专利名称：细霉素衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新颖的细霉素(I印tomycin)衍生物及其治疗用途。更特别的，本发明涉及含有可共价结合于细胞结合剂的部分(连接基团)的新颖的细霉素衍生物，并且该相应的结合物包括通过连接体结合于所述细胞结合剂的所述细霉素衍生物。所述结合物提供能够在体内被活化和释放的治疗剂，并且以靶向的方式递送到特定细胞群。
背景技术：
已出现许多涉及用单克隆抗体-药物结合物靶向肿瘤细胞的报告{Sela etal, Immunoconjugatesj 第 189-216 页(C.Vogel,ed. 1987) ；Ghose et al，TargetedDrugs,第 1-22 页(E. Goldberg, ed. 1983) ；Diener et al,Antibody Mediated DeliverySystems,第 1-23 页(J. Rodwel1，ed. 1988) ；Pietersz et al, Antibody MediatedDelivery Systems,第 25-53 页(J. Rodwellj ed. 1988) ；Bumol et al, AntibodyMediated Delivery Systems,第 55-79 页(J.Rodwell，ed. 1988) ；G.A. Pietersz &K. Krauerj 2J. Drug Targeting，183-215 (1994) ；R. V. J. Chari, 31 Adv. Drug DeliveryRevs.，89-104 (1998) ；W. A. Blattler & R. V. J. Chari, in Anti cancer Agents, Frontiersin Cancer Chemotherapy，317-338，ACS Symposium Series 796 ；以及 I. Ojima et aleds，American Chemical Society 2001}。细胞毒药物例如甲氨蝶呤、柔红霉素、多柔比星、长春新碱、长春碱、美法仑、丝裂霉素C、苯丁酸氮芥、剌孢霉素(calicheamicin)和maytansinoids已结合于多种鼠科单克隆抗体。在某些情况下，该药物分子通过中间载体分子连接于抗体分子，该中间载体分子例如血清白蛋白{Garnett et al, 46 CancerRes. 2407-2412 (1986) ；Ohkawa et al,23 Cancer Immunol. Immunother. 81-86(1986)；Endo et al, 47 Cancer Res. 1076-1080 (1980) }、右旋糖酐{Hurwitz et al, 2 Appl.Biochem. 25-35(1980) ；Manabi et al,34 Biochem. Pharmacol. 289-291 (1985) ；Dillmanet al, 46 Cancer Res. 4886-4891 (1986)；以及 Shoval et al, 85 Proc. Natl. Acad.Sci. U.S. A. 8276-8280 (1988)}、或者聚谷氨酸{Tsukada et al, 73 J. Natl. Cane.Inst. 721-729 (1984) ；Kato et al, 27 J. Med. Chem. 1602-1607 (1984) ；Tsukada et al, 52Br. J. Cancer 111-116(1985)}。目前有大量的连接体可用于制备此类免疫结合物，包括能裂解的和不能裂解的连接体。然而，体外细胞毒试验已显示，抗体-药物结合物很少达到与游离的未结合的药物相同的细胞毒效能。这提示药物分子从结合的抗体释放的机制是非常低效的。免疫毒素领域的早期著作显示，通过单克隆抗体与催化活性蛋白毒素之间的二硫键形成的结合物比含有其它连接体的结合物更具毒性{Lambert et al，260 J. Biol. Chem. 12035-12041 (1985)；Lambert et al, Immunotoxins 175-209(A. Frankelj ed. 1988) ；Ghetie et al,48 CancerRes. 2610-2617 (1988) }0此种改善的细胞毒性要归因于高的还原型谷胱甘肽的细胞内浓度造成该抗体分子与该毒素之间二硫键的有效裂解。Maytansinoids和刺孢霉素是高细胞毒性的药物的最初实例，它们通过二硫键连接到单克隆抗体。已显示这些药物的抗体结合物在体外具有高的效能，以及在小鼠中的人肿瘤移植物模型中特别的抗肿瘤活性{R. V. J. Chari et al. , 52 Cancer Res.，127-131 (1992) ；C. Liu et al. , 93, Proc. Natl.Acad. Sci.，8618—8623 (1996) ；L. M. Hinman et al. , 53, Cancer Res.，3536-3542 (1993);以及 P. R. Hamann et al, 13, BioConjugate Chem. , 40-46 (2002)}。细霉素B
权利要求
1.制备结合物的方法，其包括使含有二硫化物或硫醇的细霉素衍生物与肽或抗体反应的步骤，所述肽或抗体用选自以下的试剂修饰N-琥珀酰亚胺基4-(2-吡啶基二硫)戊酸酯、4-琥珀酰亚胺基-氧基羰基-a -甲基-a - (2-吡啶基二硫)_甲苯、N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫)丁酸酯、琥珀酰亚胺基吡啶基-二硫丙酸酯、4-(2-吡啶基二硫)丁酸N-氢琥珀酰亚胺酯、琥珀酰亚胺基4-[N-马来酰亚胺基甲基]环己烷-I-羧酸酯，N-硫代琥珀酰亚胺基-3-(2-(5-硝基-吡啶基二硫)丁酸酯、2-亚氨基硫戊烷或S-乙酰基琥珀酸酐； 所述含有二硫化物或硫醇的细霉素衍生物为式(I)的细霉素衍生物
2.权利要求I所述的方法，其中Ra是直线或分支的C1-C2tl烷基并且R’a是H。
3.权利要求I或2所述的方法，其中R17是直线或分支的C1-C2tl烷基。
4.权利要求I或2所述的方法，其中R9是直线或分支的C1-C2tl烷基。
5.权利要求I或2所述的方法，其中T是H或SR1，其中R1表示直线或分支的C1-C2tl烷基。
6.权利要求I所述的方法，其中所述细霉素衍生物选自< (2E, 10E, 12E, 16Z, 18E) - (R)-6-羟基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氢-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九烧-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-甲基硫烧基-乙基)_酰胺；双-[(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E)-(R)-6-羟基-3，5，7，9，11，15，17-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氢-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九烷-2，10，12，16，18-五烯酸的(2-巯乙基)-酰胺]；(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E) - (R)-6-羟基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氢-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九烧-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-巯基-乙基)-酰胺；(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E) - (R)-6-羟基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氢-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九烧-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-甲基二硫烧基-乙基)_酰胺；(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E) - (R)-6-羟基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氢-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九烧-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-甲基-2-甲基二硫烧基-丙基)-酰胺；(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E)-(R)-6-羟基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氢-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九烧-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-巯基-2-甲基-丙基)-酰胺； 或者药学可接受的盐或其光学异构体、外消旋体、非对映体或对映体。
7.制备硫醚连接的结合物的方法，其包括使权利要求I至6任一项所述的含有硫醇的细霉素衍生物与抗体或细胞结合剂反应的步骤，所述抗体或细胞结合剂经以下化合物修饰N-硫代琥珀酰亚胺基-4- (5-硝基-2-吡啶基-二硫)丁酸酯、N-琥珀酰亚胺基4-(马来酰亚胺基甲基)环己烷-羧酸酯、N-琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺基甲基)_环己烷-I-羧基-(6-氨基己酸酯)、N-琥珀酰亚胺基-4-(碘乙酰基)-氨基苯甲酸酯、N-琥珀酰亚胺基碘乙酸酯、N-琥珀酰亚胺基溴乙酸酯和N-琥珀酰亚胺基3-(溴-乙酰氨基)丙酸酯。
8.抑制所选细胞群生长的治疗剂，其包含 (a)细胞毒量的与细胞结合剂连接的权利要求I至6任一项所述的细霉素衍生物，和 (b)药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
9.根据权利要求8的治疗剂，其用于治疗恶性肿瘤。
10.根据权利要求8的治疗剂，其用于治疗肺癌、乳腺癌、结肠癌、前列腺癌、肾癌、胰癌、卵巢癌、淋巴器官癌或黑素瘤。
全文摘要
公开了具有一个部分例如硫化物或二硫化物的细霉素衍生物，其可结合于细胞结合试剂例如抗体。还描述了此类细霉素衍生物结合物的治疗用途；此类结合物具有治疗用途，因为它们能以靶向的方式向特定细胞群释放细胞毒性的细霉素衍生物。
文档编号C07K1/113GK102731611SQ20121021647
公开日2012年10月17日 申请日期2007年5月23日 优先权日2006年6月9日
发明者A.康默康, H.鲍查德, R.V.J.查里 申请人:赛诺菲-安万特