专利名称：一种鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法
技术领域：
本发明属于天然有机化学领域，涉及一种金丝桃苷的生产方法，特别是涉及一种利用逆流提取联合溶剂萃取大孔树脂吸附分离纯化鹿蹄草中金丝桃苷的生产方法。
背景技术：
鹿蹄草Pyrola rotundifolia ssp. chinensis,别名鹿寿草、破血丹、鹿含草、六衔草，为鹿蹄草科鹿蹄草属植物。鹿蹄草含N-苯基-2-萘胺(N-phenyl-2-naphthylam-1ne)， 伞形梅笠草素(chimaphilin),高熊果酹式(homoarbutin),没食子酸(gallicacid),原儿茶酸(protocatechuicacid),鹿蹄草素,槲皮素(quercetin),没食子鞋质(galIotannin), 肾叶鹿蹄草式(renifolin) ,6-0-没食子酰高熊果酹式(6-0-galIoylhomoarbutin),金丝桃式(hyperin),没食子酰金丝桃式(galloylhyperin)。具有补虚,益肾,祛风除湿,活血调经，治虚弱咳嗽，劳伤吐血，风湿关节痛，崩漏，白带，外伤出血等功能。
金丝桃苷金丝桃苷，又名槲皮素-3-0- β -D-吡喃半乳糖苷。属于黄酮醇苷类化合物。苷元为槲皮素，糖基为吡喃半乳糖，由槲皮素的3位O原子以β糖苷键与糖基相连。金丝桃苷分布广泛，具有抗炎、解痉、利尿、止咳、降压、降低胆固醇、蛋白同化、局部和中枢镇疼以及对心、脑血管的保护作用等多种生理活性，是一种重要的天然产物。近年来，人们发现天然植物鹿蹄草中含有大量的金丝桃苷，由于其原料鹿蹄草来源较广，从中提取金丝桃苷已取得了可喜进展，名称为“从鹿蹄草中分离纯化高熊果酚苷、金丝桃苷的方法”的专利申请中便公开了分离纯化高熊果酚苷、金丝桃苷的方法。上述专利文献中的金丝桃苷提取工艺主要是经过萃取、大孔树脂吸附、离子交换树脂吸附等步骤精制而成，虽然最后的金丝桃苷纯度很高，但其工艺本身耗费大，实际应用效果远远不如逆流提取联合溶剂萃取大孔树脂吸附分离的效果。发明内容
本发明目的在于提供一种鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法；本发明目的还在于提供一种方便快捷、原料来源丰富、提取效率高、分离纯化效果明显、提取纯度高的利用连续逆流提取联合溶剂萃取富集纯化金丝桃苷的生产工艺。
本发明目的是通过如下技术方案实现的。
一种鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法，其步骤如下
(I)将鹿蹄草粉碎成粗粉后加入连续逆流提取罐用丙酮水溶液回流提取；
(2)将经(I)处理的提取液过滤，得金丝桃苷粗提液；
(3)将所得金丝桃苷粗提液浓缩，得金丝桃苷粗浓缩液；
(4)将所得金丝桃苷粗浓缩液泵入连续萃取灌组物料罐，萃取溶剂为乙酸乙酯，经由萃取塔得金丝桃苷乙酸乙酯萃取液；
(5)将金丝桃苷乙酸乙酯萃取液浓缩，得金丝桃苷浓缩膏；
(6)将金丝桃苷浓缩膏拌硅胶，并将拌好的混合物至于硅胶柱上方，经乙酸乙酯和石油醚混合液洗脱，得洗脱液；
(7)将洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得金丝桃苷半成品；
(8)将金丝桃苷半成品用丙酮水溶液溶解，过滤，回收丙酮，浓缩，放置析出晶体， 抽滤得金丝桃苷成品。
所述步骤(I)中，鹿蹄草粉后过30 80目筛再进行丙酮水溶液回流提取。提取溶剂为70% 85%的丙酮水溶液。
所述步骤(I)中，提取的设备为逆流提取生产线，包括提升机、进料传送、逆流提取罐组主机1、掏料器1、挤汁机1、逆流提取罐组主机2、掏料器2、挤汁机2、出料传送、中间泵、出液泵、暂存罐、换热器、进液阀门等。粉碎过筛后原料由提升机加料口处匀速加入，提取液自流至暂储罐经由出液泵连续泵出。
所述步骤(I)中，逆流生产线参数为，提升机频率20 25Hz，主机I频率16 18Hz，挤汁机I频率45 50Hz，主机2频率20 22Hz，挤汁机2频率40 45Hz，出液泵流量 O. 2 O. 6T/h,进料 50 200kg/h。
所述步骤(4)中，萃取步骤由连续萃取罐组完成，包括溶剂罐、物料罐、重液罐、轻液罐、残液罐、萃取塔、流量计、物料泵等。
所述步骤(4)中，连续萃取罐组参数为，溶剂泵流量I 3L/min，物料泵流量O.4 lL/min。
所述步骤￠)中，硅胶层析步骤采用湿法装柱，保留液面，将浓缩膏按重量1:1 拌活化后硅胶，并将拌好的混合物置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯石油醚体积比为 50 85 15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟O. 4ml/g硅胶，洗脱体积为3BV。 硅胶活化条件为，IlO0C 30min。
所述的步骤(8)中，金丝桃苷半成品用10 30倍量50%丙酮水溶液40°C热溶。 浓缩密度为d =1. 03 1. 05。
本发明选用连续逆流提取生产线提取，原料经粗粉碎后从投料斗投入，提取罐组主机旋转，将物料从机组前端向后缓慢推进，同时提取溶剂从机组末端的进液管进入提取 te内，由te后端芽过移动的物料向如端流动，固液两相物质在这种逆向运动中充分接触，从而将药材中有效成分提取出来。药渣经出料传送器强制推动至出渣口而排出，专门的挤汁机对药渣进行挤压，将药渣申残留药液挤出药材组织，减少 药渣申残留药液含量。提取效率更高、提取更完全。
本发明同时选用连续萃取罐组萃取并结合硅胶柱层析法纯化，分离效果更佳。
具体实施例方式
实施例1 :
称取鹿蹄草500kg，粉碎成粗粉后过40目筛，由提升机加料口以50kg/h的速度匀速加入，75%丙酮水溶液用管道泵以200kg/h的流量由进液管加入，提升机频率设定为 20Hz，主机I频率设定为16Hz，挤汁机I频率设定为50Hz，主机2频率设定为22Hz，挤汁机 2频率设定为45Hz，得金丝桃苷粗提液2T ;金丝桃苷粗提液自流至暂储罐经由出液泵连续泵至浓缩罐浓缩，得金丝桃苷粗浓缩液200L ;调节物料泵阀门，使金丝桃苷粗浓缩液以IL/ min进入萃取塔，调剂溶剂泵阀门，使乙酸乙酯以3L/min进入萃取塔，得金丝桃苷乙酸乙酯萃取液600L ;浓缩得金丝桃苷浓缩膏18kg ;金丝桃苷浓缩膏拌18kg活化娃胶,置于娃胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯石油醚体积比为85 15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟O. lml/g硅胶，得洗脱液90kg ;洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得金丝桃苷半成品15kg ； 金丝桃苷半成品用450L50%丙酮水溶液40°C热溶，过滤，回收乙醇，浓缩至d =1. 05，放置析出晶体，抽滤得金丝桃苷成品3kg，含量98. 5%。
实施例2
称取鹿蹄草1. 4T，粉碎成粗粉后过80目筛，由提升机加料口以200kg/h的速度匀速加入，75%丙酮水溶液用管道泵以600kg/h的流量由进液管加入，提升机频率设定为 25Hz，主机I频率设定为18Hz，挤汁机I频率设定为45Hz，主机2频率设定为20Hz，挤汁机 2频率设定为40Hz，得金丝桃苷粗提液4. 2T ;金丝桃苷粗提液自流至暂储罐经由出液泵连续泵至浓缩罐浓缩，得金丝桃苷粗浓缩液400L ;调节物料泵阀门，使金丝桃苷粗浓缩液以0.5L/min进入萃取塔，调剂溶剂泵阀门，使乙酸乙酯以2L/min进入萃取塔，得金丝桃苷乙酸乙酯萃取液1. 2T ;浓缩得金丝桃苷浓缩膏54kg ;金丝桃苷浓缩膏拌54kg活化硅胶，置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯石油醚体积比为70 15的乙酸乙酯与石油醚混合物， 洗脱流速每分钟O. lml/g硅胶，得洗脱液270kg ;洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得金丝桃苷半成品45kg ;金丝桃苷半成品用900L50%丙酮水溶液40°C热溶，过滤，回收乙醇，浓缩至d =1.05，放置析出晶体，抽滤得金丝桃苷成品5kg，含量96. 5%。
实施例3
称取鹿蹄草800kg，粉碎成粗粉后过60目筛，由提升机加料口以80kg/h的速度匀速加入，80%丙酮水溶液用管道泵以250kg/h的流量由进液管加入，提升机频率设定为 22Hz，主机I频率设定为18Hz，挤汁机I频率设定为50Hz，主机2频率设定为22Hz，挤汁机 2频率设定为45Hz，得金丝桃苷粗提液2. 5T ;金丝桃苷粗提液自流至暂储罐经由出液泵连续泵至浓缩罐浓缩，得金丝桃苷粗浓缩液250L;调节物料泵阀门，使金丝桃苷粗浓缩液以0.8L/min进入萃取塔，调剂溶剂泵阀门，使乙酸乙酯以2. 4L/min进入萃取塔，得金丝桃苷乙酸乙酯萃取液750L ;浓缩得金丝桃苷浓缩膏27kg ;金丝桃苷浓缩膏拌27kg活化硅胶，置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯石油醚体积比为65 15的乙酸乙酯与石油醚混合物， 洗脱流速每分钟O. lml/g硅胶，得洗脱液135kg ;洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得金丝桃苷半成品19kg ;金丝桃苷半成品用570L50%丙酮水溶液40°C热溶，过滤，回收乙醇，浓缩至d =1.03，放置析出晶体，抽滤得金丝桃苷成品4. 8kg，含量97. 5%。
权利要求
1.一种鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法，其特征在于该方法包括如下步骤(1)将鹿蹄草粉碎成粗粉后加入连续逆流提取罐用丙酮水溶液回流提取；(2)将经(I)处理的提取液过滤，得金丝桃苷粗提液；(3)将所得金丝桃苷粗提液浓缩，得金丝桃苷粗浓缩液；(4)将所得金丝桃苷粗浓缩液泵入连续萃取灌组物料罐，萃取溶剂为乙酸乙酯，经由萃取塔得金丝桃苷乙酸乙酯萃取液；(5)将金丝桃苷乙酸乙酯萃取液浓缩，得金丝桃苷浓缩膏；(6)将金丝桃苷浓缩膏拌硅胶，并将拌好的混合物至于硅胶柱上方，经乙酸乙酯和石油醚混合液洗脱，得洗脱液；(7)将洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得金丝桃苷半成品；(8)将金丝桃苷半成品用丙酮水溶液溶解，过滤，回收丙酮，浓缩，放置析出晶体，抽滤得金丝桃苷成品。
2.根据权利要求1所述的鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法其特征在于所述的步骤(I)中，鹿蹄草粉后过30 60目筛再进行丙酮水溶液回流提取，提取溶剂为50% 85%的丙酮水溶液。
3.根据权利要求1所述的鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法其特征在于所述的步骤(I)中，提取的设备为逆流提取生产线，包括提升机、进料传送、逆流提取罐组主机1、掏料器1、挤汁机1、逆流提取罐组主机2、掏料器2、挤汁机2、出料传送、中间泵、出液泵、暂存罐、 换热器、进液阀门等。粉碎过筛后原料由提升机加料口处匀速加入，提取液自流至暂储罐经由出液栗连续栗出。
4.根据权利要求1所述的鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法其特征在于所述的步骤(I)中，逆流生产线参数为，提升机频率15 30Hz，主机I频率18 20Hz，挤汁机I频率 45 50Hz，主机2频率20 22Hz，挤汁机2频率40 45Hz，出液泵流量O. 5 2T/h，进料 100 400kg/h。
5.根据权利要求1所述的鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法其特征在于所述的步骤 (4)中，卒取步骤由连续卒取 组完成，包括溶剂te、物料te、重液te、轻液te、残液te、卒取塔、流量计、物料泵等。
6.根据权利要求1所述的鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法其特征在于所述的步骤(4)中，连续萃取罐组参数为，溶剂泵流量I 3L/min，物料泵流量O. 4 lL/min。
7.根据权利要求1所述的鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法其特征在于所述的步骤(6)中，硅胶层析步骤采用湿法装柱，保留液面，将浓缩膏按重量1:1拌活化后硅胶，并将拌好的混合物置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯石油醚体积比为50 85 15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟O. lml/g硅胶，洗脱体积为5BV。硅胶活化条件为， IlO0C 30min。
8.根据权利要求1所述的鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法其特征在于所述的步骤 (8)中，金丝桃苷半成品用9 16倍量50%丙酮水溶液40°C热溶，浓缩密度为d=1. 03 1.05。
全文摘要
本发明公开一种鹿蹄草中提取金丝桃苷的生产方法，该方法为将原料经粗粉碎后从投料斗投入，提取罐组主机旋转，将物料从机组前端向后缓慢推进，同时提取溶剂从机组末端的进液管进入提取罐内，由罐后端穿过移动的物料向前端流动，固液两相物质在这种逆向运动中充分接触，从而将药材中有效成分提取出来。药渣经出料传送器强制推动至出渣口而排出，专门的挤汁机对药渣进行挤压，将药渣申残留药液挤出药材组织，减少药渣申残留药液含量。提取效率更高、提取更完全。本发明同时选用连续萃取罐组萃取并结合硅胶柱层析法纯化，分离效果更佳。可得最高收率为0.6％，含量为95％以上的金丝桃苷成品。
文档编号C07H17/07GK103030674SQ201210595560
公开日2013年4月10日 申请日期2012年12月13日 优先权日2012年12月13日
发明者姚德坤, 姚德利, 张亚红, 姚航, 黄运生, 吴海龙 申请人:大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司