改性的氨基酸的制作方法

专利名称：改性的氨基酸的制作方法
技术领域：
本发明涉及改性的氨基酸及其作为肽和氨基酸模拟物(mimetic)或类似物的结构单元的用途。

背景技术：
氨基酸衍生物被用作或已被用作化学制品部分，其模拟具有改良的稳定性、降解或反应性特性的氨基酸的生物功能，尤其在肽模拟物中使用这类改性的氨基酸或氨基酸类似物。例如，氨基酸衍生物已应用于用于治疗人类或动物疾病的范围广泛的药物和治疗剂或农作物保护剂如除草剂、杀虫剂或杀真菌剂的合成和制造。
改性肽的设计中的一个特别方面是通过提供它们的天然或非天然的氨基酸残基的三维排列以与它们的生物目标如受体、酶、蛋白质和其它大分子或小分子相互作用和/或连接至它们的生物目标如受体、酶、蛋白质和其它大分子或小分子，从而获得代谢稳定且仍发挥它们的所需特性的产物的目的。作为一个实例，二级结构肽模拟的方法是基于生物学意义的蛋白质先导研发新的非肽药物试剂的理论方法(Eguchi等人，Mini-Reviewsin Medicinal Chemistry(2002)，2(5)447-462)。氨基酸衍生物包括酮、醛、缩醛、酯、醚等，并设计为增强的稳定性，已延长例如肽药物的生物利用度或增强其与具体目标的反应性而用于目标抑制。
在某些领域，先导化合物源自天然或非天然肽的测试库。通常，由于这类先导代谢不稳定或显示其它不利的物理化学特性，它们不能用作药物或其它生物活性物质，因而通过各种方式改变这类先导，例如通过制备逆-、反-和逆-反类似物，通过导入原始肽基序的其它构象的固定、插入或缺失，本发明的化合物可用作结构单元和子结构以获得生物活性部分，或其本身是生物活性的(WO 94/05311 A1)。例如Ranganathan等人(J.Chem.Soc.(1)(1993)92-4)描述了作为逆肽模拟物的草酰胺。
根据US 5,618,914 B，公开了肽模拟物形成β-转角基序。其中提供了用于合成模拟物的模组件或结构单元，其能组装成各种三维约束的β-转角基序。这些结构单元是氨基酸衍生物，其中连接基团被连接至模板氨基酸的氨基基团。
肽模拟物是小的类蛋白质链、环或环/链结合，其包含天然和非天然的氨基酸。以连接至目标蛋白质为目的设计和合成它，以导致各种生物作用，从而模拟细胞中关键的相互作用。
这类作用的一个实例是诱导癌细胞成为所谓的吞噬作用的细胞程序性死亡的形式。当多细胞有机体内的所有健康细胞不再被需要时，它们均进行细胞程序性死亡；但癌细胞具有躲避吞噬作用以及身体试图除去它们的能力。因此，肽模拟物是研究者、研究实验室和研究机构广泛努力的部分，以产生通过在特性细胞内的重建或活化凋亡途径的方式治疗癌症。
在WO 2005/103012 A中，公开了联氨基取代的杂环腈氨基酸衍生物，在许多其它物质中，其用作半胱氨酸蛋白酶抑制剂。
DE 1150391公开了合成芳族联氨的方法。这些化合物用作染料中的UV吸收剂。
已报道了模拟蛋白β-折叠片的结构和氢键模式，但已不具体指向结合蛋白质的化合物。Kemp和合作者描述了2，8-二氨基表吲哚二酮分子模板，其模拟肽β-股的一个边缘的氢键功能并将该β-股连接至肽以产生类似于分子内氢键的β-折叠片结构(Kemp等人，J.Org.Chem.(1990)554650-4657). WO 01/14412和Nowick等人的文章(J.Am.Chem.Sec.(2000)122:7654-7661)中公开了β-折叠片模拟物。其中，C-α原子被5-氨基-2-甲氧安息香酸取代，其中甲氧基与酰胺基形成氢键，从而形成刚性结构，其在肽上施加平的β-折叠片基序的三维结构。该氨基酸类似物已在分子动态学模拟中进行研究，以研究二聚作用和β-折叠片折叠机理(Yu等人，ProteinsStructure，Function，and Bioinformatics(2004)54116-127)。


发明内容
本发明的目的是提供具有广泛应用，尤其是在制备具有所需特性的分子的改性肽的合成中作为结构单元和子结构的新的氨基酸模拟物。
因此，本发明提供一种具有通式1的化合物，

式1 其中 ●X是CO-联氨与NR1-草酸、草酸酯或草酰胺基团之间的连接，且是未取代的5-11元杂芳基，或选自C3-20-环烷基、3-20元杂环基，以及 ■直链， ■支链， ■环状或稠环或双环或稠双环的 C1-20-烷基、C2-20-烯基或C2-20-炔基，优选C2-10-烷基的任选取代的基；以及 ●R5选自-SR10、-OR10或-NR10R11，条件是-NR10R11不是氨基酸酰肼的酰胺官能团，或R5可与R2或R3合作形成键或8-10元杂环，以及 ●R10和R11是任选取代的并独立地选自H、C3-14-环烷基、C5-14-芳基、3-14元杂环或杂芳基、直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基以及 ●R3和R4一起可组成至基团R12的双键；其中R12是任选取代的并选自C3-14-环烷基、3-14元杂环或杂芳基，直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基；以及 ●R2是任选取代的并选自H、C3-14-环烷基、3-14元杂环或杂芳基、直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基；优选R2是H；以及 ●R1、R3和R4是任选取代的并独立地选自H、C3-14-环烷基、C5-14-芳基、3-14元杂环或杂芳基、直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基；以及 ●任选地，R1、R2、R3和R4中至少两个与X可合作形成(优选单环)3-10元环，优选1、2、3或4环由R1、R2、R3、R4和X形成，甚至更优选X或作为另一种选择的R2与R3和R4之一合作形成环；或者 其酯、酰胺、盐、立体异构体或消旋体； 条件是 ●其中X是CH2，R3和R4通过单键相连，且R2选自 ■H(或D或T)， ■C3-20-环烷基 ■C5-20-芳基 ■3-20元杂环或杂芳基 ■直链或支链C2-20-烯基、C2-20-炔基，或未取代的C1-4-烷基，以及 ●其中X是杂芳基，优选X不与R3、R4或R5合作形成环，尤其是杂环烷环。
本发明的化合物可用作肽模拟物合成的结构单元，作为与天然或非天然氨基酸的反应搭档或作为蛋白质中的氨基酸取代基。联氨和草酸、酯或酰胺的特性是其对天然氨基酸胺键的模拟能力。
带有联氨和草酸基团的化合物已例如在WO 97/22619、Borloo等人(L.Pept.Science 2(3/4)(1995)198-202)、US 4 863 947 A、Cave等人(Europ.J.Med.Chem.25(1)(1990)75-9)、WO 20051075475、JP2000 141893和WO20051103012中描述，其作为h或多或少惰性药物试剂或杀虫剂，但不作为肽模拟物合成的氨基酸模拟物。本发明的化合物，尤其是在它们的优选实施方案中，被设计它们与其它氨基酸的反应性，考虑标准肽合成的要求，例如使用保护基团。
在一个具体实施方案中，当X和R1合作形成环烷基环时，R5不包含另一个联氨基，R2不与R3或R4一起形成芳环，且R3和R4均不含有硫。优选地，当X和R1形成环烷基环时，X是3、4、5或6元环的一部分。尤其优选基团X不包括1，6-二氮杂萘或萘啶。这些限制性条件也可推广至其它实施方案中的式1的其它化合物。优选地，NR10R11中的基团R10和R11不共价连接至且不包含除了式1的NR3R4NR2的联氨基团之外的另一联氨基团。优选X是3、4、5、6、7、8、9、10或10-15元的。如果R3或R4中至少一个形成酰胺，那么酰胺优选连接至酸性基团，优选保护基团。代替一个或多个氨基酸的这些结构单元可用于肽模拟，以修饰各种肽和蛋白质。还包括所述化合物的药用盐。在Handbook of Pharmaceutical SaltsProperties，Selection，andUse，P.H.Stahl和G.Wermuth(编者)，出版者Helvetica Chimica Acta，Zürich 2002中给出了对药用盐的纵览。
任何芳基或杂芳基优选是5-20元的，更优选5-15或6-10元的，尤其是6元的，任何环烷基或杂环基优选是3-20元的，更优选5-15或5-10元的，尤其是6-8元的，任何烷基、烯基或炔基，任选主链是取代的，优选是2-20元的，更优选3-15或4-10元的，尤其是5-8元的。
本发明提供如式1的化合物所示的氨基酸的某些新颖的衍生物，其中在原始模板中，氨基酸(例如，但不限于，天然或非天然、任选取代的、α、β、γ等至ω氨基酸)是在由羧酸取代的且带有作为取代基或作为环的一部分的氨基酸基团的碳环芳族或杂环化合物中，通过由草酸官能团取代原来的碱性氨基，氨基和羧酸的官能性在形式上发生翻转，从而导致分子酸性末端，并且原来的酸性端转变为酰肼，从而导致分子碱性末端。
优选地，在根据式1的化合物中，烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、n-丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、异物基、新戊基、己基、2-己基、3-己基或3-甲基戊基。此外，烯基优选是乙烯基、丙烯基、1-丁-3-烯基、1-戊-3-烯基或1-己-5-烯基。炔基优选是乙炔基、丙炔基、丁炔基或戊炔-2-基。同样优选地，烷氧基(或O-烷基)是甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、n-丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、己氧基或3-甲基戊氧基。环烷基优选是环丙基、环丁基、环戊基或环己基，取代的或未取代的。
芳基优选是苯基、1-萘基、2-萘基、茚满基、茚基、二氢萘基、四氢萘基或6，7，8，9-四氢-5H-苯并[a]环庚烯基，取代的或未取代的。
杂芳基优选是吡啶基、嘧啶基、喹啉基、苯并噻吩基、吲哚基、二氢吲哚基、哒嗪基、吡嗪基、异氮杂茚基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、2，3-二氮杂萘基、咪唑基、异噁唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、中氮茚基、吲唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、噁唑并吡啶基、咪唑并吡啶基、异噻唑基、1，5-二氮杂萘基、噌啉基、咔唑基、β-咔啉基、异苯并二氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢异喹啉基、异二氢吲哚基、异苯并四氢呋喃基、异苯并四氢噻吩基、异苯并噻吩基、苯并噁唑基、吡啶并吡啶基、苯并四氢呋喃基、苯并四氢噻吩基、嘌啉基、苯并间二氧杂环戊烯基、三嗪基、吩噁嗪基、吩噻嗪基、碟啶基、苯并噻唑基、咪唑并吡啶基、咪唑并噻唑基、二氢苯并异噁嗪基、苯并异噁嗪基、苯并噻嗪基、二氢苯并异噻嗪基、苯并吡喃基、苯并噻喃基、香豆素基、异香豆素基、色酮基、苯并二氢吡喃-4-酮基、吡啶基-N-氧化物、四氢喹啉基、二氢喹啉基、二氢喹啉酮基(dihydroquinolinonyl)、二氢异喹啉酮基、二氢香豆素基、二氢异香豆素基、异吲哚酮基、苯并二噁烷基、苯并噁唑啉酮基、吡咯基-N-氧化物、嘧啶基-N-氧化物、哒嗪基-N-氧化物、吡嗪基-N-氧化物、喹啉基-N-氧化物、吲哚基-N-氧化物、二氢吲哚基-N-氧化物、异喹啉基-N-氧化物、喹唑啉基-N-氧化物、喹喔啉基-N-氧化物、2，3-二氮杂萘基-N-氧化物、咪唑基-N-氧化物、异噁唑基-N-氧化物、噁唑基-N-氧化物、噻唑基-N-氧化物、中氮茚基-N-氧化物、吲唑基-N-氧化物、苯并噻唑基-N-氧化物、苯并咪唑基-N-氧化物、吡咯基-N-氧化物、噁二唑基-N-氧化物、噻二唑基-N-氧化物、三唑基-N-氧化物、四唑基-N-氧化物、苯并噻喃基-S-氧化物或苯并噻喃基-S，S-二氧化物，取代的或未取代的。
在另一个实施方案中，杂环基或杂环烷基优选是4-，5-，6-或7-元环的碳环体系，其包括包含至少一个至四个选自氮、氧或硫的杂原子的8-18原子的稠环体系。更优选地，杂环烷基或杂环基是吗啉基、硫代吗啉基、硫代吗啉基-S-氧化物、硫代吗啉基-S，S-二氧化物、哌嗪基、高哌嗪基、吡咯烷基、吡咯啉基、四氢吡喃基、哌啶基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、高哌啶基、高吗啉基、高硫代吗啉基、高硫代吗啉基-S，S-二氧化物、噁唑烷酮基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、二氢吡嗪基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢呋喃基、二氢吡喃基、四氢噻吩基-S-氧化物、四氢噻吩基-S，S-二氧化物和高硫代吗啉基-S-氧化物。
卤素优选是F、Cl、Br或I。
式1化合物中的化学基团优选被1、2、3、4、5或6个取代基取代。术语“任选取代的”是指各化学基团的至少一个氢原子的取代，其中取代基选自-OH、-SH、-NH2、-SO2、-SO3、-PO4、-O-C1-4-烷基、-S-C1-8-烷基、-NH-C1-8-烷基、-C1-8-烷基、-O-C2-8-烯基、-S-C2-8-烯基、-NH-C2-8-烯基、-C2-8-烯基、-O-C2-8-炔基、-S-C2-8-炔基、-NH-C2-8-炔基、-C2-8-炔基、-C5-10-芳基或芳氧基、-C5-10-羟基芳基、或5-10元杂芳基或杂芳氧基、-C5-10-环烷基或-环烯基、5-10元杂环烷基、胍基(guanidinyl)、卤素原子、C2-16-酰基、-酰胺基或-酰氧基、氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、叠氮基、氰基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基-C1-8-烷基、C5-10-芳硫基、5-10元杂芳硫基、5-10元杂环基、杂环硫基或杂环氧基、巯基、C1-8烷硫基、氨磺酰基、氨基羰基氨基、羟氨基、烷氧氨基、硝基、-SO-C1-8-烷基、-SO-C5-10-芳基、-SO-C5-10-杂芳基、-SO2-C1-8-烷基、-SO2-C5-10-芳基和-SO2-C5-10-杂芳基、羧基、羧基-C1-8-烷基、CF3、取代的氨基。所述取代基任选被进一步取代。
优选地，R1或R2是氢或甲基。
杂取代提供由优选选自O、S、N或P的杂原子取代主链碳原子的取代。这类杂取代被包含在术语“任选取代的”之内。这些杂原子也计算在基团大小之内。氢不计算在内。
如果X是芳基或杂芳基基团，那么X优选不被进一步取代。在刚性芳族基团的情况下，可通过侧链取代基防止进一步收缩而维持X基团的伸缩性，因此式1的化合物仍可采用作为一般的氨基酸衍生物的必需的功能。如果X是取代的芳基或杂芳基，那么取代基优选选自OH、O-、NH-或S-C2-10-烷基、C0-10-烷基-5-14元(杂)芳基或-(杂)环烷基、SH、NH2。
式1中的基团X形成CO-联氨和NR1-草酸或酯基团之间的连接基团。X基团的原子编号采用使用希腊字母的针对氨基酸的标准位次命名法，即，α位是在X中与CO-联氨基团相连的原子的位置(如同在氨基酸中与羧酸基团相连的原子，从该处可衍生得到CO-联氨基团)。β位将是α原子之后的下一个主链原子，以及诸如此类。NR1-草酸或酯基团可在α、或β、γ等位置上与X结合，作为α、β、γ等氨基酸。
化合物优选是在C-α位置上的L-或D-立体异构体。
在一个具体实施方案中，式1中的X是如下式2-6之一的化学基团
式2 式3式4式5 式6 其中R6、R7、R8和R9是任选取代的，并独立地选自H、C3-14-环烷基、C5-12芳基、3-12元杂环基或杂芳基以及直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基或C2-14-炔基；并且任选地，R6、R7、R8和R9中的至少两个可合作形成3-22元(优选3-12元)任选取代的或稠环烷基或杂环基环，或其双环；且n和m独立地是0-5的整数，优选1、2、3或4。
优选地，X是天然的或非天然的氨基酸官能团的取代物。因此，这些氨基酸的侧链由X表达。在一个具体实施方案中，X是(优选α、β或γ)NR1-草酸或酯结合基团，选自C1-2-烷基、胍基丁基(guanidinylbutyl)、2-甲基-丁基、苯基乙基、p-羟苯基乙基、3-吲哚基乙基、羟乙基、甲基硫丙基、硫乙基、C2-3-烷基酸、C2-3-烷基酰胺基、氨基戊基、4-咪唑基乙基，或X和R1合作形成丁基，与NR1-草酸或酯基团的氮形成吡咯烷环，其中α是指式1的CO-联氨和NR1-草酸、草酸酯或草酸酰胺基团连接至X基团的相同原子，优选碳(“C-α”)上，β是指式1的CO-联氨和NR1-草酸、草酸酯或草酸酰胺基团连接至X基团的相邻原子(优选分别在“C-α”和“C-β”碳原子)上，以及γ是指式1的CO-联氨和NR1-草酸、草酸酯或草酸酰胺基团连接至由一个原子(优选C原子“C-β”)隔开的X基团的原子(优选“C-α”和“C-γ”碳原子)上。
在一个尤其优选的实施方案中，X是-CHR13-，其中R13是H或D或选自如下氨基酸的氨基酸侧链丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯基丙氨酸、辅氨酸、4-羟基辅氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸，优选其L-对映异构体。
术语“氢”或“H”也包括氢的不同同位素，如H、D(即2H)或T(即3H)。如C、N、O、S或P的其它元素也包括这些元素的所有已知的同位素，稳定的或不稳定的。
优选R10和R11选自H、未取代的C1-5-烷基、C2-10-烯基、C2-10-炔基、C3-14-环烷基、C5-14-芳基、3-14元杂环基或3-14元杂芳基。
在另一个实施方案中，X选自O-、S-、N-或P-杂取代的3-20元O-、S-、N-或P-杂取代的杂芳基或选自任选取代的杂环烷基、直链或支链的1-20元杂烷基、2-20元杂烯基或杂炔基，尤其选自除1，6-二氮杂萘之外的O-、S-、N-或P-杂取代的3-20元杂环。
在任何情况下优选R3和R4之一是保护基，优选Fmoc。
尤其优选的是如上所述的根据式1的化合物，其选自下表1中的化合物。这些化合物可以是与表1的1个、至少2个、至少3个或至少4个不同化合物配套的形式。如所描述的带有Fmoc保护基的化合物，如表1中所描述的在它们的联氨或草酸官能团上带有其它保护基的化合物也包含在本发明之内。但是，Fmoc是优选的保护基。
表1化合物



在另一个优选的实施方案中，R3和R5形成键，从而得到通(子)式10的杂环化合物，
式10 其中X、R1、R2和R4如上所定义。式10的化合物类似于例如通过Zaleska等人(Pol.Synthesis 16(2003)2559-2563)和Lenman等人(J.Chem.Soc.Perkin Trans.1(1997)2297-2311)已知的1，2，5-三氮杂卓(triazepine)结构(尤其是如果X是C1-烷基)。但是，根据本发明，所有环键都是单键且环具有酰胺基团和草酸基团(oxalic group)。由于仅有较少的1，2，5-三氮杂卓类型的物质是已知的，因而该方法提供一种获得该环体系的新方法。在另一个实施方案中，R2和R5形成键，从而得到另一种杂环化合物。
在进一步优选的实施方案中，所述化合物选自下表2。也可包括与上述表1的化合物配套的这些化合物。
表2非α化合物
在优选实施方案中，R3或R4是N-保护基，其选自Boc、Fmoc、Alloc、三氟乙酰基、甲氧羰基、乙氧羰基、苄氧羰基、2-(三甲基硅基)乙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、芳基磺酰基、2-(三甲基硅基)-乙基磺酰基、三苯甲基，和/或R5是羧酸保护基或活化基团，选自OMe、OEt、O-t-Bu、OBn、OCHPh2、苯乙酮酯、烷氧基烷基酯、2，2，2-三氯乙酯、2-(三甲基硅基)乙酯、2-甲苯磺酰基乙酯、硅酯或活化基团，优选N-羟磺胺吡啶酯、1-羟苯并三唑酯、4-硝基苯基酯，或原位制备的酯，优选使用试剂HNTU(＝2-(内-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亚胺)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯)、HOCt(＝1-羟基-1H-1，2，3-三唑-4-羧酸酯)、HONB(＝N-羟基-5-降冰片烯-2，3-联羧基)，并且其中保护基团或活化基团均可以它们的聚合物形式或树脂结合形式使用。
优选的是本发明的酯或酰胺，优选带有保护基团或活化基团。在本发明的一个具体实施方案中，末端氨基由保护基取代，所述保护基选自Boc、Fmoc、CBz、Alloc、羰基、磺酰基、亚磺酰基、磷酰基、氧磷基。另一个具体实施方案的特点在于末端羰基的酯，该酯(优选苄基酯或丁基酯)作为保护基团，或作为具有与原始的羧酸相比增强的反应性的活化基团。可使用另外的保护基团或活化基团，如“Handbook of Reagents for OrganicSynthesisActivating and Agents and Protecting Groups”.Pearson，Anthony J.；Roush，William R.；Editors.UK.(1999)，513pp.Publisher(Wiley，Chichester，UK)或者Protective Groups in Organic Synthesis.2nd Ed.Greene，Theodora W.；Wuts，Peter G.M.USA.(1991)，473pp.Publisher(John Wiley and Sons，Inc.，New York，N.Y.)中所描述的。
大部分保护基团是本领域已知的。胺或OH保护基的一个实例是具有一般反应性的苄氧羰基(benzylcarboxycarbonyl)(缩写Z或Cbz)
其中芳族苯基(Ph)可任选取代的，例如被卤原子取代(见实施例)，或如有机化学领域中已知的进一步变化，例如被允许在温和条件下进行脱保护的一个至三个烷氧基(代表性的是甲氧基)进一步取代。进一步优选的保护基包括t-丁氧羰基(t-BOC)
或9-芴甲氧羰基(Fmoc)保护基，
及其它。根据本发明的化合物中结合的保护基优选包括9-芴甲氧羰酰胺(Fmoc-NRR′)、t-丁氧羰基(Boc-NRR’)、氨基甲酸苄酯(Z-NRR′，Cbz-NRR′)、乙酰胺、三氟乙酰胺、苯邻二甲酰亚胺、苄胺(Bn-NRR’)、三苯基甲胺(Tr-NRR′)，任选被另外的氯原子取代，亚苄基胺、p-甲苯磺酰胺(Ts-NRR’)、N-烯丙氧羰基(Alloc)酯、甲酯、t-丁酯、苄基酯、S-t-丁基酯、2-烷基-1，3-唑啉、乙酸酯、新戊酸酯、安息香酸酯、磺酰酯、磷酰酯和氨基酸酯。根据本发明可使用的保护基的详细概述记载在“Synthesis of peptides and peptidomimetics”ed.M.Goodman，Vol.22a和22b(protecting and activating groups)，22c和22d(peptidelpeptidemimeticsynthesis)，Georg Thieme Verlag，Stuttgart，New York(2002)中。22c和22d还公开了侧链修饰的方法，当合成根据式1的(衍生的)化合物和本发明的肽模拟物时也可以使用该方法。
在根据本发明的化合物中，保护基优选取代R3、R4、R5或R10，从而形成CO-联氨或NR1-草酸基团的酯或酰胺，从而形式上取代R3、R4、R5或R10。
本发明还提供了一种制备上述所定义的式1的化合物的方法，其中根据式7的化合物或前体，
式7 以任何顺序与式8的联氨或联氨衍生物
式8 和式9的草酸、酯或衍生物接触，
式9 其中X、R1、R2、R3、R4和R5如上针对式1的最终化合物的定义，且L1、L2、L3和L4独立地选择任意的离去基团，优选L4是Cl或OH或活化的酯，例如苯基-或4-硝基苯基酯，或包括混合酐的酐，例如MeO-CO-CO-O-CO-CO-OMe或1，4-二噁烷-2，3，5，6-四酮。优选地，根据式9的化合物是草酸酯酰氯或草酸酐。X、R1、R2、R3、R4和R5中的两个之间的其它化学键可通过传统化学合成步骤形成，包括酯、酰胺和保护基团和活化基团的化学反应。优选地，式9的化合物可在加入式8的化合物之前或之后加入。如果所有化合物在一个步骤中加入，那么得到所有起始物质的混合物。
离去基团是有机化学领域中熟知的，并优选形成共轭酸(见如上所述的“Synthesis of peptides and peptidomimetics”)。它们的官能团特征在于固有的不稳定性。优选L1、L2、L3和L4独立地选自氨基(-NH2)、甲氧基(CH3O-)、羟基(HO-)、羧酸根(CH3COO-)、-NO3、F-、Cl-、Br-、I-、叠氮基(N3-)、硫氰酸根(SCN-)、硝基(-NO2)和氰基(-CN)。L2和L3优选是氢。
在最优选的实施方案中，R3或R4是保护基，优选是Fmoc，例如通过Fmoc-Cl酐与NH2-NH2，或更普遍的NHR3-R2L3反应而合成。
根据本发明的化合物优选用于制备具有其它氨基酸或氨基酸模拟物的肽模拟物。这类蛋白质或肽模拟物包括根据通式1的化合物
式1 其中X、R1、R2、R3、R4和R5如权利要求1-10中任一项中所定义的，作为分子部分，以及天然的或非天然的氨基酸或另外的氨基酸模拟物，优选通过酰胺键结合。因此，在其最低限度内，肽或蛋白质模拟物包含至少两个氨基酸或氨基酸模拟物，其中至少一个是如式1所描述的。优选蛋白质或肽模拟物包含至少三个、四个、五个或至少六个氨基酸或氨基酸模拟物(氨基酸类似武)。肽或蛋白质模拟物包含尤其是至少2个，优选至少3个，甚至更优选至少5个，尤其优选至少10个或最优选至少20个除了式1的化合物之外的天然的或非天然的氨基酸或另外的氨基酸模拟物。
或者，在肽或蛋白质模拟物中，X是CO-联氨和NR1-草酸或酯基团之间的连接，并且X是一个键，5-20元杂芳基或芳基，或任选地选自C3-20-环烷基、3-20元杂环基，和直链或支链C1-20-烷基、C2-20-烯基或C2-20-炔基的取代基；以及R5选自-OR10和-NR10R11，或R5与R2或R3合作形成一个键或8-10元杂环；以及R3和R4一起可组成至R12的双键；R1、R2、R3、R4、R10、R11和R12是任选取代的，且独立地选自H、C3-14-环烷基、C5-14-芳基、3-14元杂环基或杂芳基、直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基；以及任选地R1、R2、R3、R4和X中的至少两个合作形成3-12元环烷基或杂环烷基环；或者其酯、酰胺、盐、立体异构体或消旋体；作为分子部分，以及天然的或非天然的氨基酸或另外的氨基酸模拟物，优选通过酰胺键结合。如同根据式1的单独化合物的情况一样，当X是芳基或杂芳基时，X优选是未被取代的。式1的化合物最优选经其联氨或草酸基团连接至另一个主要氨基酸，优选通过两者连接至不同的氨基酸。因此，式1的化合物包含于在其它氨基酸、肽或其它氨基酸类似物中的肽模拟物中，优选包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个其它天然的或非天然的氨基酸。优选这些氨基酸中的至少一个选自丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯基丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸和辅氨酸，最优选连接在R3、R4或R5位置，在式1化合物中的这些位置上取代任何可能的取代基。另一个优选的化合物或肽模拟物子结构是苯基乙二胺，其可用于产生转角基序(turn mofit)。这类酰胺可模拟在蛋白质中发现的氨基酸的三维外观，例如酰胺键的氢键受体和供体特性。令人惊讶地，使用式1的化合物可产生大部分天然蛋白质结构，包括α-螺旋和β-折叠片。
因此，在一个优选实施方案中，肽模拟物模拟α-螺旋、β-折叠片或转角基序的三维结构。通过这个三维结构可形成天然蛋白质基序，其允许在大量蛋白质或肽部分中使用所述化合物。因此，可能形成具有各模板的生物功能性但具有作为其改良的化学性质的实例的改良的稳定性、生物利用度或分布的肽模拟物。
在蛋白质四级结构、蛋白质-蛋白质相互作用以及蛋白质聚集中普遍发生β-折叠片的氢键边缘之间的相互作用，并且包含在健康的生物过程以及从癌症和AIDS到炭疽热和阿尔茨海默病的疾病中。由于其基本性质，这些蛋白质-蛋白质的相互作用组成一种在生物过程中非常重要的分子识别。本发明的化合物可用于合成在序列选择性模式中识别蛋白质β-折叠片的改性的肽。在因特网上建立其中可并入本发明化合物的β-折叠片的数据库(http:llwww.igb.uci.edu/serverslicbs/)。
蛋白质的二级结构如α-螺旋、β-折叠片和β-转角是三维结构和蛋白质的生物活性的重要特征。肽和蛋白质结构的模仿已成为生物有机化学和药物化学的焦点。在药物活性化合物、人工受体、不对称催化剂和新材料的研发中，设计由短肽组成的二级结构模拟物已吸引了很多关注。Rizo和Gierasch(Annu.Rev.Biochem 1992.61387-418)综述了人工α-螺旋、β-折叠片和转角以及它们的设计的实质研究。这类模拟物的化学合成可如此中所描述的进行，例如通过使用式1的化合物的固相合成。可根据Rizo和Gierasch或Loughlin等人(Chem Rev 2004，1046085-6117)设计α-螺旋、β-折叠片和(β-)转角的折叠预后。
模拟蛋白质β-折叠片的结构和氢键模式的化合物作为候选药物以及作为研究蛋白质结构和稳定性的模型体系是非常重要的。β-折叠片的形成在许多与疾病和正常功能相关的生物过程中扮演关键角色。蛋白质之间的β-折叠片的相互作用已显示或假定包含在细胞信号和与通过丝氨酸/苏氨酸致活酶Raf的Ras和Rap的结合、通过PDZ区域的膜离子通道的聚类、通过细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的与淋巴细胞功能相关的抗原-1(LFA-1)的结合，以及CD4受体和HIV病毒蛋白gp120之间的相互作用相关的癌基因表达中，以断裂肽、蛋白水解酶，如HIV-1蛋白酶或高血压蛋白原酶，形成具有其肽基质的氢键的β-折叠片状网状物。HIV-1蛋白酶通过四-相互螯合的(four-interchelating)β-股二聚。Met阻抑物，包含在基因调控中的蛋白质，也起到β-折叠片二聚物的作用；在这种情况下，β-折叠片(thatforms)直接参与至DNA大沟的结合。许多蛋白质聚集以形成与阿尔茨海默病、卡特兹佛德-雅各布(Kreutzfeld-Jacob)病和其它朊蛋白病相关的不溶的β-折叠片结构，并且与三核苷酸(CAG)相关的进行性神经变性疾病重复。
本发明的化合物可提供氢键供体和受体模式交替排列如三肽β-股，并可用作β-股模拟物以形成与适当的分子骨架结合的β-折叠片状结构。通过氢键供体和受体功能性实现在β-折叠片中的根据式1的化合物的应用，例如根据如下安排
三肽β-股 Ac-NXO-NMe三肽β-股模拟物 图1中示出了β-股中的化合物的具体实施例的2D和3D。
在20蛋白质的氨基酸中，辅氨酸是氨基酸的Cα-N键是吡咯烷环的一部分的唯一氨基酸。这个环状侧链强烈限制了肽的构象。经常观察到辅氨酸在β-转角结构的(i+1)位置上。辅氨酸衍生物(其中X与R1合作形成环结构)还可用作β-转角模拟物，如图3的实施例是转角基序的结构。
式1的化合物例如可衍生自天然氨基酸，其中氨基酸的氨基官能团通过草酸连接(ligation)而转化为羧基官能团，并且羧基官能团通过联氨转化为酰胺官能团。在对氨基酸的氨基和羧基官能性的模拟中，这些反转的官能性可用于相同的目的，如使用相同或相似的氨基酸保护基的液相或固相蛋白质合成。
本发明提供了一种使用通式1的化合物合成肽模拟物的方法，其中包含胺的反应目标与根据式1的化合物接触，且R3和R4组成带有保护基(优选Fmoc)的酰胺。通过这一步骤，在肽合成的标准条件下形成肽键。在普通的肽合成过程的这一步骤中，待结合的氨基酸被根据式1的化合物取代。包含氨基的反应目标可以是氨基酸或衍生物或另一目标，如固体树脂。尤其优选Fmoc和Boc保护基，因为它们可再次通过不可逆过程除去，其中Fmoc和Boc的羧基通过CO2的消除而被除去，优选在三氟乙酸的酸性条件下。这具有高产率的优点，尤其在结合固相合成时，其中在固体树脂上逐步合成肽。与在核糖体处的天然生物合成相反，固相肽合成优选以C-末端至N-末端的方式进行，其中通过任意保护基保护氨基。在下一步中，除去该保护基，例如根据式1的化合物的带有R3和R4保护基的酰胺。然后，通过将下一个氨基酸或氨基酸模拟物的羧基官能团连接至目前未保护的氨基官能团上而进行氨基酸链的延长或氨基酸模拟物的连接。在本领域已知的其它化合物中，根据本发明的化合物是这类氨基酸模拟物的一个例子。
在此处提供的方法的另一方面，优选在除去R3和R4保护基的步骤之后，氨基酸或氨基酸模拟物(优选带有被保护的氨基)与根据式1的化合物接触。
优选地，肽模拟物合成的方法是一种固相合成方法，即反应目标是固体，优选是固体树脂，例如Merrifield树脂，珠状的苯乙烯和氯甲基苯乙烯的共聚物(Steward和Young，Solid Phase Peptides Synthesis，Pierce，Rockford，IL(1984))。这包括氨基酸或其它化合物已被连接至树脂以及式1的化合物被连接至这些固定化氨基酸或化合物的氨基上的情况。当然，其他氨基酸和其它化合物然后可连接至式1的化合物。
在实施例中，已应用数个固相合成方法将式1的结构单元结合为人工肽。这些结构单元也可由肽合成自动仪器使用。术语“保护基”还包括保护基的固相形式。由于这些结构单元可并入固相合成和自动化肽合成器，因而存在式1化合物的众多应用。
另一方面，本发明提供了包含式1化合物的蛋白质或蛋白质片断，作为在蛋白质氨基酸序列的任何位置上的共价结合插入物。为了这一目的，使用人工的、生物的或微生物的方法合成所述蛋白质。式1的化合物可连接至这类蛋白质或蛋白质片断或另个片断，例如一个蛋白质的两个片断，由此式1的化合物插入至蛋白质的氨基酸序列中。
为了这一目的，提供制备蛋白质或蛋白质片断的方法，包括将式1化合物连接至肽、蛋白质或蛋白质片断的步骤。如上所提到的，式1化合物的优点在于可使用标准蛋白质和肽的合成方法。
优选地，所述方法进一步包括将另一肽、蛋白质或蛋白质片断连接至式1化合物上的步骤。优选的是使用式1化合物作为蛋白质例如亲和肽中的氨基酸取代物(其中蛋白质的一个或多个氨基酸被取代)，其中所述化合物稳定在特定的三维结构中的肽。
根据本发明的化合物的一个优选用途是作为间隔部分，尤其是作为亲水间隔。间隔部分具有广泛的应用。例如在生物化学中，间隔用于将药学试剂固定于生物分子例如抗体上，或为了色谱的目的，用于将亲和目标(affinity target)固定于树脂上。此处公开的化合物具有天然氨基酸的氨基和羧基的特征，并能通过标准蛋白质化学技术处理。因此，式1的化合物可用作连接子部分，其中连接子的长度可通过X基团的大小测定。尤其在生物亲和纯化领域中，由于与不需要的生物分子的低的非特定结合，这类连接子是优良的。
在另一方面，本发明提供了根据本发明的化合物作为动态组合库中的组分的用途。动态组合库由结构单元组装成的库成员组成，结构单元通过动态组合化学的可逆键相连接。动态组合化学是一种使用自组装方法产生用于例如主-客体相互作用和药物发现的化合物库的方法。本发明的化合物可作为这样的结构单元，氨基酸、蛋白质或肽模拟物作为库成员。
将通过下述图和实施例进一步阐明本发明，但不限于此。



图1A包含改性的丙氨酸(式1中的X是C1-烷基化的C-α)的β-折叠片模式的2D结构，较低股；B通过氢键稳定的β-折叠片的3D结构。
图2氢键β-折叠片二聚化合物的结构，A2D，B3D。
图3辅氨酸类似物的β-转角的结构，A2D，B3D。

具体实施例方式 实施例 缩写 Boct-丁氧羰基；DCC二环己基碳二亚胺；DCM:DCM:DCHU:二环己基脲；DIPA:二异丙基乙胺(＝Hünig’s碱)；DIC:二异丙基碳二亚胺；EtOH:乙醇；EtOAc:乙酸乙酯；EDCl.HCl:乙基二异丙基碳二亚胺盐酸盐；Fmoc:芴甲氧羰基；HOBt1-羟基苯并三唑；MeOH:甲醇；THF:四氢呋喃；TFA:三氟乙酸:Z:苄氧羰基。
(S)-2-(甲氧乙二酰基-氨基)-3-苯基-丙酸(实施例1)
单甲基草酰氯(3.34mL，36.32mmol)在0℃下滴加至DMF(15mL)中的L-苯基丙氨酸(3.0g，18.16mmol)和NaHCO3(7.63g，90.81mmol)溶液中。在室温下继续搅拌反应混合物2小时。蒸发除去DMF，所得剩余物溶解于水(50mL)中，用二乙醚(2×10mL)洗涤，用1NHCl酸化(pH4)并用EtOAc(3×15mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×5mL)洗涤，干躁(Na2SO4)并浓缩得到2.58g(56％)微黄色粘稠油状物。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)9.06(d，J＝9.2Hz，1H)，7.15-7.31(m，5H)，4.43-4.54(m，1H)，3.76(s，3H)，2.97-3.21(m，2H)。
N-[(S)-1-苄基-2-(N’-t-丁氧羰基-联氨基)-2-氧-乙基]-草酰胺酸甲基酯(实施例2)
在DCM(30mL)中的(S)-2-(甲氧基-草酰-氨基)-3-苯基-丙酸(实施例1)(1.6g，6.37mmol)溶液中加入HOBt(903.6mg，6.69mmol)，随后加入DCC(1.38g，6.69mmol)，并在室温下搅拌30分钟。将Boc-咔唑盐(883.8mg，6.69mmol)加入其中，并在室温下搅拌混合物过夜。过滤除去沉淀的DCHU，并蒸发浓缩滤液。通过随后使用冷的EtOAc的研制(trituration)和过滤除去其余的DCHU。使用1NHCl(10mL)、10％NaHCO3(10mL)、盐水(10mL)洗涤EtOAc溶液，干燥(Na2SO4)并浓缩得到2.1g粗化合物，通过柱色谱提纯粗化合物得到1.64g(70％)白色固体；熔点72-73℃；[α]D-28.6(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.2(br s，1H)，7.8(br d，J＝9.98Hz，1H)，7.19-7.35(m，5H)，6.56(br s，1H)，4.74-4.86(m，1H)，3.85(s，3H)，3.06-3.32(m，2H)，1.45(s，9H).13C NMR(200 MHz，CDCl3)δ(ppm)169.53，160.21，156.38，155.23，135.75，129.24，128.69，127.16，82.04，53.66，53.2，37.55，28.06。IR(KBr)v 4000-3292(br.)，3031，2980，1742，1688(br.)cm-1。
N-[(S)-1-苄基-2-(N’-t-丁氧羰基-联氨基)-2-氧-乙基]-草酰胺酸(实施例3)
将氢氧化锂(38mg，1.57mmol)加入至MeOH(10mL)中的N-[(S)-1-苄基-2-(N’-t-丁氧羰基-联氨基)-2-氧-乙基]-草酰胺酸甲基酯(实施例2)溶液中，随后加入2滴水。在室温下搅拌反应混合物1小时。蒸发除去MeOH，所得的剩余物溶解于水(30mL)中，用醚(2×10mL)洗涤。用冰浴冷却水层，用1N HCl酸化(pH＝4)并用EtOAc(3×10mL)萃取。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，干躁(Na2SO4)并浓缩得到333g(66％)灰白色固体；熔点82-85℃。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.32(br，1H)，8.9(br s，1H)，8.1(br d，J＝7.24 Hz，1H)，7.14(br，5H)，6.96(br，1H)，4.75(m，1H)，2.95-3.23(m，2H)，1.36(s，9H)。IR(KBr)v 4000-3300(br.)，3031，2981，2934，1689(br.)cm-1。
N-{(S)-1-苄基-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(实施例4)
在实施例2的步骤之后，使用(S)-2-(甲氧草酰基-氨基)-3-苯基-丙酸和Fmoc-咔唑盐，得到粗化合物，通过柱色谱提纯得到975mg(61％)白色固体；熔点91-93℃；[α]D-19.4(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.08(br s，1H)，9.38(br s，1H)，8.99(d，J＝8.4Hz，1H)，7.89(d，J＝7.04Hz，2H)，7.72(d，J＝6.26Hz，2H)，7.17-7.46(m，9H)，4.53-4.64(m，1H)，4.26-4.34(m，3H)，3.73(s，3H)，2.93-3.15(m，2H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)169.98，160.67，156.82，155.94，143.61，140.74，137.44，129.08，128.19，127.65，126.99，126.43，125.11，120.05，66.24，53.13，52.70，46.42，36.62。IR(KBr)v 4000-3275(br.)，3030，2954，1734，1704(br.)cm-1。
(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酸(实施例5)
在实施例1的步骤之后，使用单叔丁基草酰氯，获得250mg无色粘稠油状的粗化合物，其用于进一步的反应。
N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例6)
在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-苯基丙氨酸和Fmoc-咔唑盐，得到4.4g粗化合物，使用CHCl3-石油醚结晶得到3.6g(95％)白色固体；熔点160-161℃。Rf＝0.26(1.5:3.5 EtOAc/石油醚)；[α]D-11.2(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200 MHz，DMSO-d6)δ(ppm)9.94(br s，1H，d2o exch.)，9.35(br s，1H，d2o exch.)，7.88(d，J＝6.86Hz，2H)，7.73(d，J＝7.04Hz，2H)，7.17-7.45(m，9H)，6.93(d，J＝8.6Hz，1H，d2o exch.)，4.28-4.31(m，4H)，2.69-3.0(m，2H)，1.27(s，9H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)171.67，155.95，155.13，143.58，140.65，137.94，129.15，127.95，127.64，127.06，126.16，125.24，120.05，79.09，77.93，66.11，54.16，46.44，28.05。IR(KBr)v4000-3364，3309，3250，3037，3003，2980，1757，1692，1675，1517cm-1。
N-{(S)-1-苄基-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(实施例7)
在0℃搅拌下，将HCl饱和的EtOAc(10mL)缓慢加入至在EtOAc(10mL)中的N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例6)(1.2g，2.39mmol)溶液中。在室温下搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，并在高真空下干燥反应混合物。得到的剩余物溶解于干燥的DMF(30mL)中，将NaHCO3(1.41g，16.75mmol)加入至反应混合物中，随后于0℃在氩气中加入叔丁基草酰氯(0.59g，3.59mmol)。在室温下搅拌反应混合物30分钟。用水(100mL)稀释混合物，并用EtOAc(3×30mL)萃取，用1N HCl(30mL)洗涤合并的有机层，随后用10％NaHCO3(30mL)和水(3×30mL)洗涤，在随后用盐水(20mL)洗涤。干燥EtOAc层(Na2SO4)并浓缩得到770mg(60％)白色粉末；熔点106-108℃。Rf＝0.29(1.5:3.5 EtOAc/石油醚)；[α]D-18.0(c 0.5，DMF)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.49(br s，1H，d2o exch.)，7.64(d，J＝7.42Hz，3H，1H，d2o exch.)，7.46(d，J＝7.42Hz，2H)，7.14-7.31(m，9H)，6.96(br s，1H，d2o exch.)，4.66-4.77(m，1H)，4.21-4.35(m，2H)，4.06-4.13(m，1H)，2.96-3.19(m，2H)，1.37(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.02，158.36，157.78，156.03，143.46，141.23，135.69，129.32，128.74，127.77，127.22，127.14，125.14，119.95，85.01，68.11，53.35，46.80，37.59，27.61。IR(KBr)v 4000-3285，3065，2980，1751，1732，1692，1701，1517，1451，1371，1219，1155，1031，840，758，740，cm-1。
N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例8) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-苯基丙氨酸和z-咔唑盐，得到6.4g粗化合物，通过柱色谱提纯得到4.2g(89％)灰白色固体；熔点112-113℃。Rf＝0.23(1.5:3.5 EtOAc/石油醚)；[α]D-10.2(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.65(br s，1H，d2o exch.)，7.12-7.22(m，11H)，5.27(br s，1H，d2o可交换的)，5.03(s，2H)，4.45(m，1H)，2.78-3.21(m，2H)，1.24(s，9H)。13C NMR(200 MHz，CDCl3)δ(ppm)171.65，156.14，155.79，136.42，135.64，129.39，128.50，128.27，128.14，126.81，80.42，67.71，53.99，38.27，28.2。IR(KBr)v 4000-3372，3313，3002，2971，2929，1762，1688，1672，1628，1526cm-1。
N-[(S)-1-苄基-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-2-氧-乙基]-草酰胺酸叔丁基酯(Z-NPheO-O-t-Bu；实施例9) 在实施例7的步骤之后，使用N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例8)，得到770mg(60％)无色粘稠油状产物，经戊烷研制后得到白色粉末；熔点72.7℃。Rf＝0.29(1.5:3.5 EtOAc/石油醚)；[α]D-23.0(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.51(br s，1H，d2o exch.)，7.71(d，J＝8.2Hz，1H，d2o exch.)，7.24-7.31(m，10H)，6.95(br s，1H，d2o exch.)，5.12(s，2H)，4.72-4.83(m，1H)，3.04-3.26(m，2H)，1.48(s，9H)。13C NMR(200 MHz，CDCl3)δ(pprn)169.97，158.37，157.70，155.99，135.70，135.50，129.33，128.70，128.52，128.33，128.14，127.18，84.94，67.83，53.29，37.57，27.60。IR(KBr)v 4000-3293，3063，3032，2982，2934，1732(br.)，1703(br.)，1519，1498，1455，1371，1219，1154，1028，840，742，698cm-1。
N-[(S)-1-苄基-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-2-氧-乙基]-草酰胺酸甲基酯(Z-NPheO-OMe；实施例10) 在实施例7的步骤之后，使用N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例8)和甲基草酰氯，得到1.1g(94％)无色粘稠油状产物，经戊烷研制后得到白色粉末；熔点87-89℃。Rf＝0.42(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-24.6(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200 MHz，CDCl3)δ(ppm)8.52(br s，1H)，7.77(br s，1H)，7.14-7.22(m，11H)，5.02(s，2H)，4.73-4.76(m，1H)，3.67(s，3H)，2.85-3.36(m，2H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)169.92，160.07，156.47，156.07，135.64，135.47，129.25，128.68，128.52，128.36，128.15，127.16，67.88，53.63，53.25，37.59。IR(KBr)v 4000-3285(br.)，3031，2953，1742，1683，1525，1498，1456，1218，1028，980，741，697cm-1。
N’-[(S)-2-苄氧羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例11) 在实施例2的步骤之后，使用Z-L-色氨酸和Fmoc-咔唑盐，得到1.7g粗化合物，经柱色谱提纯得到1.39g(81％)白色固体；熔点191-192℃；[α]D-30.2(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200 MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.82(s，1H)，10.08(br s，1H)，9.37(br s，1H)，7.89(d，J＝7.04Hz，2H)，7.67-7.77(m，3H)，6.94-7.46(m，14H)，4.93(s，2H)，4.34(m，4H)，2.88-3.19(m，2H)。13C NMR(200 MHz，DMSO-d6)δ(ppm)171.79，155.99，155.76，143.62，140.68，136.88，136.04，128.22，127.67，127.41，127.09，125.27，123.99，120.82，120.08，118.48，118.2，111.26，109.87，66.15，65.21，53.93，46.46，27.84。IR(KBr)v4000-3385，3276，3062，2949，1730，1708，1694，1681，1668，1623cm-1。
N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例12) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-色氨酸和Fmoc-咔唑盐，得到1.56g(87％)白色固体产物；熔点181-182℃。Rf＝0.36(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-13.0(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.8(s，1H)，9.97(br s，1H)，9.36(br s，1H)，7.89(d，J＝7.04Hz，2H)，7.74(d，J＝8.0Hz，2H)，7.65(d，J＝7.24Hz，1H)，7.3-7.46(m，5H)，6.94-7.19(m，3H)，6.76(d，J＝8.8Hz，1H)，4.28(m，4H)，2.85-3.16(m，2H)，1.29(s，9H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)171.96，155.98，155.10，143.61，140.69，135.98，127.67，127.29，127.08，125.28，123.80，120.75，120.11，118.51，118.11，111.25，109.93，77.90，59.72，53.41，46.48，28.08，27.79。IR(KBr)v4000-3328，3052，2977，2933，1748，1674，1626cm-1。
N-[(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(Fmoc-NTrpO-O-t-Bu；实施例13) 在实施例7的步骤之后，使用N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例12)，得到882mg(83％)无色粘稠油状产物，用戊烷研制后得到灰白色粉末；熔点157-159℃。Rf＝0.24(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-37.2(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.4(br s，1H)，8.19(br s，1H)，7.65-7.81(m，4H)，7.52(d，J＝7.24Hz，2H)，6.96-7.4(m，9H)，4.72-4.82(m，1H)，4.12-4.41(m，3H)，3.28(m，2H)，1.46(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.4，158.43，157.58，156.06，143.46，143.39，141.21，136.12，127.79，127.16，125.13，123.95，122.18，119.97，119.76，118.53，111.43，109.23，85.04，68.01，52.9，46.76，27.96，27.59。IR(KBr)v 4000-3336(br.)，2979，1695，1507，1451，1371，1219，1153，758，740cm-1。
(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-(甲氧草酰基-氨基)-丙酸(实施例14) 在实施例1的步骤之后，使用L-色氨酸，得到185mg(65％)粘稠油状目标化合物。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.83(s，1H)，8.93(d，J＝8.6Hz，1H)，7.52(d，J＝8.02Hz，1H)，7.33(d，J＝7.24Hz，1H)，6.93-7.14(m，3H)，4.47-4.58(m，1H)，3.74(s，3H)，3.13-3.33(m，2H)。
N-[(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(Fmoc-NTrpO-OMe；实施例15) 在实施例2的步骤之后，使用(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-(甲氧草酰基-氨基)-丙酸(实施例14)和Fmoc-联氨，得到265mg粗化合物，经柱色谱提纯得到135mg(46％)白色固体，熔点141-142℃；[α]D-37.2(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.86(s，1H)，10.18(br s，1H)，9.43(br s，1H)，8.88(d，J＝7.62Hz，1H)，7.95(d，J＝7.64Hz，2H)，7.78(d，J＝7.04Hz，2H)，7.68(d，J＝7.62Hz，1H)，7.35-7.51(m，5H)，6.98-7.23(m，3H)，4.67-4.74(m，1H)，4.32-4.43(m，3H)，3.77(s，3H)，3.13-3.32(m，2H)。13CNMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)170.30，160.75，156.85，155.98，143.61，140.69，136.03，127.67，127.13，125.29，123.88，120.94，120.08，118.35，111.29，109.34，66.25，52.80，52.37，46.40，27.03。IR(KBr)v 4000-3389(br.)，3040(br.)，1741，1680cm-1。
N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例16) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-色氨酸和Z-联氨，得到2.16g(96％)粘稠油状产物，经戊烷研制后得到灰白色粉末；熔点88-89℃。Rf＝0.42(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-18.2(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.35(br s，2H)，7.49(d，J＝7.44Hz，1H)，6.91-7.18(m，10H)，5.25(br d，1H)，4.94(s，2H)，4.45(m，1H)，3.1(m，2H)，1.26(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.94，156.21，155.71，135.97，135.56，128.52，128.31，128.1，127.54，123.67，121.96，119.47，118.51，111.29，109.53，80.51，67.72，53.79，34.11，28.2。IR(KBr)v 4000-3303(br.)，3036，2977，1687(br.)，1499，1457，1393，1367，1226，1165，1049，741，697cm-1。
N-[(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁酯(Z-NTrpO-O-t-Bu；实施例17) 在实施例7的步骤之后，使用N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例16)，得到0.85g(80％)无色粘稠油状产物，经戊烷研制后得到灰白色粉末。Rf＝0.32(2:1石油醚/EtOAc)；[α]D-56.8(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.55(br s，1H)，8.26(br s，1H)，7.77(d，J＝8.02Hz，1H)，7.63(d，J＝7.42Hz，1H)，7.03-7.31(m，10H)，5.05(s，2H)，4.68-4.78(m，1H)，3.25(m，2H)，1.45(s，9H)。13CNMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.47，158.42，157.53，156.12，136.12，135.48，128.54，128.35，128.10，127.34，124.05，122.04，119.66，118.45，111.47，109.06，85，67.80，52.92，27.96，27.58。IR(KBr)v 4000-3328(br.)，3058，2981，2934，1736(br.)，1692(br.)，1517，1457，1371，1219，1153，838，742cm-1。
N-[(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(Z-NTrpO-OMe；实施例18) 在实施例7的步骤之后，使用N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例16)和甲基草酰氯，得到569mg(58％)白色固体产物，熔点:97-99℃。Rf＝0.12(1:1EtOAc/戊烷)；[α]D-37.4(c0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.81(s，1H)，10.13(s，1H)，9.31(s，1H)，8.82(d，J＝7.24Hz，1H)，6.94-7.63(m，10H)，5.1(s，2H)，4.63(m，1H)，3.72(s，3H)，3.19(m，2H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)170.25，160.75，156.77，156，136.53，135.99，128.33，127.93，127.7，127.06，123.79，120.88，118.28，111.27，109.38，65.95，52.77，52.36，27.13。IR(KBr)v 4000-3299(br)，3034，2954，1739，1702，1679，1524，1457，1436，1342，1266，1221，1027，1010，743，697cm-1。
碳酸2-溴-苄基酯4-{(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-3-氧-丙基}-苯基酯(实施例19) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-Tyr(2-Br-Z)-OH和Fmoc-联氨，得到2.5g粗化合物，经柱色谱提纯得到2.1g(94％)白色固体；熔点77-79℃。Rf＝0.57(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-5.8(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)9.95(br s，1H)，9.37(br s，1H)，7.89(d，J＝7.04Hz，2H)，7.68-7.75(m.3H)，7.55-7.67(m，1H)，7.33-7.54(m，8H)，7.16(d，J＝8.4Hz，2H)，6.98(d，J＝8.02Hz，1H)，5.31(s，2H)，4.22-4.36(m，4H)，2.7-3.04(m，2H)，1.29(s，9H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)171.56，155.96，155.17，152.80，149.25，143.59，140.69，134.05，132.66，130.69，130.29，128.05，127.66，127.13，125.29，122.99，120.68，120.09，78.04，69.22，63.25，54.11，46.44，33.30，28.10。IR(KBr)v 4000-3309，3250，2976，1763，1717，1684，1627cm-1。
N-{(S)-1-[4-(2-溴-苄氧羰基氧)-苄基]-2-[N’-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(Fmoc-NTyr(2-Br-Z)O-OMe；实施例20) 在实施例7的步骤之后，使用碳酸2-溴-苄基酯4-{(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-3-氧-丙基}-苯基酯(实施例19)和甲基草酰氯，得到970mg的粗化合物，经柱色谱(硅胶)提纯得到957mg(88％)白色粉末；熔点205-206℃；[α]D-10.2(c 0.5，DMF)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.10(br s，1H)，9.38(br s，1H)，9.04(br d，J＝9.2Hz，1H)，7.88(d，J＝7.62Hz，2H)，7.67-7.70(m，3H)，7.32-7.57(m，9H)，7.14(d，J＝9.18Hz，2H)，5.30(s，3H)，4.53-4.66(m，1H)，4.16-4.34(m，3H)，3.73(s，3H)，2.96-3.15(m，2H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)169.82，160.59，156.87，155.94，152.76，149.35，143.61，140.67，135.47，134.08，132.76，130.74，130.20，128.02，127.64，127.02，125.24，122.99，120.82，120.12，69.21，66.19，53.01，52.77，46.49，35.83。IR(KBr)v 4000-3382，3296，3019，2955，1765，1735，1709，1683，1509cm-1。
N-{(S)-1-[4-(2-溴-苄氧羰基氧)-苄基]-2-[N’-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(Fmoc-NTyr(2-Br-Z)O-O-t-Bu；实施例21) 在实施例7的步骤之后，使用碳酸2-溴-苄基酯4-{(S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-3-氧-丙基}-苯基酯(实施例19)和t-丁基草酰氯，得到440mg(84％)无色粘稠油状产物，经戊烷研制后得到白色粉末；熔点124-126℃。Rf＝0.38(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-12.4(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.53(br s，1H)，7.71-7.75(m，3H)，7.47-7.62(m，4H)，7.18-7.41(m，8H)，7.04-7.13(m，3H)，5.35(s，2H)，4.73-4.83(m，1H)，4.16-4.47(m，3H)，3.05-3.27(m，2H)，1.48(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)169.82，158.38，157.78，156.01，153.35，150.21，143.44，141.23，134.19，133.66，132.93，130.48，130.17，130.08，127.78，127.63，127.14，125.12，123.45，121.22，119.96，85.14，69.63，68.1，53.17，46.81，36.92，27.61。IR(KBr)v 4000-3291(br.)，2979，1761，1695，1509，1451，1372，1220，1153，758，740cm-1。
碳酸4-[(S)-3-(N’-苄氧羰基-联氨基)-2-t-丁氧羰基氨基-3-氧-丙基}-苯基酯2-溴-苄基酯(实施例22) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-Tyr(2-Br-Z)-OH和Z-联氨，得到1.26g(96％)粘稠油状产物，经戊烷研制得到灰白色粉末；熔点64-66℃。Rf＝0.78(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-15.6(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.61(br s，1H)，7.61(d，J＝7.82Hz，1H)，7.5(dd，J＝1.36，1.18Hz，1H)，7.07-7.38(m，12H)，5.36(br s，3H)，5.13(s，2H)，4.51(m，1H)，2.89-3.19(m，2H)，1.36(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.39，156.1，155.74，153.41，150.02，135.57，134.29，134.23，132.93，130.5，130.16，130.08，128.52，128.32，128.15，127.63，123.46，121，80.62，69.59，67.78，53.9，37.48，28.20。IR(KBr)v 4000-3287(br)，3034，2978，2932，1764，1683(br)，1509，1379，1368，1219，1163，1028，1018，751cm-1。
N-{(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-1-[4-(2-溴-苄氧羰基氧)-苄基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(Z-NTyr(2-Br-Z)O-O-t-Bu；实施例23) 在实施例7的步骤之后，使用碳酸4-[(S)-3-(N’-苄氧羰基-联氨基)-2-t-丁氧羰基氨基-3-氧-丙基}-苯基酯2-溴-苄基酯(实施例22)和叔丁基草酰氯，得到无色粘稠油状产物0.49g(94％)，经戊烷研制后得到灰白色粉末；熔点93-94℃。Rf＝0.73(1:1戊烷/EtOAc)；[α]D-10.4(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.53(br s，1H)，7.74(d，J＝8.2Hz，1H)，7.61(dd，J＝1.16，1.16Hz，1H)，7.5(dd，J＝1.56，1.74Hz，1H)，7.0-7.39(m，12H)，5.35(s，2H)，5.12(s，2H)，4.7-4.81(m，1H)，2.95-3.25(m，2H)，1.48(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)169.85，158.4，157.73，156.02，153.34，150.18，135.49，134.20，133.68，132.93，130.47，130.17，130.1，128.53，128.35，128.15，127.64，123.46，121.16，85.06，69.61，67.85，53.12，36.91，27.61。IR(KBr)v 4000-3287(br.)，3035，2981，1760(br.)，1508，1372，1218，838，750，696cm-1。
N-{(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-1-[4-(2-溴-苄氧羰基氧)-苄基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(Z-NTyr(2-Br-Z)O-OMe；实施例24) 在实施例7的步骤之后，使用碳酸4-[(S)-3-(N’-苄氧羰基-联氨基)-2-t-丁氧羰基氨基-3-氧-丙基}-苯基酯2-溴-苄基酯(实施例22)和甲基草酰氯，得到白色固体产物460mg(94％)；熔点78-79℃。Rf＝0.2(1:1EtOAc/戊烷)；[α]D-9.0(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.69(br s，1H)，7.92(d，J＝7.82Hz，1H)，7.6(dd，J＝0.98，0.98Hz，1H)，7.49(dd，J＝1.56，1.58Hz，1H)，7.06-7.38(m，12H)，5.34(s，2H)，5.10(s，2H)，4.75-4.82(m，1H)，3.76(s，3H)，3.0-3.26(m，2H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)169.81，160.05，156.54，156.12，153.4，150.15，135.47，134.17，133.65，132.93，130.42，130.19，130.1，128.53，128.37，128.13，127.64，123.46，121.14，69.64，67.89，53.7，53.09，36.93。IR(KBr)v 4000-3281(br.)，3034，2955，1761，1702，1688，1507，1379，1218，1027，1017，750，696cm-1。
(S)-2-(甲氧草酰基-氨基)-4-甲基-戊酸(实施例25) 在实施例1的步骤之后，使用L-亮氨酸，得到3.2g(96％)无色粘稠油状目标产物。
N-[(S)-1-(N’-t-丁氧羰基-联氨基羰基)-3-甲基-丁基]-草酰胺酸甲基酯(Boc-NLeuO-OMe)(实施例26) 在实施例2的步骤之后，使用(S)-2-(甲氧草酰基-氨基)-4-甲基-戊酸(实施例25)，得到4.5g粗化合物，经柱色谱提纯得到3.7g(75％)白色固体产物；在71℃软化且在83℃熔化；[α]D-43.4(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.90(br s，1H)，7.87(br d，J＝8.6Hz，1H)，6.89(br s，1H)，4.57-4.68(m，1H)，3.80(s，3H)，1.51-1.69(m，3H)，1.37(s，9H)，0.87(dd，J＝5.66，5.48Hz，6H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.67，160.43，156.52，155.36，81.77，53.64，50.44，40.64，28.05，24.54，22.87，21.66。IR(KBr)v 4000-3292(br.)，2960，2873，1742，1687(br.)cm-1。
N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-4-甲基-戊酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例27) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-亮氨酸一水合物和Fmoc-联氨，得到粗化合物，经柱色谱提纯得到7.2g(95％)白色固体产物；在82℃软化且在92℃熔化；[α]D-37.0(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.04(br s，1H)，7.74(d，J＝7.44Hz，2H)，7.58(d，J＝7.22Hz，2H)，7.22-7.41(m，5H)，5.24-5.30(m，1H)，4.38(d，J＝6.84Hz，2H)，4.18-4.32(m，1H)，1.58-1.84(m，3H)，1.54(s，9H)，0.95(dd，J＝5.28，5.48Hz，6H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.86，156.21，156.14，143.54，141.2，127.72，127.12，125.2，119.92，80.51，67.99，51.3，46.85，41.15，28.3，24.57，22.91，21.84。IR(KBr)v 4000-3287(br.)，2958，2871，1685(br.)cm-1。
N-{(S)-1-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基羰基]-3-甲基-丁基}-草酰胺酸甲基酯(Fmoc-NLeuO-OMe)(实施例28) 在实施例7的步骤之后，使用N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-4-甲基-戊酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例27)和甲基草酰氯，得到3.7g粗化合物，经柱色谱(硅胶)提纯得到3.4g(90％)白色粉末产物；在82℃软化且在87.3℃熔化；[α]D-42.0(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.85(s，1H)，7.62-7.72(m，3H)，7.47(d，J＝7.22Hz，2H)，7.13-7.32(m，5H)，4.56-4.68(m，1H)，4.29(d，J＝7.24，2H)，4.02-4.14(m，1H)，3.72(s，3H)，1.5-1.79(m，3H)，0.84(dd，J＝5.48Hz，6H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.95，160.45，156.47，156.22，143.55，141.24，127.79，127.15，125.23，119.98，68.11，53.76，50.68，46.85，40.7，24.69，22.9，21.75。IR(KBr)v 4000-3283(br.)，2956，2925，2854，1739，1684(br.)cm-1。
N-{(S)-1-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基羰基]-3-甲基-丁基)-草酰胺酸叔丁基酯(Fmoc-NLeuO-O-t-Bu；实施例29) 在实施例7的步骤之后，使用N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-4-甲基-戊酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例27)和叔丁基草酰氯，得到1.0g(88％)无色粘稠油状产物，经戊烷研制后得到灰白色粉末；熔点91-93℃。Rf＝0.63(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-35.2(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.91(br s，1H)，7.55-7.76(m，5H)，7.23-7.41(m，4H)，7.12(br s，1H)，4.66-4.74(m，1H)，4.17-4.45(m，3H)，1.19-1.84(m，12H)，0.86-0.97(m，6H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.04，158.71，157.81，156.1，143.49，141.21，127.76，127.13，125.16，119.94，85.07，68.18，50.56，46.8，40.75，27.62，24.62，22.76，21.99。IR(KBr)v 4000-3286(br.)，2958，1703，1684，1520，1451，1370，1304，1217，1155，759，740cm-1。
N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-4-甲基-戊酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例30) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-Leu和Z-联氨，得到2.16g(94％)粘稠油状产物，经戊烷研制后得到灰白色粉末；熔点57-59℃。Rf＝0.76(1:1石油醚/EtOAc)；[α]D-42.6(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.96(br s，1H)，7.31(s，6H)，5.21(br s，1H)，5.12(s，2H)，4.3(m，1H)，1.51-1.71(m，3H)，1.4(s，9H)，0.88-0.93(m，6H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.85，156.23，156.04，135.63，128.46，128.24，128.12，80.49，67.64，51.21，41.16，28.24，24.5，22.85，21.82。IR(KBr)v 4000-3296(br.)，2959，1683(br.)，1521，1393，1368，1221，1166，1047，741，696cm-1。
N-[(S)-1-(N’-苄氧羰基-联氨基羰基)-3-甲基-丁基]-草酰胺酸叔丁基酯(Z-NLeuO-O-t-Bu；实施例31) 在实施例7的步骤之后，使用N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-4-甲基-戊酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例30)和叔丁基草酰氯，得到0.84g(78％)无色粘稠油状产物，经戊烷研制后得到灰白色粉末；熔点69-71℃。Rf＝0.72(1:1戊烷/EtOAc)；[α]D-41.6(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.85(br s，1H)，7.66(br s，1H)，7.31(s，5H)，7.04(br s，1H)，5.18(s，2H)，4.59-4.63(m，1H)，1.61-1.82(m，3H)，1.51(s，9H)，0.90(br s，6H)。13CNMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.02，158.73，157.72，156.07，135.52，128.5，128.29，128.15，84.95，67.78，50.51，40.78，27.61，24.55，22.71，21.94。IR(KBr)v 4000-3294(br.)，2960，1685(br.)，1523，1370，1306，1218，1156，842，741，697cm-1。
N-[(S)-1-(N’-苄氧羰基-联氨基羰基)-3-甲基-丁基]-草酰胺酸甲基酯(Z-NLeuO-OMe；实施例32) 在实施例7的步骤之后，使用N’-[(S)-2-t-丁氧羰基氨基-4-甲基-戊酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例30)和甲基草酰氯，得到771mg(88％)白色固体产物。Rf＝0.24(1:1EtOAc/戊烷)；[α]D-43.8(c 0.5，MeOH)。1HNMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.97(br s，1H)，7.82(br s，1H)，7.3(br s，6H)，5.1(s，2H)，4.63-4.66(m，1H)，3.79(s，3H)，1.68(m，3H)，0.89(br s，6H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.99，160.26，156.62，156.16，135.5，128.5，128.31，128.14，67.8，53.65，50.55，40.69，24.55，22.73，21.74。IR(KBr)v 4000-3287(br)，3036，2958，1686(br)，1525，1456，1217，1043，986，741，697cm-1。
(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基羰基]-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(实施例33)
在DCM(15mL)中的Boc-L-辅氨酸琥珀酰胺酯(0.5g，1.6mmol)溶液中加入Fmoc-联氨(0.41g，1.6mmol)，并在室温下搅拌过夜。用EtOAc(50mL)稀释反应混合物，并用1N HCl(15mL)、10％NaHCO3(15mL)、盐水(15mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩得到701mg(96％)白色固体产物；熔点81-82℃。Rf＝0.3(1:1EtOAc/戊烷)；[α]D-59.8(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.85(br s，1H)，7.65(d，J＝7.24Hz，2H)，7.5(d，J＝7.24Hz，2H)，7.11-7.33(m，5H)，4.25-4.34(m，3H)，4.1-4.17(m，1H)，3.37(m，2H)，1.69-2.08(m，4H)，1.38(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.02，171.17，156.07，143.56，141.23，127.73，127.11，125.15，119.93，80.85，67.92，58.38，47.1，46.9，28.36，24.42，14.17。IR(KBr)v 4000-3277(br)，2977，1696(br)，1451，1405，1366，1246，1164，759，740cm-1。
(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(实施例34) 在实施例33的步骤之后，使用Z-联氨，得到1.1g(94％)粘性物产物。Rf＝0.28(1:1EtOAc/戊烷)；[α]D-82.0(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.76(br s，1H)，7.25(s，5H)，6.94(br s，1H)，5.07(s，2H)，4.22(br s，1H)，3.32(br s，2H)，1.68-2.21(m，4H)，1.37(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.99，156.02，135.66，128.48，128.25，128.1，80.79，67.64，58.24，47.03，28.32，24.41，14.15。IR(KBr)v 4000-3280(br)，2979，1699(br)，1456，1404，1367，1219，1164，742，697cm-1。
{(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基羰基]-吡咯烷-1-基}-氧-乙酸叔丁基酯(Fmoc-NProO-O-t-Bu；实施例35) 在实施例7的步骤之后，使用(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基羰基]-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(实施例33)和叔丁基草酰氯，得到637mg(99％)白色固体产物；熔点86-87℃。Rf＝0.13(1:1EtOAc/戊烷)；[α]D-68.6(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.83(s，1H)，7.73(d，J＝7.04Hz，2H)，7.58(d，J＝7.24Hz，2H)，7.17-7.41(m，5H)，4.57-4.74(m，1H)，4.37-4.41(m，2H)，4.19-4.26(m，1H)，3.63-3.81(m，2H)，1.94-2.4(m，4H)，1.53(s，9H)。(还观测到小部分的另一旋转异构体)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.47，160.85，160.56，156.1，143.59，141.21，127.71，127.13，125.21，119.91，84.81，68.01，58.49，48.22，46.85，27.86，27.74，24.91。IR(KBr)v 4000-3282(br)，2980，1733，1700，1656，1652，1451，1370，1252，1149，759，740cm-1。
[(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基羰基)-吡咯烷-1-基]-氧-乙酸叔丁基酯(Z-NProO-O-t-Bu；实施例36) 在实施例7的步骤之后，使用(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(实施例34)和叔丁基草酰氯，得到807mg(99％)白色固体产物；熔点51-52℃。Rf＝0.15(1:1EtOAc/戊烷)；[α]D-70.8(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.76(br s，1H)，7.31(s，5H)，7.12(br s，1H)，5.12(s，2H)，4.5-4.67(m，1H)，3.6-3.66(m，2H)，1.85-2.26(m，4H)，1.53(s，9H)(还观测到小部分的另一种旋转异构体)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.47，160.81，160.39，156.06，135.73，128.46，128.18，128.07，84.69，67.59，58.46，48.16，27.85，27.68，24.81。IR(KBr)v4000-3290(br)，2982，1733(br)，1651(br)，1456，1371，1253，115，742，698cm-1。
[(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基羰基)-吡咯烷-1-基]-氧-乙酸甲基酯(Z-NProO-OMe；实施例37) 在实施例7的步骤之后，使用(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(实施例34)和单甲基草酰氯，得到620mg(86％)粘性物产物。
N’-((DL)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例38) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-DL-苯基丙氨酸和Fmoc-联氨，得到514mg(67％)白色固体产物。
N’-((DL)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例39) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-DL-苯基丙氨酸和Z-联氨，得到617mg(98％)白色固体产物。
N-{(DL)-1-苄基-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(Fmoc-N(DL)PheO-O-O-tBu；实施例40) 在实施例7的步骤之后，使用N’-((DL)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例38)和叔丁基草酰氯，得到450mg粗化合物，经柱色谱提纯得到278mg(52％)白色固体。
N-[(DL)-1-苄基-2-(N’-苄氧羰基-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(Z-N(DL)PheO-O-O-tBu；实施例41) 在实施例7的步骤之后，使用N’-((DL)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例39)和叔丁基草酰氯，得到430mg粗化合物，经柱色谱提纯得到304mg(56％)白色固体。
N’-((R)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例42) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-D-苯基丙氨酸和Fmoc-联氨，得到760mg粗化合物，经柱色谱提纯得到710mg(93％)白色固体。Rf＝0.26(1.5:3.5EtOAc/石油醚)；[α]D+10.8(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.94(br s，1H，d2o exch.)，9.35(br s，1H，d2o exch.)，7.88(d，J＝6.86Hz，2H)，7.73(d，J＝7.04Hz，2H)，7.17-7.45(m，9H)，6.93(d，J＝8.6Hz，1H，d2o exch.)，4.28-4.31(m，4H)，2.69-3.0(m，2H)，1.27(s，9H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)171.67，155.95，155.13，143.58，140.65，137.94，129.15，127.95，127.64，127.06，126.16，125.24，120.05，79.09，77.93，66.11，54.16，46.44，28.05。
N-{(R)-1-苄基-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(Fmoc-N(D)PheO-O-O-tBu；实施例43) 在实施例7的步骤之后，使用N’-((R)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例42)和叔丁基草酰氯，得到835mg(79％)白色粉末产物。Rf＝0.29(1.5:3.5EtOAc/石油醚)；[α]D+18.4(c0.5，DMF)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.49(br s，1H，d2o exch.)，7.64(d，J＝7.42Hz，3H，1H，d2o exch.)，7.46(d，J＝7.42Hz，2H)，7.14-7.31(m，9H)，6.96(br s，1H，d2o exch.)，4.66-4.77(m，1H)，4.21-4.35(m，2H)，4.06-4.13(m，1H)，2.96-3.19(m，2H)，1.37(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.02，158.36，157.78，156.03，143.46，141.23，135.69，129.32，128.74，127.77，127.22，127.14，125.14，119.95，85.01，68.11，53.35，46.80，37.59，27.61。
(S)-6-苄基-[1，2，5]三氮杂环庚烷-3，4，7-三酮(实施例44)
在CH2Cl2(15mL)中的N-[(S)-1-苄基-2-(N’-t-丁氧羰基-联氨基)-2-氧-乙基]-草酰胺酸甲基酯(实施例2)(1.0g，2.74mmol)溶液中滴加入TFA(15mL)，在氩气中于室温下继续搅拌反应混合物30分钟。然后，蒸发反应混合物除去草酰氯，并在高真空下彻底干燥。所得剩余物溶解于干燥的CH2Cl2(15mL)中，并用10％NaHCO3洗涤。用CH2Cl2(3×10mL)萃取水溶液，用Na2SO4干燥合并后的有机层，并减压蒸发。所得剩余物于氮气下在MeOH(15mL)中回流过夜。蒸发脱去溶剂，所得粗化合物经柱色谱提纯得到350mg(54％)白色固体目标化合物。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.3(br s，1H)，8.1(br s，1H)，7.1-7.4(m，5H)，6.7(br s，1H)，4.7-4.9(m，1H)，3.04-3.36(m，2H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.83，159.2，158.6，135.7，129.23，128.67，127.1，53.1，37.5。
N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例45) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-丙氨酸和Fmoc-联氨，得到4.4g(97％)白色固体产物；熔点71-72℃。Rf＝(1:1戊烷/EtOAc)；[α]D-36.0(c0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.78(br s，1H)，7.74(d，J＝7.42Hz，2H)，7.57(d，J＝7.44Hz，2H)，7.23-7.41(m，5H)，5.31(br s，1H)，4.39(d，J＝7.02Hz，2H)，4.18-4.33(m，1H)，1.38-1.44(m，12H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.88，156.24，155.77，143.48，141.22，127.74，127.11，125.13，119.93，80.56，67.98，48.45，46.85，28.29，18.09。IR(KBr)v4000-3293(br.)，2979，2934，1668(br.)，1506，1451，1368，1247，1167，1046，759，740cm-1。
N-{(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-1-甲基-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(Fmoc-NAlaO-O-O-tBu；实施例46) 在实施例7的步骤之后，使用N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例45)和叔丁基草酰氯，得到3.8g(93％)白色固体产物，熔点79-80℃。Rf＝(1:1戊烷/EtOAc)；[α]D-31.4(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.74(br s，1H)，7.63-7.72(m，3H)，7.47(d，J＝7.24Hz，2H)，7.09-7.32(m，5H)，4.47-4.61(m，1H)，4.3(d，J＝7.04Hz，2H)，4.1-4.15(m，1H)，1.37-1.43(m，12H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.31，158.62，157.62，156.17，143.45，141.22，127.77，127.12，125.11，119.95，85.06，68.08，47.84，46.81，27.63，17.65。IR(KBr)v4000-3290(br.)，2982，2936，1732，1692(br.)，1520，1451，1371，1296，1220，1156，759，741cm-1。
N-{(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-1-甲基-2-氧-乙基}-草酰胺酸(Fmoc-NAlaOOH；实施例47)
0℃在搅拌下，在DCM(15mL)中的N-{(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-1-甲基-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(实施例46)(1.0g，2.21mmol)溶液中缓慢加入TFA(15mL)。在室温下搅拌反应混合物30分钟。蒸发脱去溶剂，在高真空下彻底干燥得到870mg粗化合物，经EtOAc-石油醚结晶后得到752mg(85％)白色固体目标化合物。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)9.92(s，1H)，9.33(s，1H)，8.73(d，J＝7.82Hz，1H)，7.87(d，J＝7.02Hz，2H)，7.71(d，J＝7.02Hz，2H)，7.28-7.44(m，4H)，4.27-4.4(m，4H)，1.33(d，J＝6.84Hz，3H)。13CNMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)171.08，161.67，157.86，155.88，143.56，140.66，127.65，127.06，125.21，120.07，66.12，47.22，46.43，17.72。
N-((S)-1-联氨基羰基-乙基)-草酰胺酸叔丁基酯(NAlaO-O-t-Bu；实施例48)
在DMF(15mL)5％哌啶中的N-{(S)-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-1-甲基-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(实施例46)(2.1g，4.63mmol)溶液在室温下搅拌20分钟。蒸发脱去溶剂，并在高真空下彻底干燥反应混合物。所得的粗化合物经柱色谱提纯得到137mg(12％)粘稠产物。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.81(d，J＝7.82Hz，1H)，4.37-4.51(m，1H)，4.06(br s，2H)，1.48(s，9H)，1.36(d，J＝7.04Hz，3H)。
N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例49) 在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-丙氨酸和Z-联氨，得到6.9g(96％)白色固体产物；熔点130-131℃。Rf＝(石油醚/EtOAc)；[α]D-43.6(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3-2滴DMSO-d6)δ(ppm)9.37(bs，1H)，8.29(bs，1H)，7.3(s，5H)，5.72(bs，1H)，5.1(s，2H)，4.23(bs，1H)，1.4(s，9H)，1.31(d，J＝6.64Hz，3H)。13C NMR(200MHz，CDCl3-2滴DMSO-d6)δ(ppm)177.7，161.11，160.02，140.87，133.15，132.84，132.75，84.19，71.77，53.33，33.08，23.55。
N-[(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-1-甲基-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(Z-NAlaO-O-O-t-Bu；实施例50) 在实施例7的步骤之后，使用N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例49)和叔丁基草酰氯，得到2.8g(86％)白色固体产物；熔点49-51℃。Rf＝(1:1戊烷/EtOAc)；[α]D-44.0(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.87(br s，1H)，7.84(d，J＝7.64Hz，1H)，7.3(s，5H)，7.21(s，1H)，5.1(s，2H)，4.51-4.65(m，1H)，1.5(s，9H)，1.42(d，J＝6.66Hz，3H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.43，158.65，157.53，156.2，135.52，128.5，128.31，128.12，84.93，67.78，47.83，27.61，17.71。IR(KBr)v 4000-3296(br.)，2984，2938，1733，1699(br.)，1517，1456，1371，1297，1219，1156，840，740，697cm-1。
N-[(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-1-甲基-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(Z-NAlaO-OMe；实施例51) 在实施例7的步骤之后，使用N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨羧酸苄基酯(实施例49)和单甲基草酰氯，得到640mg(22％)白色固体产物；熔点51-52℃。Rf＝0.37(1:1戊烷/EtOAc)；[α]D-47.6(c 0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.93(s，1H)，8.0(d，J＝7.24Hz，1H)，7.35(s，1H)，7.3(s，5H)，5.09(s，2H)，4.56-4.64(m，1H)，3.79(s，3H)，1.41(d，J＝6.64Hz，3H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.37，160.24，156.39，156.28，135.5，128.5，128.34，128.11，67.81，53.68，47.84，17.65。IR(KBr)v 4000-3293(br.)，3035，2956，1702，1689(br.)，1524，1456，1283，1218，985，742，667cm-1。
N-[(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-1-甲基-2-氧-乙基}-草酰胺酸(Z-NAlaO-OH；实施例52) 在实施例47的步骤之后，使用N-[(S)-2-(N’-苄氧羰基-联氨基)-1-甲基-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(实施例50)，得到2.2g(99％)白色固体目标产物；熔点173-174℃。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)9.7(s，1H)，9.04(s，1H)，8.52(d，J＝7.62Hz，1H)，7.14(s，5H)，4.86(s，2H)，4.08-4.15(m，1H)，1.1(d，J＝6.46Hz，3H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)172.27，162.81，159.04，157.05，137.66，129.5，129.11，128.93，67.03，48.36，18.82。
[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-氧-乙酸叔丁基酯(实施例53)
在氩气下冰浴中，在缓慢搅拌下将叔丁基草酰氯(0.06mL，0.39)加入至Fmoc-联氨(0.100mg，0.39mmol)、DIPEA(0.08mL，0.43mmol)和二氯甲烷(10mL)的混合物中。在室温下继续搅拌反应混合物15分钟。用1N HCl(5mL)，随后10％NaHCO3(5mL)和盐水(5mL)洗涤反应混合物，并浓缩得到140mg粗化合物，经柱色谱提纯得到94mg(62％)白色固体，熔点79-80℃。Rf＝0.45(2:1戊烷/EtOAc)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.94(br s，1H)，7.75(d，J＝7.42Hz，2H)，7.58(d，J＝7.24Hz，2H)，7.26-7.43(m，5H)，4.44(d，J＝7.22Hz，2H)，4.23(t，J＝7.14Hz，1H)，1.57(m，12H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ.(ppm)157.78，156.38，155.51，143.33，141.25，127.84，127.16，125.1，120.01，85.69，68.3，46.79，27.70。
[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-氧-乙酸(实施例54)
在实施例47的步骤之后，使用[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-联氨基]-氧-乙酸叔丁基酯(实施例53)，得到76mg(100％)白色固体产物，熔点178-179℃。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.64(s，1H)，9.5(s，1H)，7.88(d，J＝7.24Hz，2H)，7.72(d，J＝6.64Hz，2H)，7.32-7.45(m，4H)，4.22-4.35(m，3H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)161.19，158.19，155.43，143.51，140.67，127.67，127.06，125.18，120.09，66.19，46.38。
N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-N-甲基-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例55)
在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-苯基丙氨酸和1-Fmoc-1-甲基联氨，得到794mg(81％)白色固体产物；熔点81-82℃。Rf＝0.68(1:1EtOAc/戊烷)；[α]D-12.0(c0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.48(bs，1H)，7.75(d，J＝7.22Hz，2H)，7.56(d，J＝7.24Hz，2H)，7.23-7.43(m，9H)，5.24(bs，1H)，4.19-4.41(m，4H)，3.07(bs，5H)，1.37(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.06，155.9，155.56，143.66，141.23，136.35，129.42，128.58，127.73，127.14，126.96，125.06，119.95，80.5，68.31，54.03，46.96，38.32，37.32，28.21。IR(KBr)v 4000-3289(br.)，3064，3029，2977，1681(br.)，1478，1496，1451，1392，1366，1348，1249，1165，758，740cm-1。
N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-N’-甲基-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例56)
在实施例2的步骤之后，使用Boc-L-苯基丙氨酸和1-Fmoc-2-甲基联氨，得到632mg(65％)白色固体产物；熔点108-109℃；[α]D+23.6(c0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.79(d，J＝7.24Hz，2H)，7.17-7.74(m，12H)，5.3(bs，1H)，4.91(bs，1H)，4.49(bs，2H)，4.21(m，1H)，2.66-3.31(m，5H)，1.39(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)173.92，155.35，154.71，143.32，141.36，136.53，129.35，128.47，127.9，127.17，126.9，124.91，120.07，79.88，67.77，51.23，46.94，35.64，28.27。IR(KBr)v4000-3383，3224，3064，3004，2977，2929，1742，1697，1647，1516，1451，1391，1366，1248，1170，1115，1083，1048，756，740cm-1。
N-{(S)-1-苄基-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-N’-甲基-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(实施例57)
0℃在搅拌下，在DCM(10mL)中的N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-N-甲基-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例55)(687mg，1.33mmol)溶液中缓慢加入TFA(10mL)，在室温下搅拌反应混合物过夜。蒸发脱去溶剂并在高真空下彻底干燥。所得剩余物溶解于干燥的DCM(30mL)中，在氩气中0℃下将DIPEA(0.7mL，4.0mmol)加入至反应混合物中，随后加入叔丁基草酰氯(219mg，1.33mmol)。在室温下继续搅拌反应混合物30分钟。用1N HCl(15mL)，随后10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤混合物。干燥有机相(Na2SO4)并浓缩得到770mg粗化合物，经柱色谱提纯得到635mg(87％)白色粉末产物。Rf＝0.2(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.64(s，1H)，7.62(d，J＝7.04Hz，3H)，7.43(d，J＝7.04Hz，2H)，7.13-7.3(m，9H)，4.78(q，J＝7.24Hz，1H)，3.97-4.27(m，3H)，3.03(bs，2H)，2.93(s，3H)，1.33(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)169.0，158.29，157.49，155.82，143.61，141.2，135.7，129.42，128.69，127.75，127.23，127.12，125.05，119.95，85.01，68.44，53.08，46.87，38.11，37.51，27.56。
N-{(S)-1-苄基-2-[N’-(9H-芴-9-基甲氧羰基)-N-甲基-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸叔丁基酯(实施例58)
在实施例57的步骤之后，使用N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-N’-甲基-联氨羧酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例56)，得到463mg(83％)白色粉末产物。Rf＝0.26(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.68(d，J＝7.22Hz，2H)，7.07-7.6(m，13H)，4.98(bs，1H)，4.39(bs，2H)，4.11(bs，1H)，2.97(bs，5H)，1.43(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.37，158.6，157.07，154.76，143.29，141.35，135.75，129.32，128.61，127.91，127.23，127.16，124.91，120.07，84，78，67.75，50.73，46.93，35.69，27.68。
N’-{(S)-2-[((S)-1-二甲氨基甲酰基-乙基氨基草酰基)-氨基]-3-苯基-丙酰基}-联氨羧酸叔丁基酯(实施例59)
在实施例2的步骤之后，使用N-[(S)-1-苄基-2-(N’-t-丁氧羰基-联氨基)-2-氧-乙基]-草酰胺酸(实施例3)和(S)-2-氨基-N，N-二甲基-丙酰胺，得到122mg(35％)灰白色固体产物；熔点104-107℃；[α]D-(c0.5，MeOH)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.6(br s，1H)，8.25-8.29(br，2H)，7.14-7.2(m，5H)，6.59(br s，1H)，4.68-4.8(m，2H)，3.29(dd，J＝5.28Hz，1H)，2.93-3.07(m，4H)，2.88(s，3H)，1.35(s，9H)，1.26(d，J＝6.26Hz，3H)。13CNMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.17，169.77，159.60，158.42，155.18，136.39，129.25，128.60，126.93，81.75，53.11，45.66，37.29，36.98，35.84，28.08，17.88。IR(KBr)v 4000-3292(br.)，3030，2980，2935，1674(br.)，1641，1498cm-1。
{(S)-1-苄基-2-[N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨]-2-氧-乙基}-氨基甲酸苄基酯(实施例60)
将Boc-L-Ala(1.81g，9.57mmol)溶解于DCM(30mL)中，加入HOBt(1.36g，10.05mmol)，随后加入EDCl.HCl(1.93g，10.05mmol)。将N-苄氧羰基-L-苯基丙氨酸联氨(3.0g，9.57mmol)加入该溶液中，随后加入三乙胺(1.47mL，10.53mmol)。在室温下继续搅拌反应混合物过夜。旋转蒸发除去DCM，所得剩余物溶解于EtOAc(50mL)中。用1N HCl(15mL)、10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤EtOAc溶液。加热EtOAc以溶解沉淀的化合物，并加入石油醚(10mL)。静置溶液过夜。过滤结晶出的化合物，得到3.7g(79％)白色晶状固体产物；熔点197-198℃。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.18(br s，1H)，9.93(br s，1H)，7.54(d，J＝8.4Hz，1H)，7.17-7.35(m，10H)，6.96(d，J＝7.62Hz，1H)，4.92(s，2H)，4.25-4.36(m，1H)，4.0-4.08(m，1H)，2.69-3.09(m，2H)，1.38(s，9H)，1.23(d，J＝7.24Hz，3H)。
{(S)-1-[N’-((S)-2-氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯(实施例61)
在帕尔设备中，在室温、60psi(磅/平方英寸)下使用10％Pd/C(125mg，15％w/w)氢化在MeOH(15mL)中的{(S)-1-苄基-2-[N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨]-2-氧-乙基}-氨基甲酸苄基酯(实施例60)(835mg，1.72mmol)溶液2小时。用烧结玻璃漏斗过滤催化剂，蒸发滤液得到568mg(94％)灰白色固体产物；熔点76-77℃。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)7.26(br s，5H)，6.94(d，J＝9.78Hz，1H)，4.02-4.09(m，1H)，3.46-3.53(m，1H)，2.93-3.02(m，1H)，2.57-2.67(m，1H)，1.38(s，9H)，1.21(d，J＝5.68Hz，3H)。
N-{(S)-1-苄基-2-[N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(Boc-Ala-NPheO-OMe；实施例62)
0℃氩气下，将三乙胺(1.56mL，11.13mmol)加入至在干燥DCM(10mL)中的{(S)-1-[N’-((S)-2-氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羰基]-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯(实施例61)(2.6g，7.42mmol)溶液中，随后加入甲基草酰氯(0.72mL，7.79mmol)，反应混合物在0℃搅拌30分钟，在室温下搅拌1.5小时。混合物用EtOAc(50mL)稀释，并用1N HCl(10mL)、10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。干燥(Na2SO4)EtOAc层，并浓缩得到3.2g粗化合物，经EtOAc-石油醚结晶得到2.92g(90％)白色晶状固体；熔点134-135℃。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.21(s，1H)，9.9(s，1H)，8.96(d，J＝8.6Hz，1H)，7.16-7.29(m，5H)，6.97(d，J＝7.64Hz，1H)，4.54-4.66(m，1H)，4.0-4.08(m，1H)，3.74(s，3H)，2.94-3.18(m，2H)，1.38(s，9H)，1.22(d，J＝7.64Hz，3H)。
N-{(S)-1-苄基-2-[N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸(Boc-Ala-NPheO-OH；实施例63)
在实施例3的步骤之后，使用N-{(S)-1-苄基-2-[N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(实施例62)，得到2.25g(79％)白色晶状固体；熔点162-163℃。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.21(s，1H)，9.90(s，1H)，8.69(d，J＝10.16Hz，1H)，7.15-7.27(m，5H)，6.97(d，J＝7.24Hz，1H)，4.51-4.62(m，1H)，3.99-4.07(m，1H)，2.93-3.16(m，2H)，1.36(s，9H)，1.21(d，J＝7.24Hz，3H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)171.79，168.99，161.44，158.11，154.92，137.47，129.1，128.05，126.35，77.90，53.07，48.15，36.86，28.15，18.14。IR(KBr)v4000-3331，3258，3032，2980，2937，1765，1686，1616，1529，1481cm-1。
[(S)-1-(N’-{(S)-2-[((S)-1-二甲氨基甲酰基-乙基氨基草酰基)-氨基]-3-苯基-丙酰基}-联氨基羰基)-乙基]-氨基甲酸叔丁基酯(Boc-Ala-NPheO-Ala-NMe2；实施例64)
在实施例60的步骤之后，使用N-{(S)-1-苄基-2-[N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸(实施例63)和(S)-2-氨基-N，N-二甲基-丙酰胺，得到晶状固体目标产物；熔点199℃。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.24(s，1H)，9.92(s，1H)，8.57(d，J＝8.4Hz，1H)，8.37(d，J＝7.64Hz，1H)，7.15-7.28(m，5H)，6.97(d，J＝7.24Hz，1H)，4.56-4.72(m，2H)，3.99-4.07(m，1H)，3.05-3.1(m，2H)，2.99(s，3H)，2.82(s，3H)，1.37(s，9H)，1.18-1.23(m，6H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)171.8，170.57，168.89，159.19，158.09，154.94，137.25，129.14，128.08，126.44，77.92，53.04，48.14，45.22，37.02，36.35，35.21，28.15，18.11，17.22。IR(KBr)v4000-3353，3280，3030，2983，2936，1718，1686，1656，1627，1516cm-1。
(Boc-Ala-NPheO-O-Merrifield；实施例65)
将羟甲基树脂(100mg，0.104mmol)悬浮于9:1v/v的CH2Cl2/DMF(1mL)中。在分离瓶(separate flask)中，将HOBt(42.16mg，0.31mmol)加入至在极小量DMF中的N-{(S)-1-苄基-2-[N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸(实施例64)(131.8mg，0.31mmol)中。搅拌混合物直至HOBt溶解，并且将溶液加入至树脂内。然后将DIC(0.05mL，0.31mmol)加入至反应混合物中，随后加入极小量DMF中的DMAP(13mg，0.11mmol)溶液。在氩气中室温下，用机械搅拌器搅拌反应混合物过夜。将乙酸酐和吡啶(相对于树脂2当量)加入至反应混合物，并在室温下继续搅拌30分钟，以端盖(end-cap)树脂上任何未反应的羟基。在细烧结玻璃漏斗中过滤树脂，用DMF(3×5mL)、DCM(3×5mL)和MeOH(3×5mL)洗涤，并真空干燥至恒定重量。
(Ala-NPheO-O-Merrifield；实施例66)
使用机械搅拌器在室温下搅拌在50％(v/v)TFA/DCM(1mL)中的树脂(实施例65)(0.104mmol)的悬浮液30分钟。在细烧结玻璃漏斗中过滤树脂，并用DCM(3×5mL)洗涤，随后用5％(v/v)DIPEA(2mL)洗涤，以除去TFA，并真空干燥至恒定重量。
(Boc-Phe-Ala-NPheO-O-Merrifield；实施例67)
将树脂(实施例66)(0.104mmol)悬浮于9:1v/v的CH2Cl2/DMF(1mL)中。在分离瓶中，将HOBt(42.16mg，0.31mmol)加入至极小量DMF中的Boc-L-苯丙胺酸(82.8mg，0.31mmol)溶液中。搅拌混合物直至HOBt溶解，并将该溶液加入至树脂中。然后加入DIC(0.05mL，0.31mmol)，并在氩气下使用机械搅拌器在室温下搅拌反应混合物过夜。
在细烧结玻璃漏斗中过滤树脂，用DMF(3×5mL)、DCM(3×5mL)和MeOH(3×5mL)洗涤，并真空干燥至恒定重量。
N-((S)-1-苄基-2-{N’-[(S)-2-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰胺基)-丙酰基]-联氨基}-2-氧-乙基)-草酰胺酸甲基酯(Boc-Phe-Ala-NPheO-OMe；实施例68)
在0℃搅拌下，将TFA(5mL)缓慢加入至在DCM(5mL)中的N-{(S)-1-苄基-2-[N’-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-丙酰基)-联氨基]-2-氧-乙基}-草酰胺酸甲基酯(实施例62)(178mg，0.41mmol)溶液中。在室温下搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去DCM和TFA，并在高真空下彻底干燥反应混合物，所得剩余物溶解于干燥的DCM(5mL)中，并将其加入至含有在DCM(5mL)中的Boc-L-苯丙氨酸(113.6mg，0.43mmol)、HOBt(57.86mg，0.43mmol)和EDCl.HCl(82.09mg，0.43mmol)溶液的另一烧瓶中。加入三乙胺(0.17mL，1.22mmol)，然后反应混合物在室温下搅拌过夜。旋转蒸发除去DCM，所得剩余物溶解于EtOAc(10mL)中。用1N HCl(5mL)、10％NaHCO3(5mL)和盐水(5mL)洗涤EtOAc溶液，干燥(Na2SO4)并浓缩得到95mg(39％)白色固体目标产物。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.29(br s，1H)，10.05(br s，1H)，9.04(d，J＝9.78Hz，1H)，8.17(d，J＝8.42Hz，1H)，7.27-7.35(m，10H)，6.95(d，J＝9.78Hz，1H)，4.61-4.72(m，1H)，4.41-4.49(m，1H)，4.07-4.32(m，1H)，3.8(s，3H)，2.94-3.25(m，3H)，2.68-2.82(m，1H)，1.34(m，12H)。
N-((S)-1-苄基-2-{N’-[(S)-2-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰胺基)-丙酰基]-联氨基}-2-氧-乙基)-草酰胺酸(Boc-Phe-Ala-NPheO-OH；实施例69)
a)经固相合成将NaOCH3(0.6mg，0.01mmol)加入至在1:4v/vMeOH-THF(2mL)中的树脂(实施例67)(0.104mmol)的悬浮液中。反应混合物在70℃搅拌18小时。加入水(3滴)，并在70℃继续搅拌30分钟。经细玻璃烧结漏斗过滤反应混合物，用MeOH(5mL)洗涤。浓缩滤液以除去MeOH，所得剩余物溶解于10％NaHCO3水溶液(5mL)中，并用乙醚(2×5mL)洗涤。冷却水层，用1N HCl酸化，并用EtOAc(3×5mL)萃取。用盐水(2×5mL)洗涤合并后的有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩得到9mg(15％)灰白色固体。

b)经液相合成将NaOCH3(6mg，0.15mmol)加入至在MeOH(2mL)中的N-((S)-1-苄基-2-{N’-[(S)-2-((S)-2-t-丁氧羰基氨基-3-苯基-丙酰胺基)-丙酰基]-联氨基}-2-氧-乙基)-草酰胺酸甲基酯(Boc-Phe-Ala-NPheO-OMe；实施例68)(85mg，0.15mmol)溶液中，并在室温下搅拌1小时。蒸发除去MeOH，所得剩余物溶解于水(10mL)中，用乙醚(2×5mL)洗涤。在冰浴中冷却水层，用1N HCl酸化(pH＝4)，并用EtOAc(3×10mL)萃取。用盐水(10mL)洗涤合并后的有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩得到26mg(31％)灰白色晶状固体目标化合物，熔点155-156℃。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)10.28(br s，1H)，10.04(br s，1H)，8.79(br s，1H)，8.15(br s，1H)，6.5-7.27(m，10H)，4.39(m，2H)，2.76-3.2(m，5H)，1.29(br s，12H)。IR(KBr)v 4000-3299(宽的)，3030，2979，2933，1702，1696，1687，1674，1652，1508cm-1。
[(S)-2-甲基-1-((S)-3-甲基-1-甲基氨基甲酰基-丁基氨基甲酰基)-丁基]-氨基甲酸叔丁基酯(实施例70) 步骤1 ((S)-3-甲基-1-甲基氨基甲酰基-丁基)-氨基甲酸叔丁基酯
将HOBt(1.14mg，8.42mmol)加入至在DCM(30mL)中的Boc-L-Leu一水合物(2.0g，8.02mmol)溶液中，随后加入DCC(1.74g，8.42mmol)。将在DCM(15mL)中的甲胺盐酸盐(596mg，8.82mmol)和三乙胺(1.68mL，12.03mmol)的悬浮液加入至上述溶液中，并在室温下搅拌混合物24小时。过滤除去沉淀出的DCHU，并蒸发滤液。通过随后用冷的EtOAc研制和过滤除去另外的DCHU。用1N HCl(2×15mL)、10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤EtOAc溶液，干燥(Na2SO4)并浓缩得到1.5g(76％)白色固体。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)6.73(br s，1H)，5.2(br s，1H)，4.07-4.1(m，1H)，2.71(d，J＝4.7Hz，3H)，1.36-1.67(m，3H)，1.3(s，9H)，0.86(dd，J＝2.34，2.14Hz，6H)。13C NMR(200 MHz，CDCl3)δ(ppm)173.46，155.81，79.76，53，41.62，28.26，26.03，24.68，22.88，21.91。
步骤2
0℃搅拌下，将TFA(15mL)缓慢加入至在DCM(15mL)中的((S)-3-甲基-1-甲基氨基甲酰基-丁基)-氨基甲酸叔丁基酯(1.47g，6.02mmol)溶液中。在室温下搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥，所得剩余物溶解于DCM(30mL)中。将Boc-异亮氨酸(化合物71)(1.53g，6.62mmol)、HOBt(0.89g，6.62mmol)和DCC(1.74g，6.62mmol)加入上述溶液中，随后加入三乙胺(2.53mL，18.05mmol)，在室温下搅拌混合物过夜。过滤除去沉淀出的DCHU，并蒸发滤液。通过随后用冷的EtOAc研制和过滤除去另外的DCHU。用1N HCl(2×15mL)、10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤EtOAc溶液，干燥(Na2SO4)并浓缩得到2.1g(97％)白色固体目标产物。熔点151-152℃。Rf＝(1:1EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.19(br s，1H)，6.95(br s，1H)，5.42(d，J＝8.2Hz，1H)，4.37-4.48(m，1H)，3.92-4.0(m，1H)，2.69(d，J＝4.7Hz，3H)，1.36-1.81(m，5H)，1.27(s，9H)，0.97-1.25(m，1H)，0.77-0.86(m，12H)。13CNMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.51，172.18，155.97，79.74，59.36，51.69，40.44，37.08，28.25，26.03，24.92，24.71，22.79，21.98，15.39，11.22。
{(S)-1-[(S)-2-甲基-1-((S)-3-甲基-1-甲基氨基甲酰基-丁基氨基甲酰基)-丁基氨基甲酰基]-2-苯基-乙基}-氨基甲酸叔丁基酯(实施例71)
0℃搅拌下，将TFA(15mL)缓慢加入至在DCM(15mL)中的[(S)-2-甲基-1-((S)-3-甲基-1-甲基氨基甲酰基-丁基氨基甲酰基)-丁基]-氨基甲酸叔丁基酯(实施例70)(2.1g，6.02mmol)溶液中。在室温下搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥，所得剩余物溶解于DCM(30mL)中。将Boc-Phe(1.53g，6.62mmol)、HOBt(0.89g，6.62mmol)和DCC(1.74g，6.62mmol)加入上述溶液中，随后加入三乙胺(2.53mL，18.05mmol)，在室温下搅拌混合物过夜。过滤除去沉淀出的DCHU，并蒸发滤液。通过随后用冷的EtOAc研制和过滤除去另外的DCHU。用1N HCl(2×15mL)、10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤EtOAc溶液，干燥(Na2SO4)并浓缩得到2.1g(97％)白色固体目标产物。熔点151-152℃。Rf＝(1:1EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)7.98(d，J＝7.82Hz，1H)，7.78(br s，2H)，7.23(s，5H)，6.97(d，J＝7.82Hz，1H)，4.19-4.23(m，3H)，2.53-2.97(m，5H)，1.01-1.72(m，15H)，0.79-0.82(m，12H)。
使用式1的化合物作为子结构合成β-转角肽序列(实施例72) 步骤1
2-[[(2-乙氧基-2-氧乙基)氨基]羰基]-联氨羧酸，1，1-二甲基乙基酯(Boc-aza-Gly-OEt) 以30分钟时间将在CH2Cl2(15mL)中的甘氨酸乙酯盐酸盐(4.0g，28.66mmol)和DIEA(14.87mL，85.97mmol)的混合物加入至在CH2Cl2(10mL)中的三光气(3.4g，11.46mmol)溶液中。继续搅拌15分钟后，将CH2Cl2(15mL)中的Boc-联氨(3.79g，28.66mmol)溶液一次性加入。进一步回流反应混合物2小时，蒸发至干燥，用EtOAc稀释，用10％NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发得到5.6g粗化合物，经柱色谱提纯得到3.63g(48％)粘稠产物，经在室温下过夜静置后得到灰白色固体；熔点137-138℃。Rf＝0.29(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.2(bs，1H)，7.05(s，1H)，6.2(t，J＝5.46Hz，1H)，4.11(q，J＝7.04Hz，2H)，3.92(d，J＝5.66Hz，2H)，1.39(s，9H)，1.2(t，J＝7.04Hz，3H).13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.07，158.95，156.43，81.51，61.25，41.79，28.09，14.04。
此步骤的参考文献 如Gacel，G.Zajac，J.M.Delay-Goyet，P.Dauge，V.Roques，B.P.中描述的制备该混合物。结构参数的检测涉及线性的与脑啡肽相关的肽的μ和δ阿片类受体识别。杂志Medicinal Chemistry(1988)，31(2)，374-83。
步骤2Boc-Pro-aza-Gly-OEt
0℃搅拌下，将TFA(15mL)缓慢加入至在DCM(15mL)中的Boc-aza-Gly-OEt(3.63g，13.89mmol)溶液中，在室温下搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥，所得剩余物溶解于DCM(15mL)中。在另一个烧瓶中将Boc-Pro(2.99g，13.89mmol)、HOBt(1.97g，14.59mmol)和DCC(3.09g，14.59mmol)溶解于DCM(15mL)中，并在室温下搅拌15分钟，将在DCM(15mL)中的上述TFA盐和三乙胺(4.77mL，34.73mmol)的混合物加入至上述溶液中，并在室温下搅拌混合物过夜。过滤除去沉淀出的DCHU，并蒸发滤液。通过随后用冷的EtOAc研制和过滤除去另外的DCHU。用1N HCl(2×15mL)、10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤EtOAc溶液，干燥(Na2SO4)并浓缩得到5.2g粗化合物，经柱色谱提纯得到3.2g(48％)褐色固体产物。熔点58-59℃。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.03(bs，1H)，7.47(bs，1H)，6.65(bs，1H)，3.76-4.2(m，5H)，3.35-3.49(m，2H)，1.67-2.08(m，4H)，1.35(s，9H)，1.19(t，J＝7.04Hz，3H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)173.1，172.7，171.07，155.48，80.56，61.19，59.02，47.13，41.78，29.38，28.33，24.62，14.07。
EtO-Gly-NProO-O-tBu(步骤3和实施例73)
0℃搅拌下，将TFA(15mL)缓慢加入至在DCM(15mL)中的Boc-Pro-aza-Gly-OEt(实施例73)(2.63g，7.34mmol)溶液中，在室温下搅拌反应混合物过夜。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥。所得剩余物溶解于DCM(30mL)中，在0℃搅拌下将三乙胺(4.1mL，29.35mmol)加入其中，随后加入叔丁基草酰氯(1.27g，7.71mmol)，并在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，所得粗化合物经柱色谱提纯得到2.2g(77％)粘稠物。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.1(bs，1H)，7.54(bs，1H)，6.46(t，J＝5.48Hz，1H)，4.38(t，J＝5.48Hz，1H)，4.09(q，J＝7.04Hz，2H)3.58-4.0(m，4H)，1.73-2.16(m，4H)，1.47(s，9H)，1.18(t，J＝7.04Hz，3H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)171.26，171.16，160.59，160.02，158.76，84.6，61.29，59.08，48.57，41.85，28.62，27.83，27.68，25.1，14.05。
Boc-aza-Gly-N(Me)2(步骤4和实施例74)
在室温下将在EtOH(20mL)中的33％的二甲胺溶液中的Boc-aza-Gly-OEt(73步骤1)(3.8g，14.54mmol)溶液搅拌过夜。蒸发除去溶剂并在高真空下彻底干燥，得到3.78g(100％)灰白色固体；熔点71-72℃。Rf＝0.24(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.35(bs，1H)，7.07(s，1H)，6.48(t，J＝4.3Hz，1H)，4.0(d，J＝4.3Hz，2H)，2.92(s，3H)，2.89(s，3H)，1.38(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)169.15，158.74，156.33，81.08，41.8，36.01，35.64，28.13。
Boc-Pro-aza-Gly-N(Me)2(步骤5和实施例75)
0℃搅拌下，将HCl饱和的EtOAc(10mL)缓慢加入至在EtOAc(10mL)中的Boc-aza-Gly-N(Me)2(实施例75)(1.87g，7.2mmol)溶液中。在室温下搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，并在高真空下干燥反应混合物。在另一个烧瓶中将Boc-Pro(1.55g，7.2mmol)、HOBt(1.02g，7.56mmol)和DCC(1.56g，7.56mmol)溶解于DCM(15mL)中，并在室温下搅拌15分钟，将在DCM(15mL)中的上述HCl盐和三乙胺(3.0mL，21.6mmol)的混合物加入至上述溶液中，并在室温下搅拌混合物过夜。过滤除去沉淀出的DCHU，并蒸发滤液。通过随后用冷的EtOAc研制和过滤除去另外的DCHU。浓缩EtOAc溶液。粗化合物经柱色谱提纯得到2.1g(81％)白色固体产物。熔点74-75℃。Rf＝0.51(10％MeOH/CH2Cl2)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.89(bs，1H)，7.75(bs，1H)，6.56(bs，1H)，3.87-4.22(m，3H)，3.41(m，2H)，2.91(s，3H)，2.88(s，3H)，1.68-2.1(m，4H)，1.36(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.46，169.06，158.28，155.33，80.33，58.72，53.44，47.07，41.83，36.05，35.71，28.33，24.49。t-BuO-草酰基-Pro-aza-Gly-(NMe)2((Me)2N-Gly-NProO-OtBu；实施例76)
0℃搅拌下，将TFA(10mL)缓慢加入至在DCM(10mL)中的Boc-Pro-aza-Gly-N(Me)2(实施例76)(0.72g，2.02mmol)溶液中，在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，并在高真空下干燥。所得剩余物溶解于DCM(25mL)中，在0℃搅拌下将三乙胺(0.85mL，6.04mmol)缓慢加入其中，随后加入叔丁基草酰氯(0.33g，2.02mmol)，并在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，所得粗化合物经柱色谱提纯得到250mg(32％)白色固体产物，熔点172-173℃。Rf＝0.36(10％MeOH/CH2Cl2)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)9.78(bs，1H)，8.15(s，1H)，6.28(m，1H)，4.41(m，1H)，3.97(m，2H)，3.56(m，2H)，2.91(s，3H)，2.83(s，3H)，1.8-2.35(m，4H)，1.46(s，9H)。
((Me)2N-Gly-NProO-NCH(CH3)2实施例77)
0℃搅拌下，将TFA(5mL)缓慢加入至在DCM(5mL)中的t-BuO-草酰基-Pro-aza-Gly-N(Me)2(实施例77)(220mg，0.57mmol)溶液中，在室温下搅拌反应混合物过夜。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥。所得剩余物溶解于DCM(15mL)中，在搅拌下将SOCl2(0.21mL，2.85mmol)加入其中，随后加入起催化作用的DMF(2滴)。在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物过夜。旋转蒸发仪上蒸发除去溶剂，在高真空下除去过量的SOCl2。所得剩余物溶解于DCM(15mL)中，0℃搅拌下将异丙基胺(0.15mL，1.72mmol)缓慢加入其中。用EtOAc(30mL)稀释混合物，并用1N HCl(10mL)、随后用10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。用Na2SO4干燥EtOAc层并浓缩得到150mg(70％)白色固体。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.71(bs，1H)，9.56(bs，1H)，8.11(bs，1H)，6.28(bs，1H)，4.34(m，1H)，4.05(m，2H)，3.94(m，1H)，3.6(m，2H)，2.92(s，3H)，2.89(s，3H)，1.87-2.39(m，4H)，1.18-1.3(m，6H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.5，164.9，162.1，162.0，158.5，62.7，46.57，43.1，41.1，36.8，37.2，30.1，25.27，23.63，24.1。
(S)-2-(t-丁氧草酰基-乙基-氨基)-丁酸(步骤7和实施例78)
0℃搅拌下，将TFA(15mL)缓慢加入至在DCM(15mL)中的(S)-2-(t-丁氧草酰基-乙基-氨基)-丁酸甲基酯(根据参考文献Tetrahedron Letters(1998)，39(23)，3957-3960进行制备)(4.1g，15.94mmol)溶液中，在室温下搅拌反应混合物过夜。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥得到3.2g(100％)棕色粘稠油状产物。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)5.09(dd，J＝3.52，3.32Hz，1H)，4.53(dd，J＝3.52Hz，1H)，3.52-4.02(m，10H)，1.85-2.36(m，8H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ.(ppm)170.58，169.73，157.76，155.99，155.87，59.74，59.22，51.2，48.1，47.46，29.85，26.97，23.43，20.54，20.28。(谱中可看到两种旋转异构体) 实施例80的化合物的合成已描述于Kraus，George A.Meleknov，Alex中。直接从α-酮酸和α-酰胺酸到酰基氢醌的路线。Tetrahedron Letters(1998)，39(23)，3957-3960。
(S)-1-异丙基氨基草酰基-吡咯烷-2-羧酸甲基酯(步骤7和实施例79)
在搅拌下将SOCl2(5.81mL，79.53mmol)加入至在DCM(30mL)中的(S)-2-(t-丁氧草酰基-乙基-氨基)-丁酸(实施例78)(3.2g，15.91mmol)溶液中，随后加入起催化作用的DMF(2滴)，在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物过夜。在旋转蒸发仪上蒸发溶剂，在高真空下除去过量的SOCl2。所得剩余物溶解于DCM(30mL)中，0℃搅拌下将异丙基胺(3.4mL，39.77mmol)缓慢加入其中。用EtOAc(50mL)稀释混合物，并用1N HCl(10mL)、随后用10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。用Na2SO4干燥EtOAc层并浓缩得到3.4g(88％)深棕色粘稠油状目标化合物。Rf＝0.32(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.35(bs，2H)，5.17(dd，J＝3.92，3.7Hz，1H)，4.4(dd，J＝4.3，4.1Hz，1H)，3.48-4.12(m，10H)，1.66-2.34(m，7H)，1.1-1.22(m，10H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.75，171.88，159.74，159.68，159.1158.95，60.75，52.25，49.24，48.61，41.50，41.45，31.82，28.33，25.49，22.27，22.24，22.19，21.71。(在谱中可看到两种旋转异构体) (2-苯基氨基-乙基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(步骤8，实施例80)
在搅拌下，冰浴中，氩气下，以30分钟的时间将在DCM(25mL)中的9-芴基甲基氯甲酸酯(5.72g，22.12mmol)溶液加入至苯基乙二胺(3.0g，22.12mmol)、DIPEA(4.65mL，26.54mmol)和DCM(25mL)的混合物中，在室温下进一步搅拌反应混合物15分钟。然后用1N HCl(15mL)、随后用10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤反应混合物，干燥(Na2SO4)并浓缩得到7.8g粗化合物，经EtOAc结晶得到6.5g(82％)白色固体纯产物，熔点174-175℃。Rf＝0.54(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)7.87(d，J＝7.24Hz，2H)，7.67(m，3H)，7.27-7.43(m，9H)，4.2-4.31(m，3H)，3.31(bs，4H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)156.07，143.74，140.66，138.6，138.18，129.63，127.58，127.03，125.16，121.09，120.06，65.56，48.46，46.6，36.97。
Boc-aza-(2-苯基氨基-乙基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例81)
在30分钟时间内将在CH2Cl2(10mL)中的(2-苯基氨基-乙基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例80)(1.79g，4.99mmol)和DIEA(1.0mL，5.99mmol)的混合物缓慢加入至在CH2Cl2(10mL)中的三光气(578mg，1.95mmol)溶液中。在进一步搅拌15分钟之后，一次性加入在DCM(10mL)中的Boc-联氨(990mg，7.49mmol)溶液。进一步回流反应混合物2小时，蒸发至干燥，用EtOAc稀释，用10％NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发得到1.9g粗化合物，经柱色谱提纯得到1.1g(42％)白色固体；熔点69-70℃。Rf＝0.51(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.67(d，J＝7.22Hz，2H)，7.53(d，J＝7.24Hz，2H)，7.18-7.42(m，9H)，6.33(bs，1H)，5.96(bs，1H)，5.63(bs，1H)，4.23(d，J＝6.84Hz，2H)，4.11(t，J＝6.44Hz，1H)，3.77(m，2H)，3.33(m，2H)，1.37(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)157.77，156.61，156.28，144.02，141.23，140.22，130.41，128.52，128.27，127.63，127.04，125.23，119.91，81.39，66.85，49.44，47.18，40.3，28.17。
制备(S)-1-异丙基氨基草酰基-吡咯烷-2-羧酸甲基酯(实施例82)
0℃搅拌下，将三乙胺(7.15mL，64.87mmol)缓慢加入至在DCM(30mL)中的L-丙氨酸甲基酯盐酸盐(3.02g，21.62mmol)溶液中，随后加入叔丁基草酰氯(3.74g，22.7mmol)。在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物30分钟。用EtOAc(50mL)稀释混合物，并用1N HCl(10mL)、随后用10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。用Na2SO4干燥EtOAc层并浓缩得到4.92g(98％)深棕色粘稠油状纯产物。Rf＝0.51(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.58(bs，1H)，4.55(m，1H)，3.74(s，3H)，1.53(s，9H)，1.44(d，J＝7.24Hz，3H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.33，159.02，156.8，84.62，52.61，48.42，27.63，17.97。
(S)-2-(t-丁基氨基草酰基-氨基)-丙酸甲基酯(实施例83)
0℃搅拌下，将TFA(10mL)缓慢加入至在DCM(10mL)中的(S)-1-异丙基氨基草酰基-吡咯烷-2-羧酸甲基酯(实施例82)(1.71g，7.4mmol)溶液中，在室温下搅拌反应混合物过夜。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥得到1.3g(100％)棕色粘稠油状产物。所得剩余物溶解于DCM(30mL)中，在搅拌下将SOCl2(2.7mL，36.97mmol)加入其中，随后加入起催化作用的DMF(2滴)。在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物过夜。旋转蒸发仪上蒸发除去溶剂，在高真空下除去过量的SOCl2。所得剩余物溶解于DCM(30mL)中，0℃搅拌下将异丙基胺(2.33mL，22.18mmol)缓慢加入其中。用EtOAc(50mL)稀释混合物，并用1N HCl(10mL)、随后用10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。用Na2SO4干燥EtOAc层并浓缩得到1.37g(80％)灰白色固体；熔点80-81℃。Rf＝0.67(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.94(bs，1H)，7.25(bs，IH)，4.47(m，1H)，3.69(s，3H)，1.4(d，J＝7.24Hz，3H)，1.33(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.03，160.5，158.24，52.53，51.46，48.34，29.87，28.2，17.89。
(S)-2-(t-丁基氨基草酰基-氨基)-丙酸(实施例84)
在MeOH(5mL)中的(S)-2-(t-丁基氨基草酰基-氨基)-丙酸甲基酯(实施例83)(500mg，2.17mmol)溶液中滴加入在0.5mL水中的LiOH(62mg，2.61mmol)水溶液。在室温下进一步搅拌反应混合物20分钟。蒸发除去MeOH，所得剩余物溶解于水(10mL)中，用乙醚(2×5mL)洗涤，用1N HCl酸化(pH＝4)并用EtOAc(3×105mL)萃取。合并的EtOAc层用盐水(2×5mL)洗涤，干躁(Na2SO4)并浓缩得到400mg(85％)白色固体；熔点118-119℃。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)11.1(bs，1H)，8.22(d，J＝7.04Hz，1H)，7.43(s，1H)，4.5(m，1H)，1.45(d，J＝7.24Hz，3H)，1.33(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3).δ(ppm)175.64，160.17，158.4，51.79，48.32，28.17，17.44。
实施例85肽模拟物
0℃搅拌下，将TFA(10mL)缓慢加入至在DCM(10mL)中的Boc-aza-(2-苯基氨基-乙基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例81)(900mg，1.7mmol)溶液中，在室温下进一步搅拌反应混合物30分钟(在搅拌过夜后将形成副产物，因此仅搅拌30分钟是关键的)。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥，所得剩余物溶解于DCM(15mL)中。在另一个烧瓶中将(S)-2-(t-丁基氨基草酰基-氨基)-丙酸(实施例84)(377mg，1.74mmol)、HOBt(247mg，1.83mmol)和DCC(377mg，1.83mmol)溶解于DCM(15mL)中，并在室温下搅拌15分钟，将在DCM(15mL)中的上述TFA盐和DIPEA(0.34mL，1.92mmol)的混合物加入至上述溶液中，并在室温下搅拌混合物过夜。过滤除去沉淀出的DCHU，并蒸发滤液。通过随后用冷的EtOAc研制和过滤除去另外的DCHU。用1N HCl(15mL)、10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤EtOAc溶液，干燥(Na2SO4)并浓缩得到1.1g粗化合物，经柱色谱提纯得到974mg(90％)白色固体产物。熔点48-49℃。Rf＝0.42(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.25(bs，1H)，8.35(d，J＝8.6Hz，1H)，7.75(d，J＝7.22Hz，2H)，7.58(d，J＝7.24Hz，2H)，7.25-7.45(m，10H)，6.48(bs，1H)，5.88(bs，1H)，4.55-4.75(m，1H)，4.14-4.29(m，3H)，4.25(m，2H)，3.4(m，2H)，1.45(d，J＝7.04Hz，3H)，1.35(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3).δ(ppm)170.52，160.5，158.29，157.26，156.57，143.95，141.22，139.94，130.46，128.74，128.1，127.63，127.02，125.16，119.92，66.78，51.53，49.64，47.74，47.16，39.78，28.26，17.67。
实施例86肽模拟物
在室温下搅拌在CH2Cl2(15mL)10％哌啶中的化合物(实施例85)(915mg，1.49mmol)溶液。蒸发除去溶剂，在高真空下彻底干燥反应混合物以除去痕量的哌啶。所得剩余物经EtOAc-戊烷结晶得到575mg(98％)游离胺。将游离胺溶解于MeOH(15mL)中，将丙烯腈(0.15mL，2.23mmol)加入至其中，并在室温下氩气中搅拌反应混合物过夜。蒸发除去溶剂，经柱色谱提纯粗化合物得到333mg(50％)白色固体；熔点62-63℃。Rf＝0.42(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.14(d，J＝8.4Hz，1H)，7.21-7.43(m，6H)，4.4-4.55(m，1H)，3.72(t，J＝6.06Hz，2H)，2.84(t，J＝6.54Hz，2H)，2.71(t，J＝6.06Hz，2H)，2.41(t，J＝6.65Hz，2H)，1.37(d，J＝7.04Hz，3H)，1.3(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3).δ(ppm)170.51，160.4，158.23，157.09，140.11，130.27，128.48，128.23，118.81，51.51，49.52，47.69，47.01，44.83，28.25，18.61，17.8。
实施例87肽模拟物
在25mL一颈圆底烧瓶中装入化合物(实施例71)的盐酸盐(363mg，0.82mmol)、10mLCH2Cl2和10mL饱和的NaHCO3水溶液。在冰浴中将两相混合物冷却至0℃。停止搅拌，分层，经注射器将在甲苯(0.85mL，1.64mmol)中的1.93M的光气溶液一次性加入至较低(有机)相中。立即重新开始搅拌，以600rpm搅拌冰冷却的反应混合物10分钟。分层，水相用CH2Cl2(3×5mL)萃取，用Na2SO4干燥合并后的有机相，过滤并浓缩。所得剩余物溶解于甲苯(15mL)中，将化合物(实施例86)(333mg，0.75mmol)加入至其中。进一步回流反应混合物过夜，蒸发至干躁，用EtOAc稀释，并用10％NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发得到粗化合物，经柱色谱提纯得到(68％)白色固体。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.12(bs，1H)，8.04(d，J＝7.82Hz，1H)，7.56(bs，1H)，7.15-7.37(m，12H)，6.91(bs，1H)，6.42(bs，1H)，6.23(bs，1H)，2.28-4.52(m，17H)，1.29-1.69(m，14H)，0.6-0.77(m，16H)。
实施例90β-转角模式肽的合成 步骤1Boc-aza-Gly-OEt(实施例73的步骤1)
以30分钟时间将在CH2Cl2(15mL)中的甘氨酸乙酯盐酸盐(4.0g，28.66mmol)和DIEA(14.87mL，85.97mmol)的混合物加入至在CH2Cl2(10mL)中的三光气(3.4g，11.46mmol)溶液中。继续搅拌15分钟后，将在CH2Cl2(15mL)中的Boc-联氨(3.79g，28.66mmol)溶液一次性加入。进一步回流反应混合物2小时，蒸发至干燥，用EtOAc稀释，用10％NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发得到5.6g粗化合物，经柱色谱提纯得到3.63g(48％)粘稠产物，经在室温下过夜静置后得到灰白色固体；熔点137-138℃。Rf＝0.29(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.2(bs，1H)，7.05(s，1H)，6.2(t，J＝5.46Hz，1H)，4.11(q，J＝7.04Hz，2H)，3.92(d，J＝5.66Hz，2H)，1.39(s，9H)，1.2(t，J＝7.04Hz，3H)。13C NMR(200MHz，CDCl3).δ(ppm)171.07，158.95，156.43，81.51，61.25，41.79，28.09，14.04。
参考文献 1994 JOC 1937Majer，Pavel；Randad，Ramnarayan S.A Safe and EfficientMethod for Preparation of N，N’-Unsymmetrically Disubstituted UreasUtilizing Triphosgene.Journal of Organic Chemistry(1994)，59(7)，1937-8。
步骤2 Boc-aza-Gly-N(Me)2(如实施例75中的)
在室温下将在EtOH(20mL)中的33％的二甲胺溶液中的Boc-aza-Gly-OEt(实施例73的步骤1)(3.8g，14.54mmol)溶液搅拌过夜。蒸发除去溶剂并在高真空下彻底干燥，得到3.78g(100％)灰白色固体；熔点71-72℃。Rf＝0.24(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.35(bs，1H)，7.07(s，1H)，6.48(t，J＝4.3Hz，1H)，4.0(d，J＝4.3Hz，2H)，2.92(s，3H)，2.89(s，3H)，1.38(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)169.15，158.74，156.33，81.08，41.8，36.01，35.64，28.13。
步骤3 Boc-Pro-aza-Gly-N(Me)2(如实施例76中的)
0℃搅拌下，将HCl饱和的EtOAc(10mL)缓慢加入至在EtOAc(10mL)中的Boc-aza-Gly-N(Me)2(实施例75)(1.87g，7.2mmol)溶液中。在室温下搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，并在高真空下干燥反应混合物。在另一个烧瓶中将Boc-Pro(1.55g，7.2mmol)、HOBt(1.02g，7.56mmol)和DCC(1.56g，7.56mmol)溶解于DCM(15mL)中，并在室温下搅拌15分钟，将在DCM(15mL)中的上述HCl盐和三乙胺(3.0mL，21.6mmol)的混合物加入至上述溶液中，并在室温下搅拌混合物过夜。过滤除去沉淀出的DCHU，并蒸发滤液。通过随后用冷的EtOAc研制和过滤除去另外的DCHU。浓缩EtOAc溶液。粗化合物经柱色谱提纯得到2.1g(81％)白色固体产物。熔点74-75℃。Rf＝0.51(10％MeOH/CH2Cl2)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.89(bs，1H)，7.75(bs，1H)，6.56(bs，1H)，3.87-4.22(m，3H)，3.41(m，2H)，2.91(s，3H)，2.88(s，3H)，1.68-2.1(m，4H)，1.36(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.46，169.06，158.28，155.33，80.33，58.72，53.44，47.07，41.83，36.05，35.71，28.33，24.49。
步骤3t-BuO-草酰基-Pro-aza-Gly-(NMe)2(如实施例77中的)
0℃搅拌下，将TFA(10mL)缓慢加入至在DCM(10mL)中的Boc-Pro-aza-Gly-N(Me)2(实施例76)(0.72g，2.02mmol)溶液中，在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，并在高真空下干燥。所得剩余物溶解于DCM(25mL)中，在0℃搅拌下将三乙胺(0.85mL，6.04mmol)缓慢加入其中，随后加入叔丁基草酰氯(0.33g，2.02mmol)，并在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物30分钟。蒸发除去溶剂，所得粗化合物经柱色谱提纯得到250mg(32％)白色固体产物，熔点172-173℃。Rf＝0.36(10％MeOH/CH2Cl2)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)9.78(bs，1H)，8.15(s，1H)，6.28(m，1H)，4.41(m，1H)，3.97(m，2H)，3.56(m，2H)，2.91(s，3H)，2.83(s，3H)，1.8-2.35(m，4H)，1.46(s，9H)。
步骤4(Me)2N-Gly-NProO-NCH(CH3)2(如实施例78中的)
0℃搅拌下，将TFA(5mL)缓慢加入至在DCM(5mL)中的t-BuO-草酰基-Pro-aza-Gly-N(Me)2(实施例77)(220mg，0.57mmol)溶液中，在室温下搅拌反应混合物过夜。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥。所得剩余物溶解于DCM(15mL)中，在搅拌下将SOCl2(0.21mL，2.85mmol)加入其中，随后加入起催化作用的DMF(2滴)。在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物过夜。旋转蒸发仪上蒸发除去溶剂，在高真空下除去过量的SOCl2。所得剩余物溶解于DCM(15mL)中，0℃搅拌下将异丙基胺(0.15mL，1.72mmol)缓慢加入其中。用EtOAc(30mL)稀释混合物，并用1N HCl(10mL)、随后用10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。用Na2SO4干燥EtOAc层并浓缩得到150mg(70％)白色固体。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.71(bs，1H)，9.56(bs，1H)，8.11(bs，1H)，6.28(bs，1H)，4.34(m，1H)，4.05(m，2H)，3.94(m，1H)，3.6(m，2H)，2.92(s，3H)，2.89(s，3H)，1.87-2.39(m，4H)，1.18-1.3(m，6H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)170.5，164.9，162.1，162.0，158.5，62.7，46.57，43.1，41.1，36.8，37.2，30.1，25.27，23.63，24.1。
实施例91β-折叠片模拟物的合成 步骤1(2-苯基氨基-乙基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(如实施例82中的)
在搅拌下，冰浴中，氩气下，以30分钟的时间将在DCM(25mL)中的9-芴基甲基氯甲酸酯(5.72g，22.12mmol)溶液加入至苯基乙二胺(3.0g，22.12mmol)、DIPEA(4.65mL，26.54mmol)和DCM(25mL)的混合物中，在室温下进一步搅拌反应混合物15分钟。然后用1N HCl(15mL)、随后用10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤反应混合物，干燥(Na2SO4)并浓缩得到7.8g粗化合物，经EtOAc结晶得到6.5g(82％)白色固体纯产物，熔点174-175℃。Rf＝0.54(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)7.87(d，J＝7.24Hz，2H)，7.67(m，3H)，7.27-7.43(m，9H)，4.2-4.31(m，3H)，3.31(bs，4H)。13C NMR(200MHz，DMSO-d6)δ(ppm)156.07，143.74，140.66，138.6，138.18，129.63，127.58，127.03，125.16，121.09，120.06，65.56，48.46，46.6，36.97。
步骤2Boc-aza-(2-苯基氨基-乙基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(如实施例83中的)
在30分钟时间内将在CH2Cl2(10mL)中的(2-苯基氨基-乙基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例82)(1.79g，4.99mmol)和DIEA(1.0mL，5.99mmol)的混合物缓慢加入至在CH2Cl2(10mL)中的三光气(578mg，1.95mmol)溶液中。在进一步搅拌15分钟之后，一次性加入在DCM(10mL)中的Boc-联氨(990mg，7.49mmol)溶液。进一步回流反应混合物2小时，蒸发至干燥，用EtOAc稀释，用10％NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发得到1.9g粗化合物，经柱色谱提纯得到1.1g(42％)白色固体；熔点69-70℃。Rf＝0.51(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.67(d，J＝7.22Hz，2H)，7.53(d，J＝7.24Hz，2H)，7.18-7.42(m，9H)，6.33(bs，1H)，5.96(bs，1H)，5.63(bs，1H)，4.23(d，J＝6.84Hz，2H)，4.11(t，J＝6.44Hz，1H)，3.77(m，2H)，3.33(m，2H)，1.37(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)157.77，156.61，156.28，144.02，141.23，140.22，130.41，128.52，128.27，127.63，127.04，125.23，119.91，81.39，66.85，49.44，47.18，40.3，28.17。
步骤3制备(S)-1-异丙基氨基草酰基-吡咯烷-2-羧酸甲基酯(如实施例84中的)
0℃搅拌下，将三乙胺(7.15mL，64.87mmol)缓慢加入至在DCM(30mL)中的L-丙氨酸甲基酯盐酸盐(3.02g，21.62mmol)溶液中，随后加入叔丁基草酰氯(3.74g，22.7mmol)。在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物30分钟。用EtOAc(50mL)稀释混合物，并用1N HCl(10mL)、随后用10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。用Na2SO4干燥EtOAc层并浓缩得到4.92g(98％)深棕色粘稠油状纯产物。Rf＝0.51(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.58(bs，1H)，4.55(m，1H)，3.74(s，3H)，1.53(s，9H)，1.44(d，J＝7.24Hz，3H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.33，159.02，156.8，84.62，52.61，48.42，27.63，17.97。
步骤4(S)-2-(t-丁基氨基草酰基-氨基)-丙酸甲基酯(如实施例85中的)
0℃搅拌下，将TFA(10mL)缓慢加入至在DCM(10mL)中的(S)-1-异丙基氨基草酰基-吡咯烷-2-羧酸甲基酯(实施例84)(1.71g，7.4mmol)溶液中，在室温下搅拌反应混合物过夜。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥得到1.3g(100％)棕色粘稠液状产物。所得剩余物溶解于DCM(30mL)中，在搅拌下将SOCl2(2.7mL，36.97mmol)加入其中，随后加入起催化作用的DMF(2滴)。在室温下氩气中进一步搅拌反应混合物过夜。旋转蒸发仪上蒸发除去溶剂，在高真空下除去过量的SOCl2。所得剩余物溶解于DCM(30mL)中，0℃搅拌下将异丙基胺(2.33mL，22.18mmol)缓慢加入其中。用EtOAc(50mL)稀释混合物，并用1N HCl(10mL)、随后用10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。用Na2SO4干燥EtOAc层并浓缩得到1.37g(80％)灰白色固体；熔点80-81℃。Rf＝0.67(1:2EtOAc/戊烷)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.94(bs，1H)，7.25(bs，1H)，4.47(m，1H)，3.69(s，3H)，1.4(d，J＝7.24Hz，3H)，1.33(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)172.03，160.5，158.24，52.53，51.46，48.34，29.87，28.2，17.89。
步骤5(S)-2-(t-丁基氨基草酰基-氨基)-丙酸(如实施例86中的)
在MeOH(5mL)中的(S)-2-(t-丁基氨基草酰基-氨基)-丙酸甲基酯(实施例85)(500mg，2.17mmol)溶液中滴加入在0.5mL水中的LiOH(62mg，2.61mmol)水溶液。在室温下进一步搅拌反应混合物20分钟。蒸发除去MeOH，所得剩余物溶解于水(10mL)中，用乙醚(2×5mL)洗涤，用1N HCl酸化(pH＝4)并用EtOAc(3×105mL)萃取。合并的EtOAc层用盐水(2×5mL)洗涤，干躁(Na2SO4)并浓缩得到400mg(85％)白色固体；熔点118-119℃。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)11.1(bs，1H)，8.22(d，J＝7.04Hz，1H)，7.43(s，1H)，4.5(m，1H)，1.45(d，J＝7.24Hz，3H)，1.33(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3).δ(ppm)175.64，160.17，158.4，51.79，48.32，28.17，17.44。
步骤6(如实施例87中的)
0℃搅拌下，将TFA(10mL)缓慢加入至在DCM(10mL)中的Boc-aza-(2-苯基氨基-乙基)-氨基甲酸9H-芴-9-基甲基酯(实施例83)(900mg，1.7mmol)溶液中，在室温下进一步搅拌反应混合物30分钟(在搅拌过夜后将形成副产物，因此仅搅拌30分钟是关键的)。蒸发除去溶剂，并在高真空下彻底干燥，所得剩余物溶解于DCM(15mL)中。在另一个烧瓶中将(S)-2-(t-丁基氨基草酰基-氨基)-丙酸(实施例86)(377mg，1.74mmol)、HOBt(247mg，1.83mmol)和DCC(377mg，1.83mmol)溶解于DCM(15mL)中，并在室温下搅拌15分钟，将在DCM(15mL)中的上述TFA盐和DIPEA(0.34mL，1.92mmol)的混合物加入至上述溶液中，并在室温下搅拌混合物过夜。过滤除去沉淀出的DCHU，并蒸发滤液。通过随后用冷的EtOAc研制和过滤除去另外的DCHU。用1N HCl(15mL)、10％NaHCO3(15mL)和盐水(15mL)洗涤EtOAc溶液，干燥(Na2SO4)并浓缩得到1.1g粗化合物，经柱色谱提纯得到974mg(90％)白色固体产物。熔点48-49℃。Rf＝0.42(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.25(bs，1H)，8.35(d，J＝8.6Hz，1H)，7.75(d，J＝7.22Hz，2H)，7.58(d，J＝7.24Hz，2H)，7.25-7.45(m，10H)，6.48(bs，1H)，5.88(bs，1H)，4.55-4.75(m，1H)，4.14-4.29(m，3H)，4.25(m，2H)，3.4(m，2H)，1.45(d，J＝7.04Hz，3H)，1.35(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3).δ(ppm)170.52，160.5，158.29，157.26，156.57，143.95，141.22，139.94，130.46，128.74，128.1，127.63，127.02，125.16，119.92，66.78，51.53，49.64，47.74，47.16，39.78，28.26，17.67。
步骤7(如实施例88中的)
在室温下搅拌在CH2Cl2(15mL)10％哌啶中的化合物(实施例87)(915mg，1.49mmol)溶液。蒸发除去溶剂，在高真空下彻底干燥反应混合物以除去痕量的哌啶。所得剩余物经EtOAc-戊烷结晶得到575mg(98％)游离胺。将游离胺溶解于MeOH(15mL)中，将丙烯腈(0.15mL，2.23mmol)加入至其中，并在室温下氩气中搅拌反应混合物过夜。蒸发除去溶剂，经柱色谱提纯粗化合物得到333mg(50％)白色固体；熔点62-63℃。Rf＝0.42(5％MeOH于CH2Cl2中)。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.14(d，J＝8.4Hz，1H)，7.21-7.43(m，6H)，4.4-4.55(m，1H)，3.72(t，J＝6.06Hz，2H)，2.84(t，J＝6.54Hz，2H)，2.71(t，J＝6.06Hz，2H)，2.41(t，J＝6.65Hz，2H)，1.37(d，J＝7.04Hz，3H)，1.3(s，9H)。13C NMR(200MHz，CDCl3).δ(ppm)170.51，160.4，158.23，157.09，140.11，130.27，128.48，128.23，118.81，51.51，49.52，47.69，47.01，44.83，28.25，18.61，17.8。
步骤8(如实施例89中的)
在25mL一颈圆底烧瓶中装入化合物(实施例71)的盐酸盐(363mg，0.82mmol)、10mLCH2Cl2和10mL饱和的NaHCO3水溶液。在冰浴中将两相混合物冷却至0℃。停止搅拌，分层，经注射器将在甲苯(0.85mL，1.64mmol)中的1.93M的光气溶液一次性加入至较低(有机)相中。立即重新开始搅拌，以600rpm搅拌冰冷却的反应混合物10分钟。分层，水相用CH2Cl2(3×5mL)萃取，用Na2SO4干燥合并后的有机相，过滤并浓缩。所得剩余物溶解于甲苯(15mL)中，将化合物(实施例88)(333mg，0.75mmol)加入至其中。进一步回流反应混合物过夜，蒸发至干躁，用EtOAc稀释，并用10％NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发得到粗化合物，经柱色谱提纯得到(68％)白色固体。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)9.12(bs，1H)，8.04(d，J＝7.82Hz，1H)，7.56(bs，1H)，7.15-7.37(m，12H)，6.91(bs，1H)，6.42(bs，1H)，6.23(bs，1H)，2.28-4.52(m，17H)，1.29-1.69(m，14H)，0.6-0.77(m，16H)。
N’-(2-苄氧羰基氨基-3-苯基-丙酰基)-联氨羧酸叔丁基酯(实施例92)
-10℃搅拌下将三乙胺(1.85mL，13.23mmol)缓慢加入至在THF(30mL)中的Z-L-苯基丙氨酸(3.6g，12mmol)溶液中，随后加入乙基氯甲酸酯(1.26mL，13.23mmol)。在相同温度下氩气中搅拌反应混合物30分钟，并在搅拌下缓慢加入在干燥的THF(20mL)中的肼基甲酸叔丁酯(1.59g，12.03mmol)溶液，在室温下继续搅拌反应混合物1小时。用EtOAc(50mL)稀释混合物，并用1N HCl(10mL)、随后用10％NaHCO3(10mL)和盐水(10mL)洗涤。用Na2SO4干燥并浓缩得到5.2g粗化合物，经柱色谱提纯得到3.6g(72％)无色粘稠油状纯产物，在室温下静置过夜，结晶为白色固体；熔点104-105℃。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)8.13(br s，1H)，7.09-7.25(m，10H)，6.51(br s，1H)，5.43(d，J＝6.98Hz，1H)，4.95(dd，J＝12.34，12.36Hz，2H)，4.28-4.59(m，1H)，3.1(dd，J＝5.9，6.44Hz，1H)，2.93(dd，J＝7.92Hz，1H)，1.38(s，9H)。
权利要求
1.通式1的化合物，
式1
其中
●X是CO-联氨与NR1-草酸、草酸酯或草酰胺基团之间的连接，且是未取代的5-11元杂芳基或选自C3-20-环烷基、3-20元杂环基，优选不包括1，6-二氮杂萘，以及
■直链，
■支链，
■环状或稠环或双环或稠双环的
C1-20-烷基、C2-20-烯基或C2-20炔基，优选C2-10-烷基的任选取代的基团；以及
●R5选自-SR10、-OR10或-NR10R11，条件是-NR10R11不是氨基酸酰肼的酰胺官能团，或R5可与R2或R3合作形成键或8-10元杂环，以及
●R10和R11是任选取代的并独立地选自H、C3-14-环烷基、C5-14-芳基、3-14元杂环或杂芳基、直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基以及
●R3和R4一起可组成与基团R12相连的双键；其中R12是任选取代的并选自C3-14-环烷基、3-14元杂环或杂芳基，直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基；以及
●R2是任选取代的并选自H、C3-14-环烷基、3-14元杂环或杂芳基、直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基；优选R2是H；以及
●R1、R3和R4是任选取代的并独立地选自H、C3-14-环烷基、C5-14-芳基、3-14元杂环或杂芳基、直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基、C2-14-炔基；以及
●任选地，R1、R2、R3和R4中至少两个与X可合作形成(优选单环)3-10元环，优选1、2、3或4环由R1、R2、R3、R4和X形成，甚至更优选X或作为另一种选择的R2与R3和R4之一合作形成环；或者
其酯、酰胺、盐、立体异构体或消旋体；
条件是
●其中X是CH2，R3和R4通过单键相连，且R2选自
■H，
■C3-20-环烷基
■C5-20-芳基
■3-20元杂环或杂芳基
■直链或支链C2-20-烯基、C2-20-炔基，或未取代的C1-4-烷基，
以及
●其中X是杂芳基，优选X不与R3、R4或R5合作形成环，尤其是杂环烷环。
2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，X是式2-6之一的化学基团，
式2 式3 式4 式5式6
其中R6、R7、R8和R9是任选取代的，并独立地选自H、C3-14-环烷基、C5-12芳基、3-12元杂环基或杂芳基以及直链或支链C1-14-烷基、C2-14-烯基或C2-14-炔基；以及
任选地，R6、R7、R8和R9中的至少两个可合作形成3-22元任选取代的或稠环烷基或杂环基环，或其双环；且n和m独立地是0-5的整数，优选1、2、3或4。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其特征在于，X是，优选α、β或γ，NR1-草酸或酯结合基团，选自C1-2-烷基、胍基丁基、2-甲基-丁基、苯基乙基、p-羟苯基乙基、3-吲哚基乙基、羟乙基、甲基硫丙基、硫乙基、C2-3-烷基酸、C2-3-烷基酰胺基、氨基戊基、4-咪唑基乙基，或X和R1合作形成丁基，与NR1-草酸或酯基团的氮形成吡咯烷环，其中α是指式1的CO-联氨和NR1-草酸、草酸酯或草酸酰胺基团结合至X基团的相同原子，优选碳(“C-α”)上，β是指式1的CO-联氨和NR1-草酸、草酸酯或草酸酰胺基团结合至X基团的相邻原子(优选分别在“C-α”和“C-β”碳原子)上，以及γ是指式1的CO-联氨和NR1-草酸、草酸酯或草酸酰胺基团结合至由一个原子(优选C原子“C-β”)隔开的X基团的原子(优选“C-α”和“C-γ”碳原子)上。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其特征在于，X是-CHR13-，其中R13是H或D或选自如下氨基酸的氨基酸侧链丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯基丙氨酸、辅氨酸、4-羟基辅氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸，优选其L-对映异构体。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物，其特征在于，R10和R11选自H、未取代的C1-5-烷基、C2-10-烯基、C2-10-炔基、C3-14-环烷基、C5-14-芳基、3-14元杂环基或3-14元杂芳基。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，选自下表中的化合物
7.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，X选自除了1，6-二氮杂萘之外的O-、S-、N-或P-杂取代的3-20元杂环。
8.根据权利要求1所述的化合物，其中R3和R5形成键，从而得到通式10的杂环化合物，
式10
其中X、R1、R2和R4如权利要求1中所定义的。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中R3或R4是N-保护基，其选自Boc、Fmoc、Alloc、三氟乙酰基、甲氧羰基、乙氧羰基、苄氧羰基、2-(三甲基硅基)乙氧羰基、2，2，2-三氯乙氧羰基、芳基磺酰基、2-(三甲基硅基)乙基磺酰基、三苯甲基，和/或R5是羧酸保护基或活化基团，选自OMe、OEt、O-t-Bu、OBn、OCHPh2、苯乙酮酯、烷氧基烷基酯、2，2，2-三氯乙酯、2-(三甲基硅基)乙酯、2-甲苯磺酰基乙酯、硅酯或活化基团，优选N-羟磺胺吡啶酯、1-羟苯并三唑酯、4-硝基苯基酯，或原位制备的酯，优选使用试剂HNTU(＝2-(内-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亚胺)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯)、HOCt(＝1-羟基-1H-1，2，3-三唑-4-羧酸酯)、HONB(＝N-羟基-5-降冰片烯-2，3-联羧基)，并且其中保护基团或活化基团均可以它们的聚合物形式或树脂结合形式使用。
10.根据权利要求1或2所述的化合物，选自下表中的化合物
11.制备根据权利要求1-10中任一项所述的化合物的方法，其特征在于，根据式7的化合物
式7
以任何顺序与根据式8的联氨或联氨衍生物
式8
和根据式9的草酸、酯或衍生物接触，
式9
其中X、R1、R2、R3、R4和R5如权利要求1-10中任一项中所定义的，且L1、L2、L3和L4独立地是任意的离去基团或氢，优选L4是Cl或OH、活化的酯或酐。
12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，R3或R4之一是保护基团，优选Fmoc。
13.包含至少一种根据通式1的化合物的肽或蛋白质模拟物，
式1
其中X、R1、R2、R3、R4和R5如权利要求1-10中任一项中所定义的，作为分子部分，以及天然的或非天然的氨基酸或另外的氨基酸模拟物，优选通过酰胺键结合。
14.根据权利要求13所述的模拟物，包含至少2个，优选至少3个，甚至更优选至少5个，尤其优选至少10个或最优选至少20个除了式1的化合物之外的天然的或非天然的氨基酸或另外的氨基酸模拟物。
15.根据权利要求13或14所述的模拟物，其模拟α-螺旋、β-折叠片或转角基序的三维结构。
16.使用如权利要求13或14中所定义的通式1的化合物合成根据权利要求13-15的肽模拟物的方法，其中包含胺的反应目标与根据式1的化合物接触，且R3或R4组成带有保护基，优选Fmoc的酰胺。
17.根据权利要求16所述的方法，进一步包括除去R3或R4保护基团的步骤。
18.根据权利要求17所述的方法，其中优选在除去R3或R4保护基团的步骤之后，氨基酸或氨基酸模拟物，优选带有被保护的氨基，与根据式1的化合物接触。
19.根据权利要求16-18中任一项所述的方法，其特征在于，反应目标是固体，优选固体树脂。
20.作为在蛋白质氨基酸序列的任何位置上的共价连接插入物或取代物的，包含如权利要求13-15中所定义的通式1的化合物的肽、蛋白质或蛋白质片断。
21.制备根据权利要求20的肽、蛋白质或蛋白质片断的方法，包括将如权利要求13-15中所定义的式1的化合物连接至肽、蛋白质或蛋白质片断的步骤。
22.根据权利要求21所述的方法，进一步包括将另一氨基酸、肽、蛋白质或蛋白质片断连接至如权利要求13-15中所定义的式1的化合物的步骤。
23.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物作为间隔部分的用途。
24.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物作为动态组合库中的组分的用途。
全文摘要
本发明提供通式(I)的化合物以及其用途和合成方法，如右式(Ⅰ)，其中X是CO-联氨与NR1-草酸或草酸酯基团之间的连接。这些化合物代表氨基酸衍生物，其中氨基基团通过草酸基团转变为酸性基团，且羧酸通过联氨基团转变为氨基官能团；以及包含所述化合物的肽模拟物以其合成方法。
文档编号C07C243/28GK101389599SQ200680053471
公开日2009年3月18日 申请日期2006年11月24日 优先权日2006年2月27日
发明者乌尔里克·乔迪斯, 杰伊旺特·B·波帕塞 申请人:维也纳技术大学