专利名称：一种小麦黄素的制备方法
技术领域：
本发明属于中药提取分离技术领域，涉及一种从白羊草中分离制备小麦黄素的方法。
背景技术：
白羊草(Mothriochloa ischaemum (L. ) Keng)为禾本科孔颖草属多年生草本植物， 起源于欧洲南部和亚洲，现在各大洲均有分布。白羊草属于丛生多年生暖季型植物，具短根茎，耐干旱、耐盐碱、耐牧、休眠期耐火烧、侵入性强、种子生产能力高。适合于在排水良好的肥沃粘土上生长，在沙地和腐蚀土地上也能正常生长。白羊草主要有效成分为黄酮类化合物，以小麦黄素含量最高。小麦黄素又名麦黄酮，对离体豚鼠肠管有松弛作用，有轻度抗氧化作用，可防止肾上腺素氧化，并有轻度雌激素样作用。可作染料中间体。目前，市场上售小麦黄素相关产品大多含量低，且资源有限，工艺复杂、成本高。
发明内容
本发明的目的是提供一种小麦黄素的制备方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的
(1)取白羊草，经粉碎处理，加入到超临界(X)2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，进行萃取， 得到萃取物；
(2)萃取物加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；
(3)采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的小麦黄素，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集小麦黄素组分；
(4)将小麦黄素组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入丙酮-石油醚重结晶，过滤、洗涤干燥即得小麦黄素。所述步骤(1)中的超临界CO2萃取参数条件为萃取温度为30_55°C，萃取压力为 25-35MPa，萃取时间为2_3. 5h，分离釜I温度为30_40°C，压力为8_10MPa，分离釜II温度为 ^-35°C，压力为 5-8MPa，CO2 流量为 2-%il/g 生药 /min。所述步骤(1)中夹带剂的用量为药材重量的10-20%。所述步骤(3)中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统的体积比为 3-7:5-8:2-4:4-6。所述步骤(4)中丙酮-石油醚体积比为1-2.5 :1。本方法积极效果是
(1)本方法采用超临界ω2萃取，能耗低，萃取剂(X)2清洁无污染；
(2)本方法采用高速逆流色谱法，收率高、制备量大、制备周期短，解决了柱层析效率低而且污染严重的技术缺陷；(3)本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
取白羊草，经粉碎处理，称取1kg，加入到超临界(X)2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，用量为药材重量的10%，进行萃取，萃取温度为35°C，萃取压力为25MPa，CO2流量为2ml/g生药/min，萃取时间为2h，分离釜I温度为30°C，压力为8MPa，分离釜II温度为^°C，压力为 5MPa,得到萃取物，用乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的小麦黄素，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，体积比为3 8 4 5，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，检测波长为352nm，收集小麦黄素组分，真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入丙酮-石油醚(体积比为1 :1)重结晶，过滤、洗涤干燥即得小麦黄素，含量96. 5%。实施例2:
取白羊草，经粉碎处理，称取1kg，加入到超临界(X)2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，用量为药材重量的18%，进行萃取，萃取温度为30°C，萃取压力为35MPa，CO2流量为％il/g生药 /min，萃取时间为3. 5h，分离釜I温度为30°C，压力为8MPa，分离釜II温度为^°C，压力为 8MPa,得到萃取物，用乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的小麦黄素，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，体积比为6 5 3 5，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，检测波长为352nm，收集小麦黄素组分，真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入丙酮-石油醚(体积比为2. 5:1)重结晶，过滤、洗涤干燥即得小麦黄素，含量95. 4%。实施例3:
取白羊草，经粉碎处理，称取^ig,加入到超临界(X)2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，用量为药材重量的20%，进行萃取，萃取温度为55°C，萃取压力为^MPa，CO2流量为3ml/g生药 /min,萃取时间为2. 5h，分离釜I温度为40°C，压力为lOMPa，分离釜II温度为35°C，压力为 8MPa,得到萃取物，用乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的小麦黄素，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，体积比为7 8 4 6，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，检测波长为352nm，收集小麦黄素组分，真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入丙酮-石油醚(体积比为1.5:1)重结晶，过滤、洗涤干燥即得小麦黄素，含量96. 1。实施例4:
取白羊草，经粉碎处理，称取^g，加入到超临界(X)2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，用量为药材重量的10%，进行萃取，萃取温度为55°C，萃取压力为35MPa，CO2流量为％il/g生药 /min,萃取时间为2. 5h，分离釜I温度为40°C，压力为lOMPa，分离釜II温度为30°C，压力为
6. 5MPa，得到萃取物，用乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的小麦黄素，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水， 体积比为3 5 2 4，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，检测波长为352nm，收集小麦黄素组分， 真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入丙酮-石油醚(体积比为1.5:1)重结晶，过滤、洗涤干燥即得小麦黄素，含量95. 6%。
实施例5:
取白羊草，经粉碎处理，称取10kg，加入到超临界(X)2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，用量为药材重量的15%，进行萃取，萃取温度为35°C，萃取压力为^MPa，CO2流量为3. 5ml/g生药/min，萃取时间为3. 5h，分离釜I温度为35°C，压力为9MPa，分离釜II温度为30°C，压力为7MPa，得到萃取物，用乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的小麦黄素，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水， 体积比为3 8 4 6，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，检测波长为352nm，收集小麦黄素组分， 真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入丙酮-石油醚(体积比为2:1)重结晶，过滤、洗涤干燥即得小麦黄素，含量97. 7%。
权利要求
1.一种小麦黄素的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)取白羊草，经粉碎处理，加入到超临界(X)2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，进行萃取， 得到萃取物；(2)萃取物加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；(3)采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的小麦黄素，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集小麦黄素组分；(4)将小麦黄素组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入丙酮-石油醚重结晶，过滤、洗涤干燥即得小麦黄素。
2.根据权利要求1所述的一种小麦黄素的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中的超临界( 萃取参数条件为萃取温度为30-55°C，萃取压力为25-35MPa，萃取时间为2_3. 5h， 分离釜I温度为30-40°C，压力为8-lOMPa，分离釜II温度为，压力为5_8MPa，CO2流量为2-%il/g生药/min。
3.根据权利要求1所述的一种小麦黄素的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中夹带剂的用量为药材重量的10-20%。
4.根据权利要求1所述的一种小麦黄素的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统的体积比为3-7:5-8:2-4:4-6。
5.根据权利要求1所述的一种小麦黄素的制备方法，其特征在于所述步骤(4)中丙酮-石油醚体积比为1-2.5 =I0
全文摘要
本发明涉及一种操作简单、污染少的小麦黄素的制备方法，工艺步骤为(1)取白羊草，经粉碎处理，加入到超临界CO2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，进行萃取，得到萃取物；(2)萃取物加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；(3)采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的小麦黄素，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相为固定相，下相为流动相，收集小麦黄素组分；(4)将小麦黄素组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入丙酮-石油醚重结晶。本发明制备小麦黄素，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07D311/40GK102276566SQ20111026483
公开日2011年12月14日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司