取代的4－氨基－1－(吡啶甲基)哌啶和相关化合物的制作方法

专利名称：取代的4－氨基－1－(吡啶甲基)哌啶和相关化合物的制作方法
背景技术：
发明领域本发明涉及取代的4-氨基-1-(吡啶甲基)-哌啶和相关化合物，其用作毒蕈碱性受体拮抗剂。本发明还涉及含有这类化合物的药物组合物；使用这类化合物治疗通过毒蕈碱性受体介导的医学状况的方法；和制备这类化合物的方法和中间体。
技术现状毒蕈碱性受体族包括五种已知的受体亚型，即，M1、M2、M3、M4和M5受体，各种受体亚型具有不同的分布和功能。例如，平滑肌组织通常表达M2和M3两种受体亚型，并且这些受体起介导这些组织收缩的作用。
因此，已知起毒蕈碱性受体拮抗剂作用的化合物适用于治疗各种与非正常平滑肌功能有关的各种医学状况，诸如活动过度的膀胱(OAB)、过敏性肠综合征(IBS)和慢性阻塞性肺病(COPD)。这些平滑肌功能紊乱在人群中是非常普遍的，导致了巨大的经济代价。例如，仅仅美国，估计有3千万人(主要是妇女和老年人)遭受活动过度的膀胱的困扰，每年花费约一百亿美元治疗这种状况。更重要的是，受这些紊乱影响的患者的生活质量和自尊常常显著地受到损害。
直到最近，起毒蕈碱性受体拮抗剂作用的大多数化合物对于各种毒蕈碱性受体亚型相对地是非选择性的。因此，这类化合物常常产生使人不愉快的副作用，例如口干、便秘、视力模糊或认知副作用。这些副作用中最常见的是口干，这是由于抑制了唾液腺中的M3受体导致的。这种口干副作用常常是非常严重的，以至于约80-85％因活动过度的膀胱而被治疗的患者在6个月内中止了他们的药物治疗，从而，他们的状况不再进行治疗。
因此，存在新的毒蕈碱性受体拮抗剂的需要。特别是，存在相对于M3受体选择性地抑制M2受体新的毒蕈碱性受体拮抗剂。预计这类化合物对于治疗由M2和M3受体亚型介导的平滑肌紊乱，诸如活动过度的膀胱特别有效，同时降低或消除了主要由M3受体亚型介导的口干、便秘和视力模糊副作用。
发明概述本发明提供新的取代的4-氨基-1-(吡啶甲基)哌啶和相关化合物，其用作毒蕈碱性受体拮抗剂。除了其它特性之外，发现本发明的化合物是M2受体活性的强抑制剂。另外，发现本发明的化合物具有相对于M3受体亚型令人惊奇的和意料之外的对M2受体亚型的选择性。
因此，在其组合物方面的一个方面，本发明提供了一种式I化合物 其中W、X、Y和Z独立地选自CH、CR4、N和N→O；条件是W、X、Y和Z中的至少一个且不超过两个是N或N→O；R1是式(a)基团-(CH2)a-(O)b-(CH2)c-(a)其中在式(a)中的各个-CH2-基团和式I中在哌啶氮原子和含W、X、Y和Z的环之间的-CH2-基任选被1或2个独立选自C1-2烷基和氟的取代基取代；其中各个烷基任选被1至3个氟取代基取代；R2选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、-CH2-R5和-(CH2)x-R6；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；
各R3独立地选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、-CH2-R7和-(CH2)y-R8；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各R4独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、-OR3和卤素；或两个相邻的R4基相连形成C3-6亚烷基、-O-(C2-4亚烷基)-、-O-(C1-4亚烷基)-O-、-(O)C-CH＝CH-或-CH＝CH-C(O)-；或当Z是CR4时，-OR3和R4相连形成-O-(C2-5亚烷基)-或-O-(C1-5亚烷基)-O-；其中各烷基、亚烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各R5和R7独立地选自C3-5环烷基、C6-10芳基、-C(O)(C6-10芳基)、C2-9杂芳基、-C(O)(C2-9杂芳基)和C3-6杂环基；其中环烷基任选被1至5个氟取代基取代；并且芳基、杂芳基和杂环基任选被1至3个取代基取代，所述取代基独立地选自Rk以及芳基和杂芳基任选进-步被苯基取代，其中苯基任选被独立选自Rk的1至3个取代基取代；各R6和R8独立地选自-OH、-OR9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-C(O)R9、C3-5环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C3-6杂环基；其中环烷基任选被1至5个氟取代基取代；和芳基、杂芳基和杂环基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各R9独立地选自C1-4烷基、C3-5环烷基、C6-10芳基和C2-9杂芳基；其中烷基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；芳基和杂芳基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各Ra和Rb独立地选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-6环烷基、氰基、卤、-ORf、-SRf、-S(O)Rf、-S(O)2Rf和-NRgRh；或两个相邻的Ra基或两个相邻的Rb基相连形成C3-6亚烷基、-(C2-4亚烷基)-O-或-O-(C1-4亚烷基)-O-；其中各烷基、亚烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各Rc和Rd独立地选自C1-4烷基和氟；其中各烷基任选被1至5个氟取代基取代；各Re独立地选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C3-6杂环基、-CH2-Ri和-CH2CH2-Rj；或两个Re与它们所连接的N原子一起形成C3-6杂环基；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；和各芳基、杂芳基和杂环基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各Rf独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基和C3-6环烷基；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各Rg和Rh独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基和C3-6环烷基；或Rg和Rh与它们所连接的N原子一起形成C3-6杂环基；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代，杂环基任选被1至3个独立选自C1-4烷基和氟的取代基取代；各Ri独立地选自C3-6环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C3-6杂环基；其中芳基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各Rj独立地选自C3-6环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C3-6杂环基、-OH、-O(C1-6烷基)、-O(C3-6环烷基)、-O(C6-10芳基)、-O(C2-9杂芳基)、-S(C1-6烷基)、-S(O)(C1-6烷基)、-S(O)2(C1-6烷基)、-S(C3-6环烷基)、-S(O)(C3-6环烷基)、-S(O)2(C3-6环烷基)、-S(C6-10芳基)、-S(O)(C6-10芳基)、-S(O)2(C6-10芳基)、-S(C2-9杂芳基)、-S(O)(C2-9杂芳基)和-S(O)2(C2-9杂芳基)；其中各烷基任选被1至5个氟取代基取代；和各芳基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各Rk独立地选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、氰基、卤、-ORf、-SRf、-S(O)Rf、-S(O)2Rf和-NRgRh；或两个相邻的Rk基相连形成C3-6亚烷基、-(C2-4亚烷基)-O-或-O-(C1-4亚烷基)-O-；其中各烷基、亚烷基、烯基和炔基任选被1至5个氟取代基取代；a是2至7的整数；b是0或1；c是2至7的整数；条件是a+b+c等于7、8或9；m是0至3的整数；n是0至3的整数；p是1或2；q是0至4的整数；r是0至4的整数；
x是2至4的整数；y是2至4的整数；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
在其组合物方面的另一方面，本发明涉及式II化合物 其中R1、R2、R3、W、X、Y和Z定义如上；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
在其组合物方面的还另一方面，本发明涉及式III化合物 其中R1、R2和R3定义如上；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
本发明还涉及制备式I化合物的中间体或其盐。因此，在其组合物方面的另一方面，本发明提供了式IV化合物
其中Ra、Rb、Rc、Re、a、b、c、m、n、p和q定义如上，或其盐或立体异构体或保护的衍生物；或式V化合物 其中Ra、Rb、Rc、Re、a、b、c、m、n、p和q定义如上，G选自-CHO(式Va)；-CH(ORm)，其中Rm是C1-6烷基，或两个Rm基相连形成C2-6亚烷基(式Vb)；-COOH(式Vc)；-CH＝CH2(式Vd)；-CH2-L，其中L是离去基团(式Ve)；或其盐或立体异构体或保护的衍生物；或式VI化合物
其中Ra、Rb、Rc、Re、m、n、p和q定义如上；d是2至5的整数；b是0或1；e是1至4的整数，条件是d+b+e+3等于7、8或9；或其盐或立体异构体或保护的衍生物；或式VII化合物 其中R2、Ra、Rb、Rc、Rd、Re、a、b、c、m、n、p、q和r定义如上，或其盐或立体异构体或保护的衍生物；所述化合物用作制备式I化合物的中间体。
在其组合物方面的还另一方面，本发明提供了式VIII化合物
其中R2、R3、Rd、r、W、X、Y和Z定义如上；或其盐或立体异构体或保护的衍生物；所述化合物用作制备式I化合物的中间体。
在其组合物方面的另一方面，本发明提供了一种药物组合物，其含有药学上可接受的载体和治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
本发明的化合物是毒蕈碱性受体拮抗剂。因此，在方法方面的一方面，本发明提供了一种治疗具有医学状况的哺乳动物方法，所述状况通过用毒蕈碱性受体拮抗剂治疗而减轻，该方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的药物组合物，该组合物包括药学上可接受的载体和式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
本发明的化合物还可用作研究工具，即，研究生物系统或样品，或用于发现新的毒蕈碱性受体拮抗剂。因此，在其方法方面的另一方面，本发明涉及一种拮抗生物系统或样品中毒蕈碱性受体的方法，该方法包括将含有毒蕈碱性受体的生物系统或样品与毒蕈碱性受体拮抗量的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体接触。
本发明还涉及制备式I化合物或其盐的方法。因此，在其方法方面的另一方面，本发明提供一种制备式I化合物或其盐或立体异构体或保护的衍生物的方法；该方法包括使式Va化合物或其盐或立体异构体或保护的衍生物与式VIII化合物或其盐或保护的衍生物和还原剂反应，得到式I化合物或其盐或保护的衍生物。
在优选实施方案中，上述方法进一步包括形成式I化合物的药学上可接受的盐的步骤。本发明还涉及在此所述的其它方法；以及涉及通过在此所述的任何方法制备的产品。
本发明还涉及用于治疗或作为药剂的式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
另外，本发明涉及用式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体用于生产药剂；特别是用于生产用于治疗被用毒蕈碱性受体拮抗剂治疗减轻的医学状况(例如活动过度的膀胱)的药剂的用途。
发明详述本发明提供了新的式I取代的4-氨基-1-(吡啶甲基)-哌啶和相关化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。这些化合物可以包括一个或多个手性中心，并且当所述的一个或多个手性中心存在时，本发明涉及外消旋混合物；纯立体异构体(即，单独的对映异构体或非对映体)；和这类异构体的立体异构体富集的混合物，除非另有说明。当指出特定的立体异构体时，本领域技术人员将理解为在本发明的组合物中可能存在少量其它立体异构体，除非另有说明，条件是该组合物作为整体的功用不被这样的其它异构体的存在而消除。
本发明的化合物还包括若干碱性基团(例如，氨基)，因此式I化合物可以各种盐的形式存在。所有这类盐形式都被包括在本发明的范围内。还包括在本发明范围内的是式I化合物或其盐的药学上可接受的溶剂化物。
另外，式I化合物的所有顺式-反式或E/Z异构体(几何异构体)以及互变异构形式都被包括在本发明的范围内。例如，当R3是氢和X是N时，那么这类化合物可以吡啶-4-酮形式存在。
描述本发明化合物所用的命名通过下述代表性的实例予以说明。名称4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶表示下式化合物
该化合物还可以用AutoNom(MDL，San Leandro California)命名如下2-[(S)-1-(7-{乙基-[1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶-4-基]氨基}庚基)吡咯烷-3-基}-2，2-二苯基乙酰胺。
代表性的实施方案以下取代基和数值用以提供本发明各方面的代表性实例和实施方案。这些代表性值用来进一步定义这些方面和实施方案而不是用以排除其它实施方案或限制本发明的范围。在这点上，优选特殊值或取代基的说明不意味着以任何方式从本发明中排除其它数值或取代基，除非具体指明。
在本发明的化合物中，R1是式-(CH2)a-(O)b-(CH2)c-基团，其中a、b和c如在此的定义。在一个优选实施方案中，R1是-(CH2)a+c-，即，其中b是0，a和c如在此的定义。在另一个优选实施方案中，R5是-(CH2)a-(O)-(CH2)c-，即，其中b是1，a和c如在此的定义。
优选的R1基包括-(CH2)7-，-(CH2)8-，-(CH2)9-，-(CH2)2-O-(CH2)4-，-(CH2)2-O-(CH2)5-，-(CH2)2-O-(CH2)6，-(CH2)3-O-(CH2)3-，-(CH2)3-O-(CH2)4-，-(CH2)3-O-(CH2)5-，-(CH2)4-O(CH2)2-，-(CH2)4-O-(CH2)3-，-(CH2)4-O-(CH2)4-，-(CH2)5-O-(CH2)2-，-(CH2)5-O-(CH2)3-和-(CH2)6-O-(CH2)2-.
特别优选的R1基包括-(CH2)7-、-(CH2)8-、-(CH2)9-、-(CH2)3-O-(CH2)3-和-(CH2)4-O-(CH2)4-。特别优选的R1基是-(CH2)7-。
在R1中，各-CH2-基任选被1或2个取代基取代，所述的取代基选自甲基、乙基和氟，其中甲基和乙基任选被1至3个氟取代基取代。代表性的取代基包括氟、甲基、氟代甲基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基等。
在一个优选的实施方案中，R2是C1-4烷基；更优选R2是C2-3烷基；其中所述烷基任选被1至3个氟代取代基取代。在该实施方案中特别优选的R2基团是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基和异丁基。特别优选的R2基是乙基、正丙基和异丙基。
在另一个优选实施方案中，R2是-CH2-R5，其中R5如在此的定义。在该实施方案中，R2(即，-CH2-R5)优选选自下述基团(a)-CH2-(C3-5环烷基)；更优选-CH2-(C3环烷基)；其中环烷基任选被1至3个氟代取代基取代；(b)-CH2-(苯基)，即，苄基，其中苯基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)和-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟代取代基取代；(c)-CH2-(萘基)；其中萘基(即，1-萘基或2-萘基)任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)和-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟代取代基取代；(d)-CH2-(联苯基)，其中联苯基(即，1，2-、1，3-或1，4-联苯基)的各个苯基环任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)和-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟代取代基取代；(e)-CH2-(吡啶基)；其中吡啶基(即，2-、3-或4-吡啶基)任选被1-3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)和-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟代取代基取代；和(f)-CH2C(O)-(苯基)，即，苯甲酰甲基，其中苯甲酰甲基的苯基环任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)和-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟取代基取代。
在该实施方案中，特别优选的R2基团包括环丙基甲基、环丁基甲基和环戊基甲基；以及苄基、4-氰苄基、4-甲苄基、4-三氟甲氧基苄基、4-二氟甲氧基苄基、4-硫甲氧基苄基(thiomethoxybenzyl)、4-甲磺酰基苄基、4-叔丁基苄基、4-苯基苄基、吡啶基-2-基甲基、吡啶-3-基甲基、萘-2-基甲基、3-氰基苯甲酰甲基和3，4-亚乙基二氧基苯甲酰甲基。
在另一优选实施方案中，R2是-(CH2)x-R6，其中x是2、3或4；优选2或3。在该实施方案中，R2(即，-(CH2)x-R6)优选选自下述基团(a)-(CH2)x-OH；(b)-(CH2)x-O(C1-4烷基)；更优选-(CH2)x-O(C1-3烷基)；并且还更优选-(CH2)x-O(C1-2烷基)；其中烷基任选被1至3个氟代取代基取代；(c)-(CH2)x-S(C1-4烷基)、-(CH2)x-S(O)(C1-4烷基)，或-(CH2)x-S(O)2(C1-4烷基)；更优选-(CH2)x-S(C1-4烷基)、-(CH2)x-S(O)(C1-3烷基)，或-(CH2)x-S(O)2(C1-3烷基)；以及更优选-(CH2)x-S(C1-2烷基)、-(CH2)x-S(O)(C1-2烷基)，或-(CH2)x-S(O)2(C1-2烷基)；其中烷基任选被1至3个氟代取代基取代；(d)-(CH2)x(苯基)，例如，苯乙基，其中苯基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)和-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟代取代基取代；(e)-(CH2)x-(O-苯基)，其中苯基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)以及-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟代取代基取代；(f)-(CH2)x-(萘基)，其中萘基(即，1-或2-萘基)任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)以及-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟代取代基取代；和(g)-(CH2)x-(吲哚基)，其中吲哚基(即，2-或3-吲哚基)任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；优选1或2个取代基(优选1个取代基)取代，所述取代基选自C1-4烷基、氰基、氟、氯、-O(C1-4烷基)、-S(C1-4烷基)以及-S(O)2(C1-4烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟代取代基取代。
对该实施方案，优选的R2基包括2-羟乙基、2-甲氧基乙基、2-(甲硫基)乙基、2-乙氧基乙基、2-(乙硫基)乙基、2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基、2-苯乙基、2-(萘-1-基)乙基、2-(吲哚-3-基)乙基、3-羟丙基、3-甲氧基丙基、3-乙氧基丙基、3-苯丙基以及3-苯氧基丙基。
在优选的实施方案中，R2是C1-4烷基、-CH2-(C3-5烷基)、-CH2-(C3-5环烷基)、-CH2CH2-OH或-CH2CH2-O(C1-4烷基)。
更优选R2是乙基、正丙基、异丙基、环丙基甲基或2-羟乙基。
优选各R3独立地选自氢、C1-4烷基、环丙基甲基以及2-羟乙基；其中各个烷基任选被1至5个氟代取代基取代。更优选各R3是氢或C1-4烷基；其中各烷基任选被1至4个氟代取代基取代。更优选各R3独立地是C1-3烷基，其任选被1至4个氟代取代基取代。还更优选各R3是甲基。
特别优选的R3基包括氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、1，3-二氟丙-2-基、1，1，3-三氟丙-2-基以及1，1，3，3-四氟丙-2-基。
优选R4选自C1-4烷基、-OR3以及卤代；其中R3如在此的定义，包括其优选实施方案并且其中烷基任选被1至5个氟代取代基取代。更优选R4是C1-3烷基、-OR3、氟以及氯；其中烷基任选被1至3个氟取代基取代。还更优选R4是C1-2烷基、-OR3、氟或氯。同样更优选R4是甲基、-OR3、氟或氯。在优选的实施方案中R4是-OR3。
在本发明的化合物中，W、X、Y和Z中的一个或两个是N或N→O。在一个优选实施方案中，W、X、Y和Z中的一个并且只有一个是N或N→O，即，含有W、X、Y和Z的环是吡啶或吡啶N-氧化物环。在本发明这一方面的分开的实施方案中，W、X、Y和Z定义如下(a)W是N；X是CH；Y是CH；和Z是CH；(b)W是CH或CR4；X是N；Y是CH和Z是CH；(c)W是CH或CR4；X是CH；Y是N；和Z是CH；(d)W是CH或CR4；X是CH；Y是CH；和Z是N；或(e)W是CH；X是N；Y是CH和Z是CH。
在其它的优选实施方案中，W、X、Y和Z中的两个是N或N→O，即，含W、X、Y和Z的环是哒嗪、嘧啶或吡嗪环或相应的N-氧化物。
优选当W、X、Y和Z不是CH或CR4时，它们是N。
优选当X、Y和Z不是N或N→O时，它们是CH。
在式I化合物中，连接哌啶氮原子和含W、X、Y和Z的吡啶环的-CH2-基任选被1或2个选自甲基、乙基和氟的取代基取代，其中甲基和乙基任选被1至3个氟取代基取代。代表性的取代基包括氟、甲基、氟代甲基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基等。
当存在时，各Ra或Rb优选独立地选自C1-4烷基、氟、氯以及-ORf；其中各烷基任选被1至3个氟取代基取代。更优选各Ra和Rb是C1-2烷基或氟。特别优选的Ra和Rb基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、氟代、氯、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基。
当存在时，各Rc或Rd优选独立地选自C1-2烷基和氟；其中各烷基任选被1至3个氟取代基取代。当存在两个Rc或Rd取代基时，它们可在相同或不同的碳原子上。特别优选的Rc和Rd基包括甲基、乙基、二氟甲基、三氟甲基和氟。
优选各Re独立地是氢或C1-4烷基。更优选各Re独立地是氢或C1-2烷基。还更优选各Re是氢。特别优选的Re基包括氢、甲基和乙基。
或者，两个Re与它们所连接的N原子一起形成C5-6杂环，其任选含有另一个选自N、O或S的杂原子。特别优选的杂环包括吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、吗啉-4-基和硫吗啉-4-基。
优选各Ri独立地是苯基；其中各苯基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代。
优选各Rj独立地选自苯基、-OH和-O(C1-2烷基)；其中各烷基任选被1至3个氟取代基取代；和各苯基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代。
优选m是0、1或2；更优选m是0或1；和还更优选m是0。
优选n是0、1或2；更优选n是0或1；和还更优选n是0。
优选p是1。
当p是1时，即，当通过p定义的环是吡咯烷环，那么在一个优选实施方案中，在吡咯烷环3-位的立构中心(即，具有1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基的碳原子)优选具有(S)立体化学。在另一个优选实施方案中，该立构中心具有(R)立体化学。
优选q是0。
优选r是0。
优选x是2或3。
优选y是2或3。
优选的一组化合物是式I化合物，其中R1是-(CH2)7-、-(CH2)8-或-(CH2)9-；R3是甲基；W是CH；X是N；Y是CH；Z是CH；两个Re是氢；m、n、q和r是0；p是1；和R2如在此的定义，包括其优选的实施方案；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
另一优选的组化合物是式I化合物，其中R1是-(CH2)7-、-(CH2)8-或-(CH2)9-；R3是乙基；W是CH；X是N；Y是CH；Z是CH；两个Re是氢；m、n、q和r是0；p是1；和R2如在此的定义，包括其优选实施方案；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
还另一个优选的组化合物是式I化合物，其中R1是-(CH2)7-、-(CH2)8-或-(CH2)9-；R2是异丙基；W是CH；X是N；Y是CH；Z是CH；两个Re是氢；m、n、q和r是0；p是1；和R3如在此的定义，包括其优选实施方案；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
还另一个优选的组化合物是式I化合物，其中R2是异丙基；R3是甲基；W是CH；X是N；Y是CH；Z是CH；两个Re是氢；m、n、q和r是0；p是1；和R1如在此的定义，包括其优选实施方案；或其药学上可接受的盐或立体异构体。
还另一个优选的组化合物是式I化合物，其中R2是异丙基；R3是乙基；W是CH；X是N；Y是CH；Z是CH；两个Re是氢；m、n、q和r是0；p是1；和R1如在此的定义，包括其优选实施方案；或其药学上可接受的盐或立体异构体。
另一个优选的组化合物是式IX化合物
其中R1、R2、R3、W、X、Y和Z如表I中的定义，和各Re是氢，除非在表I中另有描述，或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
表I




1在化合物97中，(4-羟基吡啶-3-基)甲基基团可作为互变异构体即，(吡啶-4-酮-3-基)甲基部分或完全存在。
定义当描述本发明的化合物、组合物、方法和工艺时，以下术语具有以下含义，除非另有说明。
术语″烷基″表示一价饱和烃基，其可以是直链或支化的。除非另有定义，这类烷基通常含有1至10个碳原子。代表性的烷基例如包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基等。
术语″亚烷基″表示二价饱和的烃基，其可以是直链或支化的。除非另有定义，这类亚烷基通常含有1至10个碳原子。代表性的亚烷基包括例如亚甲基、乙烷-1，2-二基(″亚乙基″)、丙烷-1，2-二基、丙烷-1，3-二基、丁烷-1，4-二基、戊烷-1，5-二基等。
术语″烯基″表示一价不饱和烃基，其可以是直链或支化的，并且其具有至少一个、通常是1、2或3个碳-碳双键。除非另外定义，这类烯基通常含有2至10个碳原子。代表性的烯基包括例如乙烯基、正丙烯基、异丙烯基、正丁-2-烯基、正己-3-烯基等。
术语″炔基″表示一价不饱和烃基，其可以是直链或支化的并且具有至少一个、通常是1、2或3个碳-碳三键。除非另外定义，这类炔基通常含有2至10个碳原子。代表性的炔基包括例如乙炔基、正丙炔基、正丁-2-炔基、正己-3-炔基等。
术语″芳基″表示一价的芳烃，具有单环(即，苯基)或者稠环(即，萘)。除非另外定义，这样的芳基通常含有6至10个碳环原子。代表性芳基包括例如苯基和萘-1-基、萘-2-基等。
术语″环烷基″表示一价饱和碳环烃基。除非另外定义，这样的环烷基通常含有3至10个碳原子。代表性环烷基包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等等。
术语″卤代″表示氟代、氯代、溴代和碘代。
术语″杂芳基″表示一价的芳基，其具有单环或者二个稠环并且在环中含有至少一个(通常有1至3个杂原子)选自氮、氧或硫的杂原子。除非另外定义，这样的杂芳基通常含有5至10个总环原子。代表性杂芳基包括例如一价的吡咯、咪唑、噻唑、噁唑、呋喃、噻吩、三唑、吡唑、异噁唑、异噻唑、吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶、三嗪、吲哚、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并咪唑、苯并噻唑、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉等，其中结合点在任何可适用的碳或氮环原子上。
术语″杂环基″或″杂环的″表示一价饱和或不饱和的(非芳香性)基团，其具有单环或者多个稠环并且在环中含至少一个(通常是1至3个杂原子)选自氮、氧或者硫的杂原子。除非另外定义，这样的杂环基通常含2至9个总环碳原子。代表性杂环基包括例如一价的吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、哌啶、二氧杂环己烷、吗啉、硫代吗啉、哌嗪、3-吡咯啉等，其中结合点在任何可适用的碳或氮环原子上。
术语″(4-甲氧基吡啶-3-基)甲基″表示下式基团 相关的吡啶基以相似的方法命名。
术语″吡啶N-氧化物″表示吡啶化合物，其中吡啶的氮原子已经被氧化，即，N+-O-或N→O。
术语″活动过度的膀胱″或者″OAB″表示在症状上以尿冲动、尿失禁、排尿频率增加、和/或夜间排尿等为特征的状况。术语″尿冲动″表示强烈突然的排空膀胱的愿望。
术语″药学上可接受的盐″表示可接受用于给患者(例如哺乳动物)给药的盐(例如对于给定剂量方案具有可接受的哺乳动物安全性的盐)。这样的盐可衍生自药学上可接受的无机碱或有机碱以及药学上可接受的无机酸或有机酸。衍生自药学上可接受的无机碱的盐包括铵、钙、铜、三价铁、亚铁、锂、镁、三价锰、二价锰、钾、钠、锌等。特别优选的是铵、钙、镁、钾和钠盐。衍生自药学上可接受的有机碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺，包括取代的胺、环胺、天然存在的胺等的盐，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N′-二苄基亚乙基二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺(glucamine)、葡糖胺(glucosamine)、组氨酸、海巴明(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶(piperadine)、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等等。衍生自药学上可接受的酸的盐包括下列酸的盐醋酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、乙二磺酸、富马酸、2，5-二羟苯甲酸、葡糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、羟基乙磺酸、乳酸、乳糖酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘液酸、萘磺酸、萘-1，5-二磺酸、萘-2，6-二磺酸、烟碱酸、硝酸、乳清酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸、昔萘酸等。特别优选的是柠檬酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、马来酸、磷酸、硫酸和酒石酸。
术语″其盐″表示当酸的氢被阳离子(诸如金属阳离子或有机阳离子等)替代形成的化合物。优选所述的盐是药学上可接受的盐，尽管对不想施用给患者的中间体化合物的盐没有这种要求。
术语″溶剂化物″表示由一个或多个溶质分子(即，式I化合物或其药学上可接受的盐)和一个或多个溶剂分子形成的配合物或者聚集体。这样的溶剂化物通常是结晶固体，其具有实质上固定的溶质与溶剂的摩尔比。代表性溶剂包括例如水、甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸等等。当溶剂是水时，形成的溶剂化物是水合物。
术语″治疗有效量″表示当施用给需要治疗的患者时足以实现治疗的量。
在此使用的术语″治疗″表示患者体内疾病或医学状况的治疗(诸如活动过度的膀胱)，所述的患者诸如是哺乳动物(特别人或者伴侣动物)，所述的治疗包括(a)预防疾病或者医学状况的发生，即，患者的预防性治疗；(b)改善疾病或者医学状况，即，消除或导致患者中疾病或者医学状况消退；(c)抑制疾病或者医学状况，即，减缓或阻止患者中疾病或者医学状况的发展；或(d)减轻患者中疾病或者医学状况的症状。
术语″离去基团″表示一个官能团或原子，其可在取代反应(例如，亲核取代反应)中被另一个官能团或原子替代。例如，代表性离去基团包括氯、溴与碘基团；磺酸酯基，例如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、对溴苯磺酸酯、对硝基苯磺酸酯等；和酰氧基，例如乙酰氧基、三氟乙酰氧基等。
术语″其保护的衍生物″表示特定化合物的衍生物，其中该化合物的一个或多个官能团被保护基或封端基团保护以免发生不希望的反应。可被保护的官能团包括例如羧酸基、氨基、羟基、巯基、羰基等等。用于羧酸的代表性的保护基包括酯(例如，对甲氧苯甲基酯)、酰胺和酰肼；对于氨基，是氨基甲酸酯(例如叔丁氧基羰基)和酰胺；对于羟基，是醚和酯；对于巯基，是硫醚和硫酯；对于羰基，是乙缩醛和酮缩醇；等等。这样的保护基是本领域技术人员公知的，例如在下述文献中有所描述，in T.W.Greene and G.M.Wuts，Protecting Groups in OrganicSynthesis，Third Edition，Wiley，New York，1999，以及其中引用的参考文献。
术语″氨基保护基″表示适合于防止在氨基位的不希望的反应的保护基。代表性氨基保护基包括但不限于，叔丁氧基羰基(BOC)、三苯甲基(Tr)、苄氧基羰基(CBz)、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、甲酰基、三甲基甲硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等。
术语″羧基保护基″表示适于防止在羧基位的不希望的反应的保护基。代表性羧基保护基包括但不限于，酯，例如甲基、乙基、叔丁基、苄基(Bn)、对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)、三甲基甲硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)、二苯基甲基(二苯甲基，DPM)等。
一般的合成步骤本发明的取代的4-氨基-1-(吡啶基甲基)哌啶和有关的化合物可从容易获得的起始原料采用下述一般方法和步骤制备。虽然在下述流程中可能显示或描述了本发明的具体的实施方案，但是本领域技术人员将认识到，本发明的所有实施方案或方面可用在此所述的方法或本领域技术人员已知的其它方法、试剂和起始原料制备。还将理解，在给出典型的或者优选的工艺条件(即，反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)的情况，也可采用其它工艺条件，除非另有说明。最优的反应条件可随着使用的具体反应物或者溶剂变化，但是这样的条件可由本领域技术人员通过常规的优化过程容易地确定。
另外，如本领域技术人员将理解的，为了防止特定的官能团进行不希望的反应，常规的保护基可能是必要的或希望的。对用于特定官能团的适当保护基以及这类官能基团的保护和脱保护的适当条件的选择是本领域公知的。如果期望，可以使用除了在此所述的方法中说明的那些保护基以外的保护基。例如，在T.W.Greene and G.M.Wuts，ProtectingGroups in Organic Synthesis，第三版，Wiley，New York，1999和其中引用的参考文献中描述了许多保护基和它们的引入和除去。
在优选的合成方法中，如流程A所述制备式I化合物(在下述流程中所示的取代基和变量具有在此所述的定义，除非另有说明)。
流程A 如流程A所示，首先使式I化合物与醇2反应，其中L1是适合的离去基团，例如溴、碘、甲苯磺酰基、甲磺酰基等，得到中间体3。典型地，该反应是通过使1与至少1当量、优选与约1.0至1.1当量的醇2在惰性稀释剂(例如乙腈等)中接触而进行的。该反应通常在过量碱存在下进行；优选，在约2至约4当量的碱，例如三烷基胺，优选三乙胺存在下。通常该反应在约0至约80摄氏度、优选约40至50摄氏度的温度范围反应约1至24小时，或直到反应基本完全。如果期望，通过标准方法，例如色谱法、重结晶等等轻易纯化得到的中间体3。
用于该反应的式2的醇或者是市场上可买到的，或者可以从市场上可买到的起始原料和试剂使用公知方法制备。代表性式2的醇例如包括7-氯-1-庚醇、8-氯-1-辛醇、9-氯-1-壬醇、7-溴-1-庚醇、8-溴-1-辛醇、9-溴-1-壬醇、7-碘-1-庚醇、8-碘-1-辛醇、9-碘-1-壬醇、7-溴-3-氧杂庚-1-醇、7-溴-4-氧杂庚-1-醇、7-溴-5-氧杂庚-1-醇、8-溴-3-氧杂辛-1-醇、8-溴-4-氧杂辛-1-醇、8-溴-5-氧杂辛-1-醇、8-溴-6-氧杂辛-1-醇、8-溴-3-氧杂辛-1-醇、9-溴-3-氧杂壬-1-醇、9-溴-4-氧杂壬-1-醇、9-溴-5-氧杂壬-1-醇、9-溴-6-氧杂壬-1-醇、9-溴-7-氧杂壬-1-醇等。
然后将中间体3的羟基氧化成相应的醛，得到中间体4。通常通过将3与过量的适合的氧化剂接触进行该反应。在该反应中可使用任何能够将羟基氧化为醛的氧化剂，包括铬(VI)试剂，诸如二吡啶氧化铬(VI)、吡啶鎓氯铬酸盐、吡啶鎓二铬酸盐等；以及活化的二甲基亚砜试剂，诸如草酰氯/DMSO、三氧化硫吡啶配合物/DMSO/三烷基胺等。
优选该反应用过量的三氧化硫吡啶配合物和二甲基亚砜在三烷基胺(例如三乙胺、二异丙基乙基胺等)存在下进行。一般，通过将3与约2.5至约3.5当量的三氧化硫吡啶配合物和过量的、优选约10当量的二甲基亚砜在过量的、优选约5当量的二异丙基乙基胺存在下在诸如二氯甲烷的惰性溶剂中接触进行该反应。该反应通常在约-30摄氏度至约0摄氏度、优选约-10摄氏度至约-20摄氏度的温度范围内进行约0.25至约2小时，或直至反应基本完全。任选地，然后用标准方法(例如色谱法、重结晶等)提纯得到的醛中间体4。
或者，可通过首先使1与下式化合物反应制备醛中间体4
L1-(CH2)a-(O)b-(CH2)c-1-CH(ORm)2或L1-(CH2)a-(O)b-(CH2)c-1-CH＝CH2或OHC-(CH2)a-1-(O)b+(CH2)c-1-CH(ORm)2其中，各个L1、Rm、a、b和c如在此的定义，得到式Vb或Vd的中间体。然后臭氧分解Vd中的烯烃(即，使用O3，然后用还原剂例如三甲基亚磷酸酯，甲硫醚等)分解臭氧化物，得到醛4。或者水解式Vb的缩醛(即，使用含水酸)也得到醛4。
然后将醛中间体4与4-氨基-1-(吡啶基甲基)哌啶中间体5偶合得到式6化合物。典型地，该反应通过使醛4与约1.0至约1.2当量的5在过量的、优选约1.2至约1.5当量的适合还原剂存在下在诸如二氯甲烷等惰性稀释剂中接触进行。适当的还原剂例如包括三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢钠等。优选，还原剂是三乙酰氧基硼氢化钠。通常，该反应在约0至约30摄氏度进行约6至约24小时，或直至反应实质上完全。得到的式6化合物通常用标准方法提纯，例如色谱法、重结晶等等。
如果期望，还可用诸如铬酸、高锰酸盐、硝酸等强氧化剂氧化醇3成相应的羧酸。然后将得到的羧酸与4-氨基-1-(吡啶基甲基)哌啶中间体5偶合形成酰胺，得到的酰胺用诸如二异丁基氢化铝等还原剂还原得到化合物6。
用于在此所述反应中的式1化合物通过流程B所示的步骤可容易地制备。
流程B 如流程B中所示，使二苯基乙腈7与中间体8反应得到中间体9，其中L2是适当的离去基团，例如氯、溴、碘、甲苯磺酰基、甲磺酰基等，P1是氨基保护基，例如苄基、4-甲氧基苄基、4-硝基苄基、乙氧羰基、苯基羰基等。一般，该反应通过首先使7与过量的、优选约1.4至约1.6当量的强碱(例如叔丁醇钾)在惰性稀释剂(例如四氢呋喃)中在约-10至约10摄氏度的温度接触约0.5至约2.0小时形成化合物7的阴离子而进行。然后将得到的阴离子就地与约0.95至约1.05当量的8在约20至约50摄氏度的温度反应约10至约48小时，或者直到反应实质上完全。从相应的醇使用常规方法和试剂可容易地制备其中L2是磺酸酯离去基团的式8化合物。例如，通过用约1.1当量的对甲苯磺酰氯和约1.2当量的1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(DABCO)处理，容易地将(S)-1-苄基-3-吡咯烷醇转化成(S)-1-苄基-3-(对甲苯磺酰氧基)吡咯烷。式8其它化合物可通过相似的方法用市场上可买到的起始原料和试剂制备。
然后用常规的方法和试剂将化合物9脱保护，得到化合物10。例如，如果化合物9中的P1是苄基保护基，通过使用氢源(例如甲酸铵)和催化剂(例如钯碳)传递氢解容易地除去苄基。优选，该反应使用化合物9的盐酸盐或氢溴酸盐，或在诸如盐酸、氢溴酸、甲酸、硫酸、磷酸、对甲苯磺酸、乙酸、草酸等酸的存在下进行。该氢解反应还可使用氢和催化剂在酸存在下进行。参见例如1999年12月21日授予N.Mori等人的US6005119。
然后将化合物10的氰基水解成相应的酰胺(即，-C(O)NH2)，得到式11化合物。该反应通常通过将10与含水硫酸、优选80％的硫酸在约70至约100摄氏度、优选约90摄氏度接触约12至约36小时进行，或者直到反应实质上完全。如流程B所示，氰基水解成酰胺还可在除去保护基之前进行，得到12，然后将12脱保护得到化合物11。
如果期望，化合物9或10的氰基可被水解成相应的羧酸(即，-COOH)，使用例如含约6至约12％过氧化氢的含水氢氧化钠。得到的羧酸然后可用公知的方法和试剂偶合到多种胺(即，ReReNH，其中Re如在此的定义)形成取代的酰胺。
用于在此所述反应中的式5的4-氨基哌啶化合物可通过流程C中所示的步骤制备。
流程C 如流程C所示，式13的化合物，其中P2是氨基保护基(例如苄基)，首先用醛或酮进行还原烷基化得到式14化合物。式13化合物或者是市场上可买到的，或者可从市场上可买到的起始原料用已知的试剂和方法制备。优选的式13化合物是4-氨基-1-苄基哌啶，其可从市场上购买，例如购自Aldrich Chemical Company，Inc。
在该反应中适用的醛和酮包括例如乙醛、丙醛、丁醛、丙酮、环丙烷甲醛等。
一般，该反应通过将13与过量的，即至少1.1当量的醛或酮在过量的、优选约1.1至约1.3当量的适当还原剂存在下在惰性稀释剂(例如甲醇)中接触进行。适当的还原剂例如包括三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢钠等。优选，还原剂是三乙酰氧基硼氢化钠。通常，该反应在约0至约30摄氏度进行约1至约6小时，或直到反应实质上完全。得到的式14化合物一般用标准方法，例如色谱法、重结晶等提纯。
然后保护式14化合物的4-氨基得到式15的化合物，其中P3是氨基保护基。优选P2和P3是不同的保护基，选择它们使得可在P3存在下选择性地除去P2。例如，当P2是苄基时，P3优选是叔丁氧基羰基(BOC)；苄氧基羰基(Cbz)；或者9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)；等。当P3是叔丁氧基羰基时，化合物15一般通过将14与约1.0至约1.2当量的二叔丁基重碳酸酯在惰性稀释剂(例如二氯甲烷)中接触制备。一般，该反应在约0至约30摄氏度的温度进行约6至约48小时，或者直到反应实质上完全。
然后用标准方法和试剂将化合物15脱保护得到化合物16。例如，当P2是苄基时，用催化剂(例如钯碳)通过氢解除去保护基。一般，该反应通过将15与氢在约40至约60psi的压力在催化剂(例如10％钯碳)存在下接触进行。该反应通常在惰性稀释剂(例如乙醇)中在室温下进行约12至约48小时，或者直到反应实质上完全。
然后将化合物16与醛17在还原性烷基化条件下偶合得到化合物18。用于该反应中的式17醛是市场上可购得的，或者可以从市场上买得到的起始原料用已知的试剂和方法制备。适用于该反应的代表性醛包括例如3-甲氧基吡啶-2-甲醛、3-甲氧基吡啶-4-甲醛、2-甲氧基吡啶-3-甲醛、4-甲氧基吡啶-3-甲醛；等。在J.Org.Chem.，1990，55，69-73中描述了分别从2-甲氧基吡啶、3-甲氧基吡啶和4-甲氧基吡啶制备2-甲氧基吡啶-3-甲醛、3-甲氧基吡啶-2-甲醛、4-甲氧基吡啶-3-甲醛。
一般，偶合反应通过使16与约0.9至约1.1当量的17在惰性稀释剂(例如二氯甲烷)中在约0摄氏度到约50摄氏度、优选在室温接触约1至约6小时进行。得到的亚胺一般不被分离，而是就地与过量的、优选约1.1至约1.3当量的适合的还原剂反应。适合的还原剂包括例如三乙酰氧基硼氢化钠、氰基硼氢钠等等。优选，还原剂是三乙酰氧基硼氢化钠。通常，该还原反应在约-10至约25摄氏度进行约0.5至约12小时，或直到反应实质上完全。得到的式18化合物通常用标准方法，例如色谱法、重结晶等提纯。
然后用标准方法和试剂将化合物18脱保护得到化合物5。例如，当P3是叔丁氧基羰基时，通过用含水盐酸在例如二噁烷等惰性稀释剂中处理18脱去保护基。一般，该反应通过将18与浓盐酸在二噁烷中接触进行，开始在约0至约10摄氏度接触约0.25至1小时，然后在室温接触约6至约24小时，或直到反应实质上完全。得到的式5化合物通常用标准方法，例如色谱法、重结晶等提纯。
或者，不将醛17与16偶合，而用标准的偶合试剂和反应条件将相应于17的羧酸偶合成16形成酰胺。然后用例如氢化锂铝等还原剂还原酰胺形成中间体5。
本领域技术人员还将理解，为了制备式6化合物，流程A、B和C中所示合成步骤可以与所示顺序不同的顺序，或者使用与所描述的那些不同的试剂进行。
例如，用在此所述的步骤，可将中间体14偶合到醛4，而不是化合物5。在从得到的中间体除去保护基(即，P2)后，然后用在此描述的方法将醛17偶合到哌啶氮得到式6化合物。
另外，不将中间体3的羟基氧化成醛，用常规的试剂和反应方法可将该羟基转化为离去基团，例如氯、溴、碘、甲磺酸酯或者甲苯磺酸酯。得到的离去基团然后容易被4-氨基-1-(吡啶基甲基)哌啶5置换，得到化合物6。或者，该离去基团还可用中间体14置换，脱保护，然后偶合到如上所述醛17后，得到式6化合物。
本发明的化合物还可通过流程D所示的步骤制备。
流程D 如流程D所示，首先使式1化合物与式19的醛偶合得到炔中间体20。该反应一般通过将1与大约1.1至约1.3当量的19在适当的还原剂存在下接触进行。优选，该反应用约1.0至约1.1当量的三乙酰氧基硼氢化钠和约1.0当量的乙酸进行。一般，该反应在惰性稀释剂(例如二氯甲烷)中在约0至约50摄氏度、优选室温的温度下进行约0.25至约6小时，或者直到反应实质上完全。
用于该反应的式19的醛可从市场上购买，或者可用从市场上买得到的起始原料用标准试剂和方法制备。适用于该反应的代表性醛包括例如5-己-1-醛、6-庚-1-醛、7-辛-1-醛、4-氧杂-7-辛-1-醛等。
然后用甲醛和铜(I)催化剂将式20的炔中间体偶合到4-氨基-1-(吡啶基甲基)哌啶5得到中间体24。一般，该反应通过将20与约1.05至约1.2当量的5和约1.2至约1.4当量的三聚甲醛在催化量的、优选约0.2当量的铜(I)盐(例如氯化铜(I))存在下接触进行。一般，该反应在惰性稀释剂(例如四氢呋喃)中在约25至约75摄氏度的温度进行约2至约24小时，或者直到反应实质上完全。
然后还原得到的式21中间体形成式22化合物。优选，该还原通过将21与过量的、优选约10当量的对甲苯磺酰肼和过量的、优选约20当量的乙酸钠接触进行。一般，该反应通过将21和对甲苯磺酰肼在惰性稀释剂(例如1，2-二甲氧基乙烷)中的溶液与乙酸钠水溶液在约50至约100摄氏度的温度接触约12至约48小时进行，或者直到反应实质上完全。得到的式22化合物一般用标准方法，例如色谱法、重结晶等等提纯。
本发明的化合物还可通过流程E所示的步骤制备。
流程E 如流程E所示，4-氨基-1-(吡啶基甲基)哌啶5可与化合物23反应，其中L3是离去基团，例如氯或者溴，P4是羧基保护基，例如甲基或者乙基；得到酰胺中间体24。该反应一般通过将5与约1.0至约1.2当量的化合物23在过量的、优选约1.2至约2.0当量的三烷基胺(例如N，N-二异丙基乙胺)存在下接触进行。该反应一般在惰性稀释剂(例如二氯甲烷)中在约-10摄氏度到约25摄氏度的温度进行约1至约24小时，或直到反应实质上完全。
酰胺24然后被金属氢化物还原剂(例如氢化锂铝)还原得到醇25。该反应一般通过将24与过量的金属氢化物还原剂、优选与约3至约5当量的氢化锂铝在惰性稀释剂(例如四氢呋喃)中接触进行。该还原通常在约-30摄氏度到约10摄氏度的温度进行约6至约24小时，或者直到反应实质上完全。
用在此描述的步骤，然后将醇25氧化成醛26，再将26偶合到中间体1得到式6化合物。或者，可将醇25转化为离去基团，例如氯、溴、甲磺酸酯或者甲苯磺酸酯，然后用上述步骤偶合到中间体1。
最后，如果期望，本发明的吡啶N-氧化物可以通过用任何适合的氧化剂将相应的吡啶化合物氧化制备。例如，吡啶N-氧化物可以用下述试剂制备在乙酸中的30％过氧化氢；在乙酸中的40％过乙酸；等。
在下述实施例中描述了制备本发明代表性化合物或其中间体的更详细的具体反应条件和其它步骤。
药物组含物本发明的取代的4-氨基-1-(吡啶基甲基)哌啶和相关化合物一般以药物组合物的形式给予患者。这样的药物组合物可通过任何可接受的给药途径给予患者，所述途径包括但不限于，口服、直肠给药、阴道给药、鼻给药、吸入给药、局部给药(包括透皮)和肠胃外的给药方式。
因此，在其组合物方面的一个方面，本发明涉及一种药物组合物，该组合物含有药学上可接受的载体或者赋形剂和治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。如果需要，任选这样的药物组合物可含有其它治疗剂和/或配制试剂。
本发明的药物组合物一般含治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐。一般，这样的药物组合物将含约0.1至约95重量％的活性物质；优选，约5至约70重量％；更优选约10至约60重量％的活性物质。
任何常规的载体或者赋形剂可被用于本发明的药物组合物。具体载体或赋形剂、或载体或赋形剂的结合的选择将取决于用于治疗具体患者的给药方式或医学状况或疾病状态类型。在这点上，用于特定给药方式的适合药物组合物的制备完全属于药学领域技术人员的范围。另外，用于这类组合物的成分是可购买的形式，例如Sigma，P.O.Box 14508，St.Louis，MO 63178。作为另一具体说明，在下述文献中描述了常规的制剂技术RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy，20thEdition，Lippincott Williams & White，Baltimore，Maryland(2000)；和H.C.Ansel et al.，Pharmaceutical Dosage Forms and DrugDelivery Systems，7thEdition，Lippincott Williams & White，Baltimore，Maryland(1999)。
可用作药学上可接受的载体的材料的代表性例子包括，但不限于，如下物质(1)糖类，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉类，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素，例如微晶纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；(4)粉末黄蓍胶；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石粉；(8)赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；(9)油，例如花生油、棉子油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇类，例如丙二醇；(11)多元醇类，例如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；(12)酯类，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；
(15)藻酸；(16)无热原的水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸盐缓冲液；和(21)用于药物组合物中的其它非毒性可兼容的物质。
本发明的药物组合物一般通过将本发明的化合物与药学上可接受的载体和一种或多种任选的成分充分完全混合或掺合制备。如有必要或者要求，然后可用常规的方法和设备将得到的均匀混合的混合物成型或制成片剂、胶囊、丸剂等。
本发明的药物组合物优选以单位剂型包装。术语″单位剂型″表示适于给药患者的物理上分离的单位，即，每单位含有预定量的活性物质，计算该活性物质的量以单独地或与一种或多种其它单位结合产生所希望的治疗效果。例如，这样的单位剂型可以是胶囊、片剂、丸剂等。
在一个优选的实施方案中，本发明的药物组合物适于口服。用于口服的适合药物组合物可以呈胶囊、片剂、丸剂、锭剂、扁囊剂、糖衣丸、粉末、颗粒的形式；或者作为在含水或不含水的液体中的溶液或悬浮液；或者作为水包油或油包水液体乳剂；或者作为酏剂或者糖浆；等；各含预定量的本发明化合物作为活性成分。
当要以固体剂型(即，作为胶囊、片剂、丸剂等)用于口服时，本发明的药物组合物一般将含有作为活性成分的本发明化合物和一种或多种药学上可接受的载体(例如柠檬酸钠或者磷酸二钙)。任选地或可替代地，这样的固体剂型还可含有(1)填料或者增量剂，例如淀粉、微晶纤维素、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和/或硅酸；(2)粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；(3)湿润剂，例如甘油；(4)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或者木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和/或碳酸钠；(5)溶液阻滞剂，例如石蜡；(6)吸收促进剂，例如季铵化合物；(7)润湿剂，例如鲸蜡醇和/或单硬脂酸甘油酯；(8)吸附剂，例如高岭土和/或皂土；(9)润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和/或其混合物；(10)着色剂；和(11)缓冲剂。
释放剂、润湿剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于本发明的药物组合物中。药学上可接受的抗氧化剂的例子包括(1)水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、硫酸氢钠、偏亚硫酸钠、亚硫酸钠等等；(2)油溶性抗氧化剂，例如棕榈酸抗坏血酸酯、丁羟基茴醚(BHA)、2，6-二叔丁基对甲酚(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；和(3)金属螯合剂，例如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。用于片剂、胶囊、丸剂等的包衣剂包括那些用于肠包衣的，例如醋酞纤维素(CAP)、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯(PVAP)、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物、醋酸1，2，4-苯三酸纤维素(CAT)、羧甲基乙基纤维素(CMEC)、羟丙基甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(HPMCAS)等。
如果期望，还可配制本发明的药物组合物以提供缓释或控释活性成分，例如，使用不同比例的羟丙基甲基纤维素；或者其它聚合物基料、脂质体和/或微球。
另外，本发明的药物组合物可任选含有遮光剂，并且可被配制使其任选以延迟的方式在胃肠道的某一部分唯一地或优先地释放所述活性成分。可使用的包埋组合物的例子包括聚合物和蜡。活性成分还可以呈微胶囊化形式，如果适当，与上述赋形剂中的一种或多种一起。
用于口服的适当的液体剂型例如包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。这样的液体剂型一般含有活性成分和惰性稀释剂(例如、水或其它溶剂)、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、油(尤其是棉籽油、落花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃基醇、聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯和其混合物。悬浮液中除活性成分外可含有悬浮剂，例如乙氧基化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯和聚氧乙烯脱水山梨醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、皂土、琼脂和黄蓍胶及其混合物。
在另一个优选的实施方案中，本发明的药物组合物是适于吸入给药的。用于吸入给药的适当的药物组合物一般将呈气溶胶或者粉末形式。这样的组合物通常用公知的递送装置给药，例如计量吸入器、干粉吸入器、雾化器或者类似的递送装置。
当用增压容器吸入给药时，本发明的药物组合物一般将含有活性成分和适当的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或者其它适当的气体。
另外，药物组合物可以呈胶囊或药筒形式(例如用明胶制备)，它含有本发明的化合物和适用于粉末吸入器的粉末。适当的粉末基料包括例如乳糖或者淀粉。
本发明的化合物还可用已知的透皮递送体系和赋形剂透皮给药。例如，本发明的化合物可与渗透增强剂(例如丙二醇、聚乙烯乙二醇单月桂酸酯、氮杂环烷-2-酮等)混合。然后掺入贴片或类似的递送体系中。另外的赋形剂包括胶凝剂、乳化剂和缓冲剂，如果需要，可用于这类透皮组合物中。
本发明的药物组合物还可以含有其它治疗剂，其与式I化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体共同给药。例如，本发明的药物组合物可进一步含有一种或多种治疗剂，该治疗剂选自β2肾上腺素能受体激动剂、消炎药(例如皮质甾类和非甾族的消炎药(NSAID)、其它毒蕈碱性受体拮抗剂(即，抗胆碱能药(antichlolinergicagent))、抗感染剂(例如抗生素或者抗病毒剂)和抗组胺剂。所述的其它治疗剂可以药学上可接受的盐或者溶剂化物的形式使用。另外，如果适当，所述的其它治疗剂可作为旋光纯的立体异构体使用。
以下制剂举例说明本发明的代表性药物组合物
制剂实施例A用于口服的硬明胶胶囊制备如下组分 用量本发明的化合物250mg乳糖(喷雾干燥的) 200mg硬脂酸镁 10mg代表性方法将上述组分充分混合，然后装入硬明胶胶囊(每个胶囊460mg组合物)。
制剂实施例B用于口服的硬明胶胶囊制备如下组分 用量本发明的化合物20mg淀粉 89mg微晶纤维素89mg硬脂酸镁 2mg代表性方法将上述组分充分混合，然后通过No.45目U.S.筛，再装入硬明胶胶囊(每个胶囊200mg组合物)。
制剂实施例C用于口服的胶囊制备如下组分 用量本发明的化合物100mg聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯50mg淀粉粉末 250mg代表性方法将上述组分充分混合，然后装入明胶胶囊(每个胶囊300mg组合物)。
制剂实施例D
用于口服的片剂制备如下组分用量本发明的化合物 10mg淀粉45mg微晶纤维素 35mg聚乙烯吡咯烷酮(在水中10重量％) 4mg羧甲基淀粉钠4.5mg硬脂酸镁0.5mg滑石粉1mg代表性方法将上述活性成分、淀粉和纤维素通过No.45目U.S.筛并充分混合。然后将该聚乙烯吡咯烷酮溶液与得到的粉末混合，然后将该混合物通过No.14目U.S.筛。这样制备的颗粒在50-60摄氏度干燥，然后通过No.18目U.S.筛。然后将羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉(事先过No.60目U.S.筛)加入所述颗粒。在混合后，混合物在压片机上压片，得到重量100mg的片剂。
制剂实施例E用于口服的片剂制备如下组分用量本发明的化合物250mg微晶纤维素400mg烘制的二氧化硅10mg硬脂酸5mg代表性方法将上述组分充分混合，然后压成片剂形式(每片665mg组合物)。
制剂实施例F用于口服的单刻痕片剂制备如下组分 用量本发明的化合物400mg
玉米淀粉50mg交联羧甲基纤维素钠 25mg乳糖120mg硬脂酸镁5mg代表性方法将上述组分充分混合然后压成单刻痕的片剂(每片600mg组合物)。
制剂实施例G用于口服的悬浮液制备如下组分 用量本发明的化合物1.0g富马酸0.5g氯化钠2.0g对羟苯甲酸甲酯0.15g对羟苯甲酸丙酯0.05g砂糖 25.5g山梨糖醇(70％溶液)12.85gVeegum k(Vanderbilt Co.) 1.0g调味剂0.035ml着色剂0.5mg蒸馏水适量至100ml代表性方法将上述组分混合以形成悬浮液，该悬浮液每10ml悬浮液含100mg活性成分。
制剂实施例H用于通过吸入给药的干燥粉剂制备如下成分 用量本发明的化合物1.0mg乳糖 25mg
代表性方法将活性成分微粒化，然后与乳糖混合。然后将该混合的混合物装入明胶吸入药筒。药筒的内容物用粉末吸入器给药。
制剂实施例I用于在计量吸入器通过吸入给药的干燥粉剂制备如下代表性方法含5重量％本发明化合物和0.1重量％卵磷脂的悬浮液通过将平均尺寸小于10μm的10g活性化合物微粒化颗粒分散在溶液中进行制备，所述溶液由0.2g卵磷脂溶于200ml软化水中形成。将悬浮液喷雾干燥，并且将得到的物质微粒化至平均直径小于1.5μm的颗粒。将所述颗粒装入具有加压的用1，1，1，2-四氟乙烷药筒。
制剂实施例J可注射的制剂制备如下组分 用量本发明的化合物 0.2g乙酸钠缓冲溶液(0.4M)2.0mlHCl(0.5N)或者NaOH(0.5N) 适量至pH4水(蒸馏、无菌的)适量至20ml代表性方法将上述组分混合，用0.5N HCl或0.5N NaOH将pH调至4±0.5。
制剂实施例K用于口服的胶囊制备如下组分 用量本发明的化合物(萘-1，5-二磺酸盐形式) 40.05mg微晶纤维素(Avicel PH 103) 259.2mg硬脂酸镁 0.75mg代表性方法将上述组分充分混合，装入明胶胶囊(型号#1，白色、不透明)(每个胶囊300mg组合物)。
制剂实施例L用于口服的胶囊制备如下组分 用量本发明的化合物(萘-1，5-二磺酸盐形式) 160.2mg微晶纤维素(Avicel PH 103) 139.05mg硬脂酸镁 0.75mg代表性方法将上述组分充分混合，然后装入明胶胶囊(型号#1；白色，不透明)(每个胶囊300mg组合物)。
实用性本发明所述取代的4-氨基-1-(吡啶基甲基)哌啶和相关化合物用作毒蕈碱性受体拮抗剂，因此，这样的化合物用于治疗被毒蕈碱性受体介导的医学状况，即，通过用毒蕈碱性受体拮抗剂治疗改善的医学状况。这样的医学状况包括例如泌尿生殖道状况，如活动过度的膀胱或逼尿肌活动过强和它们的病状；胃肠道状况，如过敏性肠综合征、大肠憩室疾病、弛缓不能、胃肠运动过强状况和腹泻；呼吸道状况，如慢性阻塞性肺病、哮喘和肺纤维化；心脏心律不齐，如窦性心动过缓；帕金森氏病；认知状况，如阿尔茨海默氏病；dismenorrhea；等。
本发明化合物特别用于治疗哺乳动物、包括人的平滑肌状况。这样的平滑肌状况例如包括活动过度的膀胱、慢性阻塞性肺病和过敏性肠综合征。
当用于治疗平滑肌状况或通过毒蕈碱性受体受体介导的其它状况时，本发明的化合物通常经口、直肠、肠胃道外或通过吸入以单一日剂量或每天多剂量给药。每剂量给予的活性剂的量和每天给药总量通常由患者的医师确定，并且将取决于诸如下述的因素患者状况的属性和严重程度、被治疗的状况、患者的年龄和一般健康状况、患者对活性剂的耐受性、给药途径等。
通常，治疗平滑肌状况或其它通过毒蕈碱性受体介导的状况的合适剂量将在约0.01至约50mg活性剂/公斤/天；优选约0.02至约10mg/公斤/天的范围内变动。对于平均70公斤的人，这将总共约0.7至约3500mg活性剂/天。
在一个优选的实施方案中，本发明的化合物用于治疗活动过度的膀胱。当用于治疗活动过度的膀胱时，本发明的化合物通常经口以单一日剂量或每天多剂量给药；优选以单一日剂量给药。优选用于治疗活动过度的膀胱的剂量将在约1.0至约2000mg/天的范围内变动。
在另一个优选实施方案中，本发明的化合物用于治疗呼吸状况，如慢性阻塞性肺病或哮喘。当用于治疗慢性阻塞性肺病或哮喘时，本发明化合物通常通过吸入以单一日剂量或每天多剂量给药。优选用于治疗慢性阻塞性肺病或哮喘的剂量将在约10μg至约10mg/天的范围内变动。
在还另一优选的实施方案中，本发明的化合物用于治疗过敏性肠综合征。当用于治疗过敏性肠综合征时，本发明的化合物通常经口或直肠以单一日剂量或每天多剂量给药；优选用于治疗过敏性肠综合征的剂量将在约1.0至约2000mg/天的范围内变动。
如果需要，本发明的化合物可与其它治疗剂联合给药，其它治疗剂包括一种或多种治疗剂，选自β2肾上腺素能受体激动剂(即，β2肾上腺素能受体激动剂)、消炎药(例如皮质甾类和非甾族的消炎药(NSAIDs)、β3肾上腺素能受体激动剂(即，β3肾上腺素能受体激动剂)、其它毒蕈碱性受体拮抗剂(即，抗胆碱能药(antichlolinergic agent))、抗感染剂(例如抗生素或抗病毒剂)、抗组胺剂及其他治疗剂(如色苷酸二钠(cromylin sodium)或茶碱)。
可用于与本发明化合物联合使用的代表性β2肾上腺素能受体激动剂包括但不限于，沙美特罗、沙丁胺醇、福莫特罗、沙甲胺醇、非诺特罗、特布他林、舒喘宁、乙基异丙肾上腺素、奥西那林、比托特罗、吡布特罗、左沙丁胺醇等，或其药学上可接受的盐。其它可与本发明化合物联合使用的β2肾上腺素能受体激动剂包括但不限于，3-(4-{[6-({(2R)-2-羟基-2-[4-羟基-3-(羟甲基)-苯基]乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺和3-(-3-{[7-({(2R)-2-羟基-2-[4-羟基-3-(羟甲基)苯基]乙基}氨基)庚基]氧基}-丙基)苯磺酰胺和在2002年8月29日公开的WO02/066422中公开的相关化合物；3-[3-(4-{[6-([(2R)-2-羟基-2-[4-羟基-3-(羟甲基)苯基]乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯基]咪唑啉-2，4-二酮和在2002年9月12日公开的WO02/070490中公开的相关化合物；3-(4-{[6-({(2R)-2-[3-(甲酰基氨基)-4-羟基苯基]-2-羟基乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺，3-(4-{[6-({(2S)-2-[3-(甲酰基氨基)-4-羟基苯基]-2-羟基乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺，3-(4-{[6-({(2R/S)-2-[3-(甲酰基氨基)-4-羟基苯基]-2-羟基乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺，N-(叔丁基)-3-(4-{[6-({(2R)-2-[3-(甲酰基氨基)-4-羟基苯基]-2-羟基乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺，N-(叔丁基)-3-(4-{[6-({(2S)-2-[3-(甲酰基氨基)-4-羟基苯基]-2-羟基乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺，N-(叔丁基)-3-(4-{[6-({(2R/S)-2-[3-(甲酰基氨基)-4-羟基苯基]-2-羟基乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺和在2002年10月3日公开的WO02/076933中公开的相关化合物；4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2，6-二氯苄基)氧基]乙氧基}己基)氨基]-1-羟基乙基}-2-(羟基甲基)苯酚和在2003年3月27日公开的WO03/024439中公开的相关化合物；以及他们的药学上可接受的盐。当被使用时，β2-肾上腺素受体激动剂将以治疗有效量存在于药物组合物中。通常，β2-肾上腺素受体激动剂将以足以提供每剂量约0.5μg至约500μg的量存在。
可与本发明化合物联合使用的代表性皮质甾类包括但不限于，甲基强的松龙、强的松龙、地塞米松、丙酸氟替卡松、6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-雄甾烷-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯、6α，9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-17α-丙酰氧基-雄甾烷-1，4二烯-17β-硫代羧酸S(2-氧代-四氢-呋喃-3S-基)酯、倍氯米松酯(例如，17-丙酸酯或17，21-二丙酸酯)、布地缩松、氟尼缩松、莫米松酯(例如糠酸酯)、曲安奈德、罗氟奈德、环索奈德、布替可特丙酸酯、RPR-106541、ST-126等，或其药学上可接受的盐。当被使用时，所述皮质甾类(cortecosteriod)将以治疗有效量存在于药物组合物中。通常，所述甾族消炎剂将以足以提供每剂量约0.05μg至约500μg的量存在。
其它合适的组合包括例如其它消炎药，例如NSAIDs(比如色甘酸钠(sodium cromoglycate)；奈多罗米钠；磷酸二酯酶(PDE)抑制剂(例如茶碱、PDE4抑制剂或混合的PDE3/PDE4抑制剂)；白三烯拮抗剂(例如孟鲁司特)；白三烯合成的抑制剂；iNOS抑制剂；蛋白酶抑制剂，如类胰蛋白酶和弹性蛋白酶抑制剂；β-2整联蛋白拮抗剂和腺苷受体激动剂或拮抗剂(例如腺苷2a激动剂)；细胞因子拮抗剂(例如趋化因子拮抗剂，诸如白介素抗体(αIL抗体)，特别是αIL-4治疗剂、αIL-13治疗剂或其组合)；或细胞因子合成的抑制剂。
例如，可与本发明化合物联合使用的代表性磷酸二酯酶-4(PDE4)抑制剂或者混合的PDE3/PDE4抑制剂包括但不限于，顺式-4-氰基-4-(3-环戊基氧基-4-甲基苯基)环己烷-1-羧酸、2-甲酰甲氧基-4-氰基-4-(3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)环己烷-1-酮；顺式-[4-氰基-4-(3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)环己烷-1-醇]；顺式-4-氰基-4-[3-(环戊基氧基)-4-甲基苯基]环己烷-1-羧酸等或其药学上可接受的盐。其它代表性PDE4或者混合的PDE4/PDE3抑制剂包括AWD-12-281(elbion)；NCS-613(INSERM)；D-4418(Chiroscience和Schering-Plough)；CI-1018或PD-168787(Pfizer)；WO99/16766(kyowaHakko)中公开的苯并二噁茂化合物；K-34(kyowa Hakko)；V-11294A(Napp)；罗氟司特(Byk-Gulden)；WO99/47505(Byk-Gulden)公开的pthalazinone化合物；普马芬群(Byk-Gulden，现在的Altana)；阿罗茶碱(Almirall-Prodesfarma)；VM554/UM565(Vernalis)；T-440(Tanabe Seiyaku)；和T2585(Tanabe Seiyaku)。
可与本发明化合物联合使用的代表性β3-肾上腺素能受体激动剂包括但不限于2-[4-[2-[[(1S，2R)-2-羟基-2-[4-羟苯基)-1-甲基乙基]氨基]乙基]苯氧基]乙酸；2-[2-氯-4-[2-(1S，2R)-2-羟基-2-[4-羟苯基)-1-甲基乙基]氨基]乙基]-苯氧基]乙酸；以及在2003年3月25日授权的美国专利的6,538,152 B1中和在2002年4月23日授权的美国专利No.6,376,707 B1中公开的有关化合物。其它适合的β3-肾上腺素能受体激动剂包括在2002年3月5日授权的6,353,025 B1；以及在2003年9月4日公开的美国专利申请公开号US2003/016679 A1和2003年9月25日公开的美国专利申请公开号US2003/0181726 A1中公开的那些。当被使用时，β3-肾上腺素能受体激动剂将以治疗有效量存在于药物组合物中。一般，β3-肾上腺素能受体激动剂将以足以提供约1mg至约1000mg/天/成人的量存在。本发明的毒蕈碱性受体拮抗剂和β3-肾上腺素能受体激动剂联合给药特别适用于治疗活动过度的膀胱及其它泌尿紊乱。这类化合物，当被同时或顺序给药时，对于平滑肌紊乱(例如活动过度的膀胱)将具有协同效应。
可与本发明化合物联合使用的，本发明化合物以外的代表性毒覃碱拮抗剂(即，抗胆碱能药)包括但不限于，阿托品、硫酸阿托品、氧化阿托品、消甲阿托品、氢溴酸后马托品、氢溴酸茛菪碱(d，l)、氢溴酸东莨菪碱、异丙托溴铵、氧托溴胺、噻托溴胺、乙胺太林、溴化丙胺太林、溴甲辛托品、溴化可利啶、copyrrolate(甘罗溴铵)、碘异丙米特、溴化甲哌佐酯、氯化三乙己苯铵(pathilone)、环苯甲哌甲硫酸盐、盐酸环喷托酯、托吡卡胺、盐酸苯海索、哌仑西平、替仑西平、AF-DX116和美索曲明等或其药学上可接受的盐；或者，对于那些作为盐所列的化合物，替换其药学上可接受的盐。
可与本发明化合物联合使用的代表性抗组胺剂(即，H1-受体拮抗剂)包括但不限于，乙醇胺类，例如马来酸氯苯吡醇胺、富马酸氯马斯汀、盐酸苯海拉明和乘晕宁；乙二胺类，例如马来酸(amleate)吡拉明、盐酸曲吡那敏和柠檬酸曲吡那敏；烷基胺类，例如扑尔敏和阿伐斯汀；哌嗪类，例如盐酸羟嗪、双羟萘酸羟嗪、盐酸苯甲嗪、乳酸苯甲嗪、盐酸氯苯甲嗪和盐酸西替利嗪；哌啶类，诸如阿司咪唑、盐酸左卡巴斯汀、氯雷他定或其descarboethoxy类似物、特非那定和盐酸非索那丁；盐酸氮斯汀；等，或其药学上可接受的盐；或者，对于那些作为盐所列的化合物，替换其药学上可接受的盐。
对于与本发明化合物联合给药的其它治疗剂的适合剂量在约0.05μg/天至约100mg/天的范围内。
因为本发明的化合物是毒蕈碱性受体拮抗剂，所以这样的化合物也用作研究工具，用于调查或研究具有毒蕈碱性受体的生物系统或样品，或用于发现新的毒蕈碱性受体拮抗剂。这样的生物系统或者样品可含有M1、M2、M3、M4和/或M5毒蕈碱性受体。另外，因为本发明的化合物是选择性M2毒蕈碱性受体亚型拮抗剂，这样的化合物特别适用于研究生物系统或者样品中M2受体的选择性拮抗的效果。任何具有毒蕈碱性受体的适当的生物系统或者样品可用于这类可在体外或体内进行的研究。适合这类研究的代表性生物系统或者样品包括但不限于，细胞、细胞提取物、质膜、组织样品、哺乳动物(例如小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗、猪等)等。
在该实施方案中，将含有毒蕈碱性受体的生物系统或者样品与毒蕈碱性受体拮抗量的本发明化合物接触。然后用常规方法和设备，例如放射性配体结合试验和功能试验测定拮抗毒蕈碱性受体的效果。这样的功能试验包括配体介导的细胞内环腺苷酸(cAMP)的改变、配体介导的酶腺苷酸环化酶(其合成cAMP)活性的改变、配体介导的通过受体催化的[35S]GTPγS对GDP的交换，鸟嘌呤核苷5′-0-(γ-硫代)三磷酸(35S]GTPγS)结合到分离的膜中的改变、配体介导的游离胞内钙离子的改变(例如用荧光联动的成像板读数器或得自Molecular Devices，Inc.的FLIPR测量)。本发明的化合物在任何上述功能试验中或类似性质的实验中将拮抗或降低毒蕈碱性受体的活化。本发明化合物的毒蕈碱性受体拮抗量一般将在约0.1纳摩尔至约100纳摩尔的范围内变动。
另外，本发明的化合物可用作研究工具用于发现新的毒蕈碱性受体拮抗剂。在该实施方案中，将一种或一组测试化合物的毒蕈碱性受体结合数据(例如，如通过体外放射性配体置换试验所测定的)与本发明化合物的毒蕈碱结合数据相比较，以鉴别具有大致相等或更强毒蕈碱性受体结合性的测试化合物，如果有这样的化合物的话。作为单独的一个买施方案，本发明的这个方面包括生成比较数据(用适当的试验)和分析测试数据以鉴别目的测试化合物。
除了其它特性，还发现本发明的化合物是M2毒蕈碱性受体活性的强抑制剂。因此，在一个优选方案中，本发明涉及式I化合物，该化合物具有小于或等于100nM的对M2受体亚型的抑制离解常数；优选，小于或等于50nM；以及更优选小于或等于10nM(如通过体外放射性配体置换试验所测定)。
另外，还发现本发明的化合物具有令人惊奇的和意料之外的相对于M3毒蕈碱性受体对M2毒蕈碱性受体的选择性。因此，在另一个优选方案中，本发明涉及式I化合物，该化合物具有至少5的hM3/hM2比值；优选至少10；以及更优选至少20(如通过体外放射性配体置换试验所测定)。在一个实施方案中，hM3/hM2比值在约5至约200；优选约10至约100的范围内。
本发明化合物的这些性质以及所述实用性可用本领域技术人员公知的各种体外和体内试验证明。例如，在下述实施例中更详细地描述了代表性试验。
实施例提供下述合成实施例和生物学实施例用于说明本发明，而不应视为以任何方式限制本发明的范围。在下述实施例中，以下缩写具有以下含义，除非另有陈述。未在下文定义的缩写具有其普遍接受的含义。
AC＝腺苷酸环化酶ACN＝乙腈BSA＝牛血清白蛋白DOC＝叔丁氧基羰基cAMP＝环腺苷酸CHO＝中国仓鼠卵巢cpm＝每分钟计数DCM＝二氯甲烷DIPEA＝二异丙基乙胺DME＝乙二醇二甲醚
DMF＝N，N-二甲基甲酰胺DMSO＝二甲基亚砜dPBS＝杜尔贝科氏磷酸盐缓冲盐水，无CaCl2和MgCl2EDC＝盐酸1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺EDTA＝乙二胺四乙酸EtOAc＝乙酸乙酯FBS＝胎牛血清GDP＝鸟嘌呤核苷5′-二磷酸HEPES＝4-(2-羟乙基)-1-哌嗪-乙磺酸hM1＝人毒蕈碱性受体亚型1hM2＝人毒蕈碱性受体亚型2hM3＝人毒蕈碱性受体亚型3hM4＝人毒蕈碱性受体亚型4hM5＝人毒蕈碱性受体亚型5HOAt＝1-羟基-7-氮杂苯并三唑HPLC＝高效液相色谱Ki＝抑制离解常数MS＝质谱学[3H]NMS＝1-[N-甲基-3H]东莨菪胺甲基氯化物OIS＝氧化震颤素诱导的流涎PMB＝对甲氧基苄基PyBOP＝苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷-鏻六氟磷酸盐TEA＝三乙胺THF＝四氢呋喃TLC＝薄层色谱法TFA＝三氟乙酸VIBC＝体积诱导的膀胱收缩VIBCAmp＝体积诱导的膀胱收缩幅度在下述实施例中报道的所有温度均为摄氏度(℃)，除非另有陈述。
另外，除非另有陈述，试剂、起始原料和溶剂购自商品供应商(例如Aldrich、Fluka、Sigma等)并且使用时没有进一步提纯。
HPLC用Agilient 1100 HPLC或相当的仪器在下示条件下进行HPLC方法A柱Agilent ZorbaxBonus-RP 5μ4.6×250mm检波器波长214nm柱温40摄氏度流速1.0ml/min流动相A＝2％乙腈，98％水，0.1％TFAB＝90％乙腈，10％水，0.1％TFA注射体积5μl运行时间62min梯度2-40％B在A中HPLC方法B柱YMC ODSA 5μ C18 4.6×50mm检测器波长220nm柱温35摄氏度流速4.0ml/min流动相A＝10％甲醇，90％水，0.1％TFAB＝90％甲醇，10％水，0.1％TFA注射体积5μL运行时间5min梯度0-100％B在A中HPLC方法C柱Inertsil ODS-2 C18检测器波长254nm
柱温35摄氏度流速1.0ml/min流动相A＝5％甲醇，95％水，0.1％TFAB＝95％甲醇，5％水，0.1％TFA注射体积5μL运行时间15min梯度0-100％B在A中HPLC方法D柱ACE 5 C18，4.6mm×25cm检测器DAD1，信号＝230nm/10nm，Ref＝360nm柱温45摄氏度流速1.5ml/min流动相A＝20mM TEA(pH 5.65)/乙腈(98∶2；v/v)B＝100mM TEA(pH 5.5)/乙腈(20∶80；v/v)注射体积20μL运行时间38min梯度10-80％B在A中实施例A制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷步骤A-制备(6)-1-苄基-3-(对甲苯磺酰氧基)吡咯烷在氮气下，用20分钟向0摄氏度搅拌的(S)-1-苄基-3-吡咯烷醇(44.3g，0.25摩尔)和1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(33.7g，0.3摩尔)在250ml叔丁基甲醚的溶液中分批加入对甲苯磺酰氯(52.4g，0.275摩尔)。反应混合物在0摄氏度搅拌1小时。除去冰浴，混合物在室温搅拌过夜(20±5小时)。加入乙酸乙酯(100ml)，然后加入饱和的碳酸氢钠水溶液(250ml)。得到的混合物在室温搅拌1小时。分离各层，用饱和的碳酸氢钠水溶液(250ml)；饱和的氯化铵水溶液(250ml)；饱和的氯化钠水溶液(250ml)洗涤有机层；然后用硫酸钠(80g)干燥。滤除硫酸钠，用乙酸乙酯(20ml)洗涤，在真空中除去溶剂，得到78.2g灰白色固体的标题中间体(94％产率，95％纯度，用HPLC方法B测定)。
步骤B-制备(S)-1-苄基-3-(1-氰基-1，1-二苯甲基)-吡咯烷在0摄氏度向搅拌的二苯乙腈(12.18g，61.8mmol)在无水四氢呋喃(120ml)中的溶液中用5分钟加入叔丁醇钾(10.60g，94.6mmol)。反应混合物在0摄氏度搅拌1小时。在0摄氏度向反应混合物一次加入(S)-1-苄基-3-(对甲苯磺酰氧基)-吡咯烷(20.48g，61.3mmol)。移去冷浴，搅拌反应混合物5-10分钟，此时反应混合物变成褐色均匀的溶液。然后在40摄氏度加热反应混合物过夜(20±5小时)。让反应混合物(亮黄色悬浮液)冷却到室温，然后加入水(150ml)。然后在真空中除去大部分四氢呋喃，加入醋酸异丙酯(200ml)。分离各层，有机层用饱和氯化铵水溶液(150ml)、饱和的氯化钠水溶液(150ml)洗涤；然后用硫酸钠(50g)干燥。滤除硫酸钠，用醋酸异丙酯(20ml)洗涤，在真空中除去溶剂，得到23.88g标题中间体浅棕色油(＞99％产率，75％纯度，由HPLC方法B测定，主要污染有过量的二苯乙腈)。
步骤C-制备(S)-3-(1-氰基-1，1-二苯基甲基)吡咯烷将(S)-1-苄基-3-(1-氰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷溶于醋酸异丙酯(ca.1g/10ml)，该溶液与等体积的1N盐酸水溶液混合。分离得到的各层，水层用等体积的醋酸异丙酯萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥然后过滤。在真空中除去溶剂，得到(S)-1-苄基-3-(1-氰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷盐酸盐浅黄泡沫状固体。(注意该盐酸盐也可在步骤B的处理过程中制备)。
向搅拌的(S)-1-苄基-3-(1-氰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷盐酸盐(8.55g，21.98mmol)在甲醇(44ml)中的溶液中加入钯碳(1.71g)和甲酸铵(6.93g，109.9mmol)。将反应混合物加热至50摄氏度搅拌3小时。将反应冷却至室温，加入水(20ml)。用硅藻土衬垫过滤得到的混合物，用甲醇(20ml)洗涤。收集滤液，在真空中除去大部分甲醇。残余物与醋酸异丙酯(100ml)和10％水的碳酸钠(50ml)混合。分离得到的各层，水层用醋酸异丙酯(50ml)萃取。合并有机层，用硫酸钠(20g)干燥。滤除硫酸钠，用醋酸异丙酯(20ml)洗涤。在真空中除去溶剂，得到5.75g标题中间体浅黄色油(99.7％产率，71％纯度，由HPLC测定)。
步骤D-制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)吡咯烷有磁搅拌棒和氮气进口的200ml烧瓶装有(S)-3-(1-氰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷(2.51g)和80％硫酸(19.2ml；用16ml的96％硫酸和3.2ml水预先制备)。然后在90摄氏度加热反应混合物24小时或直到通过HPLC显示起始原料耗尽。将反应混合物冷却到室温，然后倾倒在冰上(约50ml体积)。在搅拌下缓慢地将50％的氢氧化钠水溶液加到冰浴中的混合物中，直至pH为约12。加入二氯甲烷(200ml)并与水溶液混合，此时沉淀出硫酸钠，将其滤除。收集滤液并分离各层。水层用二氯甲烷(100ml)萃取，合并有机层，用硫酸钠(5g)干燥。滤除硫酸钠，用二氯甲烷(10ml)洗涤。在真空中除去溶剂，得到粗产品浅黄色泡沫状固体(约2.2g，86％纯度，由HPLC测定)。
将粗产物在搅拌下溶于乙醇(18ml)中。向该溶液中加入温热的L-酒石酸(1.8g)在乙醇(14ml)中的溶液，得到的混合物搅拌过夜(15±5小时)。将得到的沉淀物过滤分离，得到灰白色固体(大约3.2g，＞95％纯度，由HPLC测定)。将甲醇(15ml)加入该固体，得到的淤浆在70摄氏度搅拌过夜(15小时)。将淤浆冷却到室温，过滤后得到白色固体(约2.6g，＞99％纯度，由HPLC测定)。向该固体加入乙酸乙酯(30ml)和1N的氢氧化钠水溶液(25ml)。混合该混合物直至形成两个明显的层，然后分离各层，水层用乙酸乙酯(20ml)萃取。合并有机层，用硫酸钠(10g)干燥。滤除硫酸钠，在真空中蒸发溶剂得到1.55g标题中间体灰白色泡沫状固体(58％产率；＞99％纯度，由HPLC方法C测定)。
实施例B
制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(7-羟基庚-1-基)吡咯烷在氮气气氛下，向40摄氏度的搅拌的(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷(40g，142.7mmol)和三乙胺(59.6ml，428mmol)在乙腈(1.1L)中的溶液滴加在乙腈(100ml)中的7-溴-1-庚醇(24ml，146mmol)。将反应混合物加热至50摄氏度达9小时。冷却反应混合物，然后减压除去溶剂。将粗残留物溶于二氯甲烷(500ml)，有机层用饱和的碳酸氢钠水溶液(2×300ml)洗涤，然后用水(300ml)和饱和氯化钠水溶液(300ml)洗涤，之后用硫酸镁(10g)干燥。滤除硫酸镁，用二氯甲烷(100ml)洗涤。然后在真空中除去溶剂，得到粗产物，在短柱(二氧化硅)上提纯该粗产物，洗脱剂从19∶1∶0.1到3∶1∶0.1 CH2Cl2/MeOH/NH4OH改变，得到31.35g标题中间体白色固体(56％产率；＞95％纯度，由HPLC方法A确定)。
实施例C制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(7-氧代庚-1-基)吡咯烷在氮气气氛下，在-15摄氏度，向搅拌的(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(7-羟基庚-1-基)吡咯烷(31.00g，78.57mmol)；N，N-二异丙基乙胺(68.4ml，392.8mmol)和二甲亚砜(60.7ml，785.7mmol)在二氯甲烷(780ml)中的溶液中用4 0分钟分批加入三氧化硫吡啶配合物(37.5g，235.71mmol)。在加料期间，反应混合物保持在-10摄氏度和-20摄氏度之间。然后在该温度范围搅拌反应40±10分钟。加入去离子水(300ml)，然后搅拌混合物10分钟。分离有机层，用去离子水(200ml)洗涤，然后用饱和的氯化钠水溶液(200ml)洗涤，有机层然后用硫酸镁(10g)干燥。滤除硫酸镁，用二氯甲烷(50ml)洗涤，在真空中除去溶剂。得到的糊浆用石油醚(2×200ml)洗涤以除去剩余的吡啶和DMSO，得到的白色固体在真空中干燥，得到33.02g标题中间体(98％产率；＞93％纯度，由手性HPLC方法A测定)。
实施例D制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(己-5-炔-1-基)吡咯烷步骤A-制备己-5-炔-1-醛在氮气气氛下，向搅拌的5-己炔-1-醇(10.0g，0.10摩尔)在二氯甲烷(1L)中搅拌的溶液中加入DMSO(71ml，1.0摩尔)，然后加入DIPEA(174ml，1.0摩尔)。反应混合物冷却至-15摄氏度，然后在60分钟内以10g每份加入三氧化硫吡啶配合物(79.6g，0.5摩尔)。反应混合物在-15摄氏度搅拌1小时，然后用TLC检测(30％EtOAc/己烷)，以观察起始原料完全消耗。向反应混合物加入1N盐酸水溶液(1L)，分离有机层，用1N盐酸水溶液(3×500ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(500ml)、盐水(1L)洗涤，用硫酸镁干燥，在真空中减少溶剂，得到标题中间体(注产物是挥发性的，用冷水浴，当蒸发溶剂时移去冷水浴)。
步骤B-制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)-1-(己-5-炔-1基)吡咯烷在室温下，向搅拌的(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷(64.4g，0.23摩尔)、三乙酰氧基硼氢化钠(50.9g，0.24摩尔)和乙酸(13ml，0.23摩尔)在二氯甲烷(511ml)中的溶液中加入己-5-炔-1-醛(26.14g，0.27摩尔)在二氯甲烷(256ml)中的溶液。反应混合物在室温搅拌过夜(大约8小时)，通过加入浓盐酸(30ml)并在室温搅拌1小时将反应混合物淬灭。然后用水(750ml)稀释混合物，用10N的氢氧化钠(18ml)碱化至pH5。分离各层，有机层用1N氢氧化钠(200ml)洗涤。有机层用硫酸镁(10g)干燥；过滤，然后在真空中浓缩，得到67.6g标题中间体黄色胶状固体(83％产率)。
实施例E制备4-甲氧基吡啶-3-醛(carboxaldehyde)在氮气气氛下在室温下将叔丁基锂(90.6ml，154mmol；在戊烷中1.7M)通过套管加入到搅拌的四氢呋喃(380ml)溶液中。反应混合物冷却到-78摄氏度，然后滴加2-溴-1，3，5-三甲苯(11.3ml，74.1mmol)。反应混合物在-78摄氏度搅拌1小时。向-78摄氏度反应混合物滴加4-甲氧基吡啶(5.79ml，57mmol)，在-23摄氏度搅拌得到的混合物3小时。然后将反应混合物再冷却-78摄氏度，加入二甲基甲酰胺(6.62ml，85.5mmol)，在-78摄氏度继续搅拌1小时。在-78摄氏度用饱和的氯化钠水溶液(100ml)缓慢淬灭反应混合物，然后缓慢温热至室温。向反应混合物加入乙醚(200ml)，分离各层。水层用乙醚(2×150ml)萃取，合并的有机层用碳酸钾(20g)干燥。过滤除去碳酸钾，用乙醚(100ml)洗涤，减压除去溶剂。得到的粗4-甲氧基-3-吡啶甲醛用柱色谱(二氧化硅，5∶95乙醇∶乙酸乙酯)提纯，得到4.79g标题中间体黄色固体(61％产率；＞98％纯度，由1HNMR测定)。
分析数据1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.43(s，1H，CHO)，8.87(s，lH，ArH)，8.63(d，1H，J＝6，ArH)，6.92(d，1H，J＝6，ArH)，3.98(s，3H，CH3O)。
实施例F制备2-甲氧基吡啶-3-甲醛用实施例E的方法，并用2-甲氧基吡啶代替4-甲氧基吡啶，制备了标题中间体。
实施例G制备3-甲氧基吡啶-2-甲醛用实施例E的方法，并用3-甲氧基吡啶代替4-甲氧基吡啶，制备了标题中间体。
实施例H制备4-异丙胺基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶一苯甲酸盐步骤A-制备1-苄基-4-异丙基氨基哌啶在室温搅拌4-氨基-1-苄基哌啶(45.8g，0.24摩尔)和丙酮(531ml)的溶液12小时。然后在真空中将反应混合物减少到约150ml。向该混合物加入甲醇(100ml)，得到的混合物用冰/水浴冷却到5摄氏度。然后加入预先在冰/水浴中冷却到5摄氏度的在甲醇(350ml)中的三乙酰氧基硼氢化钠(61.2g，0.29摩尔)，在5摄氏度搅拌该反应混合物0.5小时。移去冰/水浴，反应混合物在室温搅拌2小时，然后在冰/水浴中再冷却到5摄氏度。向该混合物加入浓盐酸(75ml)直到反应混合物的pH值为大约3。搅拌该混合物1小时，然后在真空中浓缩到约600ml，加入1N的盐酸水溶液(200ml)以溶解固体。水层用醋酸异丙酯(400ml)洗涤，分离各层。水层用10N的氢氧化钠水溶液(200ml)调节到pH12，然后加入醋酸异丙酯(600ml)。在室温下搅拌该混合物1小时，然后分离各层，有机层用饱和的氯化钠水溶液(600ml)洗涤，用硫酸钠(80g)干燥。滤除硫酸钠，用乙酸乙酯(20ml)洗涤。在真空中除去溶剂，得到52.0g标题中间体黄色油(95％产率)。
步骤B-制备1-苄基-4-(N-叔丁氧基羰基-N-异丙基氨基)哌啶将1-苄基-4-异丙基氨基哌啶(69.7g，0.30摩尔)在二氯甲烷(200ml)中的溶液在冰/水浴中冷却到5摄氏度。向该溶液加入在二氯甲烷(180ml)中的二叔丁基重碳酸酯(72.0g，0.33摩尔)。在加料期间温度不升高多于5摄氏度。反应混合物在5摄氏度搅拌0.5小时，然后移去冰/水浴。反应混合物搅拌24小时，然后在真空中浓缩。得到的黄色油置于真空下2小时，此时其缓慢结晶，得到98g标题中间体浅黄色针状晶体(＞99％产率)。
步骤C-制备4-(N-叔丁氧基羰基-N-异丙基氨基)哌啶1-苄基-4-(N-叔丁氧基羰基-N-异丙基氨基)哌啶(79.0g，0.24摩尔)在乙醇(140ml)中的溶液用氮气冲洗15分钟。然后将该溶液加到2L Parr烧瓶中，烧瓶含有10％钯碳(15.8g；约50％重量水)在乙醇(100ml)中的混合物，溶液已经用氮气冲洗15分钟。将该反应混合物置于Parr振荡器上在50psi氢气下24小时。反应混合物用硅藻土衬垫过滤，用乙醇洗涤硅藻土衬垫。然后将滤液在真空下浓缩，得到57.0g的标题中间体白色固体(＞99％产率)。
步骤D-制备4-(N-叔丁氧基羰基-N-异丙基氨基)-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶4-(N-叔丁氧基羰基-N-异丙基氨基)哌啶(118g，0.49摩尔)在二氯乙烷(600ml)中的溶液在室温下搅拌1小时，然后加入4-甲氧基吡啶-3-羧酸酯(63.5g，0.46摩尔)。得到的溶液在室温下搅拌2.5小时，然后在冰/水浴中冷却到5摄氏度。加入在二氯乙烷(600ml)的三乙酰氧基硼氢化钠(124g，0.58摩尔)，反应混合物在5摄氏度搅拌15分钟。然后移去冰浴，反应混合物在室温下搅拌4小时。然后将乙酸(30ml)加到反应混合物中，得到的混合物搅拌0.5小时，之后浓缩到其原始体积的一半。在干冰/丙酮浴中冷却该溶液，加入10N的氢氧化钠水溶液(350ml)。搅拌该混合物0.5小时，然后分离有机层，用1N的氢氧化钠水溶液(400ml)洗涤。然后水层用二氯甲烷(400ml)洗涤3次，合并的有机层用硫酸钠(40g)干燥。滤除硫酸钠，用二氯甲烷(100ml)洗涤，合并的有机层在真空中浓缩，得到177g标题中间体黄色油(＞99％产率；74％纯度，由GC测定)。
步骤E-制备4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基哌啶-3-基甲基)哌啶将4-(N-叔丁氧基羰基-N-异丙基氨基)-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶(17.0g，0.047摩尔)在二噁烷(93ml)中的溶液在冰/水浴中冷却到5摄氏度。向该溶液加入浓盐酸(40ml)，那得到的混合物在5摄氏度搅拌15分钟。然后移去冰/水浴，反应混合物搅拌12小时。反应混合物然后在真空中浓缩至干，用二氯甲烷(100ml)稀释，缓慢加入10N的氢氧化钠水溶液(警告剧烈放热)直到pH值为14。搅拌混合物0.5小时，然后分离有机层，水层用二氯甲烷(200ml)洗涤3次。然后分离有机层，用硫酸钠(10g)干燥。过滤除去硫酸钠，有机层在真空中浓缩得到7.8g标题中间体黄色油(65％产率；83％纯度，由GC测定)。
步骤F-制备4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶一苯甲酸盐向装备了机械搅拌器和氮气进口的1L反应烧瓶中加入4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶(45.7g，0.174摩尔)和200ml的MTBE。将得到的混合物加热到50-55摄氏度溶解固体。在50-55摄氏度向该溶液加入苯甲酸(21.3g，0.174摩尔)在100ml MTBE中的溶液(注意可能需要加热以使在MTBE中的苯甲酸溶解)。该混合物在50-55摄氏度搅拌30分钟，然后在室温搅拌16小时。过滤得到的固体，用50ml MTBE洗涤，然后在真空下在40摄氏度干燥16小时，得到54.9g标题中间体白色固体(82％产率；≥99％纯度)。
制备4-异丙基氨基-1-(4-烷氧基吡啶-3-基甲基)哌啶如果需要，4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶的4-甲氧基取代基的甲基可以用以下-般方法改变成其它烷基向1M的4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶在DMF中的溶液加入乙醇钠(2当量)，然后加入无水硫酸钠(10当量)。得到的混合物在80摄氏度加热搅拌15-20小时。然后在氮气下冷却反应混合物到0摄氏度，滴加烷基卤(5-10当量)。得到的混合物在0摄氏度搅拌15分钟，然后在室温下搅拌30-60分钟。然后用水(10倍于反应混合物体积)淬灭反应。水层用醋酸异丙酯(与水的体积相等)萃取。分离各层，有机层用硫酸钠干燥，过滤，然后在真空中除去溶剂，得到所需产物，一般是油。
例如，用该方法制备了以下中间体(a)异丙基-[1-(4-异丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶-4-基]胺1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.39(s，1H)，8.31(d，J＝5.7Hz，1H)，6.70(d，J＝5.7Hz，1H)，4.60(hept，J＝6.0Hz，1H)，3.50(s， 2H)，2.94(hept，J＝6.3Hz，1H)，2.84(br d，J＝12.4Hz，2H)，2.47(ddd，J＝4.2，4.2，10.8Hz，1H)，2.05(ddd，J＝2.4，11.7，11.7Hz，2H)，1.82(brd，J＝12.4Hz，2H)，1.33(d，J＝6.0Hz，6H)，1.1-1.2(m，2H)，1.00(d，J＝6.3Hz，6H)ppm；MS m/z 292.2(对于C17H29N3O预期值为291.43)；
(b)异丙基-[1-(4-正丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶-4-基]胺MS m/z292.2(对于C17H29N3O预期值为291.43)；(c)异丙基-[1-{4-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基甲基}哌啶-4-基]胺MSm/z 296.3(C16H26FN3O预期值为295.40)；和(d)异丙基-[1-{4-(1-溴-1，1-二氟甲氧基)吡啶-3-基甲基}哌啶-4-基]胺MS m/z 292.2(对于C15H22BrF2N3O预计值为378.26)。
另外，上述中间体(d)中的溴取代基可以用下述方法转换为氟取代基，得到异丙基-[1-{4-(三氟甲氧基)吡啶-3-基甲基}哌啶-4-基]胺向异丙基-[1-{4-(1-溴-1，1-二氟甲氧基)吡啶-3-基甲基}哌啶-4-基]胺(215mg，0.57mmol)在氟化氢-吡啶(1ml)中的溶液中，在室温下，加入氧化汞(II)(红色，147.9mg，0.68mmol)。在室温搅拌17小时后，在真空中除去挥发性成分。残留物用甲醇(5ml)稀释，然后过滤。向滤液加入NaBH(OAc)3，过滤除去得到的黑色沉淀。用另外的NaBH(OAc)3重复该步骤直至没有观察到黑色沉淀。然后在真空中除去溶剂，得到的残余物用硅胶色谱法(CH2Cl2/CH3OH/NH4OH水＝1/0.1/0.05)提纯，得到12.3mg标题化合物黄色油(Rf＝0.2)。
分析数据1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.78(d，J＝2.7Hz，1H)，7.54(dd，J＝2.7，7.8Hz，1H)，6.47(br s，1H)，6.38(d，J＝7.8Hz，1H)，3.40(s，2H)，3.20(hept，J＝6.3Hz，1H)，2.81-2.96(m，3H)，2.14(br dd，J＝12.0Hz，2H)，1.89-1.98(m，2H)，1.69(dddd，J＝3.3，12.0，12.0，12.0Hz，2H)，1.23(d，J＝63Hz，6H)ppm；MS m/z318.3(对于C15H22F3N3O预计值为317.35)实施例I制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}哌啶步骤A-制备3-(3-溴丙氧基)丙酸向烧瓶中加入3-溴丙醇(25ml，0.28摩尔)和β-丙内酯(5.0ml，0.07摩尔)，得到的混合物加热到80摄氏度14小时。然后冷却反应混合物到室温，减压除去过量的3-溴丙醇。将粗产物溶于二氯甲烷(300ml)，用1N氢氧化钠(300ml)萃取。水层然后酸化至pH2，用二氯甲烷(300ml)萃取。有机层然后用水(200ml)、盐水(200ml)洗涤，用无水硫酸镁干燥，减压除去溶剂，得到9.4g标题中间体，没有进一步提纯就使用(64％产率)。
分析数据1H NMR(CDCl3)δ3.65(t，2H)，3.52(t，2H)，3.41(t，2H)，2.55(t，2H)，2.11(t，2H).
步骤B-制备3-(3-溴丙氧基)丙酰氯向搅拌的3-(3-溴丙氧基)丙酸(15.2g，72.2mmol)在CCl4(250ml)中的溶液中加入SOCl2(5.5ml，76.0mmol)和DMF(20滴)，让反应混合物在室温下搅拌18小时。减压浓缩反应混合物得到标题中间体，没有进一步提纯就使用。
步骤C-制备N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基3-(溴丙氧基)丙酰胺将来自步骤B的粗3-(3-溴丙氧基)丙酰氯溶于二氯甲烷(250ml)，然后滴加到1-苄基-4-(异丙基氨基)哌啶(16.7g，72mmol)和二异丙胺(11.8ml，86.0mmol)在二氯甲烷(300ml)中的在0摄氏度的溶液中。混合物在0摄氏度搅拌15分钟，然后在室温下搅拌2小时。然后用洗饱和碳酸氢钠、盐水洗涤反应混合物，用硫酸镁干燥，在真空中浓缩，得到29.0g标题中间体(步骤B和C 95％产率)。
分析数据MS m/z 425.3(MH+).
步骤D-制备4-[N-(7-溴-4-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶向搅拌的N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基3-(溴丙氧基)丙酰胺(28.2g，66mmol)在四氢呋喃(300ml)中的溶液中加入BH3-四氢呋喃(100ml，在四氢呋喃中2.0M，200mmol)，反应混合物回流48小时。然后让反应混合物冷却到室温，滴加甲醇直至氢气停止放出。然后减压浓缩混合物，溶于二氯甲烷(500ml)。反应混合物用1N盐酸(500ml)洗涤，然后除去有机层。然后用1N氢氧化钠碱化水层至pH12，用二氯甲烷(500ml)萃取。合并的有机层用水(400ml)、盐水(400ml)洗涤，用无水硫酸镁干燥，减压除去溶剂。得到的粗产物用硅胶色谱法提纯(二氯甲烷/甲醇/氨水9/0.5/0.05)，得到20.5g标题中间体(76％产率)。
分析数据MS m/z 411.4(MH+)。
步骤E-制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-苄基哌啶将4-[N-(7-溴-4-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶(6.0g，15mmol)溶于DMF(100ml)和4-甲基-2-戊酮(300ml)。向该混合物加入碳酸钠(3.2g，30mmol)、3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷(4.91g，18mmol)和碘化钾(250mg，1.5mmol)，得到的混合物加热至110摄氏度达21小时。完成后，反应恢复到室温，减压浓缩，粗产物用硅胶色谱法提纯(二氯甲烷/甲醇/氨水9/1/0.1)，得到6.21g标题中间体(56％产率)。
分析数据MS m/z 611.7(MH+).
步骤F-制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-哌啶向搅拌的4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-苄基哌啶(9.3g，15.0mmol)在乙酸(100ml)中的溶液中加入负载在碳上的Pd(OH)2(0.90g，10％wt/wt)和钯碳(0.90g，10％wt/wt)。然后放空反应容器和充入氢气(3次)。让反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用氮气冲洗。过滤除去催化剂，减压浓缩滤液，得到7.18g标题中间体，没有进一步提纯就使用(92％产率)。
分析数据MS m/z 521.3(MH+)。
实施例J制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}哌啶步骤A-制备N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基2-氯乙酰胺在0摄氏度，向1-苄基-4-(异丙基氨基)哌啶(8g，34.45mmol)和DIPEA(7.2ml，41.3mmol)在200ml二氯甲烷中的混合物中滴加2-氯乙酰氯(3.01ml，37.9mmol)在二氯甲烷(400ml)中的溶液。反应混合物在0摄氏度搅拌15分钟，在室温下搅拌2小时。反应混合物然后用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，在真空中浓缩。得到的残余物用急骤柱色谱法(乙酸乙酯/己烷/三乙胺42.5/56.5/1)提纯，得到5.35g标题中间体粘性油(50％产率)。
分析数据MS309(MH+)。
步骤B-制备N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基2-(4-羟基丁-1-氧基)乙酰胺1，4-丁二醇(16ml，178mmol)与氢氧化钠(970mg，24.3mmol)在叔丁醇(8ml)中回流2小时，此时固体氢氧化钠已经溶解。然后将溶液冷却到室温，滴加N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基2-氯乙酰胺(5.0g，16.2mmol)在叔丁醇(8ml)中的溶液。然后在室温下搅拌反应混合物过夜。减压除去叔丁醇后，残余物溶于二氯甲烷。溶液用碳酸氢钠、水和盐水洗涤。有机层然后用硫酸镁干燥，然后浓缩。残余物用急骤柱色谱法(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵90/9/1)提纯，得到4.73g标题中间体粘性油(81％产率)。
分析数据MS363(MH+)。
步骤C-制备4-[N-(7-羟基-3-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶向N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基2-(4-羟基丁-1-氧基)乙酰胺(4.7g，13mmol)在四氢呋喃(30ml)中的溶液中，在0摄氏度缓慢加入在四氢呋喃(20ml，19.5mmol)中1M的氢化锂铝。反应混合物在室温下搅拌过夜，然后在0摄氏度缓慢加入15％氢氧化钠水溶液淬灭，直至观察到没有气体形成。在室温下搅拌10分钟后，有固体形成和过滤反应混合物，沉淀用四氢呋喃洗涤3次。然后浓缩滤液，残余物溶于二氯甲烷，该溶液用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，在真空中浓缩，得到3.71g标题中间体(82％产率)。
分析数据MS349(MH+)。
步骤D-制备4-[N-(7-溴-3-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶4-[N-(7-羟基-3-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶(3.7g，10.6mmol)用在二氯甲烷中的二溴三苯基膦(11.2g，26.6mmol)处理2小时。反应混合物然后用1N氢氧化钠、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，浓缩得到标题中间体，其没有进一步提纯就使用。
步骤E-制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-苄基哌啶将4-[N-(7-溴-3-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶(来自步骤D)、3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷(3.28g，11.7mmol)和三乙胺(4.5ml，31.9mmol)在乙腈中的混合物回流24小时。减压除去乙腈，将残余物溶于约1至2的pH的1N盐酸。用乙酸乙酯洗涤后(4x)，在0摄氏度，水层用50％氢氧化钠水溶液碱化至约13至14的pH。水层然后用二氯甲烷(4x)萃取，合并的有机层用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，在真空中浓缩。残余物用急骤柱色谱法提纯(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵90/9/1)得到2.08g标题中间体白色固体(32％产率)。
分析数据MS 611(MH+)。
步骤F-制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}哌啶向搅拌的4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-苄基哌啶(2.08g，3.4mmol)在乙酸(30ml)中的溶液中加入负载在碳上的Pd(OH)2(0.20g，10％wt/wt)和钯碳(0.20g，10％wt/wt)。然后放空反应容器和充入氢气(3次)。然后让反应在室温搅拌16小时。然后用氮气冲洗反应容器，过滤除去催化剂。减压浓缩滤液，得到1.69g标题中间体，其没有进一步提纯就使用(95％产率)。
分析数据MS 521(MH+)。
实施例K制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-苄基哌啶步骤A-制备N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基4-氯丁酰胺将4-氯丁酰氯(5.3ml，47.4mmol)在二氯甲烷(400ml)中的溶液在0摄氏度滴加到1-苄基-4-(异丙基氨基)哌啶(10g，43.07mmol)和DIPEA(9.0ml，51.7mmol)在二氯甲烷(200ml)中的混合物中。反应混合物在0摄氏度搅拌15分钟，然后在室温下搅拌2小时。溶液然后用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，在真空中浓缩。残余物用急骤柱色谱法提纯(乙酸乙酯/己烷/三乙胺42.5/56.5/1)，得到5.0g标题中间体粘性油(35％产率)。
步骤B-制备N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基4-(2-羟基乙氧基)丁酰胺在催化量的对甲苯磺酸存在下，将乙二醇(15ml，268mmol)和N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基4-氯丁酰胺(5.0g，14.9mmol)的混合物在140摄氏度加热2小时。然后将反应混合物溶于二氯甲烷，用1N氢氧化钠、碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤溶液；然后用硫酸镁干燥，在真空中浓缩。残余物用急骤柱色谱法提纯(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵90/9/1)，得到2.72g标题中间体粘性油(51％产率)。
步骤C-制备4-[N-(7-羟基-5-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶在0摄氏度，向N-(1-苄基哌啶-4-基)-N-异丙基4-(2-羟基乙氧基)丁酰胺(2.7g，7.5mmol)在四氢呋喃(20ml)中的溶液中缓慢加入在四氢呋喃(11.3ml，11.3mmol)的1M氢化锂铝。反应混合物在室温下搅拌过夜，然后通过在0摄氏度缓慢加入15％氢氧化钠水溶液淬灭，直到没有观察到气体形成。在室温下搅拌10分钟后，形成了固体和过滤反应混合物，沉淀用四氢呋喃洗涤3次。然后浓缩滤液，将残余物溶于二氯甲烷，该溶液用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，在真空中浓缩，得到2.13g标题中间体(82％产率)。
步骤D-制备4-[N-(7-溴-5-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶4-[N-(7-羟基-5-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶(2.0g，5.7mmol)用在二氯甲烷中的二溴三苯基膦(6.1g，14.4mmol)处理2小时。然后反应混合物用1N氢氧化钠、饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，浓缩得到标题中间体，其没有进一步提纯就使用。
步骤E-制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-苄基哌啶将4-[N-(7-溴-3-氧杂庚烷-1-基)-N-(异丙基)氨基]-1-苄基哌啶(来自步骤D)、3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷(1.8g，6.3mmol)和三乙胺(2.4ml，17.3mmol)在乙腈中的混合物回流24小时。减压除去乙腈，将残余物溶于约1至2的pH的1N盐酸。用乙酸乙酯洗涤(4x)后，在0摄氏度用50％氢氧化钠水溶液碱化水层到约13至14的pH。水层然后用二氯甲烷萃取(4x)，合并的有机层用饱和碳酸氢钠、盐水洗涤，用硫酸镁干燥，在真空中浓缩。残余物用急骤柱色谱法提纯(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵90/9/1)，得到1.02g标题中间体白色固体(29％产率)。
实施例L制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(7-氧代庚-1-基)吡咯烷步骤A-制备7，7-二甲氧基庚醛将环庚烯加入到三颈圆底烧瓶中，烧瓶中盛有低含水量的UV-级甲醇(0.5M浓度)。将反应混合物冷却到-78摄氏度，臭氧鼓泡通过45分钟。用氮气冲洗溶液以避免过度氧化。加入对甲苯磺酸(10mol％)，将反应混合物缓慢温热至0摄氏度(2小时总反应时间)。加入过量的固体碳酸氢钠(4.0当量)中和酸，在搅拌混合物15分钟后，加入甲硫醚(2.2当量)。在16小时后，通过在旋转蒸发器上除去溶剂浓缩反应混合物。加入水(10ml/g)，搅拌非均匀的混合物30分钟。粗产物用MTBE(2×20ml/g)萃取，合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，减压浓缩。粗产物用真空蒸馏提纯(观测的b.p.80-85摄氏度，压力约1.0毫米)，得到标题中间体。
步骤B-制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)-1-(7，7-二甲氧基庚烷-1-基)-吡咯烷向装备了机械搅拌器、氮气进口、冷却浴和温度计的三颈50L烧瓶中加入(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷(2.5公斤，8.93摩尔)和二氯甲烷(20L)，搅拌该混合物直到固体溶解。然后冷却反应混合物到0摄氏度，缓慢加入7，7-二甲氧基庚醛(1.71公斤，9.82摩尔)，同时保持反应温度低于5摄氏度。在0至5摄氏度搅拌该反应混合物1小时，然后用30分钟分小份地加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.27公斤，10.72摩尔)，同时保持反应温度低于5摄氏度。然后在室温搅拌反应混合物6小时。之后加入5％碳酸钾水溶液(20L)，同时保持反应温度低于20摄氏度，然后在室温搅拌反应混合物1小时。之后分离各层，有机层用盐水(10L)洗涤，然后用硫酸钠(2公斤)干燥约3小时。将有机层与硫酸钠分离后，减压浓缩有机层至大约10L。然后用硅胶色谱法(40公斤)提纯该混合物，采用以下顺序的洗脱液二氯甲烷(100L)；3％MeOH，97％DCM，如需要；5％MeOH，95％DCM，如需要；和10％MeOH，90％DCM，如需要。然后合并含有所需中间体的级分(Rf0.3；10％甲醇/90％DCM)，在低于30摄氏度的温度浓缩，得到3.3公斤标题中间体。
步骤C-制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)-1-(7-氧杂庚烷-1-基)吡咯烷向装备了机械搅拌器、氮气进口、冷却浴和温度计的三颈50L烧瓶中加入来自步骤B的中间体(3.3公斤，7.25摩尔)和乙腈(15L)。将该混合物冷却到低于10摄氏度，加入1N盐酸水溶液(15L)，同时保持反应温度低于20摄氏度。反应混合物然后在室温下搅拌2至5小时。然后加入二氯甲烷(20L)，将该混合物搅拌30分钟，然后分离。水层以二氯甲烷(2×10L)萃取，合并的有机层用盐水(20L)洗涤，用硫酸钠(4公斤)干燥至少3小时。在将有机层与硫酸钠分离后，在低于25摄氏度的温度减压浓缩有机层至约20L。含大约1.5公斤标题中间体盐酸盐的该溶液，没有进一步提纯被使用。或者，如果需要，可将溶液进一步浓缩，用常规方法提纯得到的残余物。
实施例1合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶方法A向装备了氮气进口的50ml烧瓶加入(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(7-氧杂庚烷-1-基)吡咯烷(2.36g，6.0mmol)、4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶(1.61g，6.1mmol)和二氯甲烷(12ml)。该混合物在室温下搅拌1小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.65g，7.8mmol)，继续在室温搅拌20小时(此时通过HPLC测定，基本上所有的起始吡咯烷化合物已经反应)。然后通过加入6N盐酸水溶液(12ml)淬灭反应，并分离各层。水层用二氯甲烷(12ml)洗涤，分离后，将醋酸异丙酯(40ml)加入水层。然后通过加入10N的氢氧化钠水溶液(或者可以使用浓氢氧化铵)碱化水层至pH14。分离各层，有机层用饱和的氯化钠水溶液(40ml)洗涤；然后用硫酸钠(5g)干燥。滤除硫酸钠，在真空中除去溶剂，得到2.4g粗产物浅黄色泡沫状固体(63％产率；Rf＝0.4，CH2Cl2/MeOH/NH4OH＝88∶10∶2)。粗产物进一步用SiO2色谱法提纯(60g，二氧化硅，CH2Cl2/MeOH/NH4OH＝90∶10∶1(300ml)到85∶15∶1(300ml))。合并适当的级分，得到0.98g标题化合物白色固体(26％产率；98％纯度，由HPLC方法A测定)。
方法B或者，用下述方法制备标题化合物步骤A-合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-2-炔-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3基甲基)哌啶向搅拌的(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)-1-(己-5-炔-1-基)吡咯烷(17.8g，49.4mmol)、低聚甲醛(1.93g，64.2mmol)和4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶(14.3g，54.3mmol)在四氢呋喃(247ml)中的溶液中，在氮气下在55摄氏度加入氯化亚铜(I)(0.978g，9.88mmol)。反应混合物在55摄氏度搅拌5小时，然后减压除去溶剂。将粗残余物溶于二氯甲烷(250ml)，用硅藻土过滤，用二氯甲烷(50ml)洗涤。滤液用5N氢氧化钠(3×100ml)洗涤，用硫酸镁(10g)干燥。然后在真空中除去溶剂，得到29.8g标题中间体浅黄固体(95％产率)。
步骤B-合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶将来自步骤A的炔(28.4g，47mmol)和对甲苯磺酰肼(87.5g，470mmol)溶于DME(700ml)中，然后进行回流(约85摄氏度)。然后以约20ml/小时的速度滴加乙酸钠(77.1g，940mmol)水(470ml)中的溶液，反应混合物连续回流18小时。然后将反应混合物冷却到室温，加入10N氢氧化钠将pH调节到12。分离有机层，水层用乙酸乙酯(2×400ml)萃取。合并的有机层用1N氢氧化钠(2×350ml)洗涤，然后用1N盐酸(2×350ml)萃取。合并的酸性含水萃取物用10N氢氧化钠碱化至pH12，用乙酸乙酯(2×400ml)萃取。合并的有机层用饱和的氯化钠水溶液(400ml)洗涤，用硫酸镁(10g)干燥。滤除硫酸镁，用乙酸乙酯(200ml)洗涤，在真空中除去溶剂，得到标题化合物。
方法C或者，用下述方法制备标题化合物步骤A-制备7，7-二甲氧基庚醛将环庚烯(20.0g，0.208摩尔)加入三颈圆底烧瓶中，烧瓶中装有低含水量的UV-级甲醇(0.5M浓度)。将反应混合物冷却到-78摄氏度，臭氧鼓泡通过45分钟。用氮气冲洗溶液免过度氧化。加入对甲苯磺酸(3.96g，0.021摩尔)，将反应混合物缓慢温热至0摄氏度(2小时总反应时间)。通过加入过量的固体碳酸氢钠(69.9g，0.832摩尔)中和酸，搅拌混合物15分钟后，加入甲硫醚(28.6g，0.46摩尔)。在16小时后，通过在旋转蒸发器上除去溶剂浓缩反应混合物。加入水(10ml/g)，搅拌非均匀的混合物30分钟。粗产物用MTBE(2×20ml/g)萃取，合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，减压浓缩。粗产物用真空蒸馏提纯(观测的b.p.80-85摄氏度，压力约1.0mm)，得到28.95g标题中间体。
步骤B-制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)-1-(7，7-二甲氧基庚烷-1-基)吡咯烷向装备了机械搅拌器、氮气进口、冷却浴和温度计的三颈500ml烧瓶中加入(S)-3-(1-胺甲酰基-1，1-二苯基甲基)吡咯烷(25g，0.089mol)和二氯甲烷(200ml)。将该混合物冷却到约0摄氏度，缓慢加入7，7-二甲氧基庚醛(18.6g，0.107mol)。在加料期间，反应温度保持在5摄氏度或更低。得到的混合物在0-5摄氏度搅拌1小时，然后用30分钟加入三乙酰氧基硼氢化钠(24.6g，0.116mol)。在加入期间，反应温度也保持在5摄氏度或更低。得到的混合物然后在0-5摄氏度搅拌6小时。然后，通过加入5％碳酸钾水溶液(200ml)淬灭反应，同时保持反应温度低于约20摄氏度，得到的混合物在室温搅拌1小时。分离有机层，用盐水(100ml)洗涤，然后用硫酸钠(20g)干燥。然后在真空中浓缩有机层至约100ml体积，该混合物用硅胶柱色谱提纯，用在二氯甲烷中1-10％v/v甲醇的梯度洗脱。将含有所需产物的级分合并，在真空下浓缩，得到28g标题化合物油(72％产率)。
分析数据1HNMR(CDCl3)δ7.44-7.15(m，10H)；5.88(s，2H)；4.33(t，J＝6.7Hz，1H)；3.70-3.58(m，1H)；3.30(s，6H)；3.10-2.92(m，3H)；2.76-2.64(m，1H)；2.61-2.52(m，2H)；2.30(m，1H)；2.20(m，1H)；1.56(m，4H)；1.26(m，7H).
步骤C-制备(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(7-氧杂庚烷-1-基)吡咯烷向装备了机械搅拌器、氮气进口、冷却浴和温度计的三颈500ml烧瓶中加入(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(7，7-二甲氧基庚烷-1-基)吡咯烷(16g，0.036摩尔)和乙腈(100ml)。将该混合物冷却到约10摄氏度，加入100ml 1N的盐酸水溶液，同时保持反应温度在20摄氏度或者更低。得到的混合物在20±5摄氏度搅拌2小时。然后用二氯甲烷(1×200ml和2×100ml)洗涤反应混合物。合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，用硫酸钠(40g)干燥。有机层然后在真空下在约25摄氏度浓缩至约200ml体积。含标题中间体的盐酸盐的该溶液，不经进一步提纯直接用于下一步骤。
步骤D-制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶向装备着机械搅拌器、氮气进口、冷却浴和温度计的三颈500ml烧瓶加入4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶苯甲酸盐(14.1g，0.036摩尔)和来自上述步骤C的(S)-3-(1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-1-(7-氧杂庚-1-基)吡咯烷盐酸盐溶液(200ml)。该混合物在室温搅拌1小时，然后冷却到10至15摄氏度。用30分钟分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(9.3g，0.044摩尔)，得到的混合物在室温搅拌15至20小时。然后将反应混合物冷却到0至10摄氏度，通过加入6N盐酸水溶液(200ml)将反应淬灭，同时保持反应温度在25摄氏度或更低。分离水层，用二氯甲烷(3×100ml)洗涤，然后通过加入浓氢氧化铵水溶液碱化至大约pH12。得到的混合物用二氯甲烷(1×200ml和1×100ml)萃取，合并的有机层用水(100ml)洗涤，在真空下浓缩。将得到的残余物溶于MTBE(250ml)，然后用水(3×100ml)、盐水(100ml)洗涤MTBE溶液，用硫酸钠(30g)干燥后过滤。MTBE溶液然后在真空下浓缩，得到19g标题化合物油(81.5％产率；94.9％纯度，由HPLC方法D测定)。
标题化合物(1g)用硅胶色谱法提纯，用含0.5％浓氢氧化铵二氯甲烷中的3％至10％v/v甲醇的梯度洗脱。合并含有标题化合物的级分，在真空下浓缩，得到0.6g标题化合物油(98.6％纯度，由HPLC方法D测定)。
分析数据1HNMR(CDCl3)δ8.41(s，1H)；8.39(d，J＝5.7Hz，1H)；7.44-7.41(m，2H)；7.33-7.14(m，8H)；6.76(d，J＝5.6Hz，1H)；5.74(s，2H)；3.85(s，3H)；3.52(s，2H)；3.42(m 1H)；3.10-2.78(m，4H)；2.70-2.25(m，8H)；2.10-1.85(m，3H)1.70-152(m，4H)；1.48-1.15(m，10H)；0.97(d J＝6.6Hz，6H)。
标题化合物的二(甲磺酸)盐制备如下向5L烧瓶中加入4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶(593g，0.93摩尔)和1.44L无水乙醇，搅拌混合物以溶解油。然后冷却混合物到0至5摄氏度，在5摄氏度加入142.5g甲磺酸(142.5g，1.48摩尔)在98ml无水乙醇中的溶液。混合物在5至10摄氏度搅拌1小时，然后将它缓慢加入到37.5L的MTBE，在10至15摄氏度搅拌该混合物30分钟。过滤得到的固体，溶于5L蒸馏水。水溶液用活性碳(70g)处理，然后过滤。滤液在-40摄氏度冷冻，冻干72小时，得到481g二(甲磺酸)(79％产率，99.1％纯度，由HPLC测定)。
标题化合物的三(甲磺酸)盐制备如下100ml锥形瓶中装入4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶(3.9g，6.1mmol)和乙腈(32ml)，溶解后，加入水(25ml)和甲磺酸(1.29ml，1.91g，19.9mmol)，使得pH至大约5。然后在干冰/丙酮浴中冷冻溶液，冻干48小时，得到5.5g三(甲磺酸)盐灰白色固体(100％产率；97.4％纯度，由HPLC测定)。
分析数据MS m/z 640.5(MH+).
标题化合物的萘-1，5-二磺酸盐制备如下向100ml烧瓶中加入4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基) 氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶(10.45g，16.33mmol)和甲醇(53ml)。化合物溶解后，将溶液冷却到约10摄氏度，分批加入萘-1，5-二磺酸四水合物(4.37g，15.15mmol)，同时保持反应温度低于10摄氏度。当加料完成，搅拌反应混合物30分钟。然后在0-5摄氏度用2小时将反应混合物缓慢加到异丙醇(530ml)和MTBE(265ml)的混合物中。然后搅拌该混合物1小时，过滤得到的固体，用MTBE(50ml)洗涤。然后在真空下在室温干燥固体5天。在此期间，在第2天和第4天将固体从干燥室去除，用球磨机处理(400rpm，3×2分钟)。该处理得到12g标题盐(80％产率)无定形白色粉末(98.9％纯度，由HPLC测定；65.1％游离碱含量，相对于参考标准)。
分析数据FTIR(cm-1)1671.7(w)，1593.5(w)，1497.6(w)，1291.2(w)，1220.9(m)，1180.3(m)，1030.1(s)；MS m/z 640.8(MH+游离碱)；928.8(MH+游离碱+盐)；C50H65N5O8S2的分析计算值C，63.30；H，7.52；N，7.14；S，6.15。实验值C，63.53；H，7.65；N，7.23；S，6.30。
该盐的萘-1，5-二磺酸与4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶的摩尔比为约0.95至1，由1H NMR测定(萘环质子与吡啶环质子的比)。
如果需要，本发明的萘-1，5-二磺酸盐可用下述淤浆法进一步提纯向4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶的萘-1，5-二磺酸盐(8.0g)加入异丙醇(80ml)。得到的淤浆在室温下搅拌6小时。然后过滤混合物，固体用MTBE(2×40ml)洗涤，然后在真空和氮气气氛下干燥16小时，得到7.8g标题化合物(97.5％回收率，按重量计)。
实施例2合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶向搅拌的4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}哌啶(500mg，0.96mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入4-甲氧基-3-吡啶甲醛(145mg，1.06mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(426mg，1.9mmol)。反应混合物搅拌14小时，然后减压除去溶剂。向得到的混合物加入1∶1的乙酸乙酯/水(1.0ml)，该混合物用反相硅胶色谱提纯(梯度洗脱，乙腈/水)，得到289mg标题化合物(47％产率)。
分析数据MS m/z 642.5(MH+)，Rf1.43(10-70 ACN∶H2O，反相HPLC)。
实施例3合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶向搅拌的4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚烷-1-基]-N-(异丙基)氨基}哌啶(52mg，0.1mmol)在二氯乙烷(1ml)的溶液中加入4-甲氧基-3-吡啶甲醛(13.7mg，0.1mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(24mg，1.05mmol)。反应混合物搅拌14小时，然后减压除去溶剂。向得到的残余物加入1∶1的乙酸/水混合物(1.0ml)，该混合物用反相硅胶色谱提纯(梯度洗脱，乙腈/水)，得到27mg标题化合物(42％产率)。
分析数据MS 642(MH+).
实施例4
合成4-{N[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶向搅拌的4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)-吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(乙基)氨基}哌啶(50.5mg，0.1mmol)在二氯甲烷(1ml)中的溶液中加入2-甲氧基吡啶-3-甲醛(205.7mg，0.15mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(33mg，0.15mmol)。反应混合物搅拌14小时，然后减压除去溶剂。向得到的混合物加入1∶1乙酸/水(1.0ml)，混合物用反相硅胶色谱提纯(梯度洗脱，乙腈/水)，得到标题化合物。
分析数据MS m/z 626.4(MH+)；Rf2.11(2-75 ACN∶H2O，反相HPLC).
实施例5合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-2-基甲基)哌啶用实施例4的方法并用3-甲氧基吡啶-2-甲醛代替2-甲氧基吡啶-3-甲醛，制备标题化合物。
分析数据MS m/z 626.4(MH+)；Rf2.08(2-75 ACN∶H2O，反相HPLC)。
实施例6合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶用实施例4的方法并用4-甲氧基吡啶-3-甲醛代替2-甲氧基吡啶-3-甲醛，制备标题化合物。
分析数据MS m/z 626.4(MH+)；Rf2.04(10-70 ACN∶H2O，反相HPLC)。
实施例7合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶用实施例I和实施例2的方法并用1-苄基-4-(乙基氨基)哌啶代替1-苄基-4-(异丙基氨基)哌啶，制备标题化合物。
实施例36合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-正丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶用实施例1的方法并用4-异丙基氨基-1-(4-正丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶代替4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶，制备标题化合物。在该反应中，在还原烷基化反应期间，将1.2当量的乙酸(基于1.0当量的醛)加入反应混合物。标题化合物用反相HPLC提纯，得到标题化合物的三-三氟乙酸盐。
分析数据MS m/z 668.4(MH+).
实施例37合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-异丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶用实施例1的方法并用4-异丙基氨基-1-(4-异丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶代替4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶，制备标题化合物。在该反应中，在还原烷基化反应期间，将1.2当量的乙酸(基于1.0当量的醛)加入反应混合物。标题化合物用反相HPLC提纯，得到标题化合物的三-三氟乙酸盐。
分析数据MS m/z 668.4(MH+)。
实施例98合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-乙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶步骤A-制备4-氯吡啶在0摄氏度向碳酸氢钾(10.21g，0.102摩尔)水中(50ml)的溶液中加入50ml二氯甲烷。然后分批加入4-氯吡啶盐酸盐(15.0g，0.1mmol)，得到的混合物在0摄氏度搅拌30分钟。分离各层，水层用二氯甲烷(1×30ml)萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，在真空中除去溶剂，得到4-氯吡啶非常浅的黄色油。
步骤B-制备4-氯吡啶-3-甲醛在-78摄氏度向二异丙胺(18.2ml，0.13摩尔)在四氢呋喃(200ml，0.5M)中的溶液中滴加正丁基锂(在己烷中2.5M，52ml，0.13摩尔)。在30分钟后，加入在四氢呋喃(10ml)中的得自步骤A的4-氯吡啶，反应混合物在-78摄氏度搅拌1小时。向-78摄氏度得到的红褐色溶液加入N，N-二甲基甲酰胺(12.4ml，0.16摩尔)。用15小时让反应混合物缓慢温热至室温，然后用水(150ml)淬灭反应。在真空中除去四氢呋喃，水层用醋酸异丙酯(3×150ml)萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，在真空中除去溶剂，得到粗产物棕色油。该残余物用硅胶色谱法提纯(用在EtOAc中的5％EtOH)，得到3.97g标题中间体黄色固体(Rf＝0.6，28％产率)。
分析数据1H NMR(CDCl3，300MHz)δ10.48(s，1H)，9.02(s，1H)，8.65(d，J＝5.6Hz，1H)，7.41(d，J＝5.6Hz，1H)；LC-MS m/z 141.9(对于C4H6ClNO的预期值141.55).
步骤C-制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-氯吡啶-3-基甲基)哌啶在室温搅拌4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}哌啶(0.56g，1.085mmol)和4-氯吡啶-3-甲醛(169mg，1.19mmol)在1，2-二氯乙烷(11ml，0.1M)中的溶液2小时。加入乙酸(75μL，1.30mmol)，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(299mg，1.41mmol)。在64小时后，通过加入10％碳酸钠水溶液(10ml)淬灭反应。分离各层，水层通过加入1N氢氧化钠水溶液碱化直至pH为约13至14。然后用二氯甲烷(2×15ml)萃取水层，合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，在真空中除去溶剂。得到的残余物(黄色油)用硅胶色谱法提纯(用CH2Cl2/CH3OH/含水NH4OH＝84/15/1)，得到0.46g标题中间体非常浅的黄色稠油(Rf＝0.2；66％产率)。
分析数据LCMS m/z 644.3(对于C39H54ClN5O的预期值644.34).
步骤D-制备4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯基甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-乙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶将金属钠(109mg，4.74mmol)加入乙醇(3ml)，形成乙醇钠在乙醇中的溶液。将该溶液加入4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基)-N-(异丙基)-氨基}-1-(4-氯吡啶-3-基甲基)哌啶(304.6mg，0.47mmol)在乙醇(0.2ml)中的溶液中。将得到的反应混合物加热至80摄氏度，加入另一部分在乙醇中的乙醇钠(3ml)(总体积约6ml)。通过MS监测反应，当不再检测到起始原料时，在真空中除去大部分乙醇。用RP-HPLC提纯得到的残余物，得到213mg标题化合物白色无定形固体。
分析数据1H NMR(CD3OD，300MHz)δ8.79(s，1H)，8.75(d，J＝6.9Hz，1H)，7.64(d，J＝6.9Hz，1H)，7.29-7.42(m，10H)，4.48(q，J＝7.2Hz，2H)，4.37(s，2H)，3.30-3.99(m，7H)，2.82-3.21(m，7H)，1.88-2.63(m，7H)，1.52-1.74(m，4H)，1.56(t，J＝7.2Hz，3H，重叠)，1.28-1.42(m，12H)ppm；LC-MS m/z 654.5(对于C41H59N5O2的预期值为693.94).
实施例99合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-三氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶用实施例1的方法并用4-异丙基氨基-1-(4-异丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶代替4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶，制备标题化合物。在该反应中，在还原烷基化反应期间，将1.2当量的乙酸(基于1.0当量的醛)加入反应混合物。标题化合物用反相HPLC提纯，得到那标题化合物的三-三氟乙酸盐。
分析数据MS m/z 672.4(MH+)。
实施例115
合成4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-[4-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基甲基]哌啶用实施例1的方法并用4-异丙基氨基-1-[4-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基甲基]哌啶代替4-异丙基氨基-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶，制备标题化合物。在该反应中，在还原烷基化反应期间，将1.2当量的乙酸(基于1.0当量的醛)加入反应混合物。标题化合物用反相HPLC提纯，得到标题化合物的三-三氟乙酸盐。
分析数据MSm/z 694.4(MH+).
用在此所述的方法，可制备以下化合物实施例8-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例9-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例10-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例11-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例12-4-{N[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例13-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例14-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；
实施例15-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例16-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例17-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例18-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例19-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例20-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基)-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例21-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例22-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例23-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例24-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例25-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例26-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例27-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例28-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例29-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例30-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚烷-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例31-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例32-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例33-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例34-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例35-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例38-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-环丙基-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例39-4-{N[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-{4-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例40-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-异丁氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例41-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2，4-二甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例42-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-氟-4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例4 3-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-氯-4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例44-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲基-4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例45-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；
实施例46-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例47-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-2-基甲基)哌啶；实施例48-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-2-基甲基)哌啶；实施例49-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-2-基甲基)哌啶；实施例50-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-4-基甲基)哌啶；实施例51-4-(N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-4-基甲基)哌啶；实施例52-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-4-基甲基)哌啶；实施例53-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例54-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例55-4-{N[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例56-4-{N[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；
实施例57-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例58-4-{N[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例59-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例60-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例61-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例62-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例63-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例64-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例65-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例66-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例67-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例68-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例69-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例70-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例71-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例72-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例73-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例74-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例75-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例76-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例77-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例78-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例79-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例80-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例81-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例82-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例83-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例84-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例85-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；
实施例86-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例87-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例88-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例89-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例90-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例91-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例92-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例93-4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例94-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例95-4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例96-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-叔丁氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例97-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例100-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-二氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例101-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基-2-三氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例102-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-二氟甲氧基-4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例103-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲氧基-4-三氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例104-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-二氟甲氧基-2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例105-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-{2，4-二(三氟甲氧基)吡啶-3-基甲基}哌啶；实施例106-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-{2，4-二(二氟甲氧基)吡啶-3-基甲基}哌啶；实施例107-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-乙氧基-4-三氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例108-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-乙氧基-4-二氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例109-4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2，4-二乙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例110-4-{N-{7-(3-(S)-1-(N-甲基氨甲酰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例111-4-{N-[7-(3-(S)-1-(N，N-二甲基氨甲酰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例112-4-{N-[7-(3-(S)-1-(N，N-二乙基氨甲酰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例113-4-{N-[7-(3-(S)-1-(哌啶-1-基羰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例114-4-{N-[7-(3-(S)-1-(吗啉-4-基羰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；和实施例116-4-{N-[7-(3-(R)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；实施例117-4-{N-[7-(3-(R)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-乙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶。
实施例118放射性配体结合试验
A.从表达hM1、hM2、hM3和hM4毒蕈碱性受体亚型的细胞的膜制备分别稳定地表达克隆的人hM1、hM2、hM3和hM4毒蕈碱性受体亚型的CHO(中国仓鼠卵巢)细胞系在培养基中生长至接近融合，所述培养基由HAM′s F-12构成，补充了10％FBS(胎牛血清)和250μg/ml遗传霉素。细胞在5％CO2、37摄氏度的保温箱中生长，用dPBS+2mM EDTA提起。在650xg离心5分钟收集细胞，细胞团粒或在-80摄氏度冷冻储存，或立即制膜。为了制备膜，将细胞团粒再悬浮在溶胞缓冲液中，用PolytronPT-2100组织分裂仪(Kinematica AG；20秒×2裂解)均化。在4摄氏度将粗膜在40000×g离心15分钟。然后用重悬浮缓冲剂再悬浮膜团粒，然后用Polytron组织分裂仪再次均化。用Lowry，O.等人，(1951)，Journal of Biochemistry193，265的方法测定膜悬浮液的蛋白质浓度。在-80摄氏度等分冷冻储存膜。制备的hM5受体膜的等分样直接从Perkin Elmer购买，并在-80摄氏度储存直至使用。
B.对毒蕈碱性受体亚型hM1、hM2、hM3、hM4和hM5的放射性配体结合试验放射性配体结合试验在96-孔微量滴定板上以100μL的总试验体积进行。每种含有各自毒覃碱性亚型的膜在试验缓冲剂中稀释到下述特定的目标蛋白质浓度(ug/孔)对于hM1为10μg，对于hM2为10-15μg，对于hM3为10-20μg，对于hM4为18-20μg，对于hM510-12μg。在试验板加料前用Polytron组织分裂仪将膜简单地均化(10秒)。测定放射性配体KD值植的饱和结合研究使用浓度范围为0.001nM至20nM的1-[N-甲基-3H]氯代甲基东莨菪碱([3H]NMS)(TRK666，84.0Ci/mmol，Amersham PharmaciaBiotech，Buckinghamshire，England)进行。测定试验化合物Ki值的置换试验用1nM的[3H]NMS和11个不同的试验化合物浓度进行。试验化合物最初在稀释缓冲液中溶解达到400μM的浓度，然后用稀释缓冲液连续释缓5x达到10pM-100μM的最终浓度。向试验板加料的顺序和体积如下25μl放射性配体、25μl稀释的试验化合物和50μl膜。试验板在37摄氏度培养60分钟。通过用预先在1％BSA中处理过的GF/B玻璃纤维过滤板(PerkinElme Inc.，Wellesley，MA)快速过滤终止结合反应。滤板用清洗缓冲剂(10mM HEPES)清洗3次，以除去未结合的放射性。将板空气干燥，向每孔加入50μL Microscint-20液体闪烁液(PerkinElmer Inc.，Wellesley，MA)。然后将板在PerkinElmer Topcount液体闪烁计数器(PerkinElmer Inc.，Wellesley，MA)中计数。通过用GraphPad Prism软件包(GraphPad Software Inc.，San Diego，CA)使用一位点竞争模型的非线性回归分析分析结合数据。试验化合物的Ki值从观察到的IC50值和放射性配体的KD值用Cheng-Prusoff方程式(Cheng Y；PrusoffWH.(1973)Biochemical Pharmacology，22(23)3099-108)计算。将Ki值转化为pKi值以确定几何平均数和95％置信区间。然后将这些简明的统计数字转换回Ki值用于数据报告。
在该试验中具有越低的Ki值的试验化合物对于毒蕈碱性受体具有越高的结合亲合性。在该实验中测试的本发明的化合物对于hM2具有的Ki值范围是约200nM至小于1nM；典型地为约100nM至小于1nM。另外，在该试验中测试的本发明化合物具有约5至大于50；典型地大约20至大于50的hM3/hM2比。例如，实施例1的化合物具有对于hM2小于1nM的Ki值，hM3/hM2比大于40。
因此，在该试验中发现本发明的化合物与hM2受体亚型强结合，并且相对于hM3受体亚型而言，其对hM2受体亚型具有更高的结合亲合力。
实施例119毒蕈碱性受体功能的效价试验A.激动剂介导的cAMP蓄积的抑制的阻断在这个试验中，通过测量试验化合物阻断氧化震颤素抑制在表达hM2受体的CHO-K1细胞中毛喉素介导的cAMP蓄积的能力测定试验化合物功能效力。
cAMP试验以放射免疫测定形式进行，按照厂家的指导，使用采用125I-cAMP的烁(Flashplate)腺苷酸环化酶活化试验体系(NEN SMP004B，PerkinElmer Life Sciences Inc.，Boston，MA)。
在5％二氧化碳、37摄氏度保温箱中，在培养基中稳定表达克隆的人M2毒蕈碱性受体的CH0-K1细胞生长至接近融合，所述培养基由HAM′sF-12构成，补充了10％FBS(胎牛血清)和250μg/ml遗传霉素。在试验当天，细胞用dPBS清洗一次，然后用胰蛋白酶提起。分离的细胞洗涤两次，采用在50ml dPBS中以650×g离心5分钟。然后将细胞团粒再悬浮在10mldPBS中，细胞用Coulter Z1 Dual颗粒计数器(Beckman Coulter，Fullerton，CA)计数。细胞再次以650×g离心5分钟，然后再悬浮在刺激缓冲剂中达到1.6×106-2.8×106细胞/ml的试验浓度。
最初将测试化合物溶解在稀释缓冲剂(dPBS，补充了1mg/ml牛血清白蛋白(0.1％))中达到浓度400μM，然后用稀释缓冲剂连续稀释至最终摩尔浓度为1E-4M到1E-10M。用类似方式稀释氧化震颤素。
为了测定腺苷酸环化酶(Ac)活性的氧化震颤素抑制，将25μL的毛喉素(稀释在dPBS中的25μM最终浓度)、25μL稀释的氧化震颤素和50μL细胞加入激动剂试验孔中。为了测定试验化合物阻断氧化震颤素抑制的AC活性的能力，将25μL毛喉素和氧化震颤素(为25μM和5μM的最终浓度，稀释在dPBS中)、25μl稀释的试验化合物和50μl细胞加入到剩余的试验孔中。
反应在37摄氏度培养10分钟，通过加入100μL冰冷的检测缓冲剂停止。将板密封，在室温培养过夜，次日早晨在PerkinElmer TopCount液体闪烁计数器(PerkinElmer Inc.，Wellesley，MA)上计数。如厂家的用户手册所述，基于对样品和cAMP标准品观察的计数计算产生的cAMP的量。通过用GraphPad Prism软件包(GraphPad Software，Inc.，SanDiego，CA)，使用非线性回归、一位点竞争方程的非线性回归分析分析数据。用Cheng-Prusoff方程计算Ki，分别使用氧化震颤素浓度一反应曲线的EC50和氧化震颤素试验浓度作为KD和[L]。将Ki值转化为pKi值以确定几何平均数和95％置信区间。然后将这些简明的统计数字转化回Ki值用于数据报告。
一般，在该试验中测试的本发明化合物对于在表达hM2受体的CHO-K1细胞中毛喉素介导的cAMP蓄积的氧化震颤素抑制的阻断具有小于约100nM的Ki。例如，实施例1的化合物具有小于约1nM的Ki。
B.激动剂介导的GTPγ[35S]结合的阻断在本试验中，通过在表达hM2受体的CHO-K1细胞中测定试验化合物阻断氨甲酰胆碱刺激的GTPγ[35S]结合的能力确定试验化合物的效价。
稳定表达hM2毒蕈碱性受体的CHO-K1细胞在培养基中生长，所述培养基由Hams F-12培养基构成，补充了10％胎牛血清和500μg/ml的遗传霉素(G-418)。细胞在5％CO2、湿润的保温箱中在37摄氏度培养。细胞成长至融合，用dPBS+2mM EDTA收获，通过在250×g离心10分钟成团。
将来自离心团粒的细胞再悬浮在均化缓冲剂(10mM HEPES，10mMEDTA，pH值7，4摄氏度)中。然后用Polytron PT-2100组织分裂仪(Kinematica AG)均化细胞6次，3秒裂解。在4摄氏度，在40000×g将粗膜成团15分钟。最后将膜再悬浮在试验缓冲剂(10mM HEPES，100mMNaCl，10mMMgCl2，pH 7.4，37摄氏度)中，然后在-80摄氏度冷冻。
在使用时，将膜解冻，然后在试验缓冲剂中稀释，达到最后的靶组织浓度7μg蛋白质每孔。用Polytron PT-2100组织分裂仪将膜简单地均化，然后加入试验板。
由激动剂氨甲酰胆碱刺激的GTPγ[35S]结合的EC90值(对于90％最大响应的有效浓度)在下述各个实验中进行测定将25μl的5x氨甲酰胆碱工作储备溶液、25μl含GTPγ[35S]和GDP的试验缓冲剂、25μl膜和25μl试验缓冲剂转移到96-孔微量滴定板上。GTPγ[35S]的最终浓度为0.07nM，GDP的最终浓度为3μM。然后将试验板在37摄氏度培养60分钟，然后过滤。
为了测定试验化合物抑制氨甲酰胆碱刺激的GTPγ[35S]结合的能力，将下述试剂加入96孔板的各孔25μl含有GTPγ[35S]和GDP的试验缓冲剂、25μl稀释的试验化合物(如上所述制备的)和25μl表达hM2受体的CHO细胞膜。板在37摄氏度预培养15分钟。在预保温期后，25μL氨甲酰胆碱以当天更早前测定的EC90值的终浓度加到各个板上。然后在37摄氏度再培养试验板60分钟。
在60分钟氨甲酰胆碱培养期后，用0.5％牛血清清蛋白预先处理的玻璃纤维GF/B filtermats采用PerkinElmer 96-孔采集机过滤试验板。将板用冰冷的清洗缓冲剂漂洗3×3秒，然后在空气中或者在真空中干燥。将Microscint-20闪烁液(40ul)加入各孔，将各个板密封，在TopCount(PerkinElmer)闪烁计数器上测定放射性。
试验化合物效价(IC50)用迭代曲线拟合法(GraphPad Prism 3.0软件；单一位点竞争曲线)进行测定。测试化合物的抑制离解常数(Ki)用Prism程序进行测定，考虑激动剂氨甲酰胆碱浓度和对于在相同中的试验中测定50％响应的有效浓度(EC50)。
一般，在该试验中测试的本发明化合物对于氨甲酰胆碱-介导的GTPγ[35S]结合的阻断具有小于约100nM的Ki。例如，实施例1的化合物具有小于约1nM的Ki。
在这些试验中具有越低Ki值的试验化合物，是越有效的对hM2毒蕈碱性受体亚型的拮抗剂。因此，这些试验证明本发明的化合物是人M2受体亚型的强功能拮抗剂。
实施例120体内大鼠膀胱试验称重200至300g的雌性Sprague-Dawley大鼠(Harlan，Indianapolis，IN)用尿烷麻醉(1.5g/kg，s.c.，Sigma，St.Louis，MO)，需要时补充0.25g/kg，s.c.尿烷。尿烷以0.25g/ml的浓度给药。
通过剃光大鼠的颈部和腹部，然后用酒精擦巾洗净准备大鼠用于手术。首先，在腹面进行切口。分离并结扎股静脉放置静脉内导管。在结扎近端的静脉做一个小切口，由此插入装满D5W的导管(微量-Renathane导管，0.30mm ID×0.64mm OD，Becton Dickinson，Sparks，MD)，就地用4.0丝缝线(Ethicon，Johnson and Johnson，Somerville NJ)固定。同样地，将导管插入股动脉以测定心血管参数。通过分离气管进行气管切开术，然后在两个气管软骨环之间设置一个小孔。将PE205导管(1.57mm ID×2.08mm OD，Becton Dickinson，Sparks，MD)向着肺部插入气管中。颈部切口用9mm创伤夹封闭，将导管和气管导管远端暴露。
然后，在下腹部的皮肤和肌肉层做3cm中线矢状(sagital)切口。分离膀胱和输尿管，用组织钳将其暴露。结扎输尿管，隔断通向膀胱的远端。经尿道向膀胱插入PE 50泵的导管(0.58mm ID×0.965mm OD，Becton Dickinson，Sparks，MD)。插管与微输液泵连接，通过压力转感器(Argon，Athen，TX)将盐水输注入膀胱。插管就地用荷包口缝术固定(4.0丝缝线)。为了确保密封，插管用2.0丝缝线系在外部尿道口扎紧。在将膀胱放回腹膜腔后，人工排空膀胱，使得内容物流出直至膀胱排空。切口用9毫米创伤夹封闭。
在外科准备后，以恒定速率200μl/分钟用盐水充盈膀胱5分钟，或直至膀胱压力平均超过30毫米汞柱。接着，以5μl/分钟的保持输注充盈膀胱。当观察到有节奏的体积诱导的膀胱收缩(VIBC′s)时，将保持输注调节为2-5μl/分钟。仅将显示有相似峰高的节奏膀胱收缩大鼠用于实验。在60分钟内没有显示该特征的动物用CO2窒息处死。
在保持输注期间，一旦观察到稳定的有节奏的VIBC′s持续至少30分钟，就将载体(D5W)静脉内注入(1ml/kg)，记录15分钟VIBC幅度的改变(VIBCAmp)。然后给予试验化合物静脉内剂量，记录15分钟VIBCAmp的改变。然后静脉内给药阿托品(0.1mg/公斤)(1ml/公斤)作为阳性对照，再记录15分钟VIBCAmp和数据。在该模型中测试了以半对数增量的各试验化合物的至少4个剂量。
或者，在载体之后，以15分钟间隔给予试验化合物增加的累积静脉内剂量(1ml/公斤)，记录15分钟ⅥBCAmp的变化。以半对数的增量给予了测试化合物至少以4个剂量。
在试验化合物和阿托品给药后5-15分钟期间测定了平均VIBCAmp并将其从给载体后5-15分钟期间的平均VIBCAmp中减去，得到测试化合物或阿托品诱导的VIBCAmp变化。试验化合物的抑制效果被归一化成阿托品响应，得到的剂量-响应曲线用四参数逻辑方程拟合，得到ID50(产生50％最大响应所需剂量)的估计值。
在该试验中具有越低ID50的试验化合物对减少峰值膀胱收缩压力越有效。在本试验中，实施例1的化合物具有小于或等于约0.1mg/公斤的ID50值。
实施例121体内大鼠唾液分泌试验称重200至300g的雌性Sprague-Dawley大鼠用尿烷麻醉(1.5g/公斤，s.c.，Sigma，St.Louis，MO)，如果需要，补充0.25g/kg，s.c.尿烷。尿烷以0.25g/ml的浓度给药。
以倾斜位置(20度角)体位(头冲下)将大鼠放在加热的毯子上，其背侧接触毯子。将棉签至于大鼠嘴中。通过尾静脉将试验化合物或载体静脉给药。在5分钟后，将氧化震颤素(1.0mg/公斤)皮下给药。弃去棉签，用一个预先称重的棉签代替。然后收集唾液10分钟，之后拿出棉签，再次称重，确定唾液排出量。剂量-响应曲线用四参数逻辑方程拟合，得到ID50(产生50％最大响应所需剂量)的估计值。
在该试验中具有越高ID50的试验化合物，对唾液分泌的影响越小。在该试验中，实施例1的化合物具有大于或等于约0.9mg/公斤的ID50值。
通过比较在大鼠膀胱试验和大鼠唾液分泌试验中测定的ID50值，计算了试验化合物体内膀胱/唾液分泌选择性比。意外地，发现本发明的化合物是膀胱选择性的。例如，在本试验中，实施例1的化合物具有大于20的ID50膀胱/选择性比。相反，已知的毒蕈碱性受体拮抗剂奥昔布宁和tolterodine分别在本实验中具有约1.4和4.8的ID50膀胱/唾液分泌选择性比。
虽然已经参照具体的实施方案描述了本发明，但是本领域的技术人员应理解到，可以进行多种变化和取代等价而不背离本发明的精神和范围。另外，可进行许多改进，使特定情况、材料、物质的组合、加工、一个或多个加工步骤适应于本发明的目的、精神和范围。所有这样的改进被认为是在所附的权利要求的范围内。另外，在此引用的所有出版物、专利和专利文件整体包括在此作为参考，如同其已经逐一被引用参考。
权利要求
1.式I化合物 其中W、X、Y和Z独立地选自CH、CR4、N和N→O；条件是W、X、Y和Z中的至少一个且不超过两个是N或N→O；R1是式(a)基团-(CH2)a-(O)b-(CH2)c-(a)其中在式(a)中的各个-CH2-基团和式I中在哌啶氮原子和含W、X、Y和Z的环之间的-CH2-基任选被独立地选自C1-2烷基和氟的1或2个取代基取代；其中各个烷基任选被1至3个氟取代基取代；R2选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、-CH2-R5和-(CH2)x-R6；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各R3独立地选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、-CH2-R7和-(CH2)y-R8；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各R4独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、-OR3和卤代；或两个相邻的R4基相连形成C3-6亚烷基、-O-(C2-4亚烷基)-、-O-(C1-4亚烷基)-O-、-(O)C-CH＝CH-或-CH＝CH-C(O)-；或当Z是CR4时，-OR3和R4相连形成-O-(C2-5亚烷基)-或-O-(C1-5亚烷基)-O-；其中各烷基、亚烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各R5和R7独立地选自C3-5环烷基、C6-10芳基、-C(O)(C6-10芳基)、C2-9杂芳基、-C(O)(C2-9杂芳基)和C3-6杂环基；其中环烷基任选被1至5个氟取代基取代；并且芳基、杂芳基和杂环基任选被1至3个取代基取代，所述取代基独立地选自Rk以及芳基和杂芳基任选进一步被苯基取代，其中苯基任选被独立选自Rk的1至3个取代基取代；各R6和R8独立地选自-OH、-OR9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-C(O)R9、C3-5环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C3-6杂环基；其中环烷基任选被1至5个氟取代基取代；和芳基、杂芳基和杂环基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各R9独立地选自C1-4烷基、C3-5环烷基、C6-10芳基和C2-9杂芳基；其中烷基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；芳基和杂芳基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各Ra和Rb独立地选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-6环烷基、氰基、卤代、-ORf、-SRf、-S(O)Rf、-S(O)2Rf和-NRgRh；或两个相邻的Ra基或两个相邻的Rb基相连形成C3-6亚烷基、-(C2-4亚烷基)-O-或-O-(C1-4亚烷基)-O-；其中各烷基、亚烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各Rc和Rd独立地选自C1-4烷基和氟代；其中各烷基任选被1至5个氟取代基取代；各Re独立地选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C3-6杂环基-、-CH2-Ri和-CH2CH2-Rj；或两个Re基都与它们所连接的N原子一起形成C3-6杂环基；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；和各芳基、杂芳基和杂环基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各Rf独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基和C3-6环烷基；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代；各Rg和Rh独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基和C3-6环烷基；或Rg和Rh与它们所连接的N原子连接在一起形成C3-6杂环基；其中各烷基、烯基、炔基和环烷基任选被1至5个氟取代基取代，以及杂环基任选被1至3个独立选自C1-4烷基和氟的取代基取代；各Ri独立地选自C3-6环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C3-6杂环基；其中芳基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各Rj独立地选自C3-6环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C3-6杂环基、-OH、-O(C1-6烷基)、-O(C3-6环烷基)、-O(C6-10芳基)、-O(C2-9杂芳基)、-S(C1-6烷基)、-S(O)(C1-6烷基)、-S(O)2(C1-6烷基)、-S(C3-6环烷基)、-S(O)(C3-6环烷基)、-S(O)2(C3-6环烷基)、-S(C6-10芳基)、-S(O)(C6-10芳基)、-S(O)2(C6-10芳基)、-S(C2-9杂芳基)、-S(O)(C2-9杂芳基)和-S(O)2(C2-9杂芳基)；其中各烷基任选被1至5个氟取代基取代；和各芳基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；各Rk独立地选自C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、氰基、卤代、-ORf、-SRf、-S(O)Rf、-S(O)2Rf和-NRgRh；或两个相邻的Rk基相连形成C3-6亚烷基、-(C2-4亚烷基)-O-或-O-(C1-4亚烷基)-O-；其中各烷基、亚烷基、烯基和炔基任选被1至5个氟取代基取代；a是2至7的整数；b是0或1；c是2至7的整数；条件是a+b+c等于7、8或9；m是0至3的整数；n是0至3的整数；p是1或2；q是0至4的整数；r是0至4的整数；x是2至4的整数；y是2至4的整数；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
2.根据权利要求1的化合物，其中R1选自下述基团-(CH2)7-，-(CH2)8-，-(CH2)9-，-(CH2)2-O-(CH2)4-，-(CH2)2-O-(CH2)5-，-(CH2)2-O-(CH2)6-，-(CH2)3-O-(CH2)3-，-(CH2)3-O-(CH2)4-，-(CH2)3-O-(CH2)5-，-(CH2)4-O-(CH2)2-，-(CH2)4-O-(CH2)3-，-(CH2)4-O-(CH2)4-，-(CH2)5-O-(CH2)2-，-(CH2)5-O-(CH2)3-和-(CH2)6-O-(CH2)2-。
3.根据权利要求2的化合物，其中R1是-(CH2)7-、-(CH2)8-、-(CH2)9-、-(CH2)3-O-(CH2)3-或-(CH2)4-O-(CH2)4-。
4.根据权利要求3的化合物，其中R1是-(CH2)7-。
5.根据权利要求1至3任一项的化合物，其中R2是C1-4烷基；其中烷基任选被1至3个氟取代基取代。
6.根据权利要求5的化合物，其中R2选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基和异丁基。
7.根据权利要求1至3任一项的化合物，其中R2是-CH2-R5。
8.根据权利要求7的化合物，其中R2选自下述基团(a)-CH2-(C3-5环烷基)，其中环烷基任选被1至3个氟取代基取代；(b)-CH2-(苯基)，其中苯基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；(c)-CH2-(萘基)，其中萘基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；(d)-CH2-(联苯基)，其中联苯基的各个苯环任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；(e)-CH2-(吡啶基)，其中吡啶基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；和(f)-CH2C(O)-(苯基)，其中苯甲酰甲基的苯环任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代。
9.根据权利要求8的化合物，其中R2选自下述基团环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、苄基、4-氰苄基、4-甲基苄基、4-三氟甲氧基苄基、4-二氟甲氧基苄基、4-硫代甲氧基苄基、4-甲磺酰基苄基、4-叔丁基苄基、4-苯基苄基、吡啶-2-基甲基、吡啶-3-基甲基、萘-2-基甲基、3-氰基苯甲酰甲基和3，4-亚乙基二氧基苯甲酰甲基。
10.根据权利要求1至3任一项的化合物，其中R2是-(CH2)x-R6，其中x是2、3或4。
11.根据权利要求10的化合物，其中R2选自下述基团(a)-(CH2)x-OH；(b)-(CH2)x-O(C1-4烷基)；其中烷基任选被1至3个氟取代基取代；(c)-(CH2)x-S(C1-4烷基)，-(CH2)x-S(O)(C1-4烷基)，或-(CH2)x-S(O)2(C1-4烷基)；其中烷基任选被1至3个氟取代基取代；(d)-(CH2)x-(苯基)，其中苯基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；(e)-(CH2)x-(O-苯基)，其中苯基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；(f)-(CH2)x-(萘基)，其中萘基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代；和(g)-(CH2)x-(吲哚基)，其中吲哚基任选被1至3个独立选自Rk的取代基取代。
12.根据权利要求11的化合物，其中R2选自下述基团2-羟乙基、2-甲氧基乙基、2-(甲硫基)乙基、2-乙氧基乙基、2-(乙硫基)乙基、2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基、2-苯乙基、2-(萘-1-基)乙基、2-(吲哚-3-基)乙基、3-羟基丙基、3-甲氧基丙基、3-乙氧基丙基、3-苯丙基和3-苯氧基丙基。
13.根据权利要求1至3任一项的化合物，其中R2是乙基、正丙基、异丙基、环丙基甲基或2-羟乙基。
14.根据权利要求1至13任一项的化合物，其中各R3独立选自氢、C1-4烷基、环丙基甲基和2-羟乙基；其中各烷基任选被1至5个氟取代基取代。
15.根据权利要求14的化合物，其中各R3独立地选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、1，3-二氟丙-2-基、1，1，3-三氟丙-2-基和1，1，3，3-四氟丙-2-基。
16.根据权利要求1至15任一项的化合物，其中R4选自C1-4烷基、-OR3和卤代；其中烷基任选被1至5个氟取代基取代。
17.根据权利要求16的化合物，其中R4是甲基、-OR3、氟代或氯代。
18.根据权利要求1至17任一项的化合物，其中W、X、Y和Z定义如下(a)W是N；X是CH；Y是CH；和Z是CH；(b)W是CH或CR4；X是N；Y是CH和Z是CH；(c)W是CH或CR4；X是CH；Y是N；和Z是CH；(d)W是CH或CR4；X是CH；Y是CH；和Z是N；或(e)W是CH；X是N；Y是CH和Z是CH。
19.根据权利要求18的化合物，其中W是CH；X是N；Y是CH和Z是CH。
20.式II化合物 其中W、X、Y、Z、R1、R2和R3定义如权利要求1至19任一项；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
21.根据权利要求20的化合物，其中R1是-(CH2)7-、-(CH2)8、-(CH2)9-、-(CH2)3-O-(CH2)3-或-(CH2)4-O-(CH2)4-。
22.根据权利要求21的化合物，其中R2是C1-4烷基；其中烷基任选被1至3个氟取代基取代。
23.根据权利要求22的化合物，其中各R3独立地选自氢、C1-4烷基、环丙基甲基和2-羟基乙基；其中各烷基任选被1至5个氟取代基取代。
24.根据权利要求23的化合物，其中R1是-(CH2)7-；R2选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基和异丁基；和各R3独立地选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、1，3-二氟丙-2-基、1，1，3-三氟丙-2-基和1，1，3，3-四氟丙-2-基。
25.式III化合物 其中R1、R2和R3定义如权利要求1至15任一项；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
26.根据权利要求25的化合物，其中R1是-(CH2)7-、-(CH2)8-、-(CH2)9-、-(CH2)3-O-(CH2)3-或-(CH2)4-O-(CH2)4-。
27.根据权利要求26的化合物，其中R2是C1-4烷基；其中烷基任选被1至3个氟取代基取代。
28.根据权利要求27的化合物，其中各R3独立选自氢、C1-4烷基、环丙基甲基和2-羟基乙基；其中各烷基任选被1至5个氟取代基取代。
29.根据权利要求28的化合物，其中R1是-(CH2)7-；R2选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基和异丁基；和R3选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、1，3-二氟丙-2-基、1，1，3-三氟丙-2-基和1，1，3，3-四氟丙-2-基。
30.根据权利要求1的化合物，其中所述化合物选自4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-2-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(丙-1-基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-正丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-异丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-环丙基-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-{4-(2-羟基乙氧基)吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-异丁氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2，4-二甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-氟-4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-氯-4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲基-4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-2-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-2-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-2-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-4-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-4-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(3-甲氧基吡啶-4-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(环丙基甲基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂庚-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-3-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂庚-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-4-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂庚-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-5-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[8-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂辛-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-6-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[9-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)-7-氧杂壬-1-基]-N-(2-羟乙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-叔丁氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-乙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-三氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-二氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基-2-三氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-二氟甲氧基-4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-甲氧基-4-三氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-二氟甲氧基-2-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-{2，4-二(三氟甲氧基)吡啶-3-基甲基}哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-{2，4-二(二氟甲氧基)吡啶-3-基甲基}哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-乙氧基-4-三氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2-乙氧基-4-二氟甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(2，4-二乙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-(N-甲基氨甲酰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-(N，N-二甲基氨甲酰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-(N，N-二乙基氨甲酰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-(哌啶-1-基羰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；4-{N-[7-(3-(S)-1-(吗啉-4-基羰基)-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-羟基吡啶-3-基甲基)哌啶；和4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-[4-(2-氟乙氧基)吡啶-3-基甲基]哌啶；4-{N-[7-(3-(R)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；和4-{N-[7-(3-(R)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-乙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；或其药学上可接受的盐或溶剂化物或立体异构体。
31.根据权利要求1的化合物，其中化合物是4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-甲氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；或其药学上可接受的盐或者溶剂化物。
32.根据权利要求1的化合物，其中化合物是4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-乙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；或其药学上可接受的盐或者溶剂化物。
33.根据权利要求1的化合物，其中化合物是4-{N-[7-(3-(S)-1-氨甲酰基-1，1-二苯甲基)吡咯烷-1-基)庚-1-基]-N-(异丙基)氨基}-1-(4-异丙氧基吡啶-3-基甲基)哌啶；或其药学上可接受的盐或者溶剂化物。
34.式IV的化合物或其盐或立体异构体或被保护的衍生物 其中Ra、Rb、Rc、Re、a、b、c、m、n、p和q定义如权利要求1。
35.式V化合物或其盐或立体异构体或被保护的衍生物 其中Ra、Rb、Rc、Re、a、b、c、m、n、p和q定义如权利要求1，和G选自下述的基团-CHO；-CH(ORm)，其中Rm是C1-6烷基，或两个Rm基团结合形成C2-6亚烷基；-COOH；和-CH＝CH2；-CH2-L，其中L是离去基团。
36.式VI的化合物或其盐或者立体异构体或者被保护的衍生物 其中Ra、Rb、Rc、Re、b、m、n、p和q定义如权利要求1；d是2至5的整数；e是1至4的整数，条件是d+b+e+3等于7、8或9。
37.式VII化合物或其盐或者立体异构体或者被保护的衍生物 其中R2、Ra、Rb、Rc、Rd、Re、a、b、c、m、n、p、q和r定义如权利要求1。
38.式VIII化合物或其盐或者立体异构体或者被保护的衍生物 其中R2、R3、Rd、r、W、X、Y和Z定义如权利要求1。
39.一种药物组合物，该组合物含有药学上可接受的载体和治疗有效量的权利要求1至33任一项的化合物。
40.一种治疗哺乳动物的方法，所述哺乳动物具有通过用毒蕈碱性受体拮抗剂治疗减轻的医学状况，该方法包括给予哺乳动物治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物含有药学上可接受的载体和权利要求1至33任一项的化合物。
41.根据权利要求40的方法，其中所述医学状况是活动过度的膀胱。
42.一种拮抗生物系统或样品中的毒蕈碱性受体的方法，该方法包括将含有毒蕈碱性受体的生物系统或者样品与毒蕈碱性受体拮抗量的权利要求1至33任一项的化合物接触。
43.一种治疗患者中活动过度的膀胱的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物含有药学上可接受的载体和权利要求1、20、25、30、31、32或33任一项的化合物。
44.用于制备式I化合物或其药学可接受的盐或溶剂化物或立体异构体的方法 其中R1、R2、R3、Ra、Rb、Rc、Rd、m、n、p、q、r、W、X、Y和Z定义如权利要求1至33之一；该方法包括使式Va化合物 或其盐或立体异构体或被保护的衍生物与式VIII化合物 或其盐或被保护的衍生物和还原剂反应，得到式I化合物或其药学上可接受的盐或者溶剂化物或者立体异构体。
45.权利要求44的方法，其中所述方法进一步包括形成式I化合物的药学上可接受的盐的步骤。
46.由权利要求44或45的方法制备的产品。
47.用于治疗的根据权利要求1至33任一项的化合物。
48.根据权利要求1至33任一项的化合物用于制备药剂的用途。
49.根据权利要求48的用途，其中所述药剂用于治疗通过毒蕈碱性受体拮抗剂减轻的医学症状。
50.根据权利要求48的用途，其中所述药剂用于治疗活动过度的膀胱。
全文摘要
本发明提供了4－氨基－1－(吡啶基甲基)哌啶和相关的化合物及其药学可接受的盐，其用作毒蕈碱性受体拮抗剂。本发明还提供了含有这类化合物的药物组合物；用于制备这类化合物的方法和中间体；用这类化合物治疗由毒蕈碱性受体介导的疾病状况的方法，所述的疾病例如活动过度的膀胱、过敏性肠综合征和慢性阻塞性肺病。
文档编号C07D401/00GK1708494SQ200380102214
公开日2005年12月14日 申请日期2003年10月29日 优先权日2002年10月30日
发明者M·马曼, R·威尔逊, 陈燕, S·邓纳姆, A·休斯, C·赫斯费尔德, 季玉华, 李莉, T·米施基, I·斯特加德斯 申请人:施万制药