专利名称：一种明日叶中查耳酮类成分的提取工艺的制作方法
技术领域：
本发明属化学成分提取技术领域，具体涉及一种明日叶中查耳酮类成分的提取工艺。
背景技术：
明日叶是原产于日本八丈岛、伊豆七岛的一种蔬菜，来源为芹科(伞形科，拉 丁名Umbelliferae)植物明日叶的根、茎、叶，其拉丁学名Angelica Keiskei Koidzumi。明日叶中主要成分为查耳酮类和香豆素类化合物，其中以查耳酮类黄色素化合 物的含量最高。黄色素是明日叶中多种水溶性有效成分的混合物，属查耳酮类有效部位 群，易溶于水、稀醇等极性溶剂，不溶于无水乙醇、丙酮、乙醚和石油醚，具有良好的 抗肿瘤、抗癌、抗溃疡、抗血栓、降血压、抗过敏、抗艾滋病、防痴呆症、防糖尿病等 诸多功效，而其中尤以4-hydroxyderrcin和黄腐酚(xanthoangelol)效果最好。目前，国内对于查耳酮的研究，仅仅停留在采用有机化学合成方法制备查耳酮 (作为黄酮类化合物的中间体)，所得到的产物副反应较多，耗时长，操作繁琐，后处理 不易，同时，产品纯度较低且存在对映异构体等众多缺点，而对于从明日叶中提取查耳 酮类有效成分，用于食品和药品方面的研究较少，经检索还没有相关文献。
发明内容
本发明的目的是提供一种明日叶中查耳酮类成分的提取工艺，采用乙醇作为提 取溶剂可有效地降低查耳酮酶的活性，避免提取时查耳酮的分解，提高查耳酮的提取 率，以及查耳酮内成分4-hydroxyderrcin (4-羟基德里辛，简称4HD)和xanthoangelol (黄 腐酚，简称XA)的提取率。本发明所采用的技术方案一种明日叶中查耳酮类成分的提取工艺，是选取伞形科植物明日叶(Angelica Keiskei Koidzumi)的干燥茎叶，粉碎，按重量比计用9 11倍量40 % 60 %乙醇于 65°C 75°C热浸提取2 4次，每次2 3h，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味得到 流浸膏；按重量比计用7 9倍量的水溶解流浸膏2次，合并水提取液，然后用乙酸乙酯 萃取5 7次，合并萃取液，减压回收乙酸乙酯得萃取物，即得查耳酮粗品，查耳酮粗品 采用AB-8大孔吸附树脂柱，以蒸馏水为洗脱液，树脂粒径30目，流速为15ml/min，进 行分离纯化，收集洗脱液，洗脱液再经100目硅胶层析柱进行分离纯化，得查耳酮。将上述查耳酮采用氯仿-甲醇(100 1 —30 1)混合液进行梯度洗脱，HPLC 检测收集目标物4HD及XA，再用50%乙醇进行重结晶两次，最终得到4HD及XA纯品。所述氯仿-甲醇混合液是将氯仿和甲醇按体积比为氯仿甲醇=100 1 30 1的比例进行混合。本发明的优点在于
(1)反应条件温和，关键工艺参数易于控制。
(2)查耳酮提取工艺中采用乙醇可对明日叶中的查耳酮进行有效提取，优点在于 存在植物体内的查耳酮酶在提取时会分解查耳酮，使其变为游离态，降低了其水溶性， 采用乙醇能降低其内酶的活性，从而使查耳酮尽可能的提取完全，提高提取率。
(3)采用100目硅胶层析柱进行分离纯化，用氯仿-甲醇混合液洗脱剂进行梯度 洗脱，对查耳酮的分离效果佳，产品纯度高，最终产物提取率及产品纯度相对较高。
(4)采用50%乙醇低温(0°C)进行重结晶，所得产品纯度较高，避免了其他有机 溶剂重结晶引起的目标产物构型的转变(如在50°C以上黄腐酚易产生热异构化生成黄腐 酮从而使得目标产物降低)。
具体实施方式
下面用非限定性实施例对本发明作进一步说明。
实施例一
选取伞形科植物明日叶(Angelica Keiskei Koidzumi)的干燥茎叶2.0kg，粉碎，用10倍量50%乙醇、70°C热浸提取2次，每次Zh，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味得 流浸膏，向其内加8倍量水溶解2次，合并水提取液，并采用乙酸乙酯萃取6次，合并萃 取液，减压回收乙酸乙酯得其萃取物，即得查耳酮粗品51. ，萃取物采用AB-8大孔吸 附树脂柱，以蒸馏水为洗脱液，树脂粒径30目，流速为15ιη1/ ι，进行分离纯化，收集 洗脱液，洗脱液再经100目硅胶层析柱进行分离纯化，得黄色提取物43Jg。将提取物与 硼酸进行反应，反应产物显亮黄色。将提取物与盐酸-镁粉进行反应，呈阴性。由此判 断所得提取物为查耳酮。
采用氯仿-甲醇(90 1)混合液对所得查耳酮进行梯度洗脱，HPLC检测收集 目标物4HD及XA，再用50%乙醇进行重结晶两次，最终得到4HD及XA纯品，分别为 18.44g 禾P 6.34g。
实施例二
选取伞形科植物明日叶(Angelica Keiskei Koidzumi)的干燥茎叶3.0kg，粉碎，按重量比计用9倍量45%乙醇于68°C热浸提取3次，每次3h，合并提取液，减压回收乙 醇至无醇味得到流浸膏；按重量比计用7倍量的水溶解流浸膏2次，合并水提取液，然 后用乙酸乙酯萃取7次，合并萃取液，减压回收乙酸乙酯得其萃取物，即得查耳酮粗品 80.4g,查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附树脂柱，以蒸馏水为洗脱液，树脂粒径30目，流 速为15ιη1/ ι，进行分离纯化，收集洗脱液，洗脱液再经100目硅胶层析柱进行分离纯 化，得黄色提取物68.相。将提取物与硼酸进行反应，反应产物显亮黄色。将提取物与 盐酸-镁粉进行反应，呈阴性。由此判断所得提取物为查耳酮。
采用氯仿-甲醇(60 1)混合液对所得查耳酮进行梯度洗脱，HPLC检测收集 目标物4HD及ΧΑ，再用50%乙醇进行重结晶两次，最终得到4HD及XA纯品，分别为 29.53g 和 11.25g。
实施例三
选取伞形科植物明日叶(AngelicaICeiskeiKoidzumi)的干燥茎叶1.01 ，粉碎，按重量比计用11倍量55%乙醇于73°C热浸提取3次，每次4h，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味得到流浸膏；按重量比计用9倍量的水溶解流浸膏2次，合并水提取液，然 后用乙酸乙酯萃取5次，合并萃取液，减压回收乙酸乙酯得其萃取物，即得查耳酮粗品 24.8g，查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附树脂柱，以蒸馏水为洗脱液，树脂粒径30目，流 速为15ml/min，进行分离纯化，收集洗脱液，洗脱液再经100目硅胶层析柱进行分离纯 化，得黄色提取物21.3g。将提取物与硼酸进行反应，反应产物显亮黄色。将提取物与 盐酸_镁粉进行反应，呈阴性。由此判断所得提取物为查耳酮。 采用氯仿-甲醇(40 1)混合液对所得查耳酮进行梯度洗脱，HPLC检测收集 目标物4HD及XA，再用50%乙醇进行重结晶两次，最终得到4HD及XA纯品，分别为 10.26g 和 3.57g。
权利要求
1.一种明日叶中查耳酮类成分的提取工艺，其特征是选取伞形科植物明日叶的干燥 茎叶，粉碎，按重量比计用9 11倍量40% 60%乙醇于65°C 75°C热浸提取2 4 次，每次2 3h，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味得到流浸膏；按重量比计用7 9 倍量的水溶解流浸膏2次，合并水提取液，然后用乙酸乙酯萃取5 7次，合并萃取液， 减压回收乙酸乙酯得萃取物，即得查耳酮粗品，查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附树脂柱， 以蒸馏水为洗脱液，树脂粒径30目，流速为15ml/min，进行分离纯化，收集洗脱液，洗 脱液再经100目硅胶层析柱进行分离纯化，得查耳酮。
2.根据权利要求1所述的明日叶中查耳酮类成分的提取工艺，其特征在于将所得 查耳酮采用氯仿_甲醇混合液进行梯度洗脱，HPLC检测收集目标物4HD及XA，再用 50%乙醇进行重结晶两次，最终得到4HD及XA纯品。
3.根据权利要求2所述的明日叶中查耳酮类成分的提取工艺，其特征在于所述氯 仿-甲醇混合液是将氯仿和甲醇按体积比为氯仿甲醇=100 1 30 1的比例进行 混合ο
全文摘要
本发明属化学成分提取技术领域，具体涉及一种明日叶中查耳酮类成分的提取工艺，是选取明日叶的干燥茎叶，粉碎，用乙醇进行热浸提取，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味得到流浸膏；用水溶解流浸膏后用乙酸乙酯进行萃取，减压回收乙酸乙酯得萃取物，即得查耳酮粗品，查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附树脂柱进行分离纯化，收集洗脱液，洗脱液再经100目硅胶层析柱进行分离纯化，得查耳酮。本发明采用乙醇作为提取溶剂可有效地降低查耳酮酶的活性，避免提取时查耳酮的分解，提高提取率，工艺简单，耗时短，为查耳酮的植物提取提供一条工业化途径。
文档编号C07C49/84GK102020544SQ201010299189
公开日2011年4月20日 申请日期2010年9月29日 优先权日2010年9月29日
发明者中山策敏, 滕秀兰 申请人:海南兰地高新科技有限公司