专利名称：一种栉山香内酯提取物的制备方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，具体地说，是涉及一种栉山香内酯提取物的制备方法。
背景技术：
栉山香内酯为δ -内酯类化合物，主要从唇形科植物栉山香Hyptispectinuta (L.) Poit.地上部分分离得到，包括栉山香内酯A、栉山香内酯B和栉山香内酯C，这三种单体成分均具有一定的抗菌作用，对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的MIC ( μ g/ml)分别为12. 5和6. 25、100和25、100和12. 5，另外这三种化合物还具有细胞毒活性，对多种肿瘤细胞的ED5tl均< 4 μ g/ml ο通过文献检索，国内尚未见从栉山香地上部分制备栉山香内酯提取物的方法报 道。
发明内容
本发明的目的是提供一种栉山香内酯提取物的制备方法，该方法具有工艺简单、提率高、安全等优点。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的
a.取栉山香地上部分粉碎，加入超临界萃取釜中，乙酸乙酯为夹带剂，在萃取压力21-28MPa、温度44-56 °C的条件下，通入液态CO2萃取60_180min，在压力7-10MPa，温度28-40°C条件下解析得萃取物；
b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱，收集含有栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩、低温干燥，得栉山香内酯提取物。步骤a中所述CO2流量为2. 5-4. 0ml/g生药/min，夹带剂用量为总萃取溶剂的10-16%。步骤b中所述中性氧化镁为200-300目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5_7bar，柱径高比为1:10-12，石油醚-甲醇体积比为20:1-1:1。本发明的有益效果是
1.采用超临界CO2萃取，高效无溶剂残留，对环境无污染；
2.采用氧化镁中低压柱层析纯化，操作简单，分离效果好。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明。实施例I :
将栉山香地上部分粉碎，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力21. 2MPa、温度44°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为3. 5ml/g生药/min，乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的12%，动态萃取90min，在压力8MPa、温度30°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱(柱压为5bar，柱径高比为1:12)，按石油醚-甲醇体积比20:1、10:1、5:1、3:1、I: I混合溶剂梯度洗脱，收集含栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩成相对密度I. 25的稠膏，低温干燥，即得到含内酯73%的栉山香内酯提取物。实施例2:
将栉山香地上部分粉碎，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力
24.5MPa、温度48°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为3. 2ml/g生药/min，乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的10%，动态萃取60min，在压力7MPa、温度28°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱(柱压为7bar，柱径高比为1:10)，按石油醚-甲醇体积比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶剂梯度洗脱，收集含栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩成相对密度I. 23的稠膏，低温干燥，即得到 含内酯75%的栉山香内酯提取物。实施例3:
将栉山香地上部分粉碎，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力26. 8MPa、温度50°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为3. 0ml/g生药/min，乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的14%，动态萃取120min，在压力8MPa、温度36°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱(柱压为6bar，柱径高比为1:11)，按石油醚-甲醇体积比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶剂梯度洗脱，收集含栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩成相对密度I. 22的稠膏，低温干燥，即得到含内酯76%的栉山香内酯提取物。实施例4:
将栉山香地上部分粉碎，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力28. OMPa、温度46°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为2. 5ml/g生药/min，乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的16%，动态萃取lOOmin，在压力lOMPa、温度32°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱(柱压为7bar，柱径高比为1:12)，按石油醚-甲醇体积比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶剂梯度洗脱，收集含栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩成相对密度I. 26的稠膏，低温干燥，即得到含内酯81%的栉山香内酯提取物。实施例5
将栉山香地上部分粉碎，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力22. 6MPa、温度52°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为2. 8ml/g生药/min，乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的13%，动态萃取180min，在压力9MPa、温度40°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱(柱压为5bar，柱径高比为1:10)，按石油醚-甲醇体积比20:1、10:1、5:1、3:1、I: I混合溶剂梯度洗脱，收集含栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩成相对密度I. 18的稠膏，低温干燥，即得到含内酯68%的栉山香内酯提取物。实施例6:
将栉山香地上部分粉碎，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力
25.7MPa、温度56°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为4. Oml/g生药/min，乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的12%，动态萃取70min，在压力7MPa、温度31°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱(柱压为6bar，柱径高比为1:10)，按石油醚-甲醇体积比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶剂梯度洗脱，收集含栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩成相对密度I. 20的稠膏，低温干燥，即得到含内酯72%的栉山香内酯提取物。实施例7:
将栉山香地上部分粉碎，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力27. IMPa、温度54°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为3. 8ml/g生药/min，乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的16%，动态萃取140min，在压力lOMPa、温度35°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱(柱压为7bar，柱径高比为1:12)，按石油醚-甲醇体积比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶剂梯度洗脱，收集含栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩成相对密度1.21的稠膏，低温干燥，即得到含内酯74%的栉山香内酯提取物。·实施例8:
将栉山香地上部分粉碎，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2,设置萃取压力23. 3MPa、温度45°C，达到上述参数后，调整液态CO2流量为3. Oml/g生药/min，乙酸乙酯为夹带剂，夹带剂用量为总萃取溶剂的10%，动态萃取160min，在压力9MPa、温度38°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱(柱压为5bar，柱径高比为1:11)，按石油醚-甲醇体积比20: I、10: 1、5: 1、3: I、I: I混合溶剂梯度洗脱，收集含栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩成相对密度I. 24的稠膏，低温干燥，即得到含内酯78%的栉山香内酯提取物。
权利要求
1.一种栉山香内酯提取物的制备方法，其特征在于以下步骤 a.取栉山香地上部分粉碎，加入超临界萃取釜中，乙酸乙酯为夹带剂，在萃取压力21-28MPa、温度44-56 °C的条件下，通入液态CO2萃取60_180min，在压力7-10MPa，温度28-40°C条件下解析得萃取物； b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化镁拌样，挥干溶剂，干法上氧化镁柱，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱，收集含有栉山香内酯的高浓度流分，减压浓缩、低温干燥，得栉山香内酯提取物。
2.根据权利要求I所述栉山香内酯提取物的制备方法，其特征在于步骤a中所述CO2流量为2. 5-4. 0ml/g生药/min，夹带剂用量为总萃取溶剂的10_16%。
3.根据权利要求I所述栉山香内酯提取物的制备方法，其特征在于步骤b中所述中性氧化镁为200-300目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5-7bar，柱径高比为1:10-12，石油醚-甲醇体积比为20:1-1: I。
全文摘要
本发明公开了一种栉山香内酯提取物的制备方法。方法步骤如下a.取栉山香地上部分粉碎，加入超临界萃取釜中，乙酸乙酯为夹带剂进行超临界CO2萃取；b.萃取物采用中性氧化镁柱层析进行纯化，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液减压浓缩、低温干燥得栉山香内酯提取物。采用本发明制备栉山香内酯提取物，工艺简单、效率高，所得产品含量高，适合工业化生产。
文档编号C07D309/32GK102850312SQ20121036315
公开日2013年1月2日 申请日期2012年9月26日 优先权日2012年9月26日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司