日发情检测，相关的劳动成本用于雌性猪中发情的人工检测， 基于小母猪或母猪的每日检查，W达到对例如人工授精的最好的结果。用劳动密集的方法 (比如每日检查）的发情检测增加人工授精成功的可能性。因此，必需对发情检测的每日检 查投入时间、人工劳动和物质成本，因为不使用需要每日计划W监测发情检测的方法难W 预测发情的时间（即最好的授精时间）。因此，需要优化动物的授精成功的方法，其没有发 情检测，W减少劳动成本，并增加猪生产的收益性。
[0010] 发明简述
[0011] 申请人已作出W下意外发现；经给予激素控制排卵时间可淘汰基于发情期检测的 配种，并且允许猪只接受一次授精W优化生育率和优化成本消耗。在一实施方案中，描述了 没有发情检测的同步猪的授精时间的方法。该方法包括在断奶后第四天给予猪一定剂量 激素的步骤，所述激素选自促性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组 合，其中该猪只在给予激素后约15-约24小时授精一次，且其中没有发情检测。
[0012] 在W上描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。在上述实施方案中， 1)所述猪可W是产后母猪；2)所述猪可W是小母猪；3)所述授精可W是人工授精；4)所 述授精可W通过自然配种；5)排卵可W同步；6)所述激素可W按有效刺激卵泡排卵的量给 予；7)该剂量的激素可W使用选自W下的方法给予：放置导管（expositioncatheter)的 使用、人工给药和注射；8)所述猪可W在给予激素后约15-约18小时授精；9)所述猪可W 在给予激素后约18小时授精；10)相对于未给予激素的猪，所述猪的怀孕率可增大；11)相 对于未给予激素的猪，所述猪的胎仔数可增加；12)所述激素可给予多于一只的猪；13)相 对于未给予激素的猪，在给予激素后约48小时排卵的猪的百分率可增大；15)所述激素可 W经阴道内给药；16)所述激素可W给予至阴道前部；17)所述激素可W是促性腺素释放激 素受体激动剂；18)所述激素可W是促黄体激素受体激动剂；19)所述激素可W是人绒毛膜 促性腺素受体激动剂；20)所述激素可W是曲普瑞林；21)所述激素可W是曲普瑞林盐；22) 所述激素可W是合成物质；23)所述激素可W是己酸盐形式；24)所述激素可W在包含凝胶 的组合物中给药；25)所述凝胶可包含多糖；26)所述多糖可W选自；纤维素、右旋糖酢和海 藻酸盐；27)所述凝胶可W包含纤维素；和28)所述纤维素可W是甲基纤维素。预期上段 [0007]的实施方案与1-28或其任何组合的任何组合。
[0013] 在另一实施方案中，描述了包含一定剂量激素的试剂盒，所述激素选自促性腺素 释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合。该试剂盒进一步包含使用的说明 书，其中该激素在包含凝胶的组合物中，W及该组合物具有的抑为约5-约6。
[0014] 在上段[0009]描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。在段[0009] 描述的实施方案中，1)所述说明书可W指出，应将激素在断奶后约第四天给予猪，并且猪可 在给予激素后约15-约24小时授精一次；2)所述说明书可W指出，所述授精应是人工授 精；3)所述说明书可W指出，所述授精应是通过自然配种；4)所述试剂盒可进一步包含放 置导管、用于手工给药的涂药器或注射器；5)所述说明书可W指出，该猪应在给予激素后 约15-约18小时授精；6)所述说明书可W指出，该猪应在给予激素后约18小时授精；7)所 述说明书可W指出，所述激素应经阴道内给予；8)所述说明书可W指出，所述激素应给予 至阴道前部；9)所述激素可W是促性腺素释放激素受体激动剂；10)所述激素可W是促黄 体激素受体激动剂；11)所述激素可W是人绒毛膜促性腺素受体激动剂；所述激素可W是 曲普瑞林；12)所述激素可W是曲普瑞林盐；13)所述激素可W是合成物质；14)所述激素 可W是己酸盐形式；15)所述凝胶可W包含糖类；16)所述凝胶可W包含多糖；17)所述多 糖可W选自纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐；18)所述凝胶可包含纤维素；和19)所述纤维素 可W是甲基纤维素。考虑上段[0009]的实施方案和1-19或其任何组合的任何组合。
[0015] 在另一实施方案中，描述了包含促性腺素释放激素受体激动剂和凝胶的组合物， 其中所述组合物具有的抑为约5. 0-约6. 0。
[0016] 上段[0011]描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。段[0011]描 述的实施方案中，1)所述组合物可进一步包含防腐剂；2)所述防腐剂选自对哲基苯甲酸甲 醋和对哲基苯甲酸丙醋；3)所述组合物可进一步包含稳定剂；4)所述稳定剂可^是k氨 基酸；5)所述稳定剂可^是心甲硫氨酸；6)所述凝胶可包含多糖；7)所述多糖可W选自纤 维素、右旋糖酢和海藻酸盐；8)所述凝胶可包含纤维素；9)所述纤维素可W是甲基纤维素； 10)所述组合物可进一步包含张度剂；11)所述激动剂可W是曲普瑞林；12)所述组合物还 可结合使用的说明书；13)与组合物结合的说明书可W指出，应将激动剂给予猪和猪应在 给予激动剂后约15-约24小时授精一次；和14)所述说明书可W指出，该猪应在给予激动 剂后约18小时授精一次。考虑上段[0011]的实施方案与1-14或其任何组合的任何组合。
[0017] 提供W下各种实施方案。
[0018] 1.描述了没有发情检测的同步猪的授精的时间的方法。所述方法包含在断奶后第 四天给予猪一定剂量激素的步骤，所述激素选自促性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜 促性腺素和它们的组合，其中猪只在给予激素后约15-约24小时授精一次，且其中没有发 情检测。
[001引 2.条款1的方法，其中所述猪是产后的母猪。
[0020] 3.条款1的方法，其中所述猪是小母猪。
[002。 4.条款1至3的方法，其中所述授精是人工授精。
[002引 5.条款1至4的方法，其中所述授精是通过自然配种。
[002引 6.条款1至5的方法，其中使排卵同步。
[0024] 7.条款1至6的方法，其中所述激素是W有效刺激卵泡排卵的量给药。
[002引 8.条款1至7的方法，其中所述激素的有效量为约10yg-约1000yg。
[002引 9.条款1至7的方法，其中所述激素的有效量为约10yg-约500yg。
[0027] 10.条款1至9的方法，其中该剂量的激素是应用选自W下的方法给予：放置导管 的使用、手工给药和注射。
[002引11.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约15-约18小时授精。
[0029] 12.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约16-约24小时授精。
[0030] 13.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约18-约22小时授精。
[0031] 14.条款1至13的方法，其中所述猪在给予激素后约18小时授精。
[003引15.条款1至14的方法，其中相对于未给予激素的猪，所述猪的怀孕率增大。
[003引16.条款1至15的方法，其中相对于未给予激素的猪，健康胎的总数增大。
[0034] 17.条款1至16的方法，其中相对于未给予激素的猪，产仔的百分率增大。
[003引18.条款1至17的方法，其中相对于未给予激素的猪，出生小猪的总数增大。
[0036] 19.条款1至18的方法，其中相对于未给予激素的猪，每精液剂量的出生小猪的总 数增大。
[0037] 20.条款1至19的方法，其中相对于按照发情检测授精的猪，每精液剂量的出生小 猪的总数增大。
[003引 21.条款1至20的方法，其中相对于未给予激素的猪，小猪指数增加。
[0039] 22.条款1至21的方法，其中相对于按照发情检测授精的猪，小猪指数增加。
[0040] 23.条款1至22的方法，其中相对于未给予激素的猪，所述猪的胎仔数增加。
[0041] 24.条款1至23的方法，其中所述激素给予多于一只的猪。
[0042] 25.条款1至24的方法，其中相对于未给予激素的猪，在给予激素后约48小时，排 卵的猪的百分率增大。
[0043] 26.条款1至25的方法，其中所述激素经阴道内给药。
[0044] 27.条款1至26的方法，其中所述激素给予至阴道前部。
[0045] 28.条款1至27的方法，其中所述激素是促性腺素释放激素受体激动剂。
[0046] 29.条款1至28的方法，其中所述激素是促黄体激素受体激动剂。
[0047] 30.条款1至29的方法，其中所述激素是人绒毛膜促性腺素受体激动剂。
[0048] 31.条款1至30的方法，其中所述激素是曲普瑞林。
[0049] 32.条款1至31的方法，其中所述激素是曲普瑞林盐。
[0050] 33.条款1至32的方法，其中所述促性腺素释放激素具有式pGlu-His-T巧-Ser-T yr-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyNH^。
[0051] 34.条款1至33的方法，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂具有式
[0052]
[0053] 或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐，
[0054] 其中
[00巧]Ri和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；
[0056]X是氨，或X是选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基駿酷胺；和
[0057]HNC(0)NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0058] 35.条款34的方法，其中R1是亚甲基-杂芳基，其中杂芳基选自；化晚基、唾挫基、 横胺化晚基（pyridazol^)、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化挫基 和苯并咪挫基；和
[005引 R2是氨或甲基。
[0060] 36.条款34至35的方法，其中X是C&C做畑2。
[0061] 37.条款1至36的方法，其中所述激素是合成物质。
[0062] 38.条款1至37的方法，其中所述激素是己酸盐形式。
[0063] 39.条款1至38的方法，其中所述激素是在包含凝胶的组合物中给药。
[0064] 40.条款39的方法，其中所述凝胶包含多糖。
[0065]41.条款40的方法，其中所述多糖是选自；纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐。
[0066] 42.条款39至41的方法，其中所述凝胶包含纤维素。
[0067] 43.条款42的方法，其中所述纤维素是甲基纤维素。
[0068] 44.条款39至43的方法，其中所述凝胶包含约0. 25重量％ -约10重量％的甲基 纤维素。
[0069] 45.条款39至43的方法，其中所述凝胶包含约0.5重量％-约4.0重量％的甲基 纤维素。