专利名称：一种从龙胆属药用植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及中草药有效成分的提取工艺，尤其涉及一种从龙胆属药用植物中提取裂环烯醚萜甙(苦苷)类产物的工艺。
背景技术：
龙胆属植物中主要药用植物有秦艽、小秦艽、麻花艽、粗茎秦艽等。青藏龙胆、乌奴龙胆、高山龙胆等多以根、花或全草入药，具有祛风湿、清湿热、止痹痛、清热解毒等多种功效。临床上用于筋脉拘挛，骨节酸痛，小儿疳积发热，黄疸病等多种病症的治疗[见中华人民共和国药典一部，2000版，222-223页；中华人民共和国卫生部药品标准，藏药一册，1992；17页，52页]。其药用部分均含有大量的裂环烯醚萜甙(苦苷)类成分，如龙胆苦苷(gentiopicroside)、当药苦苷又称獐牙菜苦甙(swertiamarin)、当药苷又称獐牙菜甙(sweroside)、苦龙胆酯甙又称苦龙甙(amarogentin)等][<药学学报>，1991；26(11)864-870页“九种龙胆中五种裂环烯醚萜甙类苦味成分高效液相色谱定量分析”(张建生、由子新等著)；<高原生物学集刊>[C]，1992113-118页，“青藏高原四种龙胆科植物化学成分初步研究[A]”(纪兰菊，孙洪发等著)；<药物分析杂志>1994；14(1)41-43页“秦艽中龙胆苦甙的RP-HPLC法测定”(孙文基，沙振方等)。这些裂环烯醚萜甙(苦苷)类成分中，龙胆苦苷具有促进胃液及游离盐酸分泌的健胃和抗炎作用，当药苦苷有促进毛发生长和解痉、镇痛抗炎作用，当药苷有退热抗惊厥作用和抗肝细胞损伤，促进肝细胞修复的保肝作用[<中药通报>1986；11(11)643-647“中国龙胆科药用植物概况”(宋万志)；<中药有效成分药理与应用>1994；454-455(季宇彬等)]。以这类成分为主研制开发的镇痛药，抗肝炎药物已有工业化生产，但有关这类成分的提取工艺研究报道尚少。文献报道，秦艽及麻花艽根中龙胆苦甙的含量很高，一般在3～13％(w/w)之间[<西北植物学报>2004；24(2)292-2958，“藏药麻花秦艽中苦苷类成分的含量测定及品质评价”(纪兰菊，马玉花等)]，随着药用秦艽、麻花艽的栽培成功，形成了丰富的，极有开发价值的药用资源。
天然产物的水溶性成分的提取分离，大孔树脂吸附法是一种非常有效的工业化生产方法，利用吸附树脂从龙胆属药用植物中提取裂环烯醚萜甙(苦苷)类的工业化生产方法，目前尚未见国内外有关文献和专利报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种从龙胆属药用植物中提取裂环烯醚萜甙(苦苷)类化合物的工艺。
本发明的目的可以通过以下措施实现一种从龙胆属科药用植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，包括以下步骤①将干燥龙胆属药用植物粉末用亲水性有机溶剂在50-80℃下回流提取2-4次，每次2-4小时，过滤回收有机溶剂得裂环烯醚萜甙类提取液并合并提取液；②浓缩步骤①所得提取液至干得裂环烯醚萜甙类产物；或使步骤①所得提取液缓慢流过用乙醇溶胀并经水洗脱过的大孔吸附树脂层析柱，再用0-50％的乙醇水溶液或0-50％甲醇水溶液缓慢洗脱上述树脂层析柱，收集洗脱液浓缩至干得浅棕色裂环烯醚萜甙类产物。
在上述步骤①所得提取液中加适量的水，并在室温或0～4℃冷藏12～48小时得混浊液，离心或过滤得到澄清液，再使澄清液缓慢流过用乙醇溶胀并经水洗脱过的大孔吸附树脂层析柱。
上述步骤②完成后，先用适量的水缓慢清洗树脂层析柱，然后再用0～50％的乙醇水溶液或0～50％的甲醇水溶液缓慢洗脱上述大孔吸附树脂层析柱并收集洗脱液。
所述亲水性有机溶剂为甲醇溶液或乙醇溶液或甲醇水溶液或乙醇水溶液或甲醇与乙醇的水溶液。
本发明的优点1、本发明以龙胆属药用植物全草或根、茎、叶、花为原料，以亲水性溶剂回流提取，并利用对水溶性成分具有选择性吸附作用的大孔树脂进行分离和富集，得到裂环烯醚萜甙类产物，该提取物中裂环烯醚萜甙类化合物的含量大于20％。
2、本发明工艺简便、操作方便、安全、重复性好，可工业化生产。
具体实施例方式
实施例一一种从龙胆属药用植物麻花艽植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，包括以下步骤先将麻花艽植物的干燥根用20-95％的甲醇水溶液在50-80℃依次递减用量回流提取三次，每次2-4小时，滤过回收甲醇溶液得裂环烯醚萜甙类产物的提取液，并合并浓缩三次回流的提取液；向适度浓缩后的提取液中加适量的水得混浊液，并在置室温下静置24-48小时，过滤或离心去除絮凝脂溶性成分得澄清液并浓缩至干得裂环烯萜甙类产物，该产物中裂环烯醚萜甙类化合物的含量大于15％。
实施例二一种从龙胆科属药用植物麻花艽植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，包括以下步骤(1)将麻花艽植物的干燥茎用甲醇溶液在50-80℃依次递减用量回流提取三次，每次2-4小时，滤过回收甲醇溶液得裂环烯醚萜甙类产物的提取液，并合并浓缩三次回流的提取液；(2)向适度浓缩后的提取液中加适量的水得混浊液，并在0～4℃冷藏静置24-48小时，过滤或离心去除絮凝脂溶性成分得澄清液；(3)将一定量大孔吸附树脂，用适量的乙醇溶胀并经水洗脱，使之逐渐过渡到水相，并将其转入内径为内径为1-30cm、径度为1∶2-20的层析柱中形成树脂层析柱；(4)将步骤(2)所得澄清液以1BV/h的流速缓慢流过上述树脂层析柱；(5)先用适量水缓慢清洗上述树脂层析柱，然后再用0-50％的乙醇溶液以0.5BV/h的流速缓慢洗脱树脂层析柱并收集洗脱液，浓缩至干，得到棕色提取物，该提取物中裂环烯醚萜甙类化合物的含量大于20％。
实施例三一种从龙胆科属药用植物麻花艽植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，包括以下步骤(1)将麻花艽植物的干燥茎用甲醇溶液在50-80℃依次递减用量回流提取三次，每次2-4小时，滤过回收甲醇溶液得裂环烯醚萜甙类产物的提取液，并合并浓缩三次回流的提取液；(2)向适度浓缩后的提取液中加适量的水得混浊液，并在室温下静置24-48小时，过滤或离心去除絮凝脂溶性成分得澄清液；(3)将一定量大孔吸附树脂，用适量的乙醇溶胀并经水洗脱，使之逐渐过渡到水相，并将其转入内径为内径为1-30cm、径度为1∶2-20的层析柱中形成树脂层析柱；(4)将步骤(2)所得澄清液以1BV/h的流速缓慢流过上述树脂层析柱；(5)先用适量水缓慢清洗上述树脂层析柱，然后再用0-50％的甲醇溶液以0.5BV/h的流速缓慢洗脱树脂层析柱并收集洗脱液，浓缩至干，得到棕色提取物，该提取物中裂环烯醚萜甙类化合物的含量大于20％。
实施例四一种从龙胆属药用植物麻花艽植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，包括以下步骤将麻花艽植物的干燥全草用乙醇溶液在50-80℃依次递减用量回流提取三次，每次2-4小时，滤过回收甲醇溶液得裂环烯醚萜甙类产物的提取液，并合并浓缩三次回流的提取液；向浓缩适度的提取液中加适量的水得混浊液，并在0～4℃冷藏静置24-48小时，过滤或离心去除絮凝脂溶性成分得澄清液并浓缩至干得裂环烯萜甙类产物，该产物中裂环烯醚萜甙类化合物的含量大于15％。
实施例五一种从龙胆属药用植物麻花艽中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，包括以下步骤(1)将麻花艽植物的干燥全草用50％的乙醇水溶液在50-80℃依次递减用量回流提取三次，每次2-4小时，滤过回收甲醇溶液得裂环烯醚萜甙类产物的提取液，并合并浓缩三次回流的提取液；(2)向上述浓缩适度的提取液中加适量的水得混浊液，并在0～4℃冷藏静置24-48小时，过滤或离心去除絮凝脂溶性成分得澄清液；(3)将一定量的大孔吸附树脂，用适量的乙醇溶胀并经水洗脱使之逐渐过渡到水相，并将其转入内径为内径为1-30cm、径度为1∶2-20的层析柱中，形成树脂层析柱；(4)将步骤(2)所得澄清液以1BV/h的流速液缓慢流过上述树脂层析柱；(5)先用适量水缓慢清洗树脂层析柱，然后再用0-50％的乙醇溶液以0.5BV/h的流速缓慢洗脱树脂层析柱并收集洗脱液，浓缩洗脱液至干得到棕色裂环烯醚萜甙类提取物，该提取物中裂环烯醚萜甙类化合物的含量大于20％。
实施例六一种从龙胆属药用植物麻花艽中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，包括以下步骤(1)将麻花艽植物的干燥全草用50％的乙醇水溶液在50-80℃依次递减用量回流提取三次，每次2-4小时，滤过回收甲醇溶液得裂环烯醚萜甙类产物的提取液，并合并浓缩三次回流的提取液；(2)向上述浓缩适度的提取液中加适量的水得混浊液，并在室温下静置24-48小时，过滤或离心去除絮凝脂溶性成分得澄清液；(3)将一定量的大孔吸附树脂，用适量的乙醇溶胀并经水洗脱使之逐渐过渡到水相，并将其转入内径为内径为1-30cm、径度为1∶2-20的层析柱中，形成树脂层析柱；(4)将步骤(2)所得澄清液以1BV/h的流速液缓慢流过上述树脂层析柱；(5)先用适量水缓慢清洗树脂层析柱，然后再用0-50％的甲醇溶液以0.5BV/h的流速缓慢洗脱树脂层析柱并收集洗脱液，浓缩洗脱液至干得到棕色裂环烯醚萜甙类提取物，该提取物中裂环烯醚萜甙类化合物的含量大于20％。
其他用龙胆属药用植物(如小秦艽、粗茎秦艽等)提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺同上。
权利要求
1.一种从龙胆属科药用植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，包括以下步骤①将干燥龙胆属药用植物用亲水性有机溶剂在50-80℃下回流提取2-4次，每次2-4小时，过滤回收有机溶剂得裂环烯醚萜甙类提取液并合并提取液；②浓缩步骤①所得提取液至干得裂环烯醚萜甙类产物；或使步骤①所得提取液缓慢流过用乙醇溶胀并经水洗脱过的大孔吸附树脂层析柱，再用0-50％的乙醇水溶液或0-50％甲醇水溶液缓慢洗脱上述树脂层析柱，收集洗脱液浓缩至干得浅棕色裂环烯醚萜甙类产物。
2.如权利要求1所述的从龙胆属药用植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，其特征在于向步骤①所得提取液中加适量的水，并在室温或0～4℃冷藏12～48小时得混浊液，离心或过滤得到澄清液，再使澄清液缓慢流过用乙醇溶胀并经水洗脱过的大孔吸附树脂层析柱。
3.如权利要求1或2所述的从龙胆属药用植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，其特征在于步骤②完成后，先用适量的水缓慢清洗树脂层析柱，然后再用0～50％的乙醇水溶液或0～50％的甲醇水溶液缓慢洗脱上述大孔吸附树脂层析柱并收集洗脱液。
4.如权利要求1所述的从龙胆属药用植物中提取裂环烯醚萜甙类产物的工艺，其特征在于所述亲水性有机溶剂为甲醇溶液或乙醇溶液或甲醇水溶液或乙醇水溶液或甲醇与乙醇的水溶液。
全文摘要
本发明涉及一种从龙胆属药用植物中提取裂环烯醚萜甙(苦苷)类产物的工艺，其以龙胆属药用植物全草或根、茎、叶、花为原料，以亲水性溶剂回流提取，并利用对水溶性成分具有选择性吸附作用的大孔树脂进行分离和富集，得到裂环烯醚萜甙类产物，其中裂环烯醚萜甙类化合物的含量大于 20％。本发明工艺简便、操作方便、安全、重复性好，可工业化生产。
文档编号C07H1/00GK1740184SQ20041008308
公开日2006年3月1日 申请日期2004年8月26日 优先权日2004年8月26日
发明者纪兰菊, 陈桂琛, 吉文鹤, 卢学峰, 孙洪发 申请人:中国科学院西北高原生物研究所