一种从木香中提取总内酯的方法及其质量控制方法

专利名称：一种从木香中提取总内酯的方法及其质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种从中药木香中提取用于治疗胃运动障碍的木香总内酯的制 备方法，以及用该方法制得的提取物的质量控制方法。属医药技术领域。
背录技术
胃动力障碍是临床常见病、多发病。在我国，随着社会发展，环境变迁， 人口结构以及人们生活方式的改变，主要因吸烟、饮酒、情绪紧张、药物刺激 等引起的胃病发病率逐渐增高。另一方面由社会压力，工作原因而产生的食无 定时，食无规律等引起的胃部不适和胃动力问题也在不断的增长中。
长期以来，治疗胃动力障碍的药物一直由化学药唱主角，而化学药的副作 用则是医药界的难题。目前临床常用的药物有四个灭吐灵、吗丁啉、西沙比 立和红霉素，但因为他们的临床副作用，均不能作为胃动力药首选。中医药治 疗"反酸"、"嘈杂"、"胃痞"、"胸痹"等疾病已经有几千年的历史并积累了丰 富的经验。实践证明中医药对胃动力障碍等病症是卓有疗效而且安全经济的， 复发率也低于西医药。影响胃肠运动的中药，大多属于中医传统分类法的理气 药， 一般分成三类，胃肠动力促进、胃肠动力抑制以及对胃肠动力有双向或多 向调节作用三大类。木香属于第三类，对胃肠动力有双向调节作用。
木香为菊科植物木香Aucklandia lappa Decne的干燥根。是治疗胃肠疾病 的常用药，神农本草经列为上品。木香烃内酯和去氢木香内酯是木香挥发油的 主要成分，它们具有松弛平滑肌和解痉作用，为木香的主要活性成分，也为木 香质量控制的主要指标。 木香总内酯是从中药木香中提取得到的内酯类成分，其中的主要成分为木 香烃内酯和去氢木香内酯等挥发油。
目前挥发油的提取方法比较多，水提工艺收率较低；醇提工艺会导致挥发 油及有效成分损失较大，而且容易引入杂质；微波萃取法和超声波提取法目前 仅限于实验室小规模操作，不适用于大生产。本发明采用的C02超临界萃取技术 萃取速度快，没有残留的有机溶剂，流程简单，操作方便等诸多优点。

发明内容
本发明的目的是提供一种采用co2超临界萃取技术从木香中提取总内酯的
方法及其质量控制方法。
本发明提供的采用co2超临界萃取技术从木香中提取总内酯的方法包括如
下步骤
(a) 木香药材的前处理；
(b) 采用C02超临界萃取技术从木香中提取总内酯；萃取出棕红色或棕黄色 半透明的油状物，低温(4°C)放置有大量晶体物质析出；
(C)分离取出提取物，离心除去水分，得产物木香总内酯；计算提取率， 并测定木香总内酯中总内酯的含量；
步骤(a)木香药材的前处理优选采用如下方法-
取木香药材，在40 45。C下干燥6小时，粉碎成粗粉。
步骤(b)采用C02超临界萃取技术从木香中提取总内酯采用如下方法
步骤(b)将木香药材粗粉装入C02超临界萃取罐中，以压力为10 25Mpa，
温度为25 40。C的条件进行萃取2 4小时，以压力为5-6Mpa，温度为35-40
'C进行解析。
步骤(b)最优选技术方案为在萃取压力为20Mpa、温度为3(TC条件下进行 萃取2小时；在压力为6Mpa，温度为35"C条件下进行解析。
木香药材可选用木香根部。
治疗有效量的本发明木香总内酯产物，加入药学上可接受的载体，可制备 成任何一种剂型。
本发明的木香总内酯产物可用于治疗或预防胃运动障碍，行气止痛，健脾 消食，有很好的治疗效果。
本发明解决了传统提取工艺中操作温度较高，热敏性物质易氧化逸散，而 高沸点物质不易完全提出，收率下低等缺点。采用高效液相色谱法对木香总内 酯的有效成分进行测定，本发明提取物中，去氢木香内酯含量高于20%;木香 烃内酯与去氢木香内酯含量之和高于50%。
本发明还提供了该方法制得的提取物的质量控制方法。具体如下-本品为棕红色或棕黄色油状液体或棕红色或棕黄色油状液体内 有悬浮性结晶颗粒。气香特异，味苦。在水、甲醇、乙醇中不溶，在乙酸乙酯 中略溶，在丙酮、氯仿、乙醚中极易溶。精密称取本品约30mg，置10ml量瓶中，加乙醚使溶解，加乙醚至 刻度，摇匀，作为供试品溶液。另称取木香药材10g，用20ml乙醚浸泡40分钟, 过滤，取滤液挥干，加5ml乙醚溶解，作为对照品溶液(1)。另精密称取木香 烃内酯对照品5mg和去氢木香内酯对照品约5mg，置5ml量瓶中，加乙酸乙酯 0. 5ml使溶解，再加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液(2)。照薄层色谱法(中 国药典2005年版一部附录VIB)吸取上述溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基 纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-环己垸(5:1)为展开剂，展开，
取出，晾干，喷以线香草醛浓硫酸，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在 与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性用十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂，甲醇一水 (75:25)为流动相；检测波长为225nm。理论板数按去氢木香内酯峰计不低于 4000。
对照品溶液的制备精密称取木香烃内酯对照品(购自中国药品生物制品 检定所)约10mg和去氢木香内酯对照品(购自中国药品生物制品检定所)约10mg， 分别置100ml量瓶中，加乙酸乙酯3ml使溶解，加甲醇至刻度，摇匀；分别精 密量取上述木香烃内酯溶液3ml，去氢木香内酯溶液5ml，置10ml量瓶中，加 甲醇至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备精密称取本品约100mg，置100ml量瓶中，加乙酸乙酯 20ml使溶解，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml，置25ml量瓶 中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各IOW，注入液相色谱仪， 记录峰面积，按外标法，以峰面积计算，即得。
本品含去氢木香内酯(C15H2。02)不得少于20%。含木香烃内酯与去氢木香内 酯之和为木香总内酯，不得少于50%。
具体实施例方式
药材来源药材购自沈阳市药材采购供应站，其原植物为菊样植物木香 Auchlandia lappa Dence.的干燥根，产于云南、四川等省。
药材的准备称取药材40 45"C干燥6小时，粉碎成粗粉备用。
实施例l:
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为25°C，萃取压力为10Mpa， C02流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为5Mpa，温度为35'C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.32%，总内酯量为60.2%，去氢木香内酯含 量为31.9%。
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为35°C，萃取压力为10Mpa， C02流速为21 25L/h条件下，连续萃取4小时，在压力为6Mpa，温度为4(TC条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为2.86%，总内酯量为58.1%。，去氢木香内酯 含量为30.8%。
实施例3:
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为40°C，萃取压力为25Mpa， 0)2流速为21 25L/h条件下，连续萃取3小时，在压力为6Mpa，温度为4(TC条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为2.60%，总内酯量为54.2%，去氢木香内酯含 量为28. 7%。
实施例4:
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为25°C，萃取压力为15Mpa， 0)2流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35'C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分, 得到产物木香总内酯。提取率为3.61%，总内酯量为72.6%，去氢木香内酯含 量为38. 5%。
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为3CTC，萃取压力为25Mpa， (]02流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35。C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.45%，总内酯量为71.2%，去氢木香内酯含 量为37. 8%。
实施例6:
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为40°C，萃取压力为15Mpa， CU流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35'C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.30%，总内酯量为66.5%，去氢木香内酯含 量为35. 2%。
实施例7:取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为20°C，萃取压力为25Mpa， 0)2流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35。C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.74%，总内酯量为76.2%，去氢木香内酯含 量为40. 3%。
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为35°C，萃取压力为20Mpa， 〔02流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35。C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.60%，总内酯量为74.3%，去氢木香内酯含 量为39. 3%。
实施例9:
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为40°C，萃取压力为20Mpa， 0)2流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa,温度为35。C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.41%，总内酯量为68.1%，去氢木香内酯含 量为36. 1%。
实施例10:
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取
器、分离器压力，温度，在萃取温度为30°C，萃取压力为20Mpa， 0)2流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35"C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.85%，总内酯量为79.2%，去氢木香内酯含 量为42. 0%。
实施例11:
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为35°C，萃取压力为25Mpa， C02流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35'C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.73%，总内酯量为76.2%，去氢木香内酯含 量为40. 4%。
实施例12:
取木香药材粗粉500g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为30°C，萃取压力为23Mpa， 0)2流速为21 25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35。C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.65%，总内酯量为70.2%，去氢木香内酯含 量为37. 2%。
实施例13:
取木香药材粗粉150g置于提取仪中，用C02排除萃取器中空气，调节萃取 器、分离器压力，温度，在萃取温度为3CTC，萃取压力为20Mpa, 032流速为21
25L/h条件下，连续萃取2小时，在压力为6Mpa，温度为35"C条件下解析，萃 取出棕红色或棕黄色半透明的油状物，从分离器中取出提取物，离心除去水分， 得到产物木香总内酯。提取率为3.86%,总内酯量为79.5%，去氢木香内酯含 量为42. 1%。
注提取率=木香总内酯重量/木香粗粉重量
所用提取仪为江苏南通华安超临界萃取设备有限公司生产的型号为 HA221-50-60萃取罐，主要技术指标最高萃取压力50Mpa;萃取
罐容积5L， 1L;萃取温度常温—75度；最大流量50L/h，可调。
以上实施例，仅以说明为目的，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神 和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护 范围之内。
权利要求
1、一种采用CO2超临界萃取技术从木香中提取总内酯的方法，其特征在于包括如下步骤(b)采用CO2超临界萃取技术从木香中提取总内酯。
2、 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(b)中，萃取压力为 10 25Mpa，温度为25 40。C。
3、 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述步骤(b)中，解析压 力为5-6Mpa，解析温度为35°C-40°C。
4、 根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述步骤(b)中，萃取时间为 2-4小时。
5、 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述步骤(b)为在萃取 压力为20Mpa、温度为30。C条件下进行萃取2小时；在压力为6Mpa，温度为35 "C条件下进行解析。
6、 根据权利要求5所述的方法，其特征在于步骤(b)之前还包括如下步骤 (a)木香药材的前处理取木香药材，在40 45'C下干燥6小时，粉碎成粗 粉。
7、 根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述木香药材为木香根部。
8、 根据权利要求6所述的方法，其特征在于步骤(b)之后还包括如下步骤: (c)分离取出提取物，离心除去水分，得产物木香总内酯。
9、 根据权利要求8所述的方法，其特征在于步骤(c)的产物中，本香总内 酯含量在50%以上。
10、 根据权利要求9所述的方法，其特征在于步骤(c)的产物中，去氢木香 内酯含量高于20%。
11、 一种木香总内酯药物组合物，其特征在于其中含有权利要求1_10中任一项所得产物和药学上可接受的载体。
12、 权利要求1-11中任一项所得产物在制备治疗或预防胃运动障碍的药物 中的应用。
13、 一种C02超临界萃取技术从木香中提取总内酯的质量控制方法，包括 本品为菊科植物木香Aucklandia Lappa Decne.的干燥根经二氧化碳超临界提取得到的油状液体；性状本品为棕红色或棕黄色油状液体或棕红色或棕黄色油状液体内有悬 浮性结晶颗粒；气香特异，味苦；在水、甲醇、乙醇中不溶，在乙酸乙酯中略 溶，在丙酮、氯仿、乙醚中极易溶；鉴别精密称取本品约30mg，置10ml量瓶中，加乙醚使溶解，加乙醚至刻 度，摇匀，作为供试品溶液。另称取木香药材10g，用20ml乙醚浸泡40分钟， 过滤，取滤液挥干，加5ml乙醚溶解，作为对照品溶液l;另精密称取木香烃内 酯对照品5mg和去氢木香内酯对照品约5mg，置5ml量瓶中，加乙酸乙酯0.5ml 使溶解，再加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液2;照中国药典2005年版一 部附录VIB中的薄层色谱法吸取上述溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维 素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以5:1的氯仿-环己烷为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以1%香草醛浓硫酸，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照中国药典2005年版一部附录VI D的高效液相色谱法测定;色谱条件与系统适用性用十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂，甲醇一水 (75:25)为流动相；检测波长为225nm。理论板数按去氢木香内酯峰计不低于 4000;对照品溶液的制备精密称取木香烃内酯对照品约10mg和去氢木香内酯 对照品约10mg，分别置100ml量瓶中，加乙酸乙酯3ml使溶解，加甲醇至刻度， 摇匀；分别精密量取上述木香烃内酯溶液3ml，去氢木香内酯溶液5ml，置10ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备精密称取本品约100mg，置100ml量瓶中，加乙酸乙酯 20ml使溶解，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml，置25ml量瓶 中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10W，注入液相色谱仪， 记录峰面积，按外标法，以峰面积计算，即得；本品含去氢木香内酯(C,5H2。02)不得少于20%;含木香烃内酯与去氢木香内 酯之和为木香总内酯，不得少于50%。
全文摘要
本发明提供了一种采用CO₂超临界萃取技术从木香中提取总内酯的方法及其质量控制方法。本发明中采用的萃取压力为10～25MPa，温度25～40℃，时间为2～4小时，在压力为5-6MPa，温度为35-40℃下解析。本发明解决了传统提取工艺中操作温度较高，热敏性物质易氧化逸散，而高沸点物质不易完全提出，收率下低等缺点。本发明提取物中，去氢木香内酯含量高于20％；木香烃内酯与去氢木香内酯含量之和高于50％。
文档编号A61P1/14GK101357151SQ20081014640
公开日2009年2月4日 申请日期2008年8月28日 优先权日2008年8月28日
发明者星 唐, 李明海, 兰 田, 赵立新, 马海波, 高子彬 申请人:李明海