专利名称：金银花高纯度绿原酸提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及中草药功能性成分的提取纯化方法，特别涉及一种从金银花中提取纯化绿原酸的金银花高纯度绿原酸提取工艺。
背景技术：
国内从金银花中提取绿原酸的方法一般有水提石灰乳法、水提法、水提醇沉淀法、稀醇提取法、石硫法等多种方法，采用絮凝法从从金银花中提取绿原酸的研究和应用也有文献报道；对绿原酸的纯化方法一般有乙酸乙酯法、正丁醇法、石—硫法和大孔树脂等方法，如专利申请号01144170、发明名称《金银花中绿原酸的提取纯化方法》，采用稀乙醇对金银花进行二次回流提取，提取物浓缩后再用絮凝法初步除杂纯化，最后采用大孔树脂法或酸性乙酸乙酯萃取法纯化精制；又如申请号02133448、发明名称《大孔树脂吸附提取高含量绿原酸的工艺方法》，由含绿原酸的水提取液的提取、及大孔树脂吸附高含量绿原酸成品的分离工艺所组成。尽管如此，现有技术生产出来的绿原酸纯度普遍不高，如所述前者产出来的绿原酸纯度84％，由此可见，现有技术仍不能令人满意。
发明内容
到目前为止，尚未发现有任何破坏本发明新颖性的资料，本发明人经过多年的精心研究，通过各种实验、试验，取得了最佳效果，从而完成了本发明。
本发明的目的就是提供一种绿原酸含量达95％、其收得率达3.0％的金银花高纯度绿原酸提取工艺。
本发明是这样来实现的，在金银花高纯度绿原酸提取工艺的β-CD络合工艺中加入环己酮解络、转型和制备高纯度绿原酸。
所述工艺分为四部分(1)是通过对金银花药材预处理，加入NaHSO3、收率促进剂和澄清剂，通过对澄清滤液板框压滤，再通过大孔吸附树脂柱上柱吸附、解吸和减压回收有机溶剂，得浓缩液，喷雾干燥得20∽30％口服液绿原酸；(2)是将所述浓缩液，加入乙醇沉淀，再加水水沉，二次澄清处理得澄清液，经活性炭处理，减压浓缩，喷雾干燥得注射用金银花提取物；(3)将所述澄清液加入β-CD络合反应，绿原酸与β-CD的克分子比等于0.5∽5，结晶12小时以上，得β-CD络合物，真空干燥，加入环己酮解络、转型得绿原酸浓缩液，真空干燥得含量90％左右的绿原酸，环己酮免回收，套用于下一批次；(4)是将(3)所述的浓缩液，用乙醇溶解，上硅胶层析柱，分段解析，用薄层层析，测定，合并相同部分，减压干燥，结晶，得含量≥95％绿原酸，由HPLC法测定。
所述工艺优选为(1)、金银花药材预处理，去杂、去霉变、清洁和凉干或晒干。
(2)、加入10∽20倍金银花重量的水，加入NaHSO3使其浓度达到0.5∽3％，加入收率促进剂使其浓度达到0.2∽2‰，升温60∽95℃，PH4∽8.5，间隔搅拌1∽3小时，提取3次，第三次母液套用于下一批投料。
(3)、合并NO.1.2次提取母液，加入澄清剂II-B5/万，缓缓加入使其浓度达到1∽6/万，升温60∽95℃，PH4∽8.5，间隔搅拌0.5∽2小时，板框压滤得澄清滤液。
(4)、回调至PH4.0∽6.0，搅拌0.5∽2小时，板框压滤，得澄清滤液。
(5)、大孔吸附树脂柱预处理好待用，将所述澄清滤液上柱，流速5-8BV，以不泄漏为准，期间不时真空倒柱以利充分吸附，结束后，用PH3∽6的水水洗去除其它杂质，解吸、回收有机溶剂，得浓缩液，喷雾干燥得20∽30％口服液绿原酸，由HPLC法测定。
(6)、将浓缩液ρ＝1.20∽1.25，用95％乙醇沉淀，0∽10℃，20小时以上，回收溶剂。
(7)、将母液加水水沉，升温至70∽90℃，加入IV-B型澄清剂，抽滤得澄清液。
(8)、减压浓缩液ρ＝1.10∽1.25，加入0.5∽3％活性炭，PH至5.0，微沸0.3∽1小时，洁净室内压滤。
(9)、喷雾干燥得注射用金银花提取物，含量为20∽30％的绿原酸，由HPLC法测定。
(10)、将(7)的澄清液加入精制的β-CD，绿原酸与β-CD的克分子比等于0.5∽5，络合反应3∽10小时，过滤放置0∽10℃，结晶，离心，水洗，真空45∽70℃干燥。
(11)、解络，加入15∽30倍的环己酮，回流1∽3小时，抽滤得母液，回收母液得浓缩液，真空干燥得含量为90％左右绿原酸，由HPLC法测定。
(12)、将(11)的浓缩液，用乙醇溶解，上硅胶层析柱，分段解析，用硅胶-G板确认相同部分，回收溶剂，结晶减压干燥或冷冻干燥得绿原酸，由HPLC法测定含量为≥95％绿原酸，二次上柱层析得≥99％的绿原酸，mp206∽208℃，白色结晶粉末；异绿原酸mp148∽150℃，淡黄色结晶粉末，总收得率1.5∽3.0％。
所述浓度和含量为重量百分浓度，所述倍数为重量倍。
本发明在金银花高纯度绿原酸提取工艺的β-CD络合工艺中加入环己酮解络、转型和制备高纯度绿原酸，再通过乙醇溶解，上硅胶层析柱，分段解析，用薄层层析，测定，合并相同部分，减压干燥，结晶，二次上柱层析得≥99％的绿原酸。对比现有技术中的工艺方案与所得绿原酸纯度，本发明更佳。
具体实施方法实施例1所述工艺如下(1)、金银花药材预处理，去杂、去霉变、清洁、凉干或晒干。
(2)、加入15倍金银花重量的口服级饮用水，加入NaHSO3使其浓度达到1.5％，加入收率促进剂使其浓度达到1‰，升温70∽90℃，PH5∽6，间隔搅拌2小时，提取3次，第三次母液套用于下一批投料。
(3)、合并NO.1.2次提取母液，加入药圣1+1澄清剂II-B或IV-B5/万，缓缓加入使其浓度达到3/万，升温70∽90℃，PH5∽6，间隔搅拌1.0小时，板框压滤得澄清滤液。
(4)、回调至PH5.0，搅拌1.0小时，板框压滤，或加入硅藻土助滤，得澄清滤液。
(5)、大孔吸附树脂柱B230特型树脂预处理好待用，将所述澄清滤液上柱，流速5∽8BV，以不泄漏为准，期间不时真空倒柱以利充分吸附，结束后，用PH4∽5水水洗去除其它杂质，解吸、回收有机溶剂，得浓缩液，喷雾干燥得20∽30％口服液绿原酸，由HPLC法测定。
(6)、将浓缩液ρ＝1.20∽1.25，用95％乙醇沉淀，0∽5℃，24小时以上，回收溶剂。
(7)、将母液加水水沉，升温至80℃，加入IV-B型澄清剂，抽滤得澄清液。
(8)、减压浓缩液P＝1.10∽1.25，加入1％活性炭，PH5.0，微沸0.5小时，洁净室内压滤。
(9)、喷雾干燥得注射用金银花提取物，含量20∽30％绿原酸，由HPLC法测定。
(10)、将(7)的澄清液加入精制的β-CD，绿原酸与β-CD的克分子比等于0.5∽5，络合反应4小时，过滤放置0∽5℃，结晶，离心，水洗，真空60℃干燥。
(11)、解络，加入20倍的环己酮，回流2小时，抽滤得母液，回收母液得浓缩液，真空干燥得含量为90％左右绿原酸，由HPLC法测定。
(12)、将(11)的浓缩液，用乙醇溶解，上硅胶层析柱，分段解析，用硅胶-G板确认相同部分，回收溶剂，结晶减压干燥或冷冻干燥得绿原酸，由HPLC法测定含量为≥95％绿原酸，二次上柱层析得≥99％的绿原酸，mp206∽208℃，白色结晶粉末；异绿原酸mp148∽150℃，淡黄色结晶粉末，总收得率1.5∽3.0％。
所述浓度和含量为重量百分浓度，所述倍数为重量倍数。
权利要求
1.一种金银花高纯度绿原酸提取工艺，其特征是在所述提取工艺的β-CD络合工艺中加入环己酮解络、转型和制备高纯度绿原酸。
2.根据权利要求1所述的一种金银花高纯度绿原酸提取工艺，其特征是所述工艺分为四部分(1)是通过对金银花药材预处理，加入NaHSO3、收率促进剂和澄清剂，通过对澄清滤液板框压滤，再通过大孔吸附树脂柱上柱吸附、解吸和减压回收有机溶剂，得浓缩液，喷雾干燥得20∽30％口服液绿原酸；(2)是将所述浓缩液，加入乙醇沉淀，再加水水沉，二次澄清处理得澄清液，经活性炭处理，减压浓缩，喷雾干燥得注射用金银花提取物；(3)将所述澄清液加入β-CD络合反应，绿原酸与β-CD的克分子比等于0.5∽5，结晶12小时以上，得β-CD络合物，真空干燥，加入环己酮解络、转型得绿原酸浓缩液，真空干燥得含量90％左右的绿原酸，环己酮免回收，套用于下一批次；(4)是将(3)所述的浓缩液，用乙醇溶解，上硅胶层析柱，分段解析，用薄层层析，测定，合并相同部分，减压干燥，结晶，得含量≥95％绿原酸，由HPLC法测定。
3.根据权利要求1或2所述的一种金银花高纯度绿原酸提取工艺，其特征是所述工艺如下(1)、金银花药材预处理，去杂、去霉变、清洁和凉干或晒干。(2)、加入10∽20倍金银花重量的水，加入NaHSO3使其浓度达到0.5∽3％，加入收率促进剂使其浓度达到0.2∽2‰，升温60∽95℃，PH4∽8.5，间隔搅拌1∽3小时，提取3次，第三次母液套用于下一批投料。(3)、合并NO.1.2次提取母液，加入澄清剂II-B5/万，缓缓加入使其浓度达到1∽6/万，升温60∽95℃，PH4∽8.5，间隔搅拌0.5∽2小时，板框压滤得澄清滤液。(4)、回调至PH4.0∽6.0，搅拌0.5∽2小时，板框压滤，得澄清滤液。(5)、大孔吸附树脂柱预处理好待用，将所述澄清滤液上柱，流速5-8BV，以不泄漏为准，期间不时真空倒柱以利充分吸附，结束后，用PH3∽6的水水洗去除其它杂质，解吸、回收有机溶剂，得浓缩液，喷雾干燥得20∽30％口服液绿原酸，由HPLC法测定。(6)、将浓缩液ρ＝1.20∽1.25，用95％乙醇沉淀，0∽10℃，20小时以上，回收溶剂。(7)、将母液加水水沉，升温至70∽90℃，加入IV-B型澄清剂，抽滤得澄清液。(8)、减压浓缩液ρ＝1.10∽1.25，加入0.5∽3％活性炭，PH至5.0，微沸0.3∽1小时，洁净室内压滤。(9)、喷雾干燥得注射用金银花提取物，含量为20∽30％的绿原酸，由HPLC法测定。(10)、将(7)的澄清液加入精制的β-CD，绿原酸与β-CD的克分子比等于0.5∽5，络合反应3∽10小时，过滤放置0∽10℃，结晶，离心，水洗，真空45∽70℃干燥。(11)、解络，加入15∽30倍的环己酮，回流1∽3小时，抽滤得母液，回收母液得浓缩液，真空干燥得含量为90％左右绿原酸，由HPLC法测定。(12)、将(11)的浓缩液，用乙醇溶解，上硅胶层析柱，分段解析，用硅胶-G板确认相同部分，回收溶剂，结晶减压干燥或冷冻干燥得绿原酸，由HPLC法测定含量为≥95％绿原酸，二次上柱层析得≥99％的绿原酸，mp206∽208℃，白色结晶粉末；异绿原酸mp148∽150℃，淡黄色结晶粉末，总收得率1.5∽3.0％。所述浓度和含量为重量百分浓度，所述倍数为重量倍。
4.根据权利要求1或2所述的一种金银花高纯度绿原酸提取工艺，其特征是所述工艺如下(1)、金银花药材预处理，去杂、去霉变、清洁、凉干或晒干。(2)、加入15倍金银花重量的口服级饮用水，加入NaHSO3使其浓度达到1.5％，加入收率促进剂使其浓度达到1‰，升温70∽90℃，PH5∽6，间隔搅拌2小时，提取3次，第三次母液套用于下一批投料。(3)、合并NO.1.2次提取母液，加入药圣1+1澄清剂II-B或IV-B5/万，缓缓加入使其浓度达到3/万，升温70∽90℃，PH5∽6，间隔搅拌1.0小时，板框压滤得澄清滤液。(4)、回调至PH5.0，搅拌1.0小时，板框压滤，或加入硅藻土助滤，得澄清滤液。(5)、大孔吸附树脂柱B230特型树脂预处理好待用，将所述澄清滤液上柱，流速5∽8BV，以不泄漏为准，期间不时真空倒柱以利充分吸附，结束后，用PH4∽5水水洗去除其它杂质，解吸、回收有机溶剂，得浓缩液，喷雾干燥得20∽30％口服液绿原酸，由HPLC法测定。(6)、将浓缩液ρ＝1.20∽1.25，用95％乙醇沉淀，0∽5℃，24小时以上，回收溶剂。(7)、将母液加水水沉，升温至80℃，加入IV-B型澄清剂，抽滤得澄清液。(8)、减压浓缩液P＝1.10∽1.25，加入1％活性炭，PH5.0，微沸0.5小时，洁净室内压滤。(9)、喷雾干燥得注射用金银花提取物，含量20∽30％绿原酸，由HPLC法测定。(10)、将(7)的澄清液加入精制的β-CD，绿原酸与β-CD的克分子比等于0.5∽5，络合反应4小时，过滤放置0∽5℃，结晶，离心，水洗，真空60℃干燥。(11)、解络，加入20倍的环己酮，回流2小时，抽滤得母液，回收母液得浓缩液，真空干燥得含量为90％左右绿原酸，由HPLC法测定。(12)、将(11)的浓缩液，用乙醇溶解，上硅胶层析柱，分段解析，用硅胶-G板确认相同部分，回收溶剂，结晶减压干燥或冷冻干燥得绿原酸，由HPLC法测定含量为≥95％绿原酸，二次上柱层析得≥99％的绿原酸，mp206∽208℃，白色结晶粉末；异绿原酸mp148∽150℃，淡黄色结晶粉末，总收得率1.5∽3.0％。所述浓度和含量为重量百分浓度，所述倍数为重量倍数。
全文摘要
本发明涉及一种金银花高纯度绿原酸提取工艺，在金银花高纯度绿原酸提取工艺的β－CD络合工艺中加入环己酮解络、转型和制备高纯度绿原酸。所述工艺分为四部分(1)是通过加入NaHSO
文档编号C07C69/732GK1793105SQ200510020080
公开日2006年6月28日 申请日期2005年12月16日 优先权日2005年12月16日
发明者毕思彬, 周河龙, 罗文伟, 吴茂芝, 曾爱民, 王建平 申请人:抚州苍源药业开发有限公司