专利名称：一种瓜子金皂苷己的提纯方法
技术领域：
本发明涉及一种瓜子金皂苷己的提纯方法，特别是涉及一种瓜子金皂苷己的高效快速提纯方法。
背景技术：
瓜子金为远志科植物瓜子金/^hgah jaPonica Houtt.的干燥全草。又叫辰砂草、金锁匙、瓜子草、挂米草、竹叶地丁、金牛草。传统医学认为瓜子金性味辛、苦，具有祛痰止咳，活血消肿，解毒止痛等功效。用于咳嗽痰多、咽喉肿痛；外治跌打损伤，疗疮疖肿，蛇虫咬伤。现代研究表明，瓜子金中含有皂苷类、黄酮类物质等多种功能性成分，具有降血糖、抗炎镇静及抗肿瘤作用。瓜子金皂苷己(Polygalasaponin F)是一种从瓜子金中分离出的三萜类皂苷，分子式C53H86023，具有降血糖、抗炎镇静及抗肿瘤作用，也是衡量瓜子金药材质量的指标性成分。通过文献检索，提纯瓜子金皂苷己的方法，多采用乙醇回流提取，提取液再浓缩后上大孔树脂吸附，洗脱液减所后硅胶柱发分离或再经凝胶柱、制备液相分离制的高纯度瓜子金皂苷己。如专利(申请号200410089313.5) “瓜子金皂苷类化合物及苷元，总皂苷及总皂苷元及其在医药中的应用”和文献“瓜子金有效部位群抗炎作用机制研究”。这些方法多是操作复杂，尤其是在硅胶柱和凝胶柱分离过程，试剂用量大，样品得率低，周期较长，尤其在放大过程重现率低，对人员技术水平要求较高，导致供量小、价格高。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种瓜子金皂苷己的提纯方法，方法操作简单，效率高。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的 一种瓜子金皂苷己的提纯方法，其特征在于以下步骤
i取瓜子金药材粉碎60-80目，加入超临界萃取釜中，在萃取压力15-25MPa、温度 40-600C的条件下，通入液态C02和夹带剂超临界萃取2-3小时，在压力5_10MPa，温度 50-60°C解析萃取物，原料残渣放出加入70-90%乙醇溶液微波提取，提取液浓缩加入大孔树脂中吸附，取3-7倍量40-70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液浓缩得浸膏；
把上述浸膏采用高速逆流色谱纯化，蒸发光散射检测器检测，收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。所述的夹带剂可选甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯中一种，用量为原料的1-3倍量所述的大孔树脂可选NK-9、ADS-21和HPD417中的一种。所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水四元溶剂系统，混合比例4-10 1-3 1-2 5-10，取上相做固定相，下相做流动相。所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选乙酸乙酯、正丁醇和水三元溶剂系统，混合比例3-10:1-2:5-15，取上相做固定相，下相做流动相。本发明的技术优势有
1.方法采用了超临界C02萃取杂质，因为瓜子金皂苷己的分子量大，不易被萃取出，而小分子和低极性的物质，尤其有夹带剂的更容易被萃取出，这种除杂方式操作简便，而且周期较短。2.方法采用了高速逆流色谱法纯化，方法简便易操作，溶剂用量小，样品无损失， 制备量大，可连续制备，而且无污染。
具体实施例方式下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明。实施例1
瓜子金药材粉碎60目，取Ikg加入超临界萃取釜中，通入液态C02，设置在萃取压力 20MPa、温度50°C，达到上述参数后，调整液态C02流速为20kg/h，同时通入无水甲醇lL/h， 动态萃取3小时，在压力5MPa，温度50°C调件下解析萃取物。原料残渣放出加入20L70%乙醇溶液微波提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩加适量水稀释，加入300gNK-9大孔树脂中吸附，取3倍量70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏12g。取乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水溶剂，按比例4:1:1:5混合，充分分层后，取上相做固定注满高速逆流色谱管，转动主机800rpm，泵入下相做流动相，待动态平衡后，流速调整为 2ml/min,同时用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，蒸发光散射检测器在线检测，收集目标成分，连续制备，回收试剂，减压干燥得白色粉末瓜子金皂苷己3g，经检测，含量95. 1。实施例2:
瓜子金药材粉碎80目，取Ikg加入超临界萃取釜中，通入液态C02，设置在萃取压力 25MPa、温度50°C，达到上述参数后，调整液态C02流速为20kg/h，同时通入无水丙酮300ml/ h，动态萃取3小时，在压力8MPa，温度50°C调件下解析萃取物。原料残渣放出加入60L90% 乙醇溶液微波提取30分钟，提取3次，提取液减压浓缩加适量水稀释，加入400g ADS-21大孔树脂中吸附，取5倍量50%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏9g。取乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水溶剂，按比例5:1:1:7混合，充分分层后，取上相做固定注满高速逆流色谱管，转动主机900rpm，泵入下相做流动相，待动态平衡后，流速调整为 3ml/min,同时用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，蒸发光散射检测器在线检测，收集目标成分，连续制备，回收试剂，减压干燥得白色粉末瓜子金皂苷己3. 4g，经检测，含量98. 5%。实施例3:
瓜子金药材粉碎60目，取Ikg加入超临界萃取釜中，通入液态C02，设置在萃取压力 15MPa、温度60°C，达到上述参数后，调整液态C02流速为20kg/h，同时通入95%乙醇lL/h， 动态萃取3小时，在压力5MPa，温度60°C调件下解析萃取物。原料残渣放出加入20L70%乙醇溶液微波提取30分钟，提取2次，提取液减压浓缩加适量水稀释，加入350g HPD417大孔树脂中吸附，取7倍量40%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液减压浓缩得浸膏14g。取乙酸乙酯、正丁醇和水溶剂，按比例4:1:5混合，充分分层后，取上相做固定注满高速逆流色谱管，转动主机700rpm，泵入下相做流动相，待动态平衡后，流速调整为Iml/ min，同时用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，蒸发光散射检测器在线检测，收集目标成分，连续制备，回收试剂，减压干燥得白色粉末瓜子金皂苷己3. 7g，经检测，含量97. 5%。
权利要求
1.一种瓜子金皂苷己的提纯方法，其特征在于以下步骤i取瓜子金药材粉碎60-80目，加入超临界萃取釜中，在萃取压力15-25MPa、温度 40-600C的条件下，通入液态C02和夹带剂超临界萃取2-3小时，在压力5_10MPa，温度 50-60°C解析萃取物，原料残渣放出加入70-90%乙醇溶液微波提取，提取液浓缩后加入大孔树脂中吸附，取3-7倍量40-70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液浓缩得浸膏； 把上述浸膏采用高速逆流色谱纯化，蒸发光散射检测器检测，收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。
2.根据权利要求1所述的瓜子金皂苷己的提纯方法，其特征在于步骤i中所述的夹带剂可选甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯中一种，用量为原料的1-3倍量。
3.根据权利要求1所述的瓜子金皂苷己的提纯方法，其特征在于步骤i中所述的大孔树脂可选NK-9、ADS-21和HPD417中的一种。
4.根据权利要求1所述的瓜子金皂苷己的提纯方法，其特征在于步骤ii中所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水四元溶剂系统，混合比例 4-10 1-3 1-2 5-10，取上相做固定相，下相做流动相。
5.根据权利要求1所述的瓜子金皂苷己的提纯方法，其特征在于步骤ii中所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选乙酸乙酯、正丁醇和水三元溶剂系统，混合比例 3-10:1-2:5-15，取上相做固定相，下相做流动相。
全文摘要
本发明公开了一种瓜子金皂苷己的提纯方法。方法步骤如下i取瓜子金药材粉碎60-80目，加入超临界萃取釜中，在萃取压力15-25MPa、温度40-60℃的条件下，通入液态CO2和夹带剂超临界萃取2-3小时，在压力5-10MPa，温度50-60℃解析萃取物，原料残渣放出加入70-90%乙醇溶液微波提取，提取液浓缩后加入大孔树脂中吸附，取3-7倍量40-70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液浓缩得浸膏；ii把上述浸膏采用高速逆流色谱纯化，蒸发光散射检测器检测，收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。采用本方法提纯瓜子金皂苷己，生产周期短，效率高，污染小，适合工业化生产。
文档编号C07H15/256GK102391350SQ20111030388
公开日2012年3月28日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日
发明者刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司