专利名称：从牛胆汁中提取胆红素的方法
技术领域：
本发明涉及一种从动物胆汁中提取胆红素的方法，尤其涉及一种从 牛胆汁中提取胆红素的方法。
背景技术：
胆红素作为人工牛黄的主要成分，在医药中广泛得以利用。胆红素 的提取主要是从动物胆汁中提取的。目前，有关胆红素提取的方法不断 增多，但总体归纳为二类， 一是直接法，也称为一步法，如中国专利
97125601.2 "—步法提取胆红素的工艺"；二是间接法，也称为两步法， 如中国专利88105159. 4公布的"牛胆汁提取胆红素的生产工艺"、中国 医药杂志1990.21 (8)期中提供的"用钙盐法从牛胆汁中提取胆红素"。 这两类方法各有优劣，但考虑到稳定性，大多选用间接法。间接法生产 胆红素，如上述的"用钙盐法从牛胆汁中提取胆红素"，首先必须经过 钙化阶段，使胆红素以钙盐的形式析出，其中所用的胆钙盐形成剂是石 灰水，然后将胆钙盐酸化，再用有机溶剂提取和精制，即得胆红素精品。 上述间接法所存在的问题如下
一、 物动胆汁中主要含有胆红素、胆绿素和胆酸等，其中胆红素极 不稳定，对热、光和氧很敏感，在胆汁的收集和保存过程中，胆红素很 容易因受热、见光、见空气而被氧化形成胆绿素，从而影响胆红素的收 率，这是影响胆红素收率的重要因素之一。
二、 在上述生产工艺中的胆红素钙化阶段，常因钙化不完全而造成 胆红素不同程度的损失，据计算，按上述钙化过程，胆红素损失的百分 率达到20%~30%，甚至更高。因此，钙化过程是否完全，是影响胆红素 收率的重要因素之二。影响胆红素钙化的主要因素是料液的酸度(PH
值)，其次是料液中钙离子的浓度，温度的影响不明显，而且允许ra值
波动的范围狭窄。如果能在保证酸度的前提下，又有足够的钙离子浓度，就可保证结合型胆红素醋键断裂而与足够量的钙离子结合，使胆红素形 成钙盐而析出。但是，已有技术中所用的胆钙盐形成剂是呈强碱性的石
灰水(氢氧化钙)，用它形成胆钙盐时，存在着PH值合适时转离子浓度
低的情况，但为了提高钙离子浓度而增加石灰水时，又会使ra值升高 而偏碱性，这种矛盾限制了胆钙盐的完全形成，影响胆钙盐的收率。 由于以上的两个原因，现有间接法的胆红素收率较低， 一般是在
0.003 0.005化间，最高也只能达到0.008先左右。
发明内容
本发明的目的是针对已有技术中的问題，提供一种改进的从牛胆汁 中提取胆红素的方法，以提高胆红素的收率。 为实现上述目的，本发明的步骤如下
一、 牛胆汁中胆绿素的还原
在鲜的或保存的牛胆汁中加入还原剂2 5毫升/升，所述的还原剂 为2 59^度的维生素C、磯氨化钠、亚琉酸钠或亚琉酸氢钠，用氢氧 化钠或盐酸调节ra值为3.5 7.5，温度为20 50"C,然后静置1 2 小时，料液备用。
二、 胆钙盐的形成
将上步所得的料液置于容器中，用30%浓度的氢氧化钠调节PH值至 10 12后，按照料液重量比例的2 7%加入胆钙盐形成剂，所述的胆钙 盐形成剂为氣化钙或琉酸钙，并缓缓加热至60 651C,待有棕红色胆钙 盐沉淀形成时，重新调节PH值至10 12后，继续加热至沸，保温2 5 分钟，过滤得胆钙盐。
三、 胆红素的提取和精制
将上步所得的胆钙盐经热水洗涤，尼龙布过滤、压干后，加l倍体 积量的水研磨成糊状，按胆钙盐重量的1%加入亚琉酸氢钠或亚琉酸钠， 撹拌下缓慢加入2倍体积的盐酸至PH值为0. 5 2.0后，加入等体积的 三氣甲烷或二氯甲烷，缓慢推拌2 4小时，室温，静置分层，收集有 机溶剂层，减压回收有机溶剂近干时，再加入残留液10倍量的乙醇继 续蒸馏，胆红素精品即析出。本发明与已有技术相比的特点如下
一、 本发明在转盐形成之前，增加了一个还原步骤，它可以将牛胆 汁中本身含有的胆绿素和在收集或保存过程中氧化形成的胆绿素还原
成胆红素，从而增加胆汁中胆红素的含量。这是提高收率的重要步骤。
二、 本发明用的胆钙盐形成剂是呈中性的氯化钙或硫酸钙，它们在 分解而形成钙离子时，不会改变料液的PH值，使钙化程度高达97. 4%, 从而使钙化造成的损失由现有工艺的30%左右降至2. 6%，大大提高了收
经过上述改进，本发明的收率可达到0.008 0.011%。
具体实施例方式
实施例1
1、 牛胆汁中胆绿素的还原
选用新鲜牛胆汁，在该胆汁中加入还原剂2 3毫升/升，所述的还 原剂采用3 596浓度的维生素C，用氢氧化钠或盐酸调节ra值等于3. 5 6，温度为20 30。C,然后静置2小时，料液备用；
2、 胆钙盐的形成
将上步所得的料液置于不锈钢夹层锅(夹层中可以通入蒸汽加热 或通入冷水冷却)中，用3096浓度的氢氧化钠调节ra值至10 12后， 按照料液重量比例的3 7%加入硫酸钙，并缓缓加热至60 65'C，待有 棕红色胆钙盐沉淀形成时，重新调节TO值至10 12后，继续加热至沸， 保温5分钟，过滤得胆钙盐；
3、 胆红素的提取和精制
将上步所得的胆钙盐经热水洗涤，尼龙布过滤、压干后，加l倍体 积量的水研磨成糊状，按胆钙盐重量的1%加入亚硫酸氢钠或亚硫酸钠，
搅拌下缓慢加入2倍体积量的盐酸至ra值为0. 5 2. 0后，加入等体积
的三氯甲烷或二氯甲烷，缓慢搅拌2 4小时，室温，静置分层，收集 有机溶剂层，减压回收有机溶剂近干时，再加入残留液10倍量的乙醇 继续蒸馏，胆红素精品即析出。 收率为0.011%。实施例2
1、牛胆汁中胆绿素的还原
选用冰冻保存的牛胆汁，在该牛胆汁中加入还原剂4 5毫升/升， 所述的还原剂为4 5%浓度的硼氢化钠、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠，用氢 氧化钠或盐酸调节PH值为5 7. 5,温度为40 50'C，然后静置1 2
小时，料液备用；
2、 胆钙盐的形成 将上步所得的料液置于不锈钢锅中，用30%浓度的氢氧化钠调节
PH值至10 12后，按照料液重量比例的2 4%加入氯化钙，并缓缓加 热至60 65'C，待有棕红色胆钙盐沉淀形成时，重新调节PH值至10 12后，继续加热至沸，保温3分钟，过滤得胆钙盐；
3、 胆红素的提取和精制
将上步所得的胆钙盐经热水洗涤，尼龙布过滤、压干后，加l倍体 积量的水研磨成糊状，按胆钙盐重量的1%加入亚硫酸氢钠或亚硫酸钠， 搅拌下缓慢加入2倍体积的盐酸至ra值为0. 5 2. 0后，加入等体积的 三氯甲垸或二氯甲烷，缓慢搅拌2 4小时，室温，静置分层，收集有 机溶剂层，减压回收有机溶剂近干时，再加入残留液10倍量的乙醇继 续蒸馏，胆红素精品即析出。
收率为0. 010%。
本例的收率接近上例的收率，这说明本发明对鲜胆汁或保存的胆汁 不敏感，降低了对原料的苛刻要求，利于原料的保存。
权利要求
1、一种从牛胆汁中提取胆红素的方法，其步骤如下(1)牛胆汁中胆绿素的还原在鲜的或保存的牛胆汁中加入还原剂2～5毫升/升，所述的还原剂为2～5％浓度的维生素C、硼氢化钠、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠，用氢氧化钠或盐酸调节PH值为3.5～7.5，温度为20～50℃，静置1～2小时，料液备用；(2)胆钙盐的形成将上步所得的料液置于容器中，用30％浓度的氢氧化钠调节PH值至10～12后，按照料液重量比例的2～7％加入胆钙盐形成剂，所述的胆钙盐形成剂为氯化钙或硫酸钙，并缓缓加热至60～65℃，待有棕红色胆钙盐沉淀形成时，重新调节PH值至10～12后，继续加热至沸，保温2～5分钟，过滤得胆钙盐；(3)胆红素的提取和精制将上步所得的胆钙盐经热水洗涤，尼龙布过滤、压干后，加1倍体积量的水研磨成糊状，按胆钙盐重量的1％加入亚硫酸氢钠或亚硫酸钠，搅拌下缓慢加入2倍体积的盐酸至PH值为0.5～2.0后，加入等体积的三氯甲烷或二氯甲烷，缓慢搅拌2～4小时，室温，静置分层，收集有机溶剂层，减压回收有机溶剂近干时，再加入残留液10倍量的乙醇继续蒸馏，胆红素精品即析出。
全文摘要
本发明是一种从牛胆汁中提取胆红素的方法。它包括牛胆汁中胆绿素的还原、胆钙盐的形成、胆红素的提取和精制三个步骤。本发明的改进点是增加了一个胆绿素的还原步骤，它可以将牛胆汁中本身含有的胆绿素和在收集或保存过程中氧化的胆绿素还原成胆红素，从而增加胆汁中胆红素的含量，这是提高收率的重要步骤。同时，本发明在胆钙盐形成步骤中加入呈中性的氯化钙或硫酸钙作为胆钙盐形成剂，它在分解而形成钙离子时，不会改变料液的pH值，从而使料液中的胆钙盐形成完全，提高了收率。经过上述改进，本发明的收率可达到0.008～0.011％，比已有技术提高了0.003％。
文档编号C07D207/00GK101429152SQ20081023207
公开日2009年5月13日 申请日期2008年11月4日 优先权日2008年11月4日
发明者晖 曹 申请人:陕西秦宝牧业发展有限公司