阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法，所述阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物是按如下方法制备的：以阿莫尼亚脂为原料，采用60%-95%乙醇提取，通过大孔吸附树脂纯化技术得到阿莫尼亚脂提取物，再用硅胶层析技术进行纯化，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物。
【专利说明】阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医药领域，涉及一种中药材提取物的制备方法，具体是涉及阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法。
【背景技术】
[0002]阿莫尼亚脂，为伞形科植物阿莫尼亚胶草Dorema ammoniacum D.Don.的树脂。春末夏初盛花期至初果期，割伤颈部，收集渗出的乳汁状树胶，阴干。收载于1998年《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册》。具有散寒气，燥寒湿，软坚通便，抽泄机体深层异常体液，开通肝脾闭阻之功效。用于寒性关节疼痛、关节僵硬，肌肤硬肿，腋下及颈部淋巴结核，久咳痰多，面色无华。国内未见阿莫尼亚脂相关文献报道。
[0003]国内专利检索结果，未见阿莫尼亚脂相关专利。
[0004]上述文献及专利等，尚未见阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法的报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法。
[0006]本发明是通过如下技术方案实现的:
本发明所用阿莫尼亚脂为为伞 形科植物阿莫尼亚胶草Dorema ammoniacum D.Don.的树脂。
[0007]阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法，是通过如下步骤实现的:
(1)阿莫尼亚脂，用60%-95%乙醇为溶剂，在25°C_80°C温浸提取，提取次数为1_3次，每次提取时间为3-8小时，每次溶剂用量为阿莫尼亚脂重量的8-15倍，滤过，提取液回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.03-1.20,滤过，得药液A ；
(2)将步骤(1)得到的药液A通过大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用浓度50%-95%的乙醇溶液洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得阿莫尼亚脂提取物A ；
(3)将上述阿莫尼亚脂提取物A，通过硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯(10:1-2:1)梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，并将石油醚-乙酸乙酯(5:1-3:1)部分洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物。
[0008]阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法，是通过如下步骤实现的:
(1)阿莫尼亚脂，用80%乙醇为溶剂，在50°C温浸提取，提取次数为2次，每次提取时间为6小时，每次溶剂用量为药材重量的12倍，滤过，提取液回收乙醇，浓缩至相对密度d=1.06，滤过，得药液A;
(2)将步骤(1)得到的药液A通过DlOl大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用浓度95%的乙醇溶液洗脱，收集95%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得阿莫尼亚脂提取物A ；
(3)将上述阿莫尼亚脂提取物A，通过硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯(10:1-2:1)梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，并将石油醚-乙酸乙酯(5:1-3:1)部分洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物。
[0009]本发明的阿莫尼亚脂总倍半職香豆素提取物主要含有:badrakemin,badrakeminacetate, badrakemone, feshurin, colladonin。
[0010]本发明的阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法，其特征在于:所采用的大孔吸附树脂为DlOl大孔吸附树脂、AB-8大孔吸附树脂。。
[0011]本发明的阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物，通过加入药剂学允许的各种辅料，制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊等口服剂型。
[0012]本发明首次采用大孔吸附树脂、硅胶层析纯化相结合的方法，提取制备阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物，明确了阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物中5个主要倍半萜香豆素成分结构。 【具体实施方式】
[0013]下面通过具体实施例对阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法做进一步说明，但不限于本发明。
[0014]实施例1:阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物及单体化合物制备
(1)阿莫尼亚脂20kg，用80%乙醇为溶剂，在50°C温浸提取，提取次数为2次，每次提取时间为6小时，每次溶剂用量为阿莫尼亚脂重量的12倍，滤过，提取液回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.06,滤过，得药液A ；
(2)将步骤(1)得到的药液A通过DlOl大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用浓度95%的乙醇溶液洗脱，收集95%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得阿莫尼亚脂提取物A ；
(3)将上述阿莫尼亚脂提取物A，通过硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯(10:1-2:1)梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，将石油醚-乙酸乙酯(5:1-3:1)部分洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物。
[0015]阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物再经200-300目硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱(100:0-3:1)，薄层跟踪检测，合并相同流份，石油醚-乙酸乙酯(4:1)部分洗脱液流份静置析晶，抽滤，重结晶，分别得到badrakemin, badrakemin acetate,badrakemone, feshurin, colladonin ;以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
[0016]实施例2:阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物及单体化合物制备
(1)阿莫尼亚脂15kg，用60%乙醇为溶剂，在80°C温浸提取，提取次数为3次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为阿莫尼亚脂重量的8倍，滤过，提取液回收乙醇，浓缩至相对密度d=1.20，滤过，得药液A;
(2)将步骤(1)得到的药液A通过AB-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用浓度50%的乙醇溶液洗脱，收集50%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得阿莫尼亚脂提取物A ；
(3)将上述阿莫尼亚脂提取物A，通过硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯(10:1-2:1)梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，将石油醚-乙酸乙酯(5:1-3:1)部分洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物。
[0017]阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物再经200-300目硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱(100:0-3:1)，薄层跟踪检测，合并相同流份，石油醚-乙酸乙酯(4:1)部分洗脱液流份静置析晶，抽滤，重结晶，分别得到badrakemin, badrakemin acetate,badrakemone, feshurin, colladonin ;以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
[0018]实施例3:阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物及单体化合物制备
(1)阿莫尼亚脂10kg，用95%乙醇为溶剂，在25°C温浸提取，提取次数为I次，每次提取时间为8小时，每次溶剂用量为阿莫尼亚脂重量的15倍，滤过，提取液回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.03，滤过，得药液A ;
(2)将步骤(1)得到的药液A通过DlOl大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用浓度95%的乙醇溶液洗脱，收集95%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得阿莫尼亚脂提取物A ；
(3)将上述阿莫尼亚脂提取物A，通过硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯(10:1-2:1)梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，将石油醚-乙酸乙酯(5:1-3:1)部分洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物。 [0019]阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物再经200-300目硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱(100:0-3:1)，薄层跟踪检测，合并相同流份，石油醚-乙酸乙酯(4:1)部分洗脱液流份静置析晶，抽滤，重结晶，分别得到badrakemin, badrakemin acetate,badrakemone, feshurin, colladonin ;以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。
[0020]实施例4:阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物片剂的制备
取实施例1阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物65g，加入淀粉Sg，混匀，制粒，干燥，过筛，加微晶纤维素5g，硬脂酸镁0.5g，混匀，压制成200片，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物片剂。
[0021]实施例5:阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物颗粒剂的制备
取实施例2阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物70g，加入糊精50g，混匀，制粒，干燥，整粒，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物颗粒剂。
[0022]实施例6:阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物胶囊的制备
取实施例3阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物70g，加入淀粉25g，混匀，制粒，干燥，整粒，装胶囊200粒，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物胶囊。
【权利要求】
1.阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法，是通过如下步骤实现的: (1)阿莫尼亚脂，用60%-95%乙醇为溶剂，在25°C_80°C温浸提取，提取次数为1_3次，每次提取时间为3-8小时，每次溶剂用量为阿莫尼亚脂重量的8-15倍，滤过，提取液回收乙醇，浓缩至相对密度d=l.03-1.20,滤过，得药液A ； (2)将步骤(1)得到的药液A通过大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用浓度50%-95%的乙醇溶液洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得阿莫尼亚脂提取物A ； (3)将上述阿莫尼亚脂提取物A，通过硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯(10:1-2:1)梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，并将石油醚-乙酸乙酯(5:1-3:1)部分洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物。
2.根据权利要求1所述的阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法，是通过如下步骤实现的: (1)阿莫尼亚脂，用80%乙醇为溶剂，在50°C温浸提取，提取次数为2次，每次提取时间为6小时，每次溶剂用量为药材重量的12倍，滤过，提取液回收乙醇，浓缩至相对密度d=1.06，滤过，得药液A; (2)将步骤(1)得到的药液A通过DlOl大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用浓度95%的乙醇溶液洗脱，收集95%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得阿莫尼亚脂提取物A ； (3)将上述阿莫尼亚脂提取物A，通过硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯(10:1-2:1)梯度洗脱，以硅胶G薄层层析检测，合并相同流份，并将石油醚-乙酸乙酯(5:1-3:1)部分洗脱液合并，回收溶剂，干燥，即得阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物。
3.根据权利要求1、权利要求2所述的阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法，其特征在于:所述的阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物主要含有:badrakemin，badrakemin acetate，badrakemone，feshurin，colladonin。
4.根据权利要求1所述的阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物的制备方法，其特征在于:所采用的大孔吸附树脂为DlOl大孔吸附树脂、AB-8大孔吸附树脂。
5.根据权利要求1、权利要求2所述的阿莫尼亚脂总倍半萜香豆素提取物，通过加入药剂学允许的各种辅料，制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊等口服剂型。
【文档编号】C07D311/16GK103585210SQ201310525421
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年10月31日 优先权日:2013年10月31日
【发明者】孔倩倩 申请人:济南星懿医药技术有限公司