专利名称：一种制备红景天苷的方法
技术领域：
本发明涉及一种制备红景天苷的方法。
背景技术：
本发明所用药材为大花红景天，来源于景天科红景天属植物大花红景天(拉丁 名Rhodiola crenulata (Hook. f. et Thorns.) H. Ohba)的根或者根茎的主要活性成分是红 景天苷。大花红景天主产于西藏、云南西北部、四川西部，生于海拔2800 5600米的山坡草 地、灌丛中，能在恶劣而多变的自然环境中生长，是一种适应性很强的植物。传统医学认为 大花红景天能益气活血，通脉平喘，用于气虚血淤，胸痹心痛，中风偏瘫，倦怠气喘。大花红 景天中主要含有苷类、黄酮类、多糖类、鞣质、挥发油等，红景天苷为其主要活性成分，也是 治疗心脑血管疾病的主要成分之一，具有预防和抗痴呆作用，抗缺氧作用，延缓衰老作用， 抑制快速型室性心律失常，临床上用来治疗冠心病、高原低血压症、高原性红细胞增多症。 毒性试验表明，红景天苷毒性甚小红景天苷lg/Kg小鼠皮下注射，未见毒性反应。近年来，随着人们生活水平的提高，加上人口结构的老龄化，心血管疾病的发病率 呈逐年上升的趋势，开发治疗效果较好的心脑血管疾病的药物已经成为当今药物研究的热 点，临床研究报道显示高纯度单一成分的红景天苷在治疗心脑血管方面具有良好的应用 前景。目前红景天苷的制备方法较多，邰韧辉等(“高纯度红景天苷的制备工艺研究”，现 代中药研究与实践，2004，18 (4) 58)用溶剂萃取结合大孔树脂分离，然后用硅胶柱精制。 用该方法制得的红景天苷含量低，且成本高，不适合工业化大生产。丁朝武等(“红景天苷 和红景天苷元标准品的制备方法研究”，分析测试学报，1997，16(1) 38)用化学和高效液相 制备色谱方法分离制备，所得的产品纯度高，但高效液相色谱制备量小，无法大规模生产。 葛永潮等(“红景天苷的制备工艺改进”，中国药物化学杂志，1994，4(3) 196)将聚酰胺、反 相大孔树脂、硅胶及葡聚糖凝胶四种柱层析组合使用，来制备红景天苷，此方法分离介质品 种较多，且成本较高，不适合工业化大生产。因此，还有待开发一种工艺简单、成本低、纯度高、适合工业化生产的制备红景天 苷的方法。
发明内容
因此，本发明的目的是提供一种新的制备红景天苷的方法。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。本发明提供了一种制备红景天苷的 方法，所述方法包括以下步骤1)提取取大花红景天药材，加水微波提取，滤过，浓缩，得 浓缩液；2)纯化将步骤1)所得浓缩液进行二次醇沉，得滤液；和3)精制将步骤2)所得 滤液上大孔树脂，洗脱，浓缩，干燥，即得。优选地，所述步骤1)中大花红景天药材为50 80目的粉末，优选为50目的粉末。优选地，所述步骤1)中微波提取之前，还包括采用水浸泡大花红景天药材的步
4骤；更优选地，所述浸泡时间为0. 5 3小时，优选为1. 5小时。优选地，所述步骤1)中微波提取的功率为119 700w，优选为462w。优选地，所述步骤1)中微波提取的次数为3次。优选地，所述微波提取的时间为90秒。优选地，所述微波提取的水用量为20倍。优选地，所述步骤2)中二次醇沉的乙醇含量分别为第一次60 70%，优选60%; 第二次80 90%，优选85%;更优选地，所述二次醇沉的时间分别为12 48小时，优选第 一次醇沉时间为48小时，第二次醇沉时间为24小时。优选地，所述步骤2)所得滤液在精制之前，还包括加碱调节pH值的步骤。优选地，所述pH值为pH 8 10，优选为pH 8 ；更优选地，所述调pH值后还包括于 2 8°C下静置的步骤，所述静置的时间为12 48小时，优选为24小时。优选地，所述步骤3)中所使用的大孔树脂选自NK-2、SP825、DlOU D301、AB-8、 HP-20、SP700和S-8中的一种或多种，优选为SP825。优选地，所述树脂与大花红景天药材的重量比为1 0.5以上。优选地，所述步骤3)中洗脱大孔树脂的操作如下先用水洗脱至洗脱液近无色， 再用5%乙醇洗脱，最后用10%乙醇洗脱，再合并各洗脱液并浓缩；更优选地，所述5%乙醇 洗脱的用量为1 9BV，优选为3BV ；所述10%乙醇洗脱的用量为2 10BV，优选为10BV。优选地，所述步骤3)中洗脱大孔树脂的条件如下上柱滤液浓度为0. 5 1. 5g/ ml，大孔树脂的径高比为1 10 1 30，上柱流速为2 4BV/h;优选地，步骤3)中洗脱 大孔树脂的条件如下上柱滤液浓度为1.5g/ml，大孔树脂的径高比为1 30，上柱流速为 2BV/h0在一个优选实施方案中，本发明提供的方法包括以下步骤1)提取取大花红景天药材，粉碎成50 80目的粉末，优选为50目的粉末，加水 浸泡0. 5 3小时，优选为1. 5小时，微波119 700w，优选为462w功率提取，优选提取3 次，合并提取液，浓缩，得20°C下相对密度为1. 00 1. 10的浓缩液；2)纯化加乙醇使步骤1)所得浓缩液中乙醇含量达到60 70 %，优选为60 %， 2 8°C下静置12 48小时，优选为48小时，过滤，滤液再加乙醇使含醇量达到80 90%， 优选为85%，2 8°C下静置12 48小时，优选为24小时，过滤，滤液加碱调节pH值为pH 8 10，优选为pH8，2 8°C下静置12 48小时，优选为24小时，过滤，得滤液；3)精制将步骤2)所得滤液浓缩至0. 5 1. 5g/ml的上样浓度，优选为1. 5g/ml 的上样浓度，以2 4BV/h的流速上SP825型大孔树脂柱，优选为2BV/h，先用水冲洗至洗 脱液近无色，再用1 9BV，优选为3BV的5%乙醇进行洗脱，最后用2 10BV，优选为IOBV 的10%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，合并，浓缩，浓缩液继续上SP825型大孔树脂柱洗脱，反 复2 3次，即得。此外，本发明还提供了上述的方法制备的红景天苷或者包含上述方法制备的红景 天苷的药物组合物。与现有技术相比，本发明提供的制备红景天苷的方法至少具有以下几方面的优点 和有益效果1)微波提取，红景天苷的提取效率较高，工艺过程较为简单，且提取时间短；
2)纯化和精制工艺过程简单，得到的红景天苷单体纯度较高，并且精制工艺中的 大孔树脂柱可以反复应用，后处理简单，成本较低，适用于工业化大生产；3)整个制备工艺过程中只用到乙醇和水，无其它有机溶剂，比较安全，所制备的红 景天苷可用于药品生产；4)提取溶剂仅为水，与使用高浓度乙醇的提取方法相比，成本较低；5)红景天苷的得率较高，可以提高资源利用率，节约资源。6)得到的红景天苷纯度较高，可直接用作注射剂的原料。可见，本发明提供了一种新的制备红景天苷的方法，可以提高红景天苷的收率，节 省资源，制备得到的高纯度红景天苷，可以用作注射剂等剂型的原料药，据此可以开发出一 种速效的、纯度较高、高生物利用度、治疗心脑血管疾病的药物。
具体实施例方式以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅 用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。以下各实施例中，红景天苷的含量依据《中国药典》2010版一部中规定的HPLC方 法测定。以下各实施例中使用的原料大花红景天药材(购自普宁中药材市场)，测定红景 天药材中红景天苷含量为0. 51% (按干品计)，符合药典规定的红景天药材中红景天苷含 量不得低于0.5% (按干品计)的规定，认为该药材合格。实施例1对大花红景天的提取工艺的研究本实施例对大花红景天提取工艺中的提取方法、提取溶剂、原料粒度、浸泡时间、 提取条件等分别进行了研究。1.提取方法的考察取过50目筛的大花红景天药材3份，每份10g，分别用热回流提取(每次加10倍 量的水，加热温度100°c，提取3次，每次提取3小时)；超声波提取(每次加10倍量的水， 超声波频率45KHz，提取3次，每次提取1小时)；微波提取(每次10倍量的水，微波功率 462w，提取3次，每次提取1. 5分钟)；将提取液过滤，减压浓缩至相对密度约1. 00(2(TC时 测定)，稀释定容至IOOml，测定红景天苷含量，结果见表1。表1提取方法考察结果
权利要求
一种制备红景天苷的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤1)提取取大花红景天药材，加水微波提取，滤过，浓缩，得浓缩液；2)纯化将步骤1)所得浓缩液进行二次醇沉，得滤液；和3)精制将步骤2)所得滤液上大孔树脂，洗脱，浓缩，干燥，即得。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中大花红景天药材为50 80目的粉末，优选为50目的粉末；优选地，所述步骤1)中微波提取之前，还包括采用水浸 泡大花红景天药材的步骤；更优选地，所述浸泡时间为0. 5 3小时，优选为1. 5小时。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中微波提取的溶剂为水， 提取的次数为3次；优选地，所述步骤1)中微波提取的功率为119 700w，优选为462w ；更 优选地，所述微波提取的时间为90秒；进一步优选地，所述微波提取的水用量为20倍。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中二次醇沉的 乙醇含量分别为第一次60 70%，优选60% ；第二次80 90%，优选85% ；优选地，所 述二次醇沉的时间分别为12 48小时，优选第一次醇沉时间为48小时，第二次醇沉时间 为24小时。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤2)所得滤液在精 制之前，还包括加碱调节PH值的步骤；优选地，所述pH值为pH 8 10，优选为pH 8 ；更优 选地，所述调PH值后还包括于2 8°C下静置的步骤，所述静置的时间为12 48小时，优 选为24小时。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中所使用的大 孔树脂选自 NK-2、SP825、D101、D301、AB-8、HP-20、SP700 和 S-8，优选为 SP825 ；优选地，所 述树脂与大花红景天药材的重量比为1 0.5以上。
7.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中洗脱大孔树 脂的操作如下先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5%乙醇洗脱，最后用10%乙醇洗脱，再 合并各洗脱液并浓缩；优选地，所述5%乙醇洗脱的用量为1 9BV，优选为3BV ；所述10% 乙醇洗脱的用量为2 10BV，优选为10BV。
8.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中洗脱大孔树 脂的条件如下上柱滤液浓度为0.5 1.5g/ml，大孔树脂的径高比为1 10 1 30，上 柱流速为2 4BV/h ；优选地，步骤3)中洗脱大孔树脂的条件如下上柱滤液浓度为1. 5g/ ml，大孔树脂的径高比为1 30，上柱流速为2BV/h。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤1)提取取大花红景天药材，粉碎成为50目的粉末，加水浸泡1.5小时，微波462w功 率提取3次，合并提取液，浓缩，得20°C下相对密度为1. 00 1. 10的浓缩液；2)纯化加乙醇使步骤1)所得浓缩液中乙醇含量达到60%，2 8°C下静置48小时， 过滤，滤液再加乙醇使含醇量达到85%，2 8°C下静置24小时，过滤，滤液加碱调节pH值 为pH8，2 8°C下静置24小时，过滤，得滤液；3)精制将步骤2)所得滤液浓缩至1.5g/ml的上样浓度，以2BV/h的流速上SP825型 大孔树脂柱，先用水冲洗至洗脱液近无色，再用3BV的5%乙醇进行洗脱，最后用IOBV的 10%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，合并，浓缩，浓缩液继续上SP825型大孔树脂柱洗脱，反复 2 3次，即得。
10.根据权利要求1至9中任一项所述方法制备的红景天苷或者包含权利要求1至9 中任一项所述方法制备的红景天苷的药物组合物。
全文摘要
本发明提供了一种制备红景天苷的方法。本发明提供的制备红景天苷的方法包括以下步骤1)提取取大花红景天药材，加水微波提取，滤过，浓缩，得浓缩液；2)纯化将步骤1)所得浓缩液进行二次醇沉，得滤液；和3)精制将步骤2)所得滤液上大孔树脂，洗脱，浓缩，干燥，即得。本发明提供的制备方法具有提取效率高、工艺简单、可用于工业大生产等优点。
文档编号C07H15/18GK101974045SQ20101051824
公开日2011年2月16日 申请日期2010年10月19日 优先权日2010年10月19日
发明者向飞军, 吴晓东, 许冬瑾, 闵建华, 陈华师 申请人:康美药业股份有限公司