专利名称：3,6－双(2′－羟基－5'′－氯苯基)－s－四嗪与过渡金属的配合物及制备和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗癌药3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物及其制造方法，以及其在制备抗癌药物中的应用。
背景技术：
四嗪是一类含四个氮原子的六元杂环化合物，在3种同分异构体中S-四嗪最稳定。1900年德国化学家Hantgsch首先合成了S-四嗪，20世纪70年代后人们陆续发现S-四嗪，尽管是芳烃，但可发生(4+2)环加成反应；一些特殊结构的四嗪衍生物具有明显的抗病毒活性、抗肿瘤活性以及可做为农药杀虫剂、液晶材料和火箭燃料等，因而引起了人们广泛的兴趣。
在四嗪类衍生物中，目前已经筛选出一些物质具有抗肿瘤活性，例如N，N’-二苯基-3，6-二甲基-1，4-二氢-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺；3，6-双(3-甲基吡啶-2基)-1，2，4，5-四嗪与过渡金属的配合物，等等。含不同取代基的不同结构的S-四嗪衍生物应具有不同的生物活性，通过四嗪类衍生物的筛选，可望筛选出高效低毒的抗癌药物，这将具有着非常重大的意义，也必将引起越来越多的科学工作者的关注。
发明内容本发明目的是提供一种新的S-四嗪类抗癌药物，即3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物及其制备方法，以及该配合物在制备抗癌药物中的应用。
为达到发明目的本发明所采用的技术方案是
一种3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物，所述的配合物具有下列通式(I) 其中M为过渡金属Fe2+、Fe3+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Pt2+中的一种，L为无机配体Cl-、Br-、Ac-、I-、NO3-、SO42-中的一种，R为H或孤电子，x、y、z各为1～5的数，a、b、c各为0～10的数。
优选的，所述的过渡金属为Fe3+、Co2+、Ni2+、Cu2+中的一种，所述的无机配体为Cl-、NO3-、Ac-中的一种。
一种制备所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪的方法，所述的方法是将水杨醛与水合肼在乙醇溶液中，反应制得化合物式(II)2，2’-二羟基苯吖嗪， 反应式如(A)所示 化合物式(II)在冰醋酸/酸酐溶剂中通入氯气制得化合物式(III)α，α’-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪，
反应式如(B)所示 化合物(III)在乙醇溶液中与水合肼反应生成化合物式(IV)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-1，2，4，5-四嗪， 反应式如(C)所示 化合物(IV)用亚硝酸氧化成化合物式(V)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2，4，5-四嗪。
所述的亚硝酸由亚硝酸钠与醋酸反应制得。
反应式如(D)所示
一种制备所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物的方法，按前述方法制得化合物(IV)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-1，2，4，5-四嗪，化合物(IV)与过渡金属的盐MeLf在乙醇溶剂中反应制成化合物式(I)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪与过渡金属的配合物，其中e、f各为1～5的数。
反应式如(E)所示 具体的，所述的方法按如下步骤进行(1)将水合肼溶液加入到水中，加入少量乙醇，搅匀成溶液A，将水杨醛溶于乙醇中成溶液B，将B溶液保持在10～20℃搅拌下，慢慢滴加入溶液A，1.5～2小时加完后，再搅拌反应2小时，加入水，抽滤，用大量水冲洗后干燥得2，2′-二羟基苯吖嗪(II)；(2)将2，2′-二羟基苯吖嗪加到冰醋酸和醋酸酐的混合液中。搅拌使成较好的悬浮液，在10～20℃下通入氯气约1小时，此若固体未消失，补加冰醋酸和醋酐，于10～20℃下氯气1.5～2小时，用TLC点板，观察原料斑点消失止，停止通氯，放置过夜；抽滤，固体用乙醇洗涤，干燥得α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪(III)；(3)将α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪溶于乙醇中，加热至回流，滴加80％水合肼，加完后再回流反应45分钟，冷却到室温，将析出的固体过滤，用乙醇洗涤，烘干得黄色固体3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-1，2，4，5-四嗪(IV)；(4)在常温下，将3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪(IV)溶于四氢呋喃(THF)中成溶液A，过渡金属的盐MeLf溶于乙醇中成溶液B，其中e、f各为1～5的数；在搅拌下，将A滴加到B中，30分钟滴完，再搅拌反应1小时，将生成的固体过滤，乙醇/水混合液洗涤得到络合物(I)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪与过渡金属的配合物。
一种制备所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物的方法，按前述方法制得化合物(V)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2，4，5-四嗪，化合物(V)与过渡金属的盐MeLf在乙醇溶剂中反应制成化合物式(I)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物，其中e、f各为1～5的数。
反应式如(F)所示
具体的，所述的方法按如下步骤进行(1)水合肼溶液加入到水中，加入少量乙醇，搅匀成溶液A，将水杨醛溶于乙醇中成溶液B，将B溶液保持在10～20℃搅拌下，慢慢滴加入溶液A，1.5～2小时加完后，再搅拌反应2小时，加入水，抽滤，用大量水冲洗后干燥得2，2′-二羟基苯吖嗪；(2)将2，2′-二羟基苯吖嗪加到冰醋酸和醋酸酐的混合液中。搅拌使成较好的悬浮液，在10～20℃下通入氯气约1小时，此若固体未消失，补加冰醋酸和醋酐，于10～20℃下通氯气1.5～2小时；用TLC点板，观察原料斑点消失止，停止通氯，放置过夜；抽滤，固体用乙醇洗涤，干燥得α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪；(3)将α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪溶于乙醇中，加热至回流，滴加80％水合肼，加完后再回流反应45分钟，冷却到室温，将析出的固体过滤，用乙醇洗涤，烘干得黄色固体3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-1，2，4，5-四嗪；(4)化合物(IV)与亚硝酸钠水溶液搅拌成悬浮液，加入醋酸，再于室温搅拌3小时，固体过滤、水洗，用乙醇重结晶得到红色晶体3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-s-四嗪(V)；(5)在常温下，将3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪(V)溶于四氢呋喃(THF)中成溶液A，过渡金属的盐MeLf溶于乙醇中成溶液B，其中e、f各为1～5的数。在搅拌下，将A滴加到B中，30分钟滴完，再搅拌反应1小时；将生成的固体过滤，乙醇/水混合液洗涤得到络合物(I)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物。
所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物，在制备治疗白血病、肺癌或其它肿瘤的药物中的应用。
本发明所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物及制备和应用的有益效果主要体现在(1)提供了一种新的、有明显抗癌活性的抗癌药物；(2)制备流程简单，为新药筛选提供研究基础。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述实施例1制备2，2′-二羟基苯吖嗪(II)2.4g(85％)NH2NH2·H2O水溶液(0.04mol)加入到24ml水中，加入5ml乙醇，搅匀成溶液A，将9.8g水杨醛(0.08mol)溶于4ml乙醇中成溶液B。将B溶液保持在10～20℃搅拌下，慢慢滴加入溶液A，1.5～2小时加完后，再搅拌反应2小时。加入20ml水，抽滤，用大量水冲洗后干燥得2，2′-二羟基苯吖嗪9.1克，产率95％，m.p.214～216℃。
实施例2制备α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪(III)将5.5g2，2′-二羟基苯吖嗪(0.023mol)，加到40ml冰醋酸和4.5ml醋酸酐的混合液中。搅拌使成较好的悬浮液。在10～20℃下通入氯气约1小时，此时溶液变稠，但固体并未消失。补加40ml冰醋酸和4.5ml醋酐。于10～20℃下氯气1.5～2小时。用TLC点板，观察原料斑点消失止，停止通氯，放置过夜。抽滤，固体用乙醇洗涤，干燥得α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪5克，收率58％，m.p.175～178℃。
实施例3制备3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪(IV)
将III(3.8克，0.01mol)溶于乙醇中(20ml)，加热至回流，滴加80％水合肼(0.8克，0.012mol)。加完后再回流反应45分钟。冷却到室温，将析出的固体过滤，用乙醇洗涤，烘干得黄色固体IV1.2克，收率35％，m.p.250℃(dec.)。
实施例4制备3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2，4，5-四嗪(V)化合物IV(3.37克，0.01mol)加入25ml 10％亚硝酸钠水溶液(0.036mol)搅拌成悬浮液，加入15ml醋酸，再于室温搅拌3小时。固体过滤、水洗，用乙醇重结晶得到红色晶体1.1克。收率33％，m.p.238.5～240.5℃。IR(KBr)3443，3126，1613，1569，1477，1417，1303，1224，1140，1088，1046，941，898cm-1；NMR(CDCl3)δ7.1(d，2H，Ar-H)，7.5(d，2H，Ar-H)，8.6(s，2H，Ar-H)，10.8(s，2H，OH)；M/Z(％)334(M+，7.55)，153(100.00)，125(56.36)，98(21.06)，63(61.50)。
实施例53，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪IV与过渡金属的络合物。
在常温下，将0.5克3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪(IV)溶于30ml四氢呋喃(THF)中成溶液A，1.0g硝酸镍(Ni(NO3)2)溶于30ml乙醇中成溶液B。在搅拌下，将A滴加到B中，30分钟滴完，再搅拌反应1小时。将生成的固体过滤，乙醇/水混合液洗涤得到镍-IV络合物(VI)。
同样操作，用CoCl2溶液得到钴-IV络合物(VII)；同样操作，用Ni(OAc)2溶液得到镍-IV络合物(VIII)；
络合物VI，VII，VIII摩尔电导率(s)及元素分析结果如下
实施例63，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2，4，5-四嗪(V)与过渡金属的络合物0.5克V悬浮在30ml 1∶1的乙醇/水混合物溶液中。慢慢滴加5％的氢氧化钠水溶液至固体完全溶解。此时溶液PH为6.5～7，为溶液A；1g硝酸镍溶于30ml的水中为溶液B。在常温搅拌下，将A溶液滴加至B液中，加完后再搅拌1.5小时。将生成的固体过滤，用乙醇/水(1∶1)溶剂洗涤后得镍-(V)络合物(IX)；同样操作，用三氯化铁溶液得铁-(V)络合物(X)；同样操作，用氯化钴溶液得钴-(V)络合物(XI)；络合物VIII，IX，X的摩尔电导率及元素分析结果如下
对上述化合物IV，V，及其络合物VI，IX，X，XI，用四氮唑盐酶还原法(MTT法)和磺酰罗丹明β蛋白染色法(SRB法)分别测定了化合物对P-388小鼠白血病细胞和A-549人肺癌细胞在体外生长的抑制率。其结果如下
部份化合物在不同浓度下对癌细胞生长的抑制率
一般认为在浓度为10-6mol/l，而抑制率达到50％以上则认为此类化合物有强效。按此标准，配体IV无效而配体V对P-388有强效；而4种配合物不论对P-388还是A-549均有强效。
权利要求
1.一种3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物，其特征在于所述的配合物具有下列通式(I) 其中M为过渡金属Fe2+、Fe3+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Pt2+中的一种，L为无机配体Cl-、Br-、Ac-、I-、NO3-、SO42-中的一种，R为H或孤电子，x、y、z各为1～5的数，a、b、c各为0～10的数。
2.如权利要求1所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物，其特征在于所述的过渡金属为Fe3+、Co2+、Ni2+、Cu2+中的一种。
3.如权利要求2所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物，其特征在于所述的无机配体为Cl-、NO3-、Ac-中的一种。
4.一种制备如权利要求1所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪的方法，其特征在于所述的方法是将水杨醛与水合肼在乙醇溶液中，反应制得化合物式(II)2，2’-二羟基苯吖嗪， 化合物式(II)在冰醋酸/酸酐溶剂中通入氯气制得化合物式(III)α，α’-二氯-双(2’-羟基-5-氯苯基)-吖嗪， 化合物(III)在乙醇溶液中与水合肼反应生成化合物式(IV)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-1，2，4，5-四嗪， 化合物(IV)用亚硝酸氧化成化合物式(V)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2，4，5-四嗪。
5.如权利要求4所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪的制备方法，其特征在于所述的亚硝酸由亚硝酸钠与醋酸反应制得。
6.一种制备如权利要求1所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物的方法，其特征在于由如权利要求4所述的方法制得化合物(IV)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-1，2，4，5-四嗪，化合物(IV)与过渡金属的盐MeLf在乙醇溶剂中反应制成化合物式(I)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪与过渡金属的配合物，其中e、f各为1～5的数。
7.如权利要求6所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物的方法，其特征在于所述的方法按如下步骤进行(1)将水合肼溶液加入到水中，加入少量乙醇，搅匀成溶液A，将水杨醛溶于乙醇中成溶液B，将B溶液保持在10～20℃搅拌下，慢慢滴加入溶液A，1.5～2小时加完后，再搅拌反应2小时，加入水，抽滤，用大量水冲洗后干燥得2，2′-二羟基苯吖嗪；(2)将2，2′-二羟基苯吖嗪加到冰醋酸和醋酸酐的混合液中。搅拌使成较好的悬浮液，在10～20℃下通入氯气约1小时，此若固体未消失，补加冰醋酸和醋酐，于10～20℃下氯气1.5～2小时，用TLC点板，观察原料斑点消失止，停止通氯，放置过夜；抽滤，固体用乙醇洗涤，干燥得α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪；(3)将α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪溶于乙醇中，加热至回流，滴加80％水合肼，加完后再回流反应45分钟，冷却到室温，将析出的固体过滤，用乙醇洗涤，烘干得黄色固体3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-1，2，4，5-四嗪；(4)在常温下，将3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪(IV)溶于四氢呋喃(THF)中成溶液A，过渡金属的盐MeLf溶于乙醇中成溶液B，其中e、f各为1～5的数；在搅拌下，将A滴加到B中，30分钟滴完，再搅拌反应1小时，将生成的固体过滤，乙醇/水混合液洗涤得到络合物(I)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-S-四嗪与过渡金属的配合物。
8.一种制备如权利要求1所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物的方法，其特征在于由如权利要求5所述的方法制得化合物(V)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2，4，5-四嗪，化合物(V)与过渡金属的盐MeLf在乙醇溶剂中反应制成化合物式(I)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物，其中e、f各为1～5的数。
9.如权利要求8所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物的方法，其特征在于所述的方法按如下步骤进行(1)水合肼溶液加入到水中，加入少量乙醇，搅匀成溶液A，将水杨醛溶于乙醇中成溶液B，将B溶液保持在10～20℃搅拌下，慢慢滴加入溶液A，1.5～2小时加完后，再搅拌反应2小时，加入水，抽滤，用大量水冲洗后干燥得2，2′-二羟基苯吖嗪；(2)将2，2′-二羟基苯吖嗪加到冰醋酸和醋酸酐的混合液中。搅拌使成较好的悬浮液，在10～20℃下通入氯气约1小时，此若固体未消失，补加冰醋酸和醋酐，于10～20℃下通氯气1.5～2小时；用TLC点板，观察原料斑点消失止，停止通氯，放置过夜；抽滤，固体用乙醇洗涤，干燥得α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪；(3)将α，α′-二氯-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-吖嗪溶于乙醇中，加热至回流，滴加80％水合肼，加完后再回流反应45分钟，冷却到室温，将析出的固体过滤，用乙醇洗涤，烘干得黄色固体3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-1，2-二氢-1，2，4，5-四嗪；(4)化合物(IV)与亚硝酸钠水溶液搅拌成悬浮液，加入醋酸，再于室温搅拌3小时，固体过滤、水洗，用乙醇重结晶得到红色晶体3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-s-四嗪；(5)在常温下，将3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪(V)溶于四氢呋喃(THF)中成溶液A，过渡金属的盐MeLf溶于乙醇中成溶液B，其中e、f各为1～5的数。在搅拌下，将A滴加到B中，30分钟滴完，再搅拌反应1小时；将生成的固体过滤，乙醇/水混合液洗涤得到络合物(I)3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物。
10.如权利要求1～3之一所述的3，6-双(2’-羟基-5’-氯苯基)-S-四嗪与过渡金属的配合物，在制备治疗白血病、肺癌或其它肿瘤的药物中的应用。
全文摘要
本发明提供了一种新的S－四嗪类抗癌药物，即3，6－双(2′－羟基－5′－氯苯基)－S－四嗪与过渡金属的配合物及其制备方法，以及该配合物在制备抗癌药物中的应用。实验证明这种四嗪与过渡金属的配合物是有明显抗癌活性的抗癌药物；这种配合物制备流程简单，为新药筛选提供了研究基础。
文档编号C07D257/08GK1563023SQ20041001744
公开日2005年1月12日 申请日期2004年3月31日 优先权日2004年3月31日
发明者胡惟孝, 杨忠愚, 江银枝, 饶国武 申请人:浙江工业大学