专利名称：蛹虫草多肽的制备方法
技术领域：
本发明涉及生物工程技术领域，尤其是一种蛹虫草多肽的制备方法。
背景技术：
蛹虫草的培育过程是放生野生冬虫夏草的生育条件开展仿生栽培的结果；其富有蛋白质，脂肪和糖类三大营养素，具有很高的营养价值。其用途广泛，适用于饮料，酒类、保健品等，市场需求量大，前景广阔，产品价值高。目前国内外对蛹虫草的研究较多，蛹虫草的开发利用多以提取虫草素，虫草多糖，虫草酸等活性物质为主。关于新鲜虫草制备多肽的研制方法较少。如何更好地开发利用蛹虫草这一新资源食品，使其丰富的营养得到更充分的利用，同时最大限度地减少对环境的污染，是国内众多专家关注的焦点。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种成本低廉、产品收率高、多肽含量高的蛹虫草多肽的制备方法。本发明蛹虫草多肽的制备方法，包括以下几个步骤:(a)将新鲜的蛹虫草除杂、清洗、粉碎和研磨，得蛹虫草研磨液；(b)将蛹虫草研磨液采用冻融方法细胞破壁，得破壁蛹虫草研磨液；(C)将破壁蛹虫草研磨液加入纯净水均浆，得蛹虫草均浆液；(d)将蛹虫草均浆液中加入由纤维蛋白酶和果胶酶组成的复合酶，在35 40°C的温度下酶解4 5小时； (e)将经过复合酶酶解的蛹虫草均浆液加入加入木瓜蛋白酶，在45 65°C的温度下酶解2 4小时；(f)将经过木瓜蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入碱式蛋白酶，在58 62°C的温度下酶解4 6小时；(g)将经过碱式蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入风味蛋白酶，在50 55°C的温度下酶解3 4小时；(h)将经过风味蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加热到80 100°C，保温10 40分钟，使酶失活；(i)将经过使酶失活处理后得到的蛹虫草均浆液通过分子膜过滤器过滤，得到蛹虫草多肽浓缩液；(j)将蛹虫草多肽浓缩液喷雾干燥，得蛹虫草多肽粉剂。步骤(b)所述的冻融方法细胞破壁，将蛹虫草研磨液置于_20°C温度冷冻24小时，然后置于4°C温度缓化10小时。步骤(C)中，破壁蛹虫草研磨液与纯净水的重量比例为1: 4 6。步骤(i)所述的通过分子膜过滤器是5000 10000道尔顿的分子膜过滤器。步骤(j)所述的喷雾干燥，进风温度为180 220°C，出风温度为70 80°C。
本发明与现有技术相比具有以下积极效果:1、本发明提供的制备方法在常压下进行，对设备要求简单，工艺成本低廉；2、虫草多肽的提取效率高:酶解液通过截留分子量为1000道尔顿的分子膜进行分子筛分从而保证产品成活性为更容易吸收的小分子肽。3、操作简单，易实现自动化控制。4、本发明环保。工艺彻底摒弃了以往的有机溶剂提纯方法，操作过程中对人员和周围环境不产生危害。5、本工艺大大加强了人体对蛹虫草的消化和吸收。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明。实施例1:一种蛹虫草多肽的制备方法，包括以下几个步骤:(a)将新鲜的蛹虫草除杂、清洗、粉碎和研磨，得蛹虫草研磨液；
(b)将蛹虫草研磨液采用冻融方法细胞破壁，蛹虫草研磨液置于-20°C温度冷冻24小时，然后置于4°C温度缓化10小时，得破壁蛹虫草研磨液；(C)将破壁蛹虫草研磨液加入纯净水均浆，破壁蛹虫草研磨液与纯净水的重量比例为1: 4，得蛹虫草均浆液；(d)将蛹虫草均浆液中加入由纤维蛋白酶和果胶酶组成的复合酶，在36°C的温度下酶解5小时；(e)将经过复合酶酶解的蛹虫草均浆液加入加入木瓜蛋白酶，在50°C的温度下酶解4小时；(f)将经过木瓜蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入碱式蛋白酶，在58°C的温度下酶解6小时；(g)将经过碱式蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入风味蛋白酶，在51°C的温度下酶解4小时；(h)将经过风味蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加热到85°C，保温35分钟，使酶失活；(i)将经过酶失活处理后得到的蛹虫草均浆液使用6000道尔顿的分子膜过滤器过滤，得到蛹虫草多肽浓缩液；(j)将蛹虫草多肽浓缩液喷雾干燥，进风温度为190°C，出风温度为70°C，得蛹虫草多肽粉剂。实施例2:—种蛹虫草多肽的制备方法，包括以下几个步骤:(a)将新鲜的蛹虫草除杂、清洗、粉碎和研磨，得蛹虫草研磨液；(b)将蛹虫草研磨液采用冻融方法细胞破壁，蛹虫草研磨液置于-20°C温度冷冻24小时，然后置于4°C温度缓化10小时，得破壁蛹虫草研磨液；(C)将破壁蛹虫草研磨液加入纯净水均浆，破壁蛹虫草研磨液与纯净水的重量比例为1: 5，得蛹虫草均浆液；(d)将蛹虫草均浆液中加入由纤维蛋白酶和果胶酶组成的复合酶，在38°C的温度下酶解4.5小时；(e)将经过复合酶酶解的蛹虫草均浆液加入加入木瓜蛋白酶，在55°C的温度下酶解3小时；
(f)将经过木瓜蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入碱式蛋白酶，在60°C的温度下酶解5小时；(g)将经过碱式蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入风味蛋白酶，在52°C的温度下酶解3.5小时；(h)将经过风味蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加热到90°C，保温30分钟，使酶失活；(i)将经过酶失活处理后得到的蛹虫草均浆液使用8000道尔顿的分子膜过滤器过滤，得到蛹虫草多肽浓缩液；(j)将蛹虫草多肽浓缩液喷雾干燥，进风温度为200°C，出风温度为75°C，得蛹虫草多肽粉剂。实施例3:—种蛹虫草多肽的制备方法，包括以下几个步骤:(a)将新鲜的蛹虫草除杂、清洗、粉碎和研磨，得蛹虫草研磨液；(b)将蛹虫草研磨液采用冻融方法细胞破壁，蛹虫草研磨液置于-20°C温度冷冻24小时，然后置于4°C温度缓化10小时，得破壁蛹虫草研磨液；(C)将破壁蛹虫草研磨液加入纯净水均浆，破壁蛹虫草研磨液与纯净水的重量比例为1: 6，得蛹虫草均浆液；(d)将蛹虫草均浆液中加入由纤维蛋白酶和果胶酶组成的复合酶，在40°C的温度下酶解4小时；(e)将经过复合酶酶解的蛹虫草均浆液加入加入木瓜蛋白酶，在55°C的温度下酶解2小时；(f)将经过木瓜蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入碱式蛋白酶，在60°C的温度下酶解4小时；(g)将经过碱式蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入风味蛋白酶，在53°C的温度下酶解3小时；(h)将经过风味蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加热到95°C，保温20分钟，使酶失活；(i)将经过酶失活处理后得到的蛹虫草均浆液使用10000道尔顿的分子膜过滤器过滤，得到蛹虫草多肽浓缩液；
(j)将蛹虫草多肽浓缩液喷雾干燥，进风温度为210°C，出风温度为80°C，得蛹虫草多肽粉剂。
权利要求
1.一种蛹虫草多肽的制备方法，其特征在于:该方法包括以下几个步骤: (a)将新鲜的蛹虫草除杂、清洗、粉碎和研磨，得蛹虫草研磨液； (b)将蛹虫草研磨液采用冻融方法细胞破壁，得破壁蛹虫草研磨液； (C)将破壁蛹虫草研磨液加入纯净水均浆,得蛹虫草均浆液； (d)将蛹虫草均浆液中加入由纤维蛋白酶和果胶酶组成的复合酶，在35 40°C的温度下酶解4 5小时； (e)将经过复合酶酶解的蛹虫草均浆液加入加入木瓜蛋白酶，在45 65°C的温度下酶解2 4小时； (f)将经过木瓜蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入碱式蛋白酶，在58 62°C的温度下酶解4 6小时； (g)将经过碱式蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加入风味蛋白酶，在50 55°C的温度下酶解3 4小时； (h)将经过风味蛋白酶酶解后的蛹虫草均浆液加热到80 100°C，保温10 40分钟，使酶失活； (i)将经过使酶失活处理后得到的蛹虫草均浆液通过分子膜过滤器过滤，得到蛹虫草多肽浓缩液； (j)将蛹虫草多肽浓缩液喷雾干燥，得蛹虫草多肽粉剂。
2.按照权利要求1所 述的蛹虫草多肽的制备方法，其特征在于:步骤(b)所述的冻融方法细胞破壁，将蛹虫草研磨液置于-20°C温度冷冻24小时，然后置于4°C温度缓化10小时。
3.按照权利要求2所述的蛹虫草多肽的制备方法，其特征在于:步骤(c)中，破壁蛹虫草研磨液与纯净水的重量比例为1: 4 6。
4.按照权利要求3所述的蛹虫草多肽的制备方法，其特征在于:步骤(i)所述的通过分子膜过滤器是5000 10000道尔顿的分子膜过滤器。
5.按照权利要求4所述的蛹虫草多肽的制备方法，其特征在于:步骤(j)所述的喷雾干燥，进风温度为180 220°C，出风温度为70 80°C。
全文摘要
本发明公开了一种蛹虫草多肽的制备方法，该方法采用新鲜的蛹虫草为原料，采用粉碎、研磨、冻融、均浆步骤得蛹虫草均浆液；蛹虫草均浆液在经过纤维蛋白酶和果胶酶组成的复合酶的酶解、木瓜蛋白酶的酶解、碱式蛋白酶的酶解和风味蛋白酶的酶解过程；最后再经过酶失活、分子膜过滤器过滤和喷雾干燥步骤，得蛹虫草多肽粉剂。该制备方法可在常温常压下进行，操作方法简单，节能环保，成本低廉，蛹虫草多肽的提取效率高，产品多肽含量高。
文档编号C07K1/34GK103194516SQ201310114399
公开日2013年7月10日 申请日期2013年3月17日 优先权日2013年3月17日
发明者刘永祥 申请人:赤峰鼎基生物工程科技有限公司