微多孔膜的完整性检测方法

专利名称：：微多孔膜的完整性检测方法
技术领域：
：本发明涉及膜的完整性检测方法，所述方法使用了含有金属颗粒的力交体溶液。
背景技术：
：平均粒径1nm~100nm的金属颗粒作为病毒的代替颗粒被用于由再生纤维素构成的病毒除去膜的完整性;险测中。在作为代替颗粒而使用的金颗粒的除去和病毒除去之间可以看到非常良好的相关关系(专利文献l)。另外，还提出了含有具有含氮基团的水溶性高分子分散剂的金属或金属化合物的胶体溶液，其被用于由经亲水化的聚偏氟乙烯等合成高分子所构成的病毒除去膜的完整性检测(专利文献2)。进而，作为稳定的胶体溶液还提出了一种金胶体溶液，其虽然不是用于病毒除去膜的完整性检测，但含有非离子型表面活性剂(专利文献3)。在实际应用的完整性检测中，优选具有对作为病毒除去膜而使用后的膜进行洗涤从而尽量减少膜的残存物的工序。作为合成膜使用后的洗涤方法，之前提出了使用柠檬酸的方法(专利文献2和专利文献4)。但是，当使用专利文献2所公开的金属或金属化合物的胶体溶液时，未必能够充分地对蛋白质过滤洗涤后的经亲水化处理的合成高分子所构成的病毒除去膜，实施正确的完整性检测。即，存在如下的问题洗涤后经亲水化处理的由合成高分子所构成的病毒除去膜上残留的蛋白质等，与专利文献2的胶体溶液发生相互作用，即残留于膜上的蛋白质等与胶体相吸附。专利文献l:日本专利第3328857号/>才艮专利文献2:国际公开第2005/007328号小册子专利文献3:日本专利第2902954号公报专利文献4:日本特开2006-55784号/>净艮
发明内容发明要解决的问题本发明的课题在于解决上述问题，提供一种微多孔膜的完整性检测方法，该方法使用了含有金属颗粒的胶体溶液，能够对于纤维素系病毒除去膜以及经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜两者在过滤蛋白质溶液后正确检测完整性。用于解决问题的方案本发明人等为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现，通过在包含疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂或聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯中的任一种非离子型表面活性剂和/或具有吡咯烷酮基的水溶性高分子分散剂的、含有金属颗粒或者金属化合物颗粒的胶体溶液中，进一步加入具有磺酸基的阴离子型高分子，令人惊奇的是即便是在蛋白质过滤后进行了洗涤的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜，与空白检测相比，也可以进行金属颗粒或金属化合物颗粒的对数除去率(LRV值，logreductionvalue)差异在O.l以内的正确的完整性才企测。另外发现，洗涤剂使用碱性緩冲液或者疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂和次氯酸钠的混合液，通过组合这样的洗涤方法，可以在不破坏合成高分子膜的亲水化部分的情况下进行洗涤，可以尽量减少膜中的残存蛋白质对测定造成的影响，可以进行正确的完整性4全测。即，本发明如下所述。(1)一种微多孔膜的完整性检测方法，其特征在于，其包括利用微多孔膜过滤胶体溶液的工序，所述胶体溶液含有分散于包含以下的(A)成分和(B)成分、包含以下的(A)成分和(C)成分或者包含以下的(A)成分、(B)成分和(C)成分的溶剂中的金属颗粒，(A)具有磺酸基的阴离子型高分子；(B)选自疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂和聚氧乙婦山梨醇酐脂肪酸酯类的非离子型表面活性剂所组成的组中的至少1种非离子型表面活性剂；(C)具有吡咯烷酮基的水溶性高分子。(2)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述微多孔膜为合成高分子系或纤维素系的病毒除去膜。(3)根据(2)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述合成高分子系的病毒除去膜为经亲水化处理的热塑性高分子膜。(4)根据(3)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述热塑性高分子选自聚偏氟乙烯、聚醚^l和聚^l所组成的组。(5)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述金属颗粒的金属选自金、银、钼、铑、把、钌、铱、锇、铁和铜所组成的组。(6)根据(5)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述金属颗粒的平均粒径为10nm~50nm。(7)根据(6)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述金属颗粒的平均粒径的变动率为27%以下。(8)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述具有磺酸基的阴离子型高分子为聚苯乙烯磺酸盐。(9)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，所迷疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂为选自聚氧6乙烯多环苯基醚、聚氧乙烯j3-萘基醚和聚氧乙烯苯乙烯基苯基醚所组成的组中的l种以上。(10)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述聚氧乙燁山梨醇酐脂肪酸酯类为聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯和/或聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯。(11)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述具有吡咯烷酮基的水溶性高分子为聚乙烯基吡咯烷酮或聚乙烯基吡咯烷酮/苯乙烯共聚物。(12)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述病毒除去膜为在过滤蛋白质溶液后使用碱性缓冲液进行了洗涤的膜。(13)根据(12)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述碱性緩沖液选自碳酸盐、碳酸氢盐、硼酸盐和磷酸盐所组成的纟且。(14)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，所述病毒除去膜为在过滤蛋白质溶液后使用含有疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活'性剂和次氯酸钠的混合液进行了洗涤的膜。(15)根据(1)所述的完整性检测方法，其特征在于，金属胶体溶液为如下获得的溶液在将金属化合物溶解于溶剂中并使金属颗粒析出的溶液中，添加(B)成分和/或(C)成分而溶解后，进一步添加(A)成分进行溶解。发明的效果通过本发明的使用了含有金属颗粒的胶体溶液的微多孔膜的完整性检测方法，即便对于经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜，在过滤蛋白质溶液后也可实施正确的完整性检测。具体实施例方式以下，详细说明本发明的使用了胶体溶液的微多孔膜的完整性检测方法及该金属胶体溶液的制造方法。本发明的完整性检测所使用的胶体溶液的金属颗粒是指由金属单质和氧化物等金属化合物构成的颗粒。构成该胶体溶液的金属颗粒或金属化合物颗粒的金属只要是在溶剂中可形成尺寸lnm~100nm的金属颗粒或金属化合物颗粒的金属则无特别限定，优选在用于完整性检测的胶体溶液中不发生化学反应。可为金、4艮、铑、把、钌、铱、锇、铁和铜中的任一种，更优选为金、银、铜，最优选为金。本发明的完整性检测所使用的胶体溶液的金属颗粒本身不发生化学反应。不发生化学反应是指在溶剂中颗粒之间不会发生化学反应而结合、分解、变形等，和/或金属颗粒不与多孔体或微多孔膜发生化学反应。为了将该胶体溶液用于多孔膜的完整性检测，优选在可见光下能够识别。胶体溶液优选在可见区的波长下具有极大吸收。这里所-说的可见区域的波长是指360nm830nm的范围。例如，在使用金作为金属颗粒或金属化合物颗粒的金属时，胶体溶液的颜色随粒径而不同，为紫红色~紫色(极大吸收波长500nm600應)。本发明的完整性检测是指用于确认从含有蛋白质或生理活性物质等的溶液中除去病毒的病毒除去膜在使用后的性能而进行的试验。完整性检测具有各种方法，将金属颗粒作为病毒的代替颗粒进行过滤的方法由于其原理与病毒除去相同，均是颗因此可靠性高。进而，利用胶体溶液的过滤的方法由于溶液的制备容易，且其浓度测定也简单，精度良好，因此优选。在进行完整性检测时，优选在过滤胶体溶液之前进行膜的洗涤处理，这是因为能够尽量除去残存于膜上的蛋白质和脂质等，尽量减小由于残存物的堵塞等所导致的膜的孔径分布变化。为了维持稳定的分散状态，本发明中使用的金属颗粒的粒径必须为lnm~100nm的范围。更优选为lnm~50nm的范围，金属颗粒的粒径下限为lnm以上，这对于用作病毒除去膜的完整性冲企测是必要的，优选为5nm以上、更优选为10nm以上。特别优选为15nm以上。另外，为了维持稳定的分散状态，金属颗粒的粒径上限必须为100nm以下。优选为75nm以下、更优选为50nm以下、特别优选为45nm以下。本发明中4是到的金属颗粒的粒径通常用圆当量直径表示。具体地说，在电子显微4竟下观察的照片计算颗粒的投影面积，用与其具有相等面积的圆的直径来表示。平均粒径是指上述圓当量直径的数平均值。另夕卜，在以细小病毒等直径为20nm25nm的小病毒为目标的病毒除去膜的完整性;险测中，平均粒径优选为15nm~25nm的范围。利用以小病毒为目标的病毒除去膜对平均粒径为15nm~25nm的胶体溶液进行过滤时，金属颗粒的除去率与细小病毒等小病毒除去率的相关性高。为了用于病毒除去膜的完整性检测，本发明中使用的金属颗粒的粒径的变动率优选为30%以下。更优选为27%以下。这里，变动率可以用下述式(1)求得。变动率(％)=cr(粒径的标准偏差)xl00/平均粒径(1)为了用于多孔膜的完整性检测，本发明中使用的金属颗粒的形状优选接近各向同性。这里，微粒的形状接近各向同性是指颗粒的长径/短径之比为1~2的范围，更优选为1.0~1.8的范围。本发明中使用的金属颗粒的含量优选为lppm1000ppm的范围、更优选为10ppm~800ppm、进一步优选为20ppm~700ppm。金属颗粒的含量上限超过1000ppm时，从分散稳定性的观点出发不优选，金属颗粒的含量下限小于lppm时，从作为完整性检测用的使用容易性的观点出发而不优选。换一种金属颗粒含量的表现的话，优选为0.0001重量％~0.1重量％的范围、更优选为0.001重量％~0.08重量％、进一步优选为0.002重量%~0.07重量％。为了将该胶体溶液用于微多孔膜的完整性检测，优选溶液中的颗粒仅为单一种类的金属颗粒。金属颗粒能够正确地识别、定量，颗粒本身不发生化学反应和/或颗粒不与多孔体或微多孔膜发生化学反应。多种金属颗粒存在时，由于吸收光谱等的差别，有可能无法进行正确的测定。另外，根据反应条件，由于可以容易地控制金属颗粒的粒径、变动率，因此能够制作与作为目标的病毒颗粒基本上相同大小的颗粒。难以以相同的粒径稳定地制造多种金属颗粒。本发明中使用的具有磺酸基的阴离子型高分子优选为选自聚苯乙烯磺酸或其盐、烷基化羟乙基纤维素的磺化物、聚乙烯硫酸、硫酸葡聚糖、或它们的盐等中的至少l种以上聚合物。盐可以是任何一种，作为例子可以举出能够从市售中获得的钠盐、钾盐。分子中的磺酸基密度只要不影响颗粒的分散稳定性和聚合物的溶解性，则无特别规定，例如优选每70000分子量的阴离子型高分子具有300个~400个磺酸基。只要不影响颗粒的分散稳定性，则不特别限定分子中具有除了磺酸基之外的官能团，从与残存蛋白质的相互作用的观点出发，优选不具有羧基。具有磺酸基的阴离子型高分子直接作用于金属颗粒，将颗粒包裹，防止凝集，从而显示分散力，即具有所谓的保护胶体效果。通过保护胶体的效果，具有防止金属颗粒之间的凝集的作用、保持表面的电位恒定的作用、抑制对其他材料的吸附的作用。另外，通过高分子的亲水基团具有阴离子性，从而颗粒表面的电荷进一步增大，具有增大颗粒表面与具有同种电荷的材料的双电层的排斥力的效果。此外，与具有其他种类的亲水基、例如羧基的阴离子型高分子相比，磺酸基亲水性更高，具有抑制与构成蛋白质的氨基酸中的氨基部分的疏水性相互作用的效果。本发明中使用的具有磺酸基的阴离子型高分子的分子量优选为lx103~2xl()6的范围、更优选为2xl03~lx106、进一步优选为5xl03~5xl05、最优选为7xl03~lx105。具有》美酸基的阴离子型高分子的分子量为1x103以下时，从胶体的分散稳定性的观点出发而不优选，该分子量为2xl(^以上时，,人粘度、在溶剂中的溶解性、处理性及难以对胶体颗粒大小产生影响的观点出发而不伊匸选。本发明的胶体溶液中的具有磺酸基的阴离子型高分子的含量优选为0.01重量％~20重量％的范围、更优选为0.05重量％~10重量％、进一步优选为0.1重量％~5重量％。具有磺酸基的阴离子型高分子分散剂的含量小于0.01重量％时，从抑制与合成高分子系微多孔膜的相互作用的效果的观点出发而不优选。具有磺酸基的阴离子型高分子分散剂的含量超过20重量％时，从颗粒的分散稳定性的观点出发而不优选。本发明的胶体溶液的特征在于，与具有磺酸基的阴离子型表面活性剂一起，并用疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂或聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯中的任一种非离子型表面活性剂和/或具有吡咯烷酮基的水溶性高分子。通过并用这2种或3种添加剂可获得例如进一步提高金属颗粒的分散稳定性、抑制金属颗粒吸附于残留在膜上的微量蛋白质上的效果。本发明中使用的疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂是指具有2个以上环结构或具有碳稠合环的非离子型表面活性剂。作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂，优选聚氧乙烯多环苯基醚、聚氧乙烯P-萘基醚、聚氧乙烯苯乙烯基苯基醚。通过疏水部分具有多环状结构，从而疏水性变弱，具有抑制与合成高分子系微多孔膜中的疏水部分的相互作用的效果。另外，已知具有多环状结构的非离子型表面活性剂形成大的胶束。在具有磺酸基的阴离子型高分子的侧链上具有多环状结构的非离子型表面活性剂的大胶束通过疏水性相互作用而吸附，在空间上抑制与构成蛋白质的氨基酸中的氨基的相互作用。本发明中使用的聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯类是指，亲水部分具有氧乙烯链、侧链上具有多元醇与脂肪酸形成的酯键结构的非离子型表面活性剂。聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯类也具有与含有多环状结构的非离子型表面活性剂相同的效果。作为本发明中使用的具有吡咯烷酮基的水溶性高分子，优选聚乙烯基吡咯烷酮、N-乙烯基吡咯烷酮/苯乙烯共聚物。具有吡咯烷酮基的水溶性高分子直接吸附胶体，通过包裹颗粒、防止凝集来显示分散力，具有所谓的保护胶体效果。特别是具有不同于金属表面的电荷的高分子利用其静电作用更为牢固地吸附在金属颗粒表面上，对于溶液的环境变化(温度、盐浓度)也稳定。本发明中使用的具有吡咯烷酮基的水溶性高分子的分子量优选为lx103~2xl06、更优选为2xl03~lxl06、进一步优选为5xl03~lxl05、最优选为7xl035xl04。具有吡咯烷酮基的水溶性高分子的分子量小于1\103时，从胶体的分散稳定化的观点出发而不优选，该分子量超过2xl()S时，从粘度和在溶剂中的溶解性、处理容易性、难以对胶体颗粒大小造成影响的观点出发12而不优选。本发明的疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂或聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯中的任一种非离子型表面活性剂和/或具有吡咯烷酮基的水溶性高分子的含量优选为0.001重量%~10重量％、更优选为0.01重量％~5重量％、进一步优选为0.05重量％~3重量％。疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂或聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯中的任一种非离子型表面活性剂和/或具有吡咯烷酮基的水溶性高分子的含量小于0.001重量％时，从分散稳定化效果的观点出发而不优选，含量无特别限定。本发明的胶体溶液可以通过在溶剂中溶解原料金属化合物，并还原成金属而获得。作为原料金属化合物，可以使用氯金酸、硝酸银、氯铂酸、氯化铑(in)、氯化4巴(n)、氯化钌(ni)、氯铱酸盐、氧化锇(vii)等。作为还原剂，可以举出柠檬酸、柠檬酸钠、单宁酸、肼、硼氢化钠等。反应温度只要是室温至溶剂沸点的温度即可，优选为40°C至溶剂沸点的温度。另外，反应时间为数分钟至数日。此外，还原反应后，加入规定量的疏水部分具有环状结构的非离子型表面活性剂或聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯中的任一种非离子型表面活性剂和/或具有吡咯烷酮基的水溶性高分子，进一步添加规定量的具有磺酸基的阴离子型高分子，从而可获得本发明的胶体溶液。本发明的含有金属化合物颗粒的胶体溶液的制造方法并无特别限定，可以-使用任何7>知的方法。例如，可以^使用如下的方法，即，在水中利用碱水解、热水解、离子交换等方法将金属的氯化物、硝酸盐、硫酸盐等无机盐，草酸、醋酸等有机盐制成金属氧化物或金属氢氧化物缩合物的微粒的方法。为了迅13速地结束反应，还可以4吏用高温及加压条件。作为本发明的原料金属化合物的溶剂和胶体溶液的分散溶剂，一般可以使用水、水溶性有机溶剂或它们的混合物。作为水溶性有机溶剂，可以举出乙醇、甲醇、乙二醇等。优选水、乙醇或甲醇或它们的混合物。最优选水。本发明中使用的微多孔膜的材料可以举出纤维素系或合成高分子系。作为纤维素系，优选使用再生纤维素、天然纤维素、醋酸纤维素。本发明中使用的合成高分子为热塑性高分子，优选使用聚偏氟乙烯、聚醚砜、聚砜。由于聚偏氟乙烯、聚醚砜、聚砜为疏水性，因此作为病毒除去膜使用时优选进行亲水化处理。这里所说的亲水化处理是指使膜的表面或细孔表面变成亲水性。可以根据公知的方法利用接枝、涂布或交联来进行亲水化处理。这里所说的亲水性是指膜易于被水润湿。亲水化处理方法并无特别限定，可以举出例如将微多孔膜浸渍于含有表面活性剂的溶液后，进行干燥，使表面活性剂残留于微多孔膜中的方法；通过照射电子射线或Y射线等放射线或者使用过氧化物，在微多孔膜的细孔表面接枝亲水性的丙烯酸系单体或甲基丙烯酸系单体等的方法；在制膜时预先混合亲水性高分子的方法；将微多孔膜浸渍于含有亲水性高分子的溶液中，然后进行千燥，在微多孔膜的细孔表面制作亲水性高分子覆膜的方法等。利用病毒除去膜过滤本发明的胶体溶液时的压力只要不影响微多孔性膜的结构则无特别限定，但为耐压性低的纤维素膜时，优选为lkPa100kPa、更优选为20kPa~80kPa。当为耐压性高的聚偏氟乙烯膜、聚醚砜膜、聚砜膜等时，可以高压过滤，优选4吏用尽量高的压力。优选为100kPa~600kPa、更优选为100kPa300kPa。胶体溶液的浓度测定用以下方法进行。使用分光光度计等测定胶体溶液的吸收光谱，确定极大吸收波长。在过滤前后测定极大吸收波长处的胶体溶液的吸光度。力交体的除去率以对数除去率(LRV)表示。这里，使过滤前的吸光度为Co、过滤后的吸光度为Cf,则对数除去率用下述式(2)计算。对数除去率(LRV)=Log10(Co/Cf)(2)本发明中，能够进行正确的完整性检测是指金属颗粒对于膜材料的吸附小。金属颗粒的吸附小时，可利用膜的孔大小带来的颗粒筛分原理进行性能评价。金属颗粒对于膜材料的吸附程度能够用金属颗粒的LRV对于金属颗粒尺寸变化的依赖性来判断。这是因为，如果吸附，则在金属颗粒尺寸和除去率之间没有相关关系。本发明中，作为简单地研究吸附程度的方法，选择如下的方法，即，使用具有与滤器的透水孔径基本相同的颗粒尺寸的金属颗粒、且仅改变添加剂，通过作为病毒除去膜使用前的多孔膜(空白滤器)来测定金属颗粒的LRV的方法。这里使用的添加剂是用于防止金属颗粒吸附于多孔膜的添加剂，是因为仅金属颗粒的情况下吸附性过高而添加的。由于在用于完整性检测的金属颗粒除去试验中要观察尺寸筛分所产生的除去率，因此必须排除吸附的影响。当金属颗粒牢固地吸附于膜表面时，金属颗粒的LRV与过滤量无关，为4全测限以下(LRV〉3.0)。本发明中，作为对于空白滤器是否能进行正确的完整性4企测的判断标准，例如可以举出过滤0.5L/m2~2.5L/m2液体的LRV小于2.0，且当增加过滤量时，膜的颗粒捕获容量减小，LRV降低。另外，本发明中，在作为病毒除去膜使用后能进行正确的完整性检测可如下所述进行确认通过作为病毒除去膜过滤蛋白质水溶液一定时间后经过了洗涤工序的膜，来测定金属颗粒的LRV。即，在作为病毒除去膜使用的前后，使用相同平均孔径的微多孔膜，利用相同条件的过滤方法测定相同平均粒径的胶体溶液时，如果作为测定值的LRV差别小，则可判断金属颗粒对于残存蛋白质和洗涤后的膜材料的吸附小。金属颗粒的吸附小意味着能基于作为病毒除去膜使用后的膜孔的大小带来的颗粒篩分原理进行性能评价，该方法可以说是适合实际应用的病毒除去膜的完整性检测。本发明中，作为病毒除去膜使用后能进行正确的完整性#r测是指例如在作为病毒膜使用的前后测定的金属颗粒的LRV之差为O.l以下。本发明中使用的碱性緩冲液是指组合碳酸盐、碳酸氢盐、硼酸盐、磷酸盐等而制作的使pH达到IO左右的緩冲液。盐的种类可以为任何一种，可以使用市场上能获得的钠盐、钾盐。通过在洗涤液中使用碱性的緩冲液，具有在不破坏合成高分子膜的亲水化部分的情况下而使膜中的残留物质流出到膜外的效果。本发明中，在膜的洗涤中所使用的含有疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂和次氯酸钠的混合液是指具有2个以上苯基的、或者具有碳稠合环的非离子型表面活性剂与次氯酸钠的混合液。作为含有疏水部分具有多环秋结构的非离子型表面活性剂与次氯酸钠的混合液，优选聚氧乙烯多环苯基醚、聚氧乙烯(3-萘基醚、聚氧乙烯苯乙烯基苯基醚等疏水部分具有环状结构的非离子型表面活性剂和次氯酸钠的混合液。该混合液具有使膜中的残留物质在洗涤溶剂中增溶、并流出到膜外的效果。本发明中所述的洗涤方法只要是一般的洗涤方法则无特另'J限定，例如可以举出4吏洗涤液在与有*14勿过滤的相同方向上向微多孔膜流入的洗涤方法(以下称作"顺洗")、使洗涤液在与有机物过滤的相反方向上向微多孔膜流入的洗涤方法(以下称作"逆洗")等。洗涤温度只要不对洗涤液造成影响则无特别限定，优选4°C~40。C的温度。洗涤压力只要是不影响微多孔'性膜的结构的压力则无特另'J限定，^旦为耐压性^f氐的纤维素膜时，优选为lkPa100kPa、更优选为20kPa80kPa。耐压性高的聚偏氟乙烯膜、聚醚石风膜、聚砜膜能够高压过滤，优选使用尽量高的洗涤压力。优选为100kPa~600kPa、更优选为100kPa~300kPa。以下<吏用实施例和比较例具体地i兌明本发明。(实施例l)<胶体溶液的制备>将14.7mM的氯金酸(和光制、试剂特级)的水溶液80g装入反应容器内，添加320g蒸馏水、18g的4y。柠檬酸钠水溶液，在76。C下进行30分钟反应。反应结束后，在水浴中冷却15分钟。添加聚氧乙烯P-萘基醚(日本乂b—:T、卩乂'一乂L公司制Solsperse(注册商标)27000)6.7g作为疏水部分具有多环状°结构的非离子型表面活性剂后，添加聚4-苯乙烯磺酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma公司制)的10。/。水溶液8.3g作为具有磺酸基的阴离子型高分子，从而获得紫红色的金胶体溶液。取反应液10g，利用在注射用7K96.4g中添加了1.6gSolsperse(注册商标)27000溶液和2.0gPSSA-Na(分子量70000)10%水;容液的水溶液稀释至10倍，获得红色的稀释金胶体溶液。利用分光光度计测定吸收光谱，在来自于金等离子体吸收的529nm处观察到最大吸收。在贴附有火胶棉膜的篩网上干燥该金胶体溶液，利用透射型电子显微镜进行观察。金颗粒的分散状态良好，平均粒径为22.3nm。<滤器的制备〉使用亨舍尔混合机在70°C下搅拌混合由聚偏氟乙烯树脂(SOLVAY公司制、SOFEF1012、结晶熔点173°C)49wt。/o和邻苯二甲酸二环己酯(大阪有^L化学工业公司制工业品)51wt%构成的组合物，冷却后形成粉末状物质，利用加料斗将其投入，使用双螺杆才齐出才几(东洋4青才几/>司制，求'7°，只卜；、AMODEL50C150)在210。C下熔融混合，均匀地熔解。接着，以8ml/分钟的速度向中空内部流入温度130。C的邻苯二曱酸二丁酯(三建化工7>司制)，同时利用内直径0.8mm、外直径l.lmm的环状喷管(orifice)构成的喷头以挤出速度17m/分钟挤出成中空纤维状，在调温至40。C的水浴中冷却固化，以60m/分钟的速度巻绕成线轴。之后，利用99%曱醇改性乙醇(今津药品工业公司制工业品)抽提除去邻苯二曱酸二环己酯和邻苯二甲酸二丁酯，利用水替换附着的乙醇后，以浸渍于水中的状态使用高压蒸汽灭菌装置(平山制作所公司制HV-85)实施1小时、125。C的热处理。之后，利用乙醇替换附着的水后，在烘箱中以60。C的温度进行干燥，从而获得中空纤维状的微多孔膜。在从抽提至干燥的工序中，为了防止收缩，将膜固定为定长状态来进行处理。接着，对上述微多孔膜，利用接枝法进行亲水化处理。反应液^f吏用以下物质将丙烯酸羟丙酯(东京化成7>司制试剂级)以8体积°/。溶解于3-丁醇(纯正科学公司试剂特级)的25体积％水溶液中，并在保持于40。C的状态下进行20分钟氮鼓泡。首先，在氮气环境下，一边利用干冰将该微多孔膜冷却至-6(TC,一边以Co60作为辐射源照射1OOkGy的y射线。照射后的膜在13.4Pa以下的减压下静置15分钟后，在40°C下4吏上述反应液与该膜接触，静置1小时。之后，利用乙醇洗涤膜，进行4小时、60。C真空干燥，获得微多孔膜。所得膜的平均透水孔径为23.1nm。使用利用上述方法获得的亲水化聚偏氟乙烯(PVDF)多孔性病毒除去用中空纤维膜，制造膜面积为0.0011112的滤器。<完整性4全测>利用上述滤器，对用生理盐水将人免疫球蛋白G溶液稀释(《净、〉只公司制的5。/oh-IgG)至P/。的蛋白质水溶液进行过滤。过滤方法为死端(Dead-end)法，过滤压力为0.294MPa、过滤时间为3小时。过滤后，利用5ml碳酸-碳酸氢盐緩沖液(pH10)过滤洗涤，之后〗吏用3ml注射用水过滤洗涤。用洗涤后的滤器过滤用上述方法制作的稀释金胶体溶液。过滤方法为死端法，在过滤压力0.098MPa下进行。对于过滤前的稀释金胶体溶液和0.5ml~2.5ml的过滤液级分，4吏用分光光度计(岛津制作所7>司制UV-2450)测定529nm处的吸收，计算金颗粒的对凄史除去率(LRV)。还利用相同的方法测定未进行h-IgG过滤和洗涤的空白滤器的吸光度。结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.30、空白滤器的LRV为1.37。使用本胶体溶液的结果为，可确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲氷化处理的合成高分子系病毒除去膜也可进行正确的完整性检测。(实施例2)代替实施例l的Solsperse(注册商标)27000溶液，使用聚乙烯基吡咯烷酮(ISP7>3制PVPK-15、平均分子量10000)作为具有吡咯烷酮基的水溶性高分子分散剂，除此之外利用与实施例l相同的方法进行。另外，金颗粒的分散状态良好，平均粒径为20.8nm。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.76，空白滤器的LRV为1.70。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜能够进行正确的完整性检测。(实施例3)19代替实施例l的亲水化聚偏氟乙烯多孔性病毒除去用中空纤维膜，而使用根据日本专利第3093821号说明书记载的方法的、由平均透水孔径19.3nm的铜铵法再生纤维素多孔性中空纤维膜构成的膜面积为0.0011112的滤器，除此之外利用与实施例1相同的方法进4亍。另外，利用死端法过滤蛋白质水溶液时的过滤压力为0.0784MPa。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.57,空白滤器的LRV为1.49。使用本月交体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的纤维素系病毒除去膜能够进行正确的完整性;险测。(实施例4)代替实施例l的Solsperse(注册商标)27000,使用聚氧乙烯多环苯基醚(日本乳化剂公司制的-二一-—)作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂，除此之外利用与实施例l相同的方法进行。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.77，空白滤器的LRV为1.69。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜能够进行正确的完整性检测。(实施例5)代替实施例l的Solsperse(注册商标)27000,使用聚氧乙烯苯乙烯基苯基醚(松本油脂公司制的《净口一/kSP18)作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂，除此之外利用与实施例l相同的方法进行。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.79,空白滤器的LRV为1.70。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜能够进行正确的完整性检测。(实施例6)代替实施例l的Solsperse(注册商标)27000,使用聚氧乙20烯山梨醇酐单月桂酸酯(《〉夕'化学公司制的Tween(注册商标)20)作为聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯的非离子型表面活性剂，除此之外利用与实施例l相同的方法进行。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.72，空白滤器的LRV为1.69。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜能够进行正确的完整性#:测。(实施例7)将14.7mM的氯金酸(和光制、试剂特级)的水溶液80g装入反应容器内，添加320g蒸馏水、18g的4。/。柠檬酸钠溶液，在76。C下进^f亍30分钟反应。反应结束后，在水浴中冷却15分钟。添加聚氧乙烯p-萘基醚溶液(日本/l一f!i:/—/l公司制Solsperse(注册商标)27000)6.7g作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂后，添加聚4-苯乙烯磺酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma^^司制)的10%7^;容液8.3g作为具有磺酸基的阴离子型高分子，再添加聚乙烯基吡咯烷酮(ISP公司制PVPK-15、平均分子量10000)的30。/o水溶液3.6g作为具有吡咯烷酮基的水溶性高分子分散剂，从而获得紫红色的金胶体溶液。取反应液10g，利用在注射用水95.6g中添加了1.6gSolsperse(注册商标)27000溶液、2.0gPSSA-Na(分子量70000)1。0/()7jc溶液、牙口0.8g的PVP30o/o溶液的7j^;;容液牙希释至10倍，获得红色的稀释金胶体溶液，使用所得溶液，除此之外利用与实施例l相同的方法进行。另外，金颗粒的分散状态良好，平均粒径为22.3nm。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.44、空白滤器的LRV为1.34。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜能够进行正确的完整性检测。(实施例8)代替实施例7的Solsperse(注册商标)27000，使用聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯(*〉夕'化学公司制的Tween(注册商标)20)作为聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯的非离子型表面活性剂，除此之外利用与实施例7相同的方法进行。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.68,空白滤器的LRV为1.65。使用本月交体溶液的结果为，可以确i人对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜能够进行正确的完整性4全测。(实施例9)代替实施例l的碳酸-碳酸氢盐緩冲液(pH10),将作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂的聚氧乙烯(3-萘基醚(日本A—7、'卩/一乂"7^司制Solsperse(注册商标)27000)1%水溶液、和次氯酸钠1%水溶液的混合液作为洗涤剂进4亍4吏用，除此之外利用与实施例l相同的方法进行。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.16,空白滤器的LRV为1.08。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜能够进行正确的完整性4全测。(实施例10)将14.7mM的氯金酸(和光制、试剂特级)的水溶液15g装入反应容器内，添加385g蒸馏水、16g的3Q/o柠檬酸钠水溶液，在沸腾状态下进行60分钟反应。反应结束后，在水浴中冷却15分钟。添加聚氧乙烯卩-萘基醚(日本>—:T、ij乂一》公司制Solsperse(注册商标)27000)6.7g作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂后，添加聚4-苯乙烯磺酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma公司制)的10。/o水溶液8.3g作为具有磺酸基的阴离子型高分子，从而获得紫红色的金胶体溶液。取反应液45g,利用在注射用水96.4g中添加了1.6gSolsperse(注册商标)27000溶液和2.0gPSSA-Na(分子量70000)10。/。水溶液的55ml水溶液进行稀释，获得红色的稀释金胶体〉容液。利用分光光度计测定吸收光谱，在来自于金等离子体吸收的525nm处观察到最大吸收。在贴附有火胶棉膜的筛网上干燥该金胶体溶液，利用透射型电子显^U竟进行观察。金颗粒的分散状态良好、平均粒径为13.3nm。才艮据实施例1记载的方法，制造平均透水孔径为23.1nm的亲水化聚偏氟乙烯(PVDF)多孔性病毒除去用中空纤维膜，制造膜面积为0.0011112的滤器。利用上述滤器对用生理盐水稀释人免疫球蛋白G溶液(<才、》义/>司制的5。/。h-IgG)至1%的蛋白质水溶液进4亍过滤。过滤方法为死端法，过滤压力为0.294MPa、过滤时间为3小时。过滤后，利用5ml碳酸-碳酸氢盐緩冲液(pH10)过滤洗涤，之后使用3ml注射用水过滤洗涤。用洗涤后的滤器过滤用上述方法制作的稀释金胶体溶液。过滤方法为死端法，过滤压力为0.196MPa。对于过滤前的稀释金胶体溶液和6.0ml的过滤液级分，使用分光光度计(岛津制作所公司制UV-2450)测定525nm处的吸收，计算金颗粒的对数除去率(LRV)。还利用相同的方法测定未进4亍h-IgG过滤和洗涤的空白滤器的吸光度。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为0.56,空白滤器的LRV为0.52。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜也可进行正确的完整性检测。(实施例11)将14.7mM的氯金酸(和光制、试剂特级)的水溶液80g装入反应容器内，添加320g蒸馏水、13.1g的4。/。柠檬酸钠水溶液，在77。C下进行30分钟反应。反应结束后，在水浴中冷却15分钟。添加聚氧乙烯(3-萘基醚(日本7L—7、、！i乂一/"公司制Solsperse(注册商标)27000)6.7g作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂后，添加聚4-苯乙烯磺酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma7^司制)的10%水溶液8.3g作为具有石黄酸基的阴离子型高分子，从而获得紫色的金胶体溶液。取反应液10g，用在注射用水96.4g中添力口了1.6gSolsperse(注册商标)27000溶液和2.0gPSSA-Na(分子量70000)10%水溶液的水溶液稀释至10倍，获得紫色的稀释金胶体溶液。利用分光光度计测定吸收光谱，在来自于金等离子体吸收的535nm处观察到最大吸收。在贴附有火胶棉膜的筛网上干燥该金胶体溶液，利用透射型电子显微镜进行观察。金颗粒的分散状态良好，平均粒径为35.0nm。将实施例1中记载的聚偏氟乙烯树脂的浓度改变为38%，除此之外利用与实施例l相同的方法制造亲水化聚偏氟乙烯(PVDF)多孔性病毒除去用中空纤维膜。平均透水孔径为37.0nm。使用上述方法所获得的膜，利用与实施例l相同的方法进行过滤。另外，利用死端法过滤蛋白质水溶液时的过滤压力为0.294MPa。另夕卜，金月交体过滤方法为死端法，过滤压力为0.078MPa。对于过滤前的稀释金胶体溶液和0.5ml~2.5ml的过滤液级分，使用分光光度计(岛津制作所公司制UV-2450)测定535nm处的吸收，计算金颗粒的对数除去率(LRV)。还利用相同的方法测定未进行h-IgG过滤和洗涤的空白滤器的吸光度。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为2.05，空白滤器的LRV为2.00。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系病毒除去膜也可进行正确的完整性4全测。(实施例12)将14.7mM的氯金酸(和光制、试剂特级)的水溶液80g装入反应容器内，添加320g蒸馏水、6.4g的4。/U宁檬酸钠水溶液，在84。C下进行30分钟反应。反应结束后，在水浴中冷却15分4中。添加聚氧乙烯(3-萘基醚(日本^一:T、！i乂、、一/k公司制Solsperse(注册商标)27000)6.7g作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂后，添加聚4-苯乙烯磺酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma公司制)的10。/。水溶液8.3g作为具有磺酸基的阴离子型高分子，从而获得紫色的金胶体溶液。取反应液10g，利用在注射用7JC96.4g中添力口了1.6gSolsperse(注册商标)27000溶液和2.0gPSSA-Na(分子量70000)10%水溶液的水溶液稀释至10倍，获得紫色的稀释金胶体溶液。利用分光光度计测定吸收光谱，在来自于金等离子体吸收的541nm处观察到最大吸收。在贴附有火胶棉膜的筛网上干燥该金胶体溶液，利用透射型电子显微镜进行观察。金颗粒的分散状态良好，平均粒径为44.9nm。将实施例1中记载的聚偏氟乙烯树脂的浓度改变为30%,除此之外，利用与实施例l相同的方法制造亲水化聚偏氟乙烯(PVDF)多孔性病毒除去用中空纤维膜。平均透水孔径为47.0nm。使用上述方法所获得的膜，利用与实施例l相同的方法进行过滤。另外，利用死端法过滤蛋白质水溶液时的过滤压力为0.294MPa。另夕卜，金月交体过滤方法为死端法，过滤压力为0.078MPa。对于过滤前的稀释金胶体溶液和0.5ml~2.5ml的过滤液级分，使用分光光度计(岛津制作所公司制UV-2450)测定540nm的吸收，计算金颗粒的对数除去率(LRV)。还利用相同的方法测定未进行h-IgG过滤和洗涤的空白滤器的吸光度。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为2.00、空白滤器的LRV为2.10。使用本胶体溶液的结果为，可以确认对于过滤了蛋白质溶液后的经亲水化处理的合成高分子系膜也可进行正确的完整性检测。(比较例1)将14.7mM的氯金酸(和光制、试剂特级)的水溶液80g装入反应容器内，添加320g蒸馏水、18g的4。/U宁一蒙酸钠溶液，在76。C下进行30分钟反应。反应结束后，在水浴中冷却15分钟。添加聚氧乙烯(3-萘基醚(日本^一7"y乂、、一/"7>司制Solsperse(注册商标)27000)溶液6.7g作为疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂后，从而获得紫红色的金胶体溶液。取反应-液10g，利用在5主射用？K98.4g中添力口了1.6gSolsperse(;主册商标)27000溶液的水溶液稀释至10倍，获得红色的稀释金胶体溶液，使用所得溶液，除此之外利用与实施例l相同的方法进行。另外，金颗粒的分散状态良好，平均粒径为22.3nm。其结果为，滤器的LRV值为3.0以上、4全测限以下，胶体吸附在膜上，无法正确地测定。(比较例2)除了使用未添加实施例2的具有磺酸基的阴离子型高分子的聚4-苯乙烯磺酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma公司制)的稀释金胶体溶液之外，利用与实施例2相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。另外，金颗粒的分散状态良好，平均粒径为22.3nm。其结果为，滤器的LRV值为3.0以上、检测限以下，胶体吸附在膜上，无法正确；也测定。(比專交例3)除了使用未添加实施例4的具有磺酸基的阴离子型高分子的聚4-苯乙烯石黄酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma公司制)的稀释金胶体溶液之外，利用与实施例4相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。另26外，金颗粒的分散状态良好，平均粒径为20.8nm。其结果为，滤器的LRV值为3.0以上、检测限以下，胶体吸附在膜上，无法正确J4测定。(比较例4)除了使用未添加实施例6的具有磺酸基的阴离子型高分子的聚4-苯乙烯石黄酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma公司制)的稀释金胶体溶液之外，利用与实施例6相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。另外，金颗粒的分散状态良好，平均粒径为22.3nm。其结果为，滤器的LRV值为3.0以上、检测限以下，胶体吸附在膜上，无法正确地测定。(比较例5)除了使用未添加实施例7的具有磺酸基的阴离子型高分子的聚4-苯乙烯石黄酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma公司制)的稀释金胶体溶液之外，利用与实施例7相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。另外，金颗粒的分散状态良好、平均粒径为22.3nm。其结果为，滤器的LRV值为3.0以上、检测限以下，胶体吸附在膜上，无法正确t也测定。(比较例6)代替实施例2的具有磺酸基的阴离子型高分子的聚4-苯乙烯石黄酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma^^司制)而添加了0.27%月桂基硫酸钠(大力，4fX夕公司制)，除了使用这样获得的红色稀释金胶体溶液之外，利用与实施例2相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。另外，金颗粒的分散状态良好，平均粒径为20.8nm。其结果为，滤器的LRV值为3.0以上、检测限以下，胶体吸附在膜上，无法正确地测定。(比较例7)代替实施例1的具有磺酸基的阴离子型高分子的聚4-苯乙丈希石黄酉臾#)(PSSA-Na、分子量70000、Sigma^^司制)而添力口了聚丙烯酸钠(日本纯药公司制PAA-Na、分子量=5000~6000)外，利用与实施例l相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为2.25,空白滤器的LRV为1.82,通过蛋白质过滤洗涤操作LRV提高，无法进行正确的完整'性检测。(比较例8)代替实施例2的具有磺酸基的阴离子型高分子的聚4-苯乙烯磺酸钠(PSSA誦Na、分子量70000、Sigma公司制)而添力口了聚丙歸酸钠(日本纯药公司制PAA-Na、分子量=5000~6000)利用与实施例l相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为2.21,空白滤器的LRV为1.95,通过蛋白质过滤洗涤操作LRV提高，无法进行正确的完整性检测。(比较例9)代替实施例3的具有磺酸基的阴离子型高分子的聚4-苯乙烯石黄酸钠(PSSA-Na、分子量70000、Sigma^^司制)而添加了聚丙烯酸钠(日本纯药乂>司制PAA-Na、分子量=5000~6000)利用与实施例3相同的方法进行铜铵法再生纤维素多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为1.91，空白滤器的LRV为1.60,28通过蛋白质过滤洗涤操作LRV提高，无法进4亍正确的完整性枱，测。(比4交例10)代替实施例l的疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂的聚氧乙烯p-萘基醚(日本乂k—y乂、、一/b公司制Solsperse(注册商标)27000)而添加了聚氧乙烯(C9)烷基苯基醚(*〉本油脂7>司制的乂-水一》(注册商标)120)，除了使用这样获得的红色稀释金胶体溶液之外，利用与实施例1相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为2.16,空白滤器的LRV为1.92,通过蛋白质过滤洗涤操作LRV提高，无法进行正确的完整性才全测。-(比4交例11)代替实施例1的疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂的聚氧乙烯(3-萘基醚(日本/b—y'J乂、、一^公司制Solsperse(注册商标)27000)而添力口了聚氧乙烯油基醚(WAKO利用与实施例l相同的方法进行PVDF多孔性中空纤维膜的过滤，计算金胶体对数除去率(LRV)。其结果为，蛋白质负荷洗涤后的滤器的LRV为2.08,空白滤器的LRV为1.82,通过蛋白质过滤洗涤操作LRV提高，无法进行正确的完整性检测。(比较例12)将14.7mM的氯金酸(和光制、试剂特级)的水溶液15g装入反应容器内，添力口385g蒸馏水、20g的3o/4宁才蒙酸钠水溶液，在沸腾状态下进行60分钟反应。反应结束后，在水浴中冷却15分钟，除此之外利用与实施例l相同的方法进^f亍。即《更添力卩20g以上3%柠檬酸钠水溶液，也无法制造平均粒径小于5nm的金胶体溶液。(比较例13)将14.7mM的氯金酸(和光制、试剂特级)的水溶液80g装入反应容器内，添加320g蒸馏水、3.0g的4o/o柠檬酸钠水溶液，在90。C下进行30分钟反应。反应结束后，在水浴中冷却15分钟，除此之外利用与实施例1相同的方法进行。所得金胶体溶液的平均粒径为55nm以上，但为茶褐色，会马上凝集、沉淀，无法制造均匀粒径的金胶体溶液。将以上实施例和比较例的结果综合于表1。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>产业上的可利用性本发明的使用了含金属颗粒的胶体溶液的完整性检测方法优选作为以病毒除去膜使用后的微多孔膜的实用的完整性检测。权利要求1.一种微多孔膜的完整性检测方法，其特征在于，其包括利用微多孔膜过滤胶体溶液的工序，所述胶体溶液含有分散于包含以下的(A)成分和(B)成分、包含以下的(A)成分和(C)成分或者包含以下的(A)成分、(B)成分和(C)成分的溶剂中的金属颗粒，(A)具有磺酸基的阴离子型高分子；(B)选自疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂和聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯类的非离子型表面活性剂所组成的组中的至少1种非离子型表面活性剂；(C)具有吡咯烷酮基的水溶性高分子。2.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，所述微多孔膜为合成高分子系或纤维素系的病毒除去膜。3.根据权利要求2所述的完整性检测方法，其特征在于，所述合成高分子系的病毒除去膜为经亲水化处理的热塑性高分子膜。4.根据权利要求3所述的完整性检测方法，其特征在于，所述热塑性高分子选自聚偏氟乙烯、聚醚砜和聚砜所组成的组。5.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，所述金属颗粒的金属选自金、银、铂、铑、把、钌、铱、锇、4失和铜所纟且成的组。6.根据权利要求5所述的完整性检测方法，其特征在于，所述金属颗粒的平均粒径为10nm~50nm。7.根据权利要求6所述的完整性检测方法，其特征在于，所述金属颗粒的平均粒径的变动率为27%以下。8.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，所述具有磺酸基的阴离子型高分子为聚苯乙烯磺酸盐。9.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，所述疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂为选自聚氧乙烯多环苯基醚、聚氧乙烯(3-萘基醚和聚氧乙烯苯乙烯基苯基醚所组成的组中的l种以上。10.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，所述聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯类为聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯和/或聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯。11.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，所述具有吡咯烷酮基的水溶性高分子为聚乙烯基吡咯烷酮或聚乙烯基吡咯烷酮/苯乙烯共聚物。12.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，所述病毒除去膜为在过滤蛋白质溶液后使用碱性缓冲液进行了洗涤的膜。13.根据权利要求12所述的完整性检测方法，其特征在于，所述碱性緩冲液选自碳酸盐、碳酸氢盐、硼酸盐和磷酸盐所组成的组。14.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，所述病毒除去膜为在过滤蛋白质溶液后使用含有疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂和次氯酸钠的混合液进行了洗涤的膜。15.根据权利要求l所述的完整性检测方法，其特征在于，金属胶体溶液为如下获得的溶液在将金属化合物溶解于溶剂中并使金属颗粒析出的溶液中，添加(B)成分和/或(C)成分而溶解后，进一步添加(A)成分进行溶解。全文摘要本发明提供了一种膜的完整性检测方法，该方法使用了含有金属颗粒或金属化合物颗粒的胶体溶液，能够对于由经亲水化的合成高分子所构成的病毒除去膜在过滤蛋白质溶液后正确检测完整性，另外提供了该胶体溶液的制造方法。微多孔膜的完整性检测方法的特征在于，其包括利用微多孔膜过滤胶体溶液的工序，所述胶体溶液含有分散于包含以下的(A)成分和(B)成分、包含以下的(A)成分和(C)成分或者包含以下的(A)成分、(B)成分和(C)成分的溶剂中的金属颗粒，(A)具有磺酸基的阴离子型高分子；(B)选自疏水部分具有多环状结构的非离子型表面活性剂和聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯类的非离子型表面活性剂所组成的组中的至少1种非离子型表面活性剂；(C)具有吡咯烷酮基的水溶性高分子。文档编号B22F9/00GK101626857SQ20088000737公开日2010年1月13日申请日期2008年3月7日优先权日2007年3月8日发明者井出正一,浜崎直子申请人:旭化成医疗株式会社