专利名称：一种从茶叶中提取茶黄素和茶氨酸的方法
技术领域：
本发明属于天然产物化学的技术领域，主要涉及一种提取茶黄素和茶氨酸的方法，更加具体地说涉及一种茶叶中提取茶黄素和茶氨酸的方法。
背景技术：
茶叶是我国重要经济作物和出口创汇产品之一，主要以传统的粗加工产品为主，并且近年来茶叶粗产品供过于求，每年有十几万吨左右的低档茶积压，严重阻碍了我国茶产业的健康发展。茶叶深加工作为茶产业的新兴领域，有利于茶产业的可持续发展，并有着巨大的增值潜力和市场需求。随着茶叶深加工研究不断深入以及和医学研究的交叉和渗透，已经 证实茶叶中多种活性成分具有抗菌、抗氧化、防衰老、增免疫等保健功能，其中以茶黄素和茶氨酸优为显著。茶黄素具有比茶多酚更强的抗氧化作用，具有调节血脂、预防心血管疾病的功效，而且无毒副作用。茶黄素被誉为茶叶中“软黄金”的茶黄素有降血脂的独特功能，茶黄素不但能与肠道中的胆固醇结合减少食物中胆固醇的吸收，还能抑制人体自身胆固醇的合成。通过调节体内的生物酶系的活性、直接消除自由基、与金属离子络合、以及防止低密度脂蛋白的氧化等途径实现抗氧化作用。茶氨酸具有既不催眠，又可以解消疲劳、降低血压和提高学习记忆能力，茶氨酸是茶叶中特有的游离氨基酸，也是茶叶中含量最高的氨基酸，约占游离氨基酸总量的50%以上，占茶叶干重的1%_2%。茶氨酸为白色针状体,易溶于水。具有甜味和鲜爽味，是茶叶的滋味的组分。具有调节脑内神经传达物质的变化、镇静作用、保护神经细胞、降低血压的作用和增强抗癌药物的疗效。公开号为CN1074618的中国专利介绍了一种茶色素及其生产方法涉及一种茶萃取物及茶叶中水溶性茶成分的提取方法，具体地说，是一种从茶叶中提取的由茶褐素、茶黄素、茶红素三者构成，且三者有恒定比例的药用茶色素及其生产方法。本发明所得的茶色素中茶褐素重量含量为13 —16%，茶黄素的重量含量为I一4%，茶红素的重量含量为4一7%。茶色素的生产过程为，茶叶经煎煮取汁，碱化，浓缩，酸化，加入乙醇回流，乙醇回流液再碱化得到茶色素结晶，茶色素结晶经真空干燥，即得该茶色素。公开号为CN1285152的中国专利介绍了一种高活性茶色素及其生产方法利用鲜茶叶本身的酶系，在较佳的氧化聚合条件下，使外加的茶叶提取物——茶多酚或鲜茶叶本身榨出的渣浆汁中的茶多酚氧化聚合成以茶黄素、茶红素为主的茶色素。其生产过程为鲜茶叶捣碎后，加入缓冲溶液，可向其中加入茶叶提取物或不加，通入O2或空气，保温、搅拌，在酶促氧化聚合反应下生成以茶红素、茶黄素为主的茶色素，然后经萃取，纯化，浓缩，干燥，得到高活性茶色素。公开号为CN101565724的中国专利介绍了一种极细枝孢霉生物合成茶黄素粗提物的方法通过极细枝孢霉生物合成茶黄素粗提物的方法，获得多酚氧化酶的高产菌株极细枝孢霉，在优化的发酵培养基中于pH为4. 5-5. 3、摇床转速为110-130r/min、温度为22-25°C的条件下恒温培养该菌株合成多酚氧化酶，取得多酚氧化酶粗酶液，并通入氧气进行体外模拟氧化儿茶素40-50分钟制备茶黄素。公开号为CN101190909的中国专利介绍了一种制备四种茶黄素单体的方法将茶黄素提取物溶液缓慢通过装有聚酰胺材料的层析柱；用洗脱溶剂对层析柱进行洗脱，依次收集分别含茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素_3’ -没食子酸酯和茶黄素双没食子酸酯单体的四种洗脱液，所述的洗脱溶剂为由酯或酮、醇和有机酸组成的混合溶剂；将四种洗脱液分别浓缩，采用弱碱性水溶液分别将四种浓缩液的PH值调至中性后，用有机溶剂萃取得萃取液，干燥萃取液得茶黄素的四种单体。公开号为CN101250566的中国专利介绍了一种极细枝孢霉生物合成茶黄素粗提物的方法通过极细枝孢霉生物合成茶黄素粗提物的方法，通过对大量微生物进行筛选，获得多酚氧化酶的高产菌株极细枝孢霉，在优化的发酵培养基中于PH为4. 5-5. 3、摇床转速 为110-130r/min、温度为22_25°C的条件下恒温培养该菌株合成多酚氧化酶，取得多酚氧化酶粗酶液，并通入氧气进行体外模拟氧化儿茶素40-50分钟制备茶黄素。公开号为CN1626668的中国专利介绍了一种生产茶色素的方法将鲜茶叶捣碎成渣和汁，加入市场购买的酶后，然后加到茶多酚与有机溶剂的混合溶液中，再加入酸性水溶液，搅拌通风反应，在酶促氧化聚合反应下生成以茶黄素、茶红素为主的茶色素，然后经分离、纯化、浓缩、干燥得到茶色素。公开号为CN1699358的中国专利介绍了一种茶黄素提取方法将鲜茶叶经揉捻后加水磨浆，然后进行发酵氧化得到含有茶黄素的溶液，通过离心除渣得到离心液，离心液经陶瓷膜超滤后所得滤液采用溶剂萃取法或膜分离法进行处理得到茶黄素。公开号为CN1729807的中国专利介绍了一种高茶黄素、茶红素工夫红茶的制备方法一种高茶黄素、茶红素工夫红茶的制备方法，以一芽二叶或者一芽二、三叶鲜叶为原料，其制备方法包括选择、萎凋、冰冻处理、揉捻、解块分级、发酵和烘干。公开号为CN1826921的中国专利介绍了一种微生物液态发酵生产茶色素的方法将茶粉碎至60-80目，按I-IOg 100-200ml加入蒸馏水，在121°C的温度下灭菌10分钟，再按O. I克/IOOml蒸馏水计接种微生物；进行摇床发酵，发酵温度为20-35°C，摇床转速为110r/min，培养时间15天；吸取IOOml发酵液，加入IOOml醋酸乙酯，在500ml的分液漏斗中振荡10分钟分层后，将上层的醋酸乙酯和下层的水层分别置于200ml三角瓶中；吸取醋酸乙酯萃取液50ml，加入2. 5% NaHCO3水溶液50ml，在转速为300r/min下振荡30秒，分层后，将醋酸乙酯层蒸干即为茶黄素；将水层蒸干，得到茶红素；吸取50ml澄清的发酵液和50ml正丁醇放入分液漏斗中，摇振5分钟，取下层浓缩蒸干后即为茶褐素。公开号为CN1989851的中国专利介绍了一种食品级高纯度茶色素生产方法以儿茶素为主体的多酚类物质为原料，以独特而严格的工艺要求和国家及行业相关法规、标准为产品质量标准依据。采用氧化聚合缩合技术，按照优化的生产工艺和加工方法，生产食品级高纯度达标茶色素。公开号为CN101081844的中国专利介绍了一种大批量分离制备高纯度茶黄素单体的方法采用了凝胶柱层析和高速逆流色谱相结合的方法，将凝胶色谱柱层析制备量大的特点和高速逆流色谱分离效率高的特点结合起来，二者优势互补，实现了红茶提取物中四种主要的茶黄素单体茶黄素(TF)、茶黄素-3-没食子酸酯(TF-3-MG)、茶黄素-3'-没食子酸酯(TF-3, -MG)、茶黄素-3，3'-双没食子酸酯(TFDG)高纯度分离制备。该方法可用于从茶黄素粗提物中分离制备十克至几十克高纯度的茶黄素单体，单体纯度可达97%以上。公开号为CN102226211A的中国专利介绍了一种固定化多酚氧化酶动态连续氧化制备茶黄素的方法以茶多酚为底物，固定化多酚氧化酶为催化媒介，控制反应温度，在填充床反应器上实现底物与氧气连续进入，完成茶多酚的氧化、聚合形成茶黄素类物质并由恒流泵连续泵出。公开号为CN102286565A的中国专利介绍了一种茶黄素单体的制备方法以茶多酚为原料，由灵芝真菌通过液体发酵培养得到的含有漆酶的粗酶液以I : 20-30的体积比加入质量百分浓度1-3%茶多酚乙酸乙酯溶液中，以空气作为催化氧化的氧气来源，30-60°C水浴振荡10-40min，然后超声振荡l_2min，反应结束后旋转蒸发乙酸乙酯，加入萃取剂4-甲基-2-戊酮得到萃取液，脱去萃取剂得到茶黄素单体TF-3-G。
发明者李兰岚, 李光锋, 代洪波, 黄生有 申请人:向华