专利名称：血浆激肽释放酶抑制剂的制作方法
相关申请的交叉引用
本申请要求2007年5月20日提交的美国临时专利申请第60/919,031号和2006年7月31日提交的美国临时专利申请第60/834,377号的优先权，所述专利申请的内容全面纳入本文作为参考。
在联邦政府资助下的研究或开发对本发明的权利声明
不适用
对于“序列表”，以磁盘形式提交的表格或计算机程序列表附录
不适用
背景技术：
血栓形成是阻止血液损失和实现受损血管的修复所必需的，是一种称为止血的过程，但是当血栓阻断血管剥夺组织供氧时，它也可以是致病性的。血栓导致的动脉阻塞，即动脉血栓形成，常常在破裂或受侵蚀的粥样硬化斑块部位发生。(Kou，V.等，(2006)Mt.Sinai J.Med.73449-468)。特异性阻塞冠状动脉可导致急性冠状动脉综合征，包括不稳定咽峡炎和心肌梗塞(MI)。
通过启动两种独特路径中的一种，即内源性路径和外来途径，将共同路径汇聚到凝固上，可以在血流中产生纤维蛋白凝块(Macfarlane，R.G.(1964)Nature202498-9；Davie，E.W.等(1964)Science 1451310-12；Joseph，K.等(2005)Advances Immunology 86159-208)。实验数据表明，PK-和FXII-缺乏的个体中虽然缺乏出血表型但其内源性路径介导的凝块形成严重受损(Ratnoff，O.D.等(1955)J.Clin.Invest.34602-613；Colman，R.W.(2001)，止血与血栓形成基本原理和临床实践(Hemostasis and ThrombosisBasic principles and clinicalpractice).R.W.Colman等编.Lippincott Williams & Wilkins，宾夕法尼亚州费城，103-122；Rosen，E.D.等(1997)Nature 390290-294；Hathaway，W.E.等，(1965)Blood 26521-32；Lawrie，A.S.等(1998)Clin.Lab.Haematol.20179-86；和Bates，等，(2005)Circulation 11253-60)。在内源性路径中，通过结合于表面，少量因子XII(FXII)活化(FXIIa)，然后通过蛋白酶解激活血浆激肽释放酶(PK)。重要的是，PK在反馈回路中产生额外的FXIIa，再使因子XI(FXI)活化成FXIa而连接于共同途径。虽然内源性路径的最初活化是通过少量FXIIa激活少量PK，却是随后PK对FXII的反馈活化控制了内源性路径的活化程度，从而控制下游的凝结(Hathaway，W.E.等，(1965)Blood 26521-32)。
目前在医院环境中对急性MI或缺血性中风的治疗要求急救措施，以溶解阻塞性血栓和实现再灌注(恢复血流)。这样做的一种常用方法是用纤维蛋白溶解性试剂，如组织纤溶酶原活化剂(t-PA)或链激酶治疗患者，这些试剂能使纤溶酶原活化形成纤溶酶。纤溶酶裂解血栓纤维蛋白网状物，因而导致凝块溶解。这种纤维蛋白溶解性试剂是全世界最常用的再灌注治疗方法。然而，纤维蛋白溶解作用也与高程度的血栓再形成有关，研究发现后续的再阻塞率高达50％(Zijlstra，F.等(1993)N.Engl.J.Med.328680-4；Brodie，B.R.等(1994)Circulation 90156-62；Stone，G.W.等(1999)Circulation 991548-54；Tamai，H.等，MAJIC Investigators(2004)Am.Heart J.147E9；Verheugt，F.W.等(1996)JAm.Coil.Cardiol.27766-73)。
急性MI患者呈现处于凝固性过高(凝块促进)状态的临床征兆。这种过高的血液凝固性在接受纤维蛋白溶解性治疗的患者中反常地额外加剧。与仅仅接受肝素治疗的患者中观察到的已经非常高的水平相比，在进行这种治疗的患者中通过凝血酶-抗凝血酶III(TAT)测定发现凝血酶的产生增加高达2倍以上(Hoffmeister，H.M.等(1998)Circulation 982527-33)。已提出凝血酶的增加是内源性路径中纤溶酶介导的活化导致的结果。内源性路径体系中纤溶酶介导的活化已知在血液中发生(Ewald，G.A.等(1995)Circulation 9128-36)，提示可能是纤溶酶直接激活FXII的结果。
纤维蛋白溶解诱导的血液凝固性过高不仅导致再阻塞率增加，而且很可能，至少部分地，与不能实现凝块完全的纤维蛋白溶解作用有关，这就是纤维蛋白溶解疗法的主要缺陷(Keeley，E.C.等(2003)Lancet 36113-20)。纤维蛋白溶解疗法的另一个问题在于，伴随着颅内出血(ICH)的风险提高3倍(Menon，V.等(2004)126549S-575S；纤维蛋白溶解疗法试验联合小组(FibrinolyticTherapy Trialists′Collaborative Group)(1994)Lancet 343311-322)。因此，不会提高出血风险却能抑制新的凝血酶形成的辅助的抗凝血疗法是非常有益的。
已经发现，用FXII可逆抑制剂治疗野生型小鼠导致阻塞血管较少且缺血性皮层损伤较少，FXII的抑制能够保护动脉免于血栓形成，如急性MI期间或血栓形成性中风期间发生的那些(WO/2006066878A1)。然而，肽类药物存在许多缺陷，包括因为半衰期短而仅限于急性研究，要求静脉注射进行的医学干预，以及进行治疗的患者的抗-肽抗体的开发。
因此，需要开发能够克服这些限制的PK的小分子抑制剂。具体说，需要能够推动闭塞性血栓处的纤维蛋白溶解/血栓形成平衡朝溶解方向移动，促进再灌注，还能缓解高凝状态的抑制剂，从而防止血栓再形成和血管再阻塞。本发明满足了这些和其他需要。
发明概述 在一个方面，本发明提供了具有以下通式的化合物及其药学上可接受的盐
式中，Ar是键或选自苯、吡啶和嘧啶的芳环；下标m是0-5的整数；每个Ra独立地选自环烷基、卤代烷基、卤素、-OH、-OR1、-OSi(R1)3、-OC(O)O-R1、-OC(O)R1、-OC(O)NHR1、-OC(O)N(R1)2、-SH、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-SO2NH2、-S(O)2NHR1、-S(O)2N(R1)2、-NHS(O)2R1、-NR1S(O)2R1、-C(O)NH2、-C(O)NHR1、-C(O)N(R1)2、-C(O)R1、-C(O)H、-C(＝S)R1、-NHC(O)R1、-NR1C(O)R1、-NHC(O)NH2、-NR1C(O)NH2、-NR1C(O)NHR1、-NHC(O)NHR1、-NR1C(O)N(R1)2、-NHC(O)N(R1)2、-CO2H、-CO2R1、-NHCO2R1、-NR1CO2R1、-R1、-CN、-NO2、-NH2、-NHR1、-N(R1)2、-NR1S(O)NH2、-NR1S(O)2NHR1、-NH2C(＝NR1)NH2、-N＝C(NH2)NH2、-C(＝NR1)NH2、-NH-OH、-NR1-OH、-NR1-OR1、-N＝C＝O、-N＝C＝S、-Si(R1)3、-NH-NHR1、-NHC(O)NHNH2、NO、-N＝C＝NR1和-S-CN，其中每个R1独立地是烷基；L是选自键、CH2和SO2的连接基团；Qa、Qb和Qc各自独立地选自N、S、O或C(Rq)，其中每个Rq独立地选自H、C1-8烷基和苯基，具有Qa、Qb、Qc和Y作为环顶点的环是具有两个双键的五元环；Y选自C或N；当Ar是键时，m是1；当Ar是芳环时，m是0-5的整数。
在另一方面，本发明提供了具有以下通式的化合物及其药学上可接受的盐
式中，下标m是0-5的整数；下标n是0-4的整数；下标q是0-1的整数；L是选自键、CH2和SO2的连接基团；Rb和Rc各自独立地选自环烷基、卤代烷基、卤素、-OH、-OR2、-OSi(R2)3、-OC(O)O-R2、-OC(O)R2、-OC(O)NHR2、-OC(O)N(R2)2、-SH、-SR2、-S(O)R2、-S(O)2R2、-SO2NH2、-S(O)2NHR2、-S(O)2N(R2)2、-NHS(O)2R2、-NR2S(O)2R2、-C(O)NH2、-C(O)NHR2、-C(O)N(R2)2、-C(O)R2、-C(O)H、-C(＝S)R2、-NHC(O)R2、-NR2C(O)R2、-NHC(O)NH2、-NR2C(O)NH2、-NR2C(O)NHR2、-NHC(O)NHR2、-NR2C(O)N(R2)2、-NHC(O)N(R2)2、-CO2H、-CO2R2、-NHCO2R2、-NR2CO2R2、-R2、-CN、-NO2、-NH2、-NHR2、-N(R2)2、-NR2S(O)NH2、-NR2S(O)2NHR2、-NH2C(＝NR2)NH2、-N＝C(NH2)NH2、-C(＝NR2)NH2、-NH-OH、-NR2-OH、-NR2-OR2、-N＝C＝O、-N＝C＝S、-Si(R2)3、-NH-NHR2、-NHC(O)NHNH2、NO、-N＝C＝NR2或-S-CN，其中每个R2独立地是烷基；当q是0时，Z选自O、S或NRd，其中Rd是H或C1-C8烷基；当q是1时，Z是N。
在又一方面，本发明提供了一种药物组合物。该组合物包含式I或II的化合物以及药学上可接受的赋形剂。
在又一方面，本发明提供了在需要的对象中治疗血栓形成的方法。该方法包括给予所述对象式I或II的化合物或PK特异性单克隆抗体。
在另一方面，本发明提供了在需要的对象中治疗血浆激肽释放酶依赖性疾病或病症的方法。该方法包括给予所述对象式I或II的化合物或PK特异性单克隆抗体。
附图简要说明
图1显示了加入肌动蛋白FS(Actin FS)之后缺乏PK的血浆与正常血浆的凝固时间的比较。
图2显示了加入各种浓度的ASP-440或ASP-465的正常血浆的凝血时间的剂量依赖性延长，以及PK-缺乏血浆的凝结时间。
图3显示了将100或200nM的外源性纤溶酶加入50％血浆-6.25％肌动蛋白FS孵育化合物中导致凝血时间剂量依赖性缩短，例如凝血时间从1.00下降到0.74再到0.65。
图4显示了PK-特异性抑制剂能够有效抑制血浆中纤溶酶介导的血栓形成作用，PK的存在是纤溶酶发挥其血浆中的血栓形成作用所必需的。
图5显示了单克隆抗体(MAB)13G11使得用50％肌动蛋白FS激活血浆时的凝血时间延长100％。
图6显示了MAB 13G11使得用200nM纤溶酶和6.25％肌动蛋白FS激活血浆时的凝血时间延长32％。
发明详述 I.定义 除非另有声明，说明书和权利要求书中使用的以下术语具有下面给出的涵义。
除非另有声明，术语“烷基”，本身或作为另一取代基的一部分，表示直链或支链烃基团，具有指定的碳原子数目(即C1-8表示1-8个碳原子)。烷基的例子包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基等。对于本文中的各种定义(如，烷基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、亚烷基、卤代烷基)，如果不包括前缀来表示烷基部位中主链碳原子的数目，则基团或部分中主链碳原子的数目等于或小于12。
术语“亚烷基”，本身或作为另一取代基的一部分，表示来源于链烷的二价基团，例如-CH2CH2CH2CH2-。通常，烷基(或亚烷基)具有1-24个碳原子，在本发明中优选碳原子数目等于或小于10。“低级烷基”或“低级亚烷基”是短链烷基或亚烷基，通常碳原子数目等于或小于4。
术语“环烷基”表示具有指定环原子数目的烃环(如，C3-6环烷基)，环原子之间完全饱和或仅仅具有一个双键。一个或两个碳原子可任选地被羰基取代。“环烷基”也表示双环和多环烃环，例如双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷等。如果不包括前缀来表示环烷基中环上碳原子的数目，则该基团或部分环上碳原子的数目等于或小于8。
术语“烷氧基”、“烷基氨基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基)采用其常规涵义，分别表示烷基通过氧原子、氨基或硫原子与分子其余部分相连。此外，对于二烷基氨基，烷基部分可相同或不同，也可组合形成各自连接氮原子的3-7元环。因此，以-NRaRb表示的基团包括哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、吖丁啶基等。
除非另有声明，术语“卤代”或“卤素”，本身或作为另一取代基的一部分，表示氟、氯、溴或碘原子。此外，术语如“卤代烷基”表示包括单卤代烷基和多卤代烷基。例如，术语“C1-4卤代烷基”表示三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯代丁基、3-溴代丙基等。
术语“芳基”表示5-14个环原子的单价单环、双环或多环芳族烃基团，未取代或被1-4个取代基，优选1个、2个或三个取代基独立地取代，所述取代基选自烷基、环烷基、环烷基-烷基、卤素、氰基、羟基、烷氧基、氨基、酰基氨基、单烷基氨基、二烷基氨基、卤代烷基、卤代烷氧基、杂烷基、COR(其中R是氢、烷基、环烷基、环烷基-烷基短链(cut)、苯基或苯基烷基、芳基或芳基烷基)、-(CR′R″)n-COOR(其中n是0-5的整数，R′和R″独立地是氢或烷基，R是氢、烷基、环烷基、环烷基烷基短链、苯基或苯基烷基、芳基或芳基烷基)或-(CR′R″)n-CONRaRb(其中n是0-5的整数，R′和R″独立地是氢或烷基，Ra和Rb相互独立地是氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、苯基或苯基烷基、芳基或芳基烷基)。更具体地，术语芳基包括但不限于苯基、联苯基、1-萘基和2-萘基以及它们的取代形式。类似地，术语“杂芳基”表示1-5个杂原子或杂原子官能团取代环碳并保留芳族性质的芳基，例如吡啶基、喹啉基、喹唑啉基、噻吩基等。杂原子选自N、O或S，其中氮原子和硫原子可任选地氧化，氮原子可任选地季铵化。杂芳基可通过杂原子连接分子其余部分。芳基非限制性的例子包括苯基、萘基和联苯基，而杂芳基非限制性的例子包括吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基(pyrimindinyl)、三嗪基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基(phthalaziniyl)、苯并三嗪基、嘌呤基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并异噁唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、中氮茚基、苯并三嗪基、噻吩并吡啶基、噻吩并嘧啶基、吡唑并嘧啶基、咪唑并吡啶基、苯并噻唑基(benzothiaxolyl)、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、异噻唑基、吡唑基、吲唑基、蝶啶基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、吡咯基、噻唑基、呋喃基、噻吩基等。为简便起见，术语芳基与其他基团联用时(如芳氧基、芳基烷基)表示包括上文所述的芳基和杂芳基。
芳基的取代基有许多，通常选自-卤素、-OR′、-OC(O)R′、-NR′R″、-SR′、-R′、-CN、-NO2、-CO2R′、-CONR′R″、-C(O)R′、-OC(O)NR5R″、-NR″C(O)R′、-NR″C(O)2R′、-NR′-C(O)NR″R″′、-NH-C(NH2)＝NH、-NR′C(NH2)＝NH、-NH-C(NH2)＝NR′、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)2NR′R″、-NR′S(O)2R″、-N3、全氟(C1-C4)烷氧基和全氟(C1-C4)烷基，数量从1到芳环体系上的开放原子价总数；其中R′，R″和R″′独立地选自氢、C1-8烷基、C3-6环烷基、C2-8烯基、C2-8炔基、未取代的芳基和杂芳基、(未取代的芳基)-C1-4烷基和未取代的芳氧基-C1-4烷基。
芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-T-C(O)-(CH2)q-U-的取代基所取代，其中T和U独立地是-NH-、-O-、-CH2-或单键，q是0-2的整数。或者，芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-A-(CH2)r-B-的取代基所取代，其中A和B独立地是-CH2-、-O-、-NH-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2NR′-或单键，r是1-3的整数。这些形成的新环上的一个单键可任选地被双键取代。或者，芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可任选地被式-(CH2)s-X-(CH2)r的取代基所取代，其中s和t独立地是0-3的整数，X是-O-、-NR′-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-S(O)2NR′-。-NR′-和-S(O)2NR′-中的取代基R′选自氢或未取代的C1-6烷基。
本文所用术语“杂原子”包括氧(O)、氮(N)、硫(S)和硅(Si)。
术语“药学上可接受的盐”表示包括根据本文所述化合物上的具体取代基，用相对无毒性的酸或碱制备的活性化合物的盐。如果本发明化合物包含相对酸性的官能团，则使中性形式的该化合物与足量的所需碱以净相形式或在合适的惰性溶剂中接触可得碱加成盐。由药学上可接受的无机碱制得的盐的例子包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。由药学上可接受的有机碱制得的盐包括伯、仲和叔胺的盐，包括取代的胺、环状胺、天然来源的胺等，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N′-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡萄糖胺、葡糖胺、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲基胺、三丙胺、氨丁三醇等的盐。如果本发明的化合物包含相对碱性的官能团，则使中性形式的该化合物与足量的所需酸以净相形式或在合适的惰性溶剂中接触可得酸加成盐。药学上可接受的无机酸加成盐的例子包括由无机酸制得的盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氢碘酸盐或亚磷酸盐等；以及由相对无毒性的有机酸制得的盐，例如醋酸盐、丙酸盐、异丁酸盐、丙二酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、反丁烯二酸盐、扁桃酸盐、苯二甲酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐等。还包括诸如精氨酸等氨基酸的盐和诸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等有机酸的盐(参见例如，Berge，S.M.等，“药物的盐”(″PharmaceuticalSalts″)，Journal of Pharmaceutical Science，1977，66，1-19)。某些具体的本发明化合物同时包含碱性和酸性官能团，使得化合物可转化成碱或者酸的加成盐。术语“药学上可接受的”表示载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂中的其他成分相容且不会对受者有害。
本文所用术语“组合物”表示包括含有特定量的特定成分的产品，以及直接或间接地来自特定量的特定成分的组合的产品。
本文所用术语“对象”表示包括动物，例如哺乳动物，包括但不限于灵长类动物(例如人)、牛、羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等。
II.一般概念 本发明涉及用于抑制血浆激肽释放酶(PK)的活性的化合物以及使用这种化合物和药物组合物来预防和治疗血液凝固，如血栓形成和PK-依赖性疾病和病症的方法。例如，该化合物通过内源性路径抑制凝血酶的形成，因而降低新的致病性血栓形成(再阻塞)的风险，还可以用作纤维蛋白溶解方案的辅助疗法以提高纤维蛋白溶解诱导的再灌注效果。
本发明提供了一些优点。首先，高水平抑制PK活性不会产生任何不良反应，因为在PK-缺乏的个体中没有观察到任何表型。其次，急性心肌梗塞(MI)，缺血性中风或深静脉血栓形成之后的PK抑制能够提供超过处于临床开发的其他抗凝剂如肝素(包括LMWH)或直接凝血酶和FXa抑制剂的有力的额外的优点，因为它不会影响正常的止血，因而不会在该患者中提高已经升高的出血风险。第三，通过减少纤维蛋白溶解疗法时并行产生的凝血酶的量，PK抑制剂能够改善纤维蛋白溶解治疗时再灌注的临床过程，导致该治疗更有效的结局，并允许应用较低剂量的纤维蛋白溶解来获得治疗效果，同时降低ICH的风险。第四，本发明的化合物和方法对于急性研究具有稳定的长半衰期，患者发生耐药性的可能性低，且不要求进行其他医疗干预。
III.化合物 在一个方面，本发明提供了具有以下通式的化合物
Ar是键或选自苯、吡啶和嘧啶的芳环。如果Ar是键，则m是1。如果Ar是芳环，则m是0-5的整数。在一个实施方式中，Ar是苯或吡啶。在另一实施方式中，Ar是键。
下标m是0-5的整数。在一个实施方式中，m是0。
每个Ra独立地选自环烷基、卤代烷基、卤素、-OH、-OR1、-OSi(R1)3、-OC(O)O-R1、-OC(O)R1、-OC(O)NHR1、-OC(O)N(R1)2、-SH、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-SO2NH2、-S(O)2NHR1、-S(O)2N(R1)2、-NHS(O)2R1、-NR1S(O)2R1、-C(O)NH2、-C(O)NHR1、-C(O)N(R1)2、-C(O)R1、-C(O)H、-C(＝S)R1、-NHC(O)R1、-NR1C(O)R1、-NHC(O)NH2、-NR1C(O)NH2、-NR1C(O)NHR1、-NHC(O)NHR1、-NR1C(O)N(R1)2、-NHC(O)N(R1)2、-CO2H、-CO2R1、-NHCO2R1、-NR1CO2R1、-R1、-CN、-NO2、-NH2、-NHR1、-N(R1)2、-NR1S(O)NH2、-NR1S(O)2NHR1、-NH2C(＝NR1)NH2、-N＝C(NH2)NH2、-C(＝NR1)NH2、-NH-OH、-NR1-OH、-NR1-OR1、-N＝C＝O、-N＝C＝S、-Si(R1)3、-NH-NHR1、-NHC(O)NHNH2、NO、-N＝C＝NR1或-S-CN，其中每个R1独立地是烷基。在一个实施方式中，R1是C1-C8烷基。在另一实施方式中，R1是未取代的芳基，如苯基或吡啶基，或取代的芳基，如取代的苯基或取代的吡啶基。
在一个实施方式中，每个Ra独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、芳基、芳基(C1-C8烷基)、卤素、-NH2、-NH(C1-C8烷基)、-N(C1-C8烷基)2、-CN、-C(＝O)(C1-C8烷基)、-(C＝O)NH2、-(C＝O)NH(C1-C8烷基)、-C(＝O)N(C1-C8烷基)2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)、-NH(C＝O)(C1-C8烷基)、-NH(C＝O)O(C1-C8烷基)、-O(C＝O)NH(C1-C8烷基)、-SO2(C1-C8烷基)、-NHSO2(C1-C8烷基)和-SO2NH(C1-C8烷基)。在另一实施方式中，每个Ra独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、卤素、-CN、-NH2、-NH(C1-C8烷基)、-N(C1-C8烷基)3、-(C＝O)CH3、-(C＝O)NH2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)、-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)或-NH(C＝O)(C1-C8烷基)。在又一实施方式中，每个Ra独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、苯氧基、芳氧基、卤素、-CN、-NH2、-NH-芳基、-(C＝O)CH3、-(C＝O)NH2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-COO-芳基、-OC(O)-芳基、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)、-NH(C＝O)(C1-C8烷基)等。例如，Ra是卤素，如Cl、Br或I。
L是选自键、CH2和SO2的连接基团。
Qa、Qb和Qc各自独立地选自N、S、O和C(Rq)，其中每个Rq独立地选自H、C1-8烷基、卤素和苯基，具有Qa，Qb，Qc和Y作环顶点的环是具有两个双键的五元环。
在第一组实施方式中，Qa是N，Qb和Qc各自选自N、O和C(Rq)。在某些情况下，Qa是N，Qc和Qb各自独立地选自N和C(Rq)。在某些其他情况下，Qa是N，Qc和Qb各自选自C(Rq)和O。在某些其他实施方式中，Qa是N，Qc选自N和O之一，Qb选自N和O中另一个。
在第二组实施方式中，Qa是O，Q和Qc各自选自N、O和C(Rq)。在某些情况下，Qa是O，Qc和Qb各自独立地选自N和C(Rq)。
在第三组实施方式中，Qa是C(Rq)，Qb和Qc各自选自N、O和C(Rq)。在某些情况下，Qa是C(Rq)，Qb和Qc各自独立地选自N和O。在某些其他情况下，Qa是C(Rq)，Qb和Qc各自独立地选自N和C(Rq)。在某些其他情况下，Qa是C(Rq)，Qb和Qc各自独立地选自O和C(Rq)。在一种情况下，Qa是C(Rq)，Qb是O，Qc是(CRq)。
Y选自C或N。在一个实施方式中，Y是C，Qa是S，Ar选自苯基或吡啶基。在另一实施方式中，Y是N，Qa、Qb和Qc各自独立地是C(Rq)，其中Rq是H或C1-C8烷基。在一种情况下，Y是N，Qa和Qc是C(Rq)，Qb是CH。在优选的实施方式中，Y是N。
在一个实施方式中，L是键，Y是N。在另一实施方式中，L是键，Y是N，Ar是苯环。在又一实施方式中，L是CH2，Y是N。在另一个实施方式中，L是键，Y是C。在另一个实施方式中，L是SO2，Y是N。
在优选的实施方式中，Qa、Qb和Qc各自独立地是CRq。在另一个优选的实施方式中，L是键或CH2。在另一个优选的实施方式中，Ar是苯。在另一个优选的实施方式中，Ra是-H和C1-C8烷基。
在一个实施方式中，本发明提供了具有表1所示通式的式I的化合物 表1
在另一实施方式中，式I的化合物具有下式Ia
Rq和L如上所述。在一种情况下，Rq独立地是-H或C1-8烷基，L是键或-CH2-。在另一种情况下，Ra是卤代-(C1-C8烷基)。例如，Ra是-CF3、CH2CF3。
在一个实施方式中，式I的化合物具有下式Ib
其中Ar是芳环。在一种情况下，每个Rq独立地是H、C1-C8烷基或卤素。在另一种情况下，L是键或CH2。在又一种情况下，Ar是苯。在另一种情况下，m是0。在一种情况下，每个Rq是H，L是CH2，Ar是苯，m是0。在另一种情况下，每个Rq是H，L是键，Ar是苯，m是0。
在另一方面，本发明提供了具有以下通式的化合物
下标m是0-5的整数。下标n是0-4的整数。下标q是0-1的整数。在一个实施方式中，下标m是0。在另一实施方式中，下标n是0-2的整数。在又一实施方式中，下标q是0。在另一个实施方式中，下标q是1。
L是选自键、CH2和SO2的连接基团。在一个实施方式中，L是CH2或SO2。
Rb和Rc各自独立地选自环烷基、卤代烷基、卤素、-OH、-OR2、-OSi(R2)3、-OC(O)O-R2、-OC(O)R2、-OC(O)NHR2、-OC(O)N(R2)2、-SH、-SR2、-S(O)R2、-S(O)2R2、-SO2NH2、-S(O)2NHR2、-S(O)2N(R2)2、-NHS(O)2R2、-NR2S(O)2R2、-C(O)NH2、-C(O)NHR2、-C(O)N(R2)2、-C(O)R2、-C(O)H、-C(＝S)R2、-NHC(O)R2、-NR2C(O)R2、-NHC(O)NH2、-NR2C(O)NH2、-NR2C(O)NHR2、-NHC(O)NHR2、-NR2C(O)N(R2)2、-NHC(O)N(R2)2、-CO2H、-CO2R2、-NHCO2R2、-NR2CO2R2、-R2、-CN、-NO2、-NH2、-NHR2、-N(R2)2、-NR2S(O)NH2、-NR2S(O)2NHR2、-NH2C(＝NR2)NH2、-N＝C(NH2)NH2、-C(＝NR2)NH2、-NH-OH、-NR2-OH、-NR2-OR2、-N＝C＝O、-N＝C＝S、-Si(R2)3、-NH-NHR2、-NHC(O)NHNH2、NO、-N＝C＝NR2和-S-CN，其中每个R2独立地是烷基。在一个实施方式中，R2是C1-C8烷基。在另一实施方式中，R2是未取代的芳基，如苯基或吡啶基，或取代的芳基，如取代的苯基或取代的吡啶基。
在一个实施方式中，Rb和Rc各自独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、芳基、芳基(C1-C8烷基)、卤素、-NH2、-NH(C1-C8烷基)、-N(C1-C8烷基)2、-CN、-C(＝O)(C1-C8烷基)、-(C＝O)NH2、-(C＝O)NH(C1-C8烷基)、-C(＝O)N(C1-C8烷基)2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)、-NH(C＝O)(C1-C8烷基)、-NH(C＝O)O(C1-C8烷基)、-O(C＝O)NH(C1-C8烷基)、-SO2(C1-C8烷基)、-NHSO2(C1-C8烷基)和-SO2NH(C1-C8烷基)。在另一实施方式中，每个Ra独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、卤素、-CN、-NH2、-NH(C1-C8烷基)、-N(C1-C8烷基)2、-(C＝O)CH3、-(C＝O)NH2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)、-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)和-NH(C＝O)(C1-C8烷基)。在又一实施方式中，每个Ra独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、苯氧基、芳氧基、卤素、-CN、-NH2、-NH-芳基、-(C＝O)CH3、-(C＝O)NH2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-COO-芳基、-OC(O)-芳基、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)、-NH(C＝O)(C1-C8烷基)等。
如果q是0，则Z选自O、S或NRd，其中Rd是H或C1-C8烷基。如果q是1，则Z是N。在一个实施方式中，下标q是0，Z选自O、S或NH。在一种情况下，下标n是0、1或2。在一种情况下，Z是O或S。在另一实施方式中，下标q是1。在一种情况下，L是CH2或SO2。
在一个实施方式中，本发明提供了具有表2所示通式的式I的化合物 表2
在一个实施方式中，式I的化合物具有下式IIa
取代基Rb和Rc以及下标m如上所述。在一种情况下，L是CH2。在另一个情况下，L是SO2。在又一种情况下，m是0。在又一种情况下，n是0。
在另一实施方式中，式I的化合物具有下式IIa-1
表3提供了PK抑制剂的化合物及其抑制活性。这些化合物对应于表1和2的数字。
表3 表3(续) 表3(续) 表3(续) 化合物的制备 如以下实施例所述，技术人员可以根据多种合成途径来制备本发明的化合物和中间体。以下方案提供了随后可以获得某些本发明的化合物的合成途径。其他途径或途径的改良形式是技术人员容易明白的，包括在本发明的范围内。
方案1显示了得到本发明PK抑制剂的一种合成路径。
方案1
在方案1中，在碳二亚胺、HOBt和DIPEA的存在下，具有各种R基团的羧酸与脒基苄胺反应，形成羧酸4-甲脒基-苄基酰胺衍生物。脒基苄胺购自宾夕法尼亚州布里斯托尔的阿斯塔特公司(Astatech，Bristol，Pennsylvania)。具体反应条件的选择在本领域技术人员的能力范围内。
IV.药物组合物 除了具有上述式I和II的化合物，用于预防和治疗人体及动物中血栓形成的组合物通常还包含药用载体、赋形剂和稀释剂。
用于本发明化合物的给药的药物组合物可方便地以单位剂量形式存在，可通过任何药学和药物递送领域众所周知的方法进行制备。所有方法包括使活性成分载体结合的步骤，所述载体构成一种或多种辅助成分。一般，药物组合物的制备包括使活性成分与液体载体或细分的固体载体或者这两种载体均匀而紧密结合，然后(如果需要的话)使产物形成所需的制剂。在药物组合物中，活性目标化合物的含量足以针对疾病进程或状况产生所需的效果。
含有活性成分的药物组合物可以是适合口服应用的形式，例如片剂、含片、锭剂、水性或油性混悬剂、可分散的粉末或颗粒，如美国专利申请2002-0012680所述的乳剂和自身乳剂、硬胶囊或软胶囊、糖浆剂、酏剂、溶液剂、口腔贴片、口服凝胶、口香糖、嚼用片、泡腾粉和泡腾片。指定用于口服应用的组合物可根据任何本领域已知的用于制造药物组合物的方法进行制备，所述组合物可包含一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂、抗氧化剂和防腐剂的试剂以提供药学上精致且开口的制剂。片剂含有活性成分与适用于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂的混合物。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，例如纤维素、二氧化硅、氧化铝、碳酸钙、碳酸钠、葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂、例如玉米淀粉或藻酸；粘合剂、例如PVP、纤维素、PEG、淀粉、明胶或阿拉伯胶；和润滑剂、例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可未包衣或者它们可通过已知技术包肠衣或其他包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而提供在较长时间内的持续作用。例如，可采用时间延迟材料如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它们也可以通过美国专利4,256,108；4,166,452；和4,265,874所述的技术进行包衣，以形成控释的渗透性治疗片。
口服应用的制剂也可以是硬明胶胶囊的形式，硬明胶胶囊中活性成分与惰性固体稀释剂如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或是软明胶胶囊的形式，软明胶胶囊中活性成分与水或油介质如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。此外，可用非水混溶成分如油制备乳剂，用表面活性剂如单-甘油二酯、PEG酯等稳定。
水性混悬剂包含活性成分与适用于制造水性混悬剂的辅料的混合物。这些辅料是助悬剂，例如羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，藻酸钠，聚乙烯吡咯烷酮，黄芪树胶和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂可以是天然来源的磷脂，例如卵磷脂，或环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七氧乙烯十六醇，或环氧乙烷与部分来源于脂肪酸和己糖醇的酯的缩合产物，如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或环氧乙烷与部分来源于脂肪酸和己糖醇酐的酯的缩合产物，例如聚乙烯山梨聚糖单油酸酯。水性混悬剂还可包含一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂，和一种或多种甜味剂，如蔗糖或糖精。
油性混悬剂的制备包括将活性成分悬浮到植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油，或矿物油如液状石蜡中。油性混悬剂可包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或十六醇。诸如上述那些的甜味剂和调味剂可添加到制剂中以提供开口的口服制剂。这些组合物可通过添加抗氧化剂如抗坏血酸来防腐。
适用于加水制备水性混悬剂的可分散的粉末和颗粒提供了活性成分与分散剂或湿润剂。助悬剂和一种或多种防腐剂的混合物。合适的分散剂或湿润剂助悬剂已经在上文中提及。也可存在其他辅料，例如甜味剂、调味剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油，或矿物油，例如液状石蜡或它们的混合物。合适的乳化剂可以是天然来源的树胶，例如阿拉伯胶或黄芪树胶，天然来源的磷脂，例如大豆磷脂、卵磷脂，乙基来源于脂肪酸和己糖醇酐的酯或部分酯，例如山梨聚糖单油酸酯和所述部分酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯。乳剂还可包含甜味剂和调味剂。
糖浆剂和酏剂可与甜味剂如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖一起配制。所述制剂也可包含缓和剂、防腐剂和调味剂和着色剂。口服溶液剂可与例如环糊精、PEG和表面活性剂一起配制。
药物组合物可以是无菌可注射的水性或油性混悬剂的形式。该混悬剂可采用上文提及的那些合适的分散剂或润湿剂和助悬剂，根据本领域已知的方法进行配制。无菌可注射制剂也可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液剂或混悬剂，例如在1，3-丁二醇中的溶液剂。可采用的所述可接受的运载体或溶剂包括水、林格溶液和氯化钠等渗溶液。此外，无菌非挥发油是常用的溶剂或悬浮介质。为此目的，可采用任何温和的非挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸可用于注射用制剂中。
本发明的化合物也可以直肠给药的栓剂形式给予。这种组合物的制备包括将药物与合适的非刺激性赋形剂混合，该赋形剂在常规温度下为固体但在直肠温度下为液体，因而将在直肠中熔解而释放药物。所述材料包括可可豆脂和聚乙二醇。此外，化合物可通过眼睛递送以溶液或软膏的方式给予。并且，本发明混合物的透皮递送可通过离子电渗贴片的方式实现。对于外用，可采用含有本发明化合物的乳膏、软膏、凝胶剂、溶液剂或混悬剂等。如本文所用，外用也可表示包括口腔洗剂和漱口水的应用。
可将本发明的化合物配制成沉积到医疗装置内，所述医疗装置可包括许多常规移植物、支架(包括支架移植物)、导管、气囊、框架或其他配制或永久性植入体腔内的装置中的任一种。作为一个具体的例子，需要能够将本发明化合物递送到已通过干预技术进行治疗的体内区域的装置和方法。
在示例性的实施方式中，本发明的抑制剂可沉积到医疗装置如支架内，递送到治疗部位，用于身体的一部分的治疗。
已使用支架作为治疗剂(即药物)的递送载体。通常血管内支架被永久性地植入冠状或外周血管。支架设计包括美国专利4,733,655(Palmaz)、4,800,882(Gianturco)或4,886,062(Wiktor)所述的那些。这些设计包括金属和聚合物支架，以及自身膨胀型和气囊膨胀型支架。支架也可用于在与血管接触的部位递送药物，如美国专利5,102,417(Palmaz)和国际专利申请WO 91/12779(Medtronic，Inc.)和WO 90/13332(Cedars-Sanai Medical Center)，美国专利5,419,760(Narciso，Jr.)和美国专利5,429,634(Narciso，Jr.)所述。支架也可用于在基因治疗中将病毒递送到管腔壁，如1996年11月8日提交的美国专利申请08/746,404所述(Donovan等)所述。
术语“沉积”表示抑制剂通过本领域已知的方法涂覆、吸附、设置或以其他方式结合在装置内。例如，抑制剂可嵌入涂覆或跨过医疗装置的聚合物材料内并由其释放(“基质型”)或者被该聚合物材料包裹并通过其释放(“储库型”)。在后一种情况下，抑制剂可采用本领域已知的用于产生该材料的一种或多种技术，俘获在聚合物材料内或者偶联于聚合物材料。在其他制剂中，抑制剂可通过可分离键的方式连接于医疗装置的表面而不需要涂层并随时间释放，可通过主动机械或化学过程离开，或者抑制剂以永久性固定的形式位于植入部位。
在一个实施方式中，抑制剂可以在医疗装置(例如支架)的生物相容性涂层的形成期间结合在聚合物组合物内。由这些组分产生的涂层通常是均质的，可用于涂覆许多被设计成用于植入的装置。
聚合物可以是生物稳定或可生物吸收的聚合物，取决于所需的释放速率或所需的聚合物稳定程度，但本实施方式中优选可生物吸收的聚合物，因为和生物稳定聚合物不同，可生物吸收的聚合物在植入后不会长时间存在而导致任何不良的慢性局部反应。可使用的可生物吸收的聚合物包括但不限于聚(L-乳酸)、聚已酸内酯、聚乙交酯(PGA)、聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLLA/PGA)、聚(羟基丁酸酯)、聚(羟基丁酸酯-共-戊酸酯)、聚二氧六环酮、聚原酸酯、聚酐、聚(乙醇酸)、聚(D-乳酸)、聚(L-乳酸)、聚(D，L-乳酸)、聚(D，L-丙交酯)(PLA)、聚(L-丙交酯)(PLLA)、聚(乙醇酸-共-三亚甲基碳酸酯)(PGA/PTMC)、聚环氧乙烷(PEO)、聚二氧六环酮(PDS)、聚磷酸酯、聚磷酸酯聚氨酯、聚(氨基酸)、氰基丙烯酸酯、聚(三亚甲基碳酸酯)、聚(亚氨基碳酸酯)、共聚(醚-酯)(如PEO/PLA)、聚亚烷基草酸酯、聚磷腈以及生物分子如纤维蛋白、纤维蛋白原、纤维素、淀粉、胶原和透明质酸、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯、水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物、和本领域已知的其他合适的可生物吸收的聚合物。并且，可使用慢性组织反应较低的生物稳定的聚合物聚氨酯、硅氧烷和聚酯，也可使用其他聚合物，只要这些聚合物能够在医疗装置上溶解并固化或聚合，例如聚烯烃、聚异丁烯和乙烯-α烯烃共聚物；丙烯酸聚合物和共聚物、卤化乙烯聚合物和共聚物，如聚氯乙烯；聚乙烯吡咯烷酮；聚乙烯醚，如聚乙烯基甲基醚；聚偏卤乙烯，如聚偏氟乙烯和聚偏二氯乙烯；聚丙烯腈、聚乙烯酮；聚乙烯基芳族化合物，如聚苯乙烯、聚乙烯酯，如聚乙酸乙烯酯；乙烯基单体相互间和与烯烃的共聚物，如乙烯-甲基丙烯酸甲酯共聚物、丙烯腈-苯乙烯共聚物、ABS树脂和乙烯-乙酸乙烯酯共聚物；吡喃共聚物；聚羟基-丙基-异丁烯酰胺-酚；聚羟乙基-天冬酰胺-酚；被棕榈酰残基取代的聚环氧乙烷-聚赖氨酸；聚酰胺，如尼龙66(Nylon66)和聚己内酰胺；醇酸树脂、聚碳酸酯；多聚甲醛；聚酰亚胺；聚醚；环氧树脂、聚氨酯；人造丝；人造丝-三乙酸酯；纤维素、醋酸纤维素、丁酸纤维素；醋酸纤维素丁酸酯；玻璃纸；硝酸纤维素；丙酸纤维素；纤维素醚；和羧甲基纤维素。
可将聚合物和半渗透性聚合物基质制成成形制品，例如瓣膜、支架、导管、假体等。
在一个本发明的实施方式中，本发明的抑制剂偶联于支架或支架-移植物装置形式的聚合物或半渗透性聚合物基质。
通常，通过旋涂、浸渍或喷雾方法将聚合物应用于可植物装置的表面。也可采用本领域已知的其他方法来实现该目的。喷雾方法包括传统方法以及在喷墨型分配器中的微沉积技术。此外，可采用光学图案制作方法仅在装置的特定部分上设置聚合物，而将聚合物沉积到可植物装置上。装置的这种涂层提供了围绕装置的均匀层，从而改善各种分析物通过装置涂层的扩散。
在本发明优选的实施方式中，抑制剂可配制成在医疗装置植入后从聚合物涂层释放到环境中。优选地，采用涉及聚合物载体或层以控制溶出的几种众所周知的技术中的至少一种，使抑制剂在延长的时间窗内(例如几个月)以控释方式释放。这些技术中的一些已在美国专利申请20040243225A1中描述，其全部内容纳入本文作为参考。
而且，如美国专利6,770,729所述(该专利被纳入本文作为参考)，可操控聚合物组合物的反应试剂和反应条件，从而控制抑制剂从聚合物涂层的释放。例如，可调节一种或多种聚合物涂层的扩散系数，以控制抑制剂从聚合物涂层的释放。在该方案的变体中，可控制一种或多种聚合物涂层的扩散系数以调节植入医疗装置的环境中存在的分析物(例如有利于聚合物的一些部分发生裂解或水解的分析物)到达聚合物组合物内的一种或多种组分的能力(例如，从而调节抑制剂从聚合物涂层的释放)。本发明的另一个实施方式包括具有多种聚合物涂层的装置，各自具有多种扩散系数。在这种本发明的实施方式中，可通过多种聚合物涂层来调节抑制剂从聚合物涂层的释放。
在本发明的又一实施方式中，通过调节聚合物组合物的一种或多种性质，例如存在一种或多种耐药性或外源性化合物，或者可选地，调节聚合物组合物的pH，来控制抑制剂从聚合物涂层的释放。例如，可将某些聚合物组合物设计成响应聚合物组合物pH的降低而释放抑制剂。或者，可将某些聚合物组合物设计成响应过氧化氢的存在而释放抑制剂。
V.治疗血栓形成和PK-依赖性疾病和病症的方法 在又一方面，本发明提供了在需要的对象中治疗血栓形成的方法。在一个实施方式中，该方法包括使PK酶与式I或II的化合物接触而抑制PK的活性。在另一实施方式中，该方法包括给予对象式I或II的化合物。对象可以是人或哺乳动物。在又一实施方式中，该方法包括给予对象治疗有效量的式I或II的化合物。在一个实施方式中，给予是在心肌梗塞(MI)临床后或缺血性中风临床后进行。例如，该方法可包括在用纤维蛋白溶解剂治疗之后给予PK抑制剂。
由于PK活性是有效激活FXII所必需的，PK完全缺陷型个体在体外表现为经内源性路径凝血不良。在一个实施方式中，本发明的化合物是能够用于抑制PK活性的PK的抑制剂。在另一实施方式中，采用抗-PK单克隆抗体(MAB)，如MAB 13G11，来抑制经内源性路径的凝血。通常，此类方法包括以下步骤在配体与PK结合的适宜条件下，在含PK酶的水溶液中，使PK与充分且有效量的一种或多种本发明PK抑制剂或PK-特异性MAB接触。PK可以悬浮液的形式存在(例如，含于分离的膜或细胞制剂中)，或存在于分离的培养细胞中。
优选地，与酶接触的PK抑制剂的量应足以在体外抑制PK活性，这可以采用例如比色或荧光计量底物裂解分析来测定。
在又一方面，本发明提供了在有需要的对象中治疗PK-依赖性疾病或病症的方法。该方法包括给予对象式I或II的化合物。
在又一方面，本发明提供了在有需要的对象中治疗血栓形成的方法。该方法包括给予对象血浆激肽释放酶特异性单克隆抗体(MAB)，例如MAB 13G11。
能够用PK抑制剂治疗的病症 本发明提供了这样的抑制剂，它们能够抑制经内源性路径的凝血酶的形成，从而降低新的致病性血栓形成的风险(再阻塞)，并且能作为辅助疗法联合纤维蛋白溶解方案改善纤维蛋白溶解引起的再灌注情况。可用本发明化合物进行治疗的疾病状态包括但不限于缺血性中风、中风、炎症、疼痛、急性心肌梗塞(MI)、深静脉血栓形成(DVT)、纤维蛋白溶解治疗状态后的凝血(组织纤溶酶原活化剂、链激酶)、咽峡炎、血管性水肿、败血症、关节炎、心肺转流术期间的失血、炎性肠病、糖尿病及其并发症和视网膜病变。
例如，在血管性水肿疾病患者中，小分子多肽PK抑制剂(DX-88)(ecallantide)能够缓解HAE患者的水肿(参见Williams，A.等(2003)Transfus.Apher.Sci 29255-258；Schneider，L等Immunol.2007年6月6日[印刷品之前的电子出版物]；和Levy，J.H.等(2006)Expert Opin.Invest.Drugs 151077-1090)。缓激肽B2受体拮抗剂艾替班特(Icatibant)也能有效治疗HAE(参见Bork，K.等(2007)J.Allergy Clin.Immunol.1191497-1503)。PK产生缓激肽，所以抑制PK能够抑制缓激肽的产生。
例如，在纤维蛋白溶解治疗(例如，组织纤溶酶原活化剂，链激酶)导致的凝血中，在接受纤维蛋白溶解治疗的患者被发现PK水平较高(参见Hoffmeister，H.M.等(1998)J.Cardiovasc.Pharmacol.31764-72)。纤溶酶介导的内源性路径的活化在血浆和血液中发生，在缺乏内源性路径中任一或若干组成元素的个体血浆中则显著削弱(参见Ewald，G.A.等(1995)Circulation 9128-36)。
发现患有急性MI的个体中活化的PK和凝血酶水平升高(参见Hoffmeister，H.M.等，(1998)Circulation 982527-33)。
在缺血性中风的动物模型中，DX-88能够缓解脑水肿、降低梗死体积并减少神经缺陷(参见Storini，C.等(2006)J.Pharm.Exp.Ther.318849-854)。在MCAO小鼠模型中，C1-INH能够减小梗死范围(参见De Simoni，M.G.等(2004)Am.J.Pathol.1641857-1863；和Akita，N.等(2003)Neurosurgery 52395-400)。在MCAO动物模型中，B2受体拮抗剂被发现能够降低梗死体积、脑肿胀和嗜中性粒细胞蓄积，具有神经保护作用(参见Zausinger，S.等(2003)ActaNeurochir.增补本86205-207；Lumenta，D.B.等(2006)Brain Res.1069227-234；Ding-Zhou，L.等(2003)Br.J.Pharmacol.1391539-1547)。
就心肺旁路期间的失血而言，发现在CABG期间接触系统被激活(参见Wachtfogel，Y.T.(1989)Blood 73468)，CPB期间接触系统的活化导致血浆缓激肽增加达20-倍之多(参见Cugno，M.等(2006)Chest 1201776-1782；和Campbell，DJ.等(2001)Am.J.Physiol.Reg.Integr.Comp.Physiol.2811059-1070)。Dyax报道，DX-88可降低需要的输血量(参见www.dyax.com)。
在关节炎大鼠模型中，PK抑制剂P8720和PKSI-527被发现能够减轻关节肿胀(参见De La Cadena，R.A.等(1995)FASEB J.9446-452；Fujimori，Y.(1993)Agents Action 3942-48)。还发现，关节炎动物模型中的炎症伴随着接触系统的活化(参见Blais，C.Jr.等(1997)Arthritis Rheum.401327-1333)。
此外，发现血浆激肽释放酶抑制剂P8720能够在急性和慢性IBD大鼠模型中减轻炎症(Stadnicki，A.等(1998)12325-333；Stadnicki，A.等(1996)Dig.Dis.Sci.41912-920；和De La Cadena，R.A.等，(1995)FASEB J.9446-452)。急性和慢性肠炎期间，接触系统被激活(参见Sartor，R.B.等(1996)Gastroenterology 1101467-1481)。在IBD动物模型中发现，B2受体拮抗剂(一种针对高分子量激肽原的抗体)或激肽原水平降低能够减轻临床病理特征(参见Sartor，R.B.等(1996)Gastroenterology 1101467-1481；Arai，Y.等(1999)Dig.Dis.Sci.44845-851；和Keith，J.C.等(2005)Arthritis Res.Therapy 7R769-R776)。
发现H-D-Pro-Phe-Arg-CMK(一种PK和FXII的抑制剂)和生理学抑制剂(Cl-INH)能够在动物中降低多种器官中的血管渗透性，减轻LPS损伤或细菌诱导的败血症(Liu，D.等(2005)Blood 1052350-2355；Persson，K.等(2000)J.Exp.Med.1921415-1424)。用C1-INH治疗的败血症患者中观察到临床改善(参见Zeerleder，S.等(2003)Clin.Diagnost.Lab.Immunol.10529-535；Caliezi，C等，(2002)Crit.Care Med 301722-8；和Marx，G.等(1999)Intensive Care Med.251017-20)。在高危败血症病例中发现高度的接触活化(参见Martinez-Brotons，F.等(1987)Thromb.Haemost.58709-713；和Kalter，E.S.等(1985)J Infect.Dis.1511019-1027)。
还发现，糖尿病尤其是伴有增殖性视网膜病变的患者的PK酶原(prePK)水平较高，并与果糖胺水平相关联(Gao，B.-B.等，(2007)Nature Med 13181-188；和Kedzierska，K.等(2005)Archives Med.Res.36539-543)。还发现糖尿病中PK酶原升高，在伴有感觉运动神经病的患者中最高(参见Christie，M.等(1984)Thromb.Haemostas.(Stuttgart)52221-223)。糖尿病PK酶原水平升高，并且与血压升高有关联。PK酶原水平独立地与白蛋白排泄率相关联，在大量白蛋白尿的糖尿病中升高，这提示PK酶原可能是进展型肾病的标志(参见Jaffa，A.A.等(2003)Diabetes 521215-1221)。发现B1受体拮抗剂能够在链脲霉素处理的大鼠中降低血浆渗漏(Lawson，S.R.等(2005)Eur.J.Pharmacol.51469-78)。还发现，B1受体拈抗剂能够阻止链脲霉素处理的小鼠发生高血糖症和肾功能障碍(参见Zuccollo，A.等(1996)Can.J.Physiol.Pharmacol 74586-589)。
本发明还代表了一种新的缺血性中风治疗模式。目前的治疗手段存在严重局限。传统上，对急性缺血性中风采用组织纤溶酶原活化剂(tPA)进行治疗。该药物能够防止与中风有关的一些不良影响，但只有在发病的最初三个小时内静脉内给予且脑内没有出血的情况下才有效。治疗窗如此小，仅仅少量的中风患者(约3％)能够接受到有效的治疗。近年来，对中风的研究集中在开发神经保护剂，使脑更能抵抗中风所致损伤的化合物。本发明的化合物能够中断缺血性级联反应。
本发明提供的治疗方法一般包括通过例如口服、鼻腔内或胃肠外给予患者有效量的一种或多种本本发明化合物。适应患者包括本文所述异常或病症的患者或易发者(即预防性治疗)。适用本发明治疗的典型患者包括哺乳动物，尤其是灵长类动物，尤其是人。其他适宜的患者包括宠物如狗、猫、马等，或家畜如牛、猪、羊等。
通常，本文提供的治疗方法包括给予患者有效量的一种或多种本文所述的化合物。在一个优选的实施方式中，本发明的化合物以优选的口服方式给予患者(例如人)。有效量可以是足以调节PK受体活性的量并且/或者足以降低或缓解患者呈现的症状的量。优选地，给药量足以使化合物(或其活性代谢物，如果化合物是前药的话)的血浆浓度高到足以在体外抑制PK受体达到可测知的程度。治疗方案取决于所用的化合物以及需要治疗的具体病症；对于大多数病症的治疗，优选给药频率等于或小于每天4次。通常，更好的是每天2次的给药方案，最优选每天一次。然而，应理解，任何特定患者的具体剂量水平和治疗方案取决于许多因素，这些因素包括所采用的具体化合物的活性、年龄、体重、健康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、药物组合(即一起给予患者的其他药物)和进行治疗的特定疾病的严重性、以及处方医师的判断。通常，优选使用足以提供有效治疗的最小剂量。通常，可采用针对正在治疗或预防的病症的医学或兽医学标准对患者的治疗效果进行全面监测。
本发明的化合物的给药频率可按需要而定，包括每小时，每天，每周或每月。给药频率也可根据所用化合物和治疗的具体疾病而变化。然而，对于大多数疾病的治疗来说，优选每天4次，每天3次或更低频率的给药方案，尤其优选每天一次或每天2次的给药方案。本发明药学方法中采用的化合物以初始剂量每天约0.0001-1000毫克/千克给予。可采用以下日剂量约0.01-500毫克/千克，或约0.1-200毫克/千克，或约1-100毫克/千克，或约10-50毫克/千克。然而，剂量可根据患者的需要、所治情况的严重性以及所采用的化合物而变化。例如，可以考虑特定患者确诊的疾病类型和阶段根据经验来确定剂量。在本发明的内容中，给予患者的剂量应足以随时间在患者中产生有益的治疗效果。剂量大小也可根据特定化合物在特定患者中是否产生副作用、及其性质和程度来确定。然而，应理解，任何特定患者的具体剂量水平将取决于许多因素，这些因素包括所采用的特定化合物的活性、年龄、体重、健康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、药物组合(即一起给予患者的其他药物)、进行治疗的特定疾病的严重性、以及包括处方医师的判断等其他因素。针对特定情况确定合适剂量是相关专业人士能力所及的。通常，在治疗开始时采用低于化合物最优剂量的较小剂量。然后，缓步提高剂量，直至达到最优效果。方便起见，可根据需要将总的日剂量在一天内分多次给予。可每天给药，或者隔天给药，这可以由治疗医师来确定。也可以在较长的时期内(几周、几个月或几年)定期或连续给药，例如通过使用皮下胶囊、小药囊或储库、或采用贴片给药。
药物组合物可以多种途径给予或者，包括外用、胃肠外、静脉内、皮内、肌内、经结肠、经直肠或腹膜内。优选地，药物组合物经胃肠外、外用、静脉内、肌内或口服给予。
式I或II的化合物可与额外的治疗剂或诊断试剂联合给予。
VI.实施例 实施例中以及整篇说明书中采用以下缩写。
HOBtN-羟基苯并三唑 DMSO二甲基亚砜 AmBZ脒基苄胺 DCM二氯甲烷 DIPEA二异丙基乙基胺 实施例1 PK-特异性抑制剂的合成 采用PS-碳二亚胺(得自维吉尼亚州查洛斯维(Charlottesville)的拜欧塔有限公司(Biotage，Inc.))和拜欧塔提供的合成方案(参见图1)，在市售羧酸(得自乌克兰基辅的ASDI有限公司或伊安有限公司(Enamine))和4-脒基-苄胺(4-AmBz，得自宾夕法尼亚州布里斯托尔(Bristol)的阿斯塔特有限公司(Astatech，Inc.))之间形成酰胺键而合成本发明化合物。每次合成中，在含玻璃料并具塞的聚丙烯反应容器中，在4毫升40％二甲亚砜(DMSO)/60％二氯甲烷(DCM)中，将100微摩尔的PS-碳二亚胺与一种羧酸(75微摩尔)、4-AmBz.2HCl(75微摩尔)、N-羟基苯并三唑(HOBt；75微摩尔)和二异丙基乙基胺(DIPEA；75微摩尔)混合，室温下在亚当斯章动器(Adams Nutator)上混合48-72小时。过滤获得产物，然后蒸发除去DCM。通过用茚三酮定量4-AmBZ上的游离胺官能团来测定未偶联的4-AmBZ的残余量，据此测定，在上述条件下，超过95％的羧酸与4-AmBz发生偶联。然后采用Waters WCX柱纯化本发明的化合物。将约50微摩尔化合物溶于4毫升50％DMSO-50％水后上样到250毫克Waters WCX柱上(先后用5毫升MeOH和水预洗)。然后，先用20毫升5％MeOH-95％水，再用5毫升MeOH洗柱。接着，用10毫升5％HCOOH-95％MeOH洗脱。在SavantSpeedVac中蒸发溶剂后得到纯度＞95％的化合物。采用应用生物系统公司(Applied Biosystems)/MDS SCIEX Q-STAR质谱仪，通过分析型LC-MS/MS测定产物质量来鉴定产物，然后在Shimadzu VP HPLC系统上分离。
采用上述过程制备和纯化的一些化合物在表1和2中列出。
实施例2PK抑制剂的抑制作用研究 人血浆激肽释放酶(PK)得自汉姆泰克技术公司(Haemtech Technologies)佛蒙特州艾塞克斯交汇处(Essex Junction，Vermont)。用合成肽底物H-D-Pro-Phe-Arg-pNA(瑞士拜凯有限公司(Bachem，Inc.))测定PK的酶活性，酶对底物的剪切将导致A405升高，这可用分子装置(Molecular Devices)Vmax动态酶标仪来测定。在酶标仪板的各孔中，将190微升PK溶液(1nM，含于0.05M HEPES中，pH7.5，0.01％Triton X-100)加入10微升H-D-Pro-Phe-Arg-pNA(2mM，含于DMSO中)中，立即震摇混合，在120-180秒的时间内测定A405的升高率，由此确定不受抑制的PK活性(对照)。平行试验中，在各个孔中将本发明的化合物与合成底物混合，达到最终浓度0.01-10微摩尔，最终反应混合液体积为200微升，加入190微升PK溶液启动反应。化合物存在下裂解率的降低表明PK活性的抑制，相互作用的表观抑制常数可通过以下方程确定 Ki，app＝[I]/(PK对照/PKI-1) 其中[I]＝抑制性化合物的浓度，PK对照＝不受抑制的PK的底物裂解率，PKI＝抑制性化合物存在下PK的底物裂解率。
相互作用的校正的Ki可通过以下公式计算而得Ki，app-Ki＝Ki，app/([S]/Km+1)。
其中[S]＝合成底物的浓度，Km＝合成底物对于PK的米氏常数，此处，所述条件下经实验确定为0.15mM。
表4列出了具有以下通式的一些化合物的抑制常数
表4抑制常数
*＝与4-脒基苄基酰胺部分的连接点 ASP-440和ASP-465的抑制作用 表5显示了内源性凝血路径和外源性凝血路径中ASP-440和ASP-465对纯化的人PK以及其他酶的抑制作用。数字为Ki值(μM)，是如下测得的在一系列递增ASP-440和ASP-465剂量下，用合适的合成底物(S-2302或Chromozym TH)测定给定酶的酰胺溶解活性抑制程度(如果有此抑制)。两种被测化合物的最高浓度皆为10μM。表5所示结果表明，ASP-440和ASP-465是强效的PK抑制剂，ASP-465比ASP-440强三倍。此外，相对于所有其他测试酶，ASP-440对PK的选择性＞100倍，相对于所有其他测试酶，ASP-440对PK的选择性＞300倍。
表5PK抑制剂的特异性曲线(Ki值) 实施例3 PK抑制剂抗凝活性的测定 为了确定内源性路径激活时PK对凝血酶的产生、纤维蛋白裂解和最终的纤维蛋白凝块形成的作用，采用市售肌动蛋白FS试剂(Dade-Behring)启动内源性路径的接触活化。在干净的聚苯乙烯96-孔微量板的各个孔中将人血浆(50μl)与补充有15mM CaCl2的肌动蛋白FS(50μl)混合，通过在动态酶标仪(分子装置(Molecular Devices)Vmax)中监测A405，并将其与时间相关联，由此测定纤维蛋白裂解和凝块形成的时间和程度。凝块形成导致浊度增加，表现为A405增加。这可通过在每次实验结束时的目测来证实。凝血时间定义为到达1/2最大ΔA405的时间。所有数据点以三复孔测定均值±SD作图(n＝3)。
在所述条件下，缺乏PK的血浆(PK水平＜正常值的1％，得自堪萨斯州陆上公园(Overland Park，Kansas)的乔治金生物医学公司(George King Biomedical))在加入肌动蛋白FS后发生凝血，凝结时间比正常血浆长3倍以上(图1)。因此，这标志着在人血浆中用PK抑制剂能够实现的对接触激活凝血的最大抑制。然后，可以如下测定本发明化合物抑制接触激活凝血的能力在血浆中加入本发明的化合物-肌动蛋白FS混合物(多种浓度的0.1-10μM)，测定凝血时间，并根据10μM浓度对接触激活凝血的抑制程度对这些化合物进行分级。例如，向正常血浆中加入1.1、3.3或10μM的ASP-440或ASP-465会剂量依赖性地使凝血时间延长16-134％，在以上各个浓度，ASP-465比ASP-440更能延长凝血时间(图2)。
实施例4 纤溶酶的血栓形成作用是通过内源性路径介导的并且需要血浆激肽释放酶(PK) 按照实施例3的凝结模式，将血浆与市售的配制化肌动蛋白FS以1∶1混合。因此，50％(v/v)肌动蛋白FS是可加入的活化剂的最大剂量，同时维持血浆含量恒为孵育混合物的50％。由于正常血浆的凝结时间取决于孵育混合物中肌动蛋白FS的含量，理论上，在这一模式中，上述条件将造成最短的内源性路径介导的凝血时间。降低接触活化剂的量导致活化PK减少，由此降低凝血酶的产量，延长了凝血时间(数据未显示)。因此，为了确定加入外源性纤溶酶(模拟纤维蛋白溶解状态)是否能够缩短凝血时间，降低加入血浆中的肌动蛋白FS试剂的量(保持恒为最终孵育混合物的50％)至6.25％(最终体积百分含量)。该水平显著增加了对照的凝血时间，因而提供了用于测定较短凝血时间的实验窗。
将100或200nM的外源性纤溶酶加入50％血浆-6.25％肌动蛋白FS的孵育混合物中导致凝血时间剂量依赖性地缩短(相对凝血时间从1.00降低至0.74再到0.65，参见图3)。在没有任何肌动蛋白FS的血浆中加入200nM纤溶酶表现出非常缓慢的相对凝血时间4.0(数据未显示)，这说明，接触活化剂的存在是纤溶酶显现显著血栓形成作用所必需的。这直接表明少量接触活化剂存在下，纤溶酶加入血浆会产生血栓形成作用。
在相同的实验条件下，将200nM纤溶酶加入缺乏PK的血浆中，导致凝血时间比正常血浆长80％(图4)，这表明，PK的存在是纤溶酶在血浆中发挥其血栓形成作用所必需的。在200nM纤溶酶存在下将ASP-440(10μM)或ASP-465(3.3或10μM)加入正常血浆中(图4)可使凝血时间延长36％(ASP-440)或36-75％(ASP-465)。因此，PK-特异性抑制剂能够有效抑制血浆中纤溶酶介导的血栓形成，3.3μM的ASP-465与10μM的ASP-440延长凝血时间的程度相同。如表2所示，ASP-465对PK的体外Ki正好比ASP-440低3倍，与其抑制纤溶酶激活的凝血强3倍以上的观察结果相一致。重要的是，10μM的ASP-465(图4)几乎完全阻断缘于PK的纤溶酶诱导的凝血时间缩短，这表明了小分子PK抑制剂在上述临床模式中的实用性。
实施例5 PK的特异性MAb抑制接触激活的凝血和纤溶酶激活的血栓形成 上面的实施例已经表明PK对接触激活的经内源性路径的凝血以及纤溶酶激活的血栓形成来说具有关键作用。通过评价PK缺陷以及采用两种特异性酶抑制剂来确认PK的这种作用。为了确定以特异性单克隆抗体(MAb)阻抑PK是否能够在上述两种模式中有效抑制凝血，从而进一步证明本发明的有效性，按照实施例2和3所述的凝血模式中测试已知为PK特异性的MAb13G11(Veloso等，(1987)Blood，70，1053-1062)。各模式中，加入MAb 13G11(得自得克萨斯州圣安东尼奥(San Antonio，Texas)的基因科技公司(GeneTex))，最终浓度为0.036毫克/毫升，构成50％血浆-50％活化剂的混合物。以Veloso等，(1987)，Blood，70，1053-1062的参考文献为基准，据计算，这该含量比血浆-活化剂混合物中的PK含量过量约2倍(摩尔量)。对照样品用0.036毫克/毫升同种型匹配的对照IgG1(也得自基因科技公司)进行处理。当用50％肌动蛋白FS激活血浆时(图5)，MAb 13G11能够使凝血时间延长100％(是PK缺乏血浆获得的最大效果的45％)，当用200nM纤溶酶+6.25％肌动蛋白FS激活血浆时(图6)，凝血时间延长32％(是PK缺乏血浆获得的最大效果的40％)。因此，对PK高度特异性的MAb能够同样有效地阻断接触活化启动(±纤溶酶)的经内源性路径介导的凝血，比PK过量2倍(摩尔量)时，与10μM的高度特异性PK抑制剂ASP-440同样有效。
本文应用的所有专利、专利申请、出版物和文献以其全部内容纳入本文作为参考。本文引用的任意参考文献与本说明书内容之间的任何矛盾以有利于后者的形式解释。类似地，短语或文字的本领域已知涵义与本说明书中提供的短语或文字的涵义之间的任意矛盾也以有利于后者的涵义解释。
权利要求
1.一种具有以下通式的化合物及其药学上可接受的盐
式中，
Ar是键或选自苯、吡啶或嘧啶的芳环；
下标m是0-5的整数；
每个Ra独立地选自环烷基、(C1-C8)卤代烷基、卤素、-OH、-OR1、-OSi(R1)3、-OC(O)O-R1、-OC(O)R1、-OC(O)NHR1、-OC(O)N(R1)2、-SH、-SR1、-S(O)R1、-S(O)2R1、-SO2NH2、-S(O)2NHR1、-S(O)2N(R1)2、-NHS(O)2R1、-NR1S(O)2R1、-C(O)NH2、-C(O)NHR1、-C(O)N(R1)2、-C(O)R1、-C(O)H、-C(＝S)R1、-NHC(O)R1、-NR1C(O)R1、-NHC(O)NH2、-NR1C(O)NH2、-NR1C(O)NHR1、-NHC(O)NHR1、-NR1C(O)N(R1)2、-NHC(O)N(R1)2、-CO2H、-CO2R1、-NHCO2R1、-NR1CO2R1、-R1、-CN、-NO2、-NH2、-NHR1、-N(R1)2、-NR1S(O)NH2、-NR1S(O)2NHR1、-NH2C(＝NR1)NH2、-N＝C(NH2)NH2、-C(＝NR1)NH2、-NH-OH、-NR1-OH、-NR1-OR1、-N＝C＝O、-N＝C＝S、-Si(R1)3、-NH-NHR1、-NHC(O)NHNH2、NO、-N＝C＝NR1和-S-CN，其中每个R1独立地是烷基；
L是选自键、CH2或SO2的连接基团；
Qa、Qb和Qc各自独立地选自N、S、O或C(Rq)，其中每个Rq独立地选自H、C1-8烷基、卤素或苯基，具有Qa、Qb、Qc和Y作为环顶点的环是具有两个双键的五元环；
Y选自C或N；
当Ar是键时，m是1；
当Ar是芳环时，m是0-5的整数。
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，Ar是选自苯、吡啶或嘧啶的芳环。
3.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，Ar是键，m是1。
4.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物具有式Ia
5.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，L是键，Y是N。
6.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，L是键，Y是N，Ar是苯环。
7.如权利要求6所述的化合物，其特征在于，Qa、Qb和Qc各自独立地是C(Rq)。
8.如权利要求6所述的化合物，其特征在于，Qb是N。
9.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，Y是C；Qa是S，Ar选自苯基或吡啶基。
10.如权利要求9所述的化合物，其特征在于，Qc是C。
11.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，L是CH2，Y是N。
12.如权利要求11所述的化合物，其特征在于，Qa是C。
13.如权利要求12所述的化合物，其特征在于，Qb和Qc各自独立地选自N和C(Rq)。
14.如权利要求12所述的化合物，其特征在于，Ar是苯或吡啶。
15.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，L是键，Y是C。
16.如权利要求15所述的化合物，其特征在于，Qb是O；Qa和Qc各自是C(Rq)。
17.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，L是SO2，Y是N。
18.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，每个Ra独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、芳基、芳基(C1-C8烷基)、卤素、-NH2、-NH(C1-C8烷基)、-N(C1-C8烷基)2、-CN、-C(＝O)(C1-C8烷基)、-(C＝O)NH2、-(C＝O)NH(C1-C8烷基)、-C(＝O)N(C1-C8烷基)2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)、-NH(C＝O)(C1-C8烷基)、-NH(C＝O)O(C1-C8烷基)、-O(C＝O)NH(C1-C8烷基)、-SO2(C1-C8烷基)、-NHSO2(C1-C8烷基)和-SO2NH(C1-C8烷基)。
19.如权利要求18所述的化合物，其特征在于，每个Ra独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、卤素、-CN、-NH2、-NH(C1-C8烷基)、-N(C1-C8烷基)2、-(C＝O)CH3、-(C＝O)NH2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)、-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)和-NH(C＝O)(C1-C8烷基)。
20.如权利要求19所述的化合物，其特征在于，Ra是卤素。
21.如权利要求2所述的化合物，所述化合物选自
22.一种具有通式II的化合物及其药学上可接受的盐
式中，
下标m是0-5的整数；
下标n是0-4的整数；
下标q是0-1的整数；
L是选自键、CH2和SO2的连接基团；
每个Rb和Rc独立地选自环烷基、(C1-C8)卤代烷基、卤素、-OH、-OR2、-OSi(R2)3、-OC(O)O-R2、-OC(O)R2、-OC(O)NHR2、-OC(O)N(R2)2、-SH、-SR2、-S(O)R2、-S(O)2R2、-SO2NH2、-S(O)2NHR2、-S(O)2N(R2)2、-NHS(O)2R2、-NR2S(O)2R2、-C(O)NH2、-C(O)NHR2、-C(O)N(R2)2、-C(O)R2、-C(O)H、-C(＝S)R2、-NHC(O)R2、-NR2C(O)R2、-NHC(O)NH2、-NR2C(O)NH2、-NR2C(O)NHR2、-NHC(O)NHR2、-NR2C(O)N(R2)2、-NHC(O)N(R2)2、-CO2H、-CO2R2、-NHCO2R2、-NR2CO2R2、-R2、-CN、-NO2、-NH2、-NHR2、-N(R2)2、-NR2S(O)NH2、-NR2S(O)2NHR2、-NH2C(＝NR2)NH2、-N＝C(NH2)NH2、-C(＝NR2)NH2、-NH-OH、-NR2-OH、-NR2-OR2、-N＝C＝O、-N＝C＝S、-Si(R2)3、-NH-NHR2、-NHC(O)NHNH2、NO、-N＝C＝NR2和-S-CN，其中每个R2独立地是烷基；
当q是0时，Z选自O、S或NRd，其中Rd是H或C1-C8烷基；
当q是1时，Z是N。
23.如权利要求22所述的化合物，其特征在于，下标q是0，Z选自O，S或NH。
24.如权利要求23所述的化合物，其特征在于，下标n是0-2的整数。
25.如权利要求24所述的化合物，其特征在于，Z是O或S。
26.如权利要求22所述的化合物，其特征在于，下标q是1。
27.如权利要求26所述的化合物，其特征在于，L选自-CH2-或-SO2-。
28.如权利要求27所述的化合物，其特征在于，下标m是0。
29.如权利要求22所述的化合物，其特征在于，Rb和Rc各自独立地选自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、苯基、苯基(C1-C8烷基)、卤素、-CN、-NH2、-NH(C1-C8烷基)、-N(C1-C8烷基)2、-(C＝O)CH3、-(C＝O)NH2、-OH、-COOH、-COO(C1-C8烷基)、-OCO(C1-C8烷基)、-O(C＝O)O(C1-C8烷基)-NO2、-SH、-S(C1-C8烷基)和-NH(C＝O)(C1-C8烷基)。
30.如权利要求22所述的化合物，其特征在于，所述化合物选自
31.一种药物组合物，所述组合物包含权利要求1-30中任一项所述化合物以及药学上可接受的赋形剂。
32.一种在需要的对象中治疗血栓形成的方法，所述方法包括给予所述对象如权利要求1-30中任一项所述的化合物。
33.一种在需要的对象中治疗血浆激肽释放酶依赖性疾病或病症的方法，所述方法包括给予所述对象如权利要求1-30中任一项所述的化合物。
34.如权利要求33所述的方法，其特征在于，所述血浆激肽释放酶依赖性疾病或病症选自中风、炎症、疼痛、急性心肌梗塞、深静脉血栓形成(DVT)、纤维蛋白溶解治疗后的病症、咽峡炎、血管性水肿、败血症、关节炎、心肺转流术期间的失血、炎性肠病、糖尿病及其并发症。
35.一种在需要的对象中治疗血栓形成的方法，所述方法包括给予所述对象血浆激肽释放酶特异性单克隆抗体。
36.如权利要求35所述的方法，其特征在于，所述单克隆抗体是MAB13G11。
全文摘要
本发明提供了能够抑制血浆激肽释放酶(PK)活性的化合物以及在PK依赖性疾病或病症期间或之后预防和治疗血栓形成的方法，例如在纤维蛋白溶解治疗之后。
文档编号C07D401/04GK101495468SQ200780028615
公开日2009年7月29日 申请日期2007年7月30日 优先权日2006年7月31日
发明者S·辛哈, T·J·奇尔科特 申请人:艾克提弗赛特制药股份有限公司