专利名称：蛋白质层析的氮气封闭装置的制作方法
技术领域：
本发明属于生物化学领域。应用于蛋白质层析系统，特别适用于氧化还原性活跃的蛋白质的层析。
本发明的氧化还原性活跃的蛋白质的层析方法是在层析过程中使容易被氧化的还原性蛋白质处于密闭系统中，并且处于氮气保护条件下，从而有效地防止了系统中的氧气对氧化还原性活跃的蛋白质的氧化作用。
本发明层析辅助系统的设计如
图1所示。
本发明层析辅助系统中使用的特殊设计的A种阀门如图2所示。本发明层析辅助系统中使用的特殊设计的B种阀门如图3所示。
图2是A种阀门结构图。A种阀门由球阀(编号1)，壳体(编号2)，手柄(编号3)及四个接口(编号4、5、6、7)构成。A种阀门通过四个接口与四个导管相连。球阀内有两条通道(编号8、9)。通过旋转手柄可使球阀处于三个不同状态。在状态1下，接口4、5相连的导管接通，接口6、7相连的导管接通；在状态2下，接口4、6相连的导管接通，接口5、7相连的导管接通；在状态3下，接口4、7相连的导管接通，接口5、6相连的导管接通。
图3是B种阀门结构图。B种阀门由球阀(编号1)，壳体(编号2)，手柄(编号3)及四个接口(编号4、5、6、7)构成。B种阀门通过四个接口与四个导管相连。球阀内有一条通道(编号8)。通过旋转手柄可使球阀处于三个不同状态。在状态1下，接口4、5相连的导管接通；在状态2下，接口4、6相连的导管接通；在状态3下，接口4、7相连的导管接通；在状态4下，接口4相连的导管关闭。
然后打开缓冲液泵开始运行。
在循环1时，使阀门6、7都处于状态1。缓冲液会在缓冲液泵的作用下被逐渐加入层析柱。同时分配罐2中的氮气会逐渐被负压吸入到分配罐1中，分配罐3中的水会逐渐被吸入到分配罐2中。待分配罐3中无水后，使阀门8处于状态1，缓冲液会从缓冲液贮存罐中加入到分配罐3中。加满后使阀门8恢复状态4。系统进入循环2。
在循环2时，使阀门6、7都处于状态2。缓冲液会在缓冲液泵的作用下被逐渐加入层析柱。同时分配罐1中的氮气会逐渐被负压吸入到分配罐3中，分配罐2中的水会逐渐被吸入到分配罐1中。待分配罐2中无水后，使阀门8处于状态2，缓冲液会从缓冲液贮存罐中加入到分配罐2中。加满后使阀门8恢复状态4。系统进入循环3。
在循环3时，使阀门6、7都处于状态3。缓冲液会在缓冲液泵的作用下被逐渐加入层析柱。同时分配罐3中的氮气会逐渐被负压吸入到分配罐2中，分配罐1中的水会逐渐被吸入到分配罐3中。待分配罐1中无水后，使阀门8处于状态3，缓冲液会从缓冲液贮存罐中加入到分配罐1中。加满后使阀门8恢复状态4。系统又进入循环1。
在系统初始化后可通过调节阀门状态使系统连续运行。实际操作时，步骤简单只须依次使阀门6、7处于状态1、2、3并循环；每次加缓冲液时，阀门8先处于对应状态1、2或3，然后处于状态4即可。若欲将此辅助系统集成于蛋白质纯化仪器设备或应用于工业生产，可以把阀门6、7、8的状态切换过程自动化。
由于在层析过程中，缓冲液处于密闭系统中且被氮气保护，可以有效防止氧化还原性活跃的蛋白质被氧化。另外，辅助系统采用缓冲液泵吸取缓冲液，氮气、缓冲液、水三者的循环没有压力。此种设计使系统固有安全性高。如果层析系统发生堵塞，辅助系统可以自动停止运行，不会出现事故。
权利要求
1 本发明涉及一种氧化还原性活跃的蛋白质的层析方法，实现此方法的辅助系统设计和辅助系统中使用的两种特殊设计的阀门。
2 根据权利要求1所述，本发明的氧化还原性活跃的蛋白质的层析方法是在层析过程中使容易被氧化的蛋白质处于密闭系统中，并且处于氮气保护条件下，从而有效地防止了系统中的氧气对氧化还原性活跃的蛋白质的氧化作用。
3 根据权利要求1所述，本发明的氧化还原性活跃的蛋白质层析辅助系统由三个分配罐，一个缓冲液贮存罐，一个缓冲液泵，两个特殊设计的A种阀门，一个特殊设计的B种阀门及相应的导管组成。
4 根据权利要求1和权利要求3所述，本发明的氧化还原性活跃的蛋白质层析辅助系统中使用的特殊设计的A种阀门由球阀，壳体，手柄及四个接口构成。A种阀门通过四个接口与四个导管相连。球阀内有两条通道。通过旋转手柄可使球阀处于三个不同状态，使四个导管分别两两分别接通。
5 根据权利要求1和权利要求3所述，本发明的氧化还原性活跃的蛋白质层析辅助系统中使用的特殊设计的B种阀门由球阀，壳体，手柄及四个接口构成。B种阀门通过四个接口与四个导管相连。球阀内有一条通道，通过旋转手柄可使球阀处于二个不同状态。通过旋转手柄可使球阀处于三个不同状态，使一个导管分别与其它三个导管接通。
全文摘要
本发明属于生物化学领域。应用于蛋白质层析系统，特别适用于氧化还原性活跃的蛋白质的层析。层析技术在生物化学研究及生物制药业有着广泛的应用。然而，氧化还原性活跃的蛋白质层析难度较高，容易在层析过程中被氧化后丢失，给目标蛋白的纯化带来极大困难。本发明设计了一种利用氮气保护、在密闭系统中层析的方法及实施此方法的辅动系统，以有效地解决这个技术问题。辅助系统具有操作简单，系统固有安全性高，易于自动化等特点，此方法已成功应用于低等动物的金属硫蛋白的层析分离及纯化。
文档编号C07K1/00GK1418891SQ0215660
公开日2003年5月21日 申请日期2002年12月17日 优先权日2002年12月17日
发明者任宏伟, 韩铁钢 申请人:任宏伟, 韩铁钢